大鼠全脑照射后早期海马水通道蛋白4mRNA水平的变化

目的 观察单次全脑照射大鼠海马区水通道蛋白4(AQP4)的变化,探讨AQP4在早期放射性脑损伤中的作用.方法 将雌性SD大鼠36只随机分为20 Gy单次全脑照射后1 d、1周、2周、4周和8周及对照6个组别,每组6只.用RT-PCR法检测海马区AQP4 mRNA表达的变化.结果 与对照组比较,20 Gy照射后1 d海马区AQP4 mRNA下降,照射后1周达最低点(P＜0.01),2周时仍低于对照(P＜0.01),4周时高于对照组(P＜0.01),8周时仍高于对照组( P＜0.05).结论 大鼠全脑照射后海马区AQP4 mRNA表达增加,AQP4参与了放射性脑水肿过程.     

全脑照射对大鼠海马区Notch 1信号通路的影响

目的 观察大鼠全脑照射后海马区Notch 1信号通路中Notch 1与下游因子Hes 1的表达变化。方法 单次10Gy全脑照射构建大鼠放射性脑损伤模型,于照射后1、3天、1、2周、1、2个月处死大鼠获取海马组织,采用real-time PCR和Western blot法检测海马组织Notch 1、Hes 1的表达变化,免疫组织化学染色法检测海马区新生神经细胞数。结果 相较对照组,大鼠全脑照射后Notch 1表达进行性下调;其下游因子Hes 1在照射后2周内表达无明显变化,而在照射1、2个月后表达显著下调（P<0.05）。在照射后1、2个月组中,海马区新生神经细胞数较对照组显著减少。结论 大鼠全脑照射后,海马区Notch 1信号通路活性显著下调,伴随着海马区神经再生显著抑制,提示Notch 1通路可能参与放射性脑损伤后神经再生的调控过程。     

大鼠全脑照射后海马区VEGF表达变化及超微结构改变

目的探讨单次大剂量全脑照射后大鼠海马区血管内皮生长因子（VEGF）表达的变化及其超微结构改变。方法以雌性SD大鼠作为研究对象,使用RT—PCR检测全脑照射后大鼠海马区VEGFmRNA的表达变化,电镜观察照射后大鼠海马区神经元线粒体及血管内皮等超微结构改变。结果全脑照射后1d大鼠海马区VEGFmRNA表达出现短暂下降,放疗后1、2、4和8周时VEGFmRNA表达水平与对照组比较均无统计学差异（均P〉0．05）。20Gy放疗后4周,大鼠海马区神经元出现线粒体水肿,空泡形成;毛细血管内皮间隙增加,管腔狭窄。结论VEGF参与大鼠脑部放疗后损伤应答反应,这可能为将来的脑损伤防护提供新的靶点。     

清醒状态下大鼠放射性脑损伤实验模型的建立

目的　排除麻醉药物对实验结果的干扰 ,建立清醒状态下全脑照射大鼠放射性脑损伤实验模型。方法　将SD大鼠随机分为 2Gy、15Gy、30Gy剂量照射组和假照射组 ,每组 2 5只。自制“热记忆膜固定罩”固定大鼠照射体位 ,4MeV电子线作不同剂量的单次全脑照射 ,并用治疗束流分析仪和剂量仪作剂量学监测。在照射后 1个月内每周 2次 ,观察并记录大鼠头部照射野毛发与皮肤的情况以及体重的变化 ,并进行神经行为学评分。观察大鼠在照射前、照射后 6h、1d、1周和 1个月时海马CA1区神经细胞的病理形态学改变。结果　该照射条件下的最大剂量点深度约为 14 .3mm ,各照射点吸收剂量的差异≤ 5 %。在通过“热记忆膜固定罩”后 ,剂量衰减率≤2 .5 7%。全部 30Gy和部分 15Gy照射的大鼠在照射后约 2 0d出现照射野内脱毛现象 ,其余大鼠在观察期内无上述表现。各组别大鼠体重增长趋势和神经行为评分差别无显著性意义 (P >0 .0 5 )。病理观察显示放射性脑损伤程度与照射剂量、观察时间呈正相关 ,30Gy照射后随观察时间的延长 ,大鼠海马CA1区神经细胞逐步出现损伤和坏死。结论　该动物模型制作方法简便、可靠 ,排除了麻醉药物对实验结果的干扰 ,临床模拟性好 ,可用于早期放射性脑损伤与防护机制的实验研究     

氦氖激光穴位照射对缺血缺氧后新生大鼠海马神经元增殖的影响

目的：探讨氦氖激光穴位照射疗法对缺血缺氧新生大鼠脑损伤后海马神经元增殖的影响。方法：7d龄健康Wistar大鼠72只随机分成4组：假手术组、缺血缺氧组、缺血缺氧激光穴位照射组、缺血缺氧激光非穴位照射组。制备新生大鼠缺血缺氧脑损伤模型,激光穴位照射组选择“百会”和“大椎”穴位给予氦氖激光照射．激光非穴位照射组选择腹部非穴位部位进行激光照射,常规饲养22d后处死,处死前经腹腔注射5-溴-2-脱氧脲嘧啶(BrdU)标记增殖细胞。取左侧脑做组织切片,HE、Nissl染色以及采用抗BrdU抗体和神经上皮蛋白(Nestin)抗体进行免疫组织化学染色。结果：激光穴位照射组与其他组比较海马神经元胞体内尼氏体丢失较少,神经元坏死减轻,海马齿状回BrdU标记的免疫阳性细胞数增加,海马CA1区Nestin免疫阳性细胞数增高。结论：激光穴位照射对海马神经元有保护作用,促进了海马神经元的增殖。     

阻塞性睡眠呼吸暂停大鼠海马区HMGB1、TLR4、NF-κB的变化

目的 探讨阻塞性睡眠呼吸暂停大鼠海马区HMGB1、TLR4、NF-κB的表达变化.方法 将60只雄性SD大鼠随机分为对照组和模型组(各30只),经咽腔多点注射医用透明质酸钠凝胶制备OSAS大鼠模型.于造模后2、4、6周组通过HE染色观察海马CA1区神经细胞的病理形态,免疫组织化学染色观察海马CA1区HMGB1及TLR4...     

大豆异黄酮对AD大鼠海马Apo—E4的影响

目的：探讨大豆异黄酮（SIF）对AD大鼠海马Apo—E4的影响。方法：采用Aβ双侧海马注射建立阿尔茨海默病（AD）大鼠模型,分组后给予不同剂量大豆异黄酮,Morris水迷宫实验观察大鼠学习记忆能力的变化,HE染色观察大鼠海马组织形态结构变化,ELISA法测定海马组织Apo-E4含量。结果：大豆异黄酮可改善AD大鼠的学习记忆能力（P〈0．01）,减少海马神经元丢失,显著性降低Apo-E4含量（P〈0．01）。结论：大豆异黄酮可能通过降低AD大鼠海马Apo—E4的含量改善AD大鼠学习记忆能力。     

放射性脑损伤后大鼠海马IL-6 mRNA的表达

目的　观察大鼠放射诱导脑损伤后海马区IL - 6mRNA的动态表达 ,探讨其在放射性脑损伤急性期反应的发病机制中可能的作用。方法　制备大鼠脑放射性损伤模型。应用逆转录聚合酶链反应 (RT -PCR)半定量分析大鼠脑放射性损伤后海马区在不同时间、不同剂量水平IL - 6基因转录的动态表达。结果　正常组海马区IL - 6mRNA低水平表达 ;全脑照射后表达逐步上调并在 12h达峰值 ,是正常组的 2～ 5倍 (P <0 .0 5 ) ,15Gy组上升幅度最大 (P <0 .0 0 1) ,高出 2Gy组和 30Gy组 1倍多 (P <0 .0 5 ) ;30Gy组低于 2Gy组 ,但无显著差异 (P >0 .0 5 ) ;在 6h时间点也可见到这一趋势 ,15Gy组与 30Gy组仍有显著差异 (P <0 .0 5 )。各照射组在 2 4h后恢复到基础水平。 结论　大鼠放射性脑损伤后海马区IL - 6mRNA表达上调 ,参与了脑放射性损伤急性期的细胞反应。     

新生鼠脑缺氧缺血性损伤后海马区细胞增殖的观察

目的：观察新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）后海马区细胞增殖的情况,探讨脑组织内源性修复的可能机制。方法：建立新生大鼠HIBD模型,分假手术组、单纯缺氧组、缺氧缺血组。于脑损伤后不同时间点取脑,分别行HE染色和BrdU免疫组化检测。结果：缺氧缺血组于缺氧缺血后3d BrdU阳性细胞有表达,7-14d达到高峰,21d时减少,在各时间点均高于其他组（P〈0.05）。结论：HIBD后海马区存在细胞增殖,推论新生大鼠在出生后早期能显著抵抗HIBD,可能产生对海马的保护作用。     

大鼠全脑照射后海马组织中GFAPmRNA表达的研究

目的通过观察大鼠全脑照射后海马组织中胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)mRNA表达的变化,探讨GFAP在放射性脑损伤中的作用.方法大鼠全脑单次2 Gy、10 Gy和30 Gy照射后1 d、30 d,用逆转录聚合酶链技术(RT-PCR)观察海马组织中GFAPmRNA的表达变化,并分析照射剂量和照射后时间对其表达的影响.结果 10 Gy和30 Gy组照后1 d GFAPmRNA水平开始升高,分别为正常组的2.5倍、3倍(P＜0.001),并持续到照后30 d,2 Gy组未见明显升高.结论随着照射剂量的加大和观测时间的延长,大鼠大脑海马内 GFAPmRNA表达增高,其终产物GFAP在放射性脑损伤保护和修复机制中有重要作用.     

嗅鞘细胞移植促进急性脊髓损伤的修复作用

目的研究嗅鞘细胞(OEG)移植后在体内存活情况以及对大鼠脊髓损伤长期的修复作用.方法用新生Wistar大鼠嗅球做OEG培养,大量增殖并标记.80只大鼠,随机分为4组,每组20只.A、B、C组以250 mm·g打击T13脊髓致运动诱发电位和体感诱发电位完全消失,A组在打击区中央用尖刀横行切断脊髓;D组仅做与A、B组相同节段的椎板减压,不挫伤脊髓.A、B组在脊髓远近断端距离挫伤区边缘1 mm的脊髓中线上,深度分别为1.75、1.5、1.0、0.5 mm处,各注入200 000个OEG;C组用同样的方法注射等量的DMEM培养液;D组不做处理.术后观察脊髓功能恢复情况(BBB运动功能评分法)和体重变化.术后24周取脊髓标本,做HE染色、嗜银染色、抗神经原纤维(NF)免疫组化染色、荧光显微镜下观察Hoechst标记的OEG在体内存活情况.结果手术后4周,A、B、C组开始有运动功能恢复,术后4～24周BBB运动功能评分A、B组均高于C组(P＜0.01),16周以后BBB评分变化较小.HE染色A、B两组脊髓损伤区结构紊乱,纤维走行方向扭曲不一致,细胞数目较多,C组大鼠脊髓损伤段常有明显空洞存在,纤维含量少且扭曲.嗜银染色和免疫组化抗NF染色显示无论在损伤区还是损伤头、尾端,A、B组神经纤维数量多于C组,但都少于相同节段的D组(P＜0.01).荧光显微镜下观察到Hoechst标记的OEG大量存在于脊髓损伤段周围.术后各组大鼠均出现体重减轻.术后2周,D组大鼠体重恢复至术前重量,此后逐渐增加.术后4周,A、B、C组大鼠体重降至最低,与D组(Sham组)比较差异有显著性(P＜0.01);此后,A、B组大鼠体重逐渐增加,而C组大鼠体重增加不明显;A、B组大鼠体重与C组比较差异有显著性(P＜0.05).结论OEG移植具有一定促进脊髓损伤神经纤维再生和功能恢复的作用.     

大鼠颅脑损伤后突触素表达变化研究

目的 探讨大鼠颅脑损伤后突触素变化规律并探索其与组织学、影像学的动态变化关系。方法 健康3月龄雄性SD大鼠24只,依据突触素检测时间,分为损伤后2周、4周、8周组和对照组共4组,每组6只。其中3个损伤组通过建立大鼠自由落体脑损伤模型,在损伤后24 h、2周、4周和8周时通过CT检查观察其颅脑损伤后脑组织的影像学变化,对照组不作损伤处理。同时检测大鼠颅脑损伤后脑组织形态学及影像学变化,并分别于2周、4周、8周使用免疫荧光法及蛋白免疫印迹实验观察受伤后大鼠脑组织突触素表达变化。结果 大鼠颅脑损伤后,神经功能评分提示实验组大鼠出现明显神经功能障碍,HE染色提示实验组大鼠受伤24 h出现脑细胞水肿、坏死。另外尚可见局部的充血,受伤后2周后出现脑溶解性液化及坏死,而受伤4周及8周后除可见明显组织缺损外,无明显组织学变化。CT检查提示实验组大鼠术后24 h呈现全脑明显的低密度影,此后脑组织低密度灶的区域及程度开始减轻,至受伤后2周低密度影已经明显减退,受伤后4周及8周时脑损伤已经不明显,仅可见骨窗缺损。免疫荧光染色及western blot均提示突触素表达于2周下降,第8周略有上升。结论 成功建立了Feeney大鼠自由落体脑损伤模型。大鼠颅脑损伤后,突触素在受损急性期呈现下降,持续至脑损伤后第8周开始恢复。突触素的表达随时间变化的规律与影像学、组织病理学变化有关。     

骨髓间充质干细胞移植对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用

目的研究骨髓间充质干细胞（BMSCs）移植对新生SD大鼠缺血缺氧性脑损伤（HIBD）的治疗作用。方法新生SD大鼠随机分为假手术组、模型组、BMSCs移植组;结扎左侧颈总动脉制备大鼠缺氧缺血性脑损伤模型,3 d后BMSCs组左侧脑室接种1×105个BMSCs;分别于移植后第2周和第4周处死各组大鼠,取脑组织行HE染色及免疫荧光染色观察病理变化。结果 HE染色假手术组脑组织结构正常核仁大而圆,胞质丰富;模型组大鼠脑神经元大量坏死,出现空洞;BMSCs移植组与模型组相比较,损伤细胞较少,但是多于假手术组,无空泡,可见新生毛细血管生成。移植4周后BMSCs移植组神经元凋亡指数（0.170±0.0002）与假手术组（0.094±0.0003）相比,无统计学意义（P〉0.05）,但明显小于模型组（0.342±0.0002）,有统计学意义（P〈0.05）。结论 BMSCs移植可降低缺氧缺血性脑损伤新生大鼠神经元凋亡指数,能够促进神经功能恢复,对新生SD大鼠缺血缺氧性脑损伤有治疗作用。     

粒细胞集落刺激因子骨髓干细胞动员治疗大鼠肝损伤的实验研究

目的：探讨粒细胞集落刺激因子（G-CSF）骨髓干细胞动员对大鼠肝损伤的治疗作用。方法：将大鼠随机分为正常对照组（10只）、造模组（20只）。造模组采用腹腔注射四氯化碳的方法连续4w构建大鼠肝损伤模型,然后随机分为动员组（10只）和模型对照组（10只）,动员组皮下注射G-CSF,连续6d。3w后采用检测大鼠肝功能、大鼠肝脏HE染色等方法进行观察。结果：3w后大鼠的肝功能较模型组没有明显恢复。结论：G-CSF骨髓干细胞动员治疗大鼠肝损伤,不能明显改善肝脏功能,也没有加重肝脏的病理变化。     

大鼠小肠甘丙素在肠型放射病时的变化

本文用免疫细胞化学(ICC)、H.E染色及显微分光光度计测定等技术,对20Gyγ线肠型放射病时大鼠小肠GAL神经的免疫反应性结构做了定性和定量分析。结果如下(1)照后小肠粘膜层损伤随时间延长而加重。(2)照后各组小肠GAL-LI神经元胞体无明显改变,而GAL纤维出现排列紊乱。(3)照后大鼠小肠内GAL的含量有下降趋势,且照后48h和72h组与非照射组之间存在显著差别(P<0.01)。作者结合GAL在肠道的生理功能,将照射后小肠GAL的变化规律与肠型放射病的病理特征及过程相联系,推测照后GAL的变化可能与受照后小肠运动机能、供血障碍以及粘膜损伤等病理改变有关。     

高能X线照射犬脑后的反应、形态及CT变化

目的：犬脑照射后,观察不同时期的反应,病理及CT的变化,为CT诊断放射性脑坏死提供新的依据．方法：用SL75－14型直线加速器对犬脑行外照射,建立犬脑放射性损伤模型．结果：早期病理所见血管周围性水肿,细胞凝固性坏死系射线直接损伤脑组织,脱髓鞘与少突胶质细胞坏死有关,CT显示为低密度区;放射性脑坏死在CT显示为增强效应的包块,坏死区出血和炎细胞浸润是放射性脑坏死的特征,可作为与脑瘤复发的鉴别点．结论：照射侧的脑室扩大是由脑萎缩引起的,而不是颅压升高所致ICT能反映放射性脑损伤的程度．     

电针对PSD大鼠行为学及神经营养因子和炎症因子的影响

  目的  探讨电针疗法对脑卒中后抑郁症模型(PSD)大鼠行为学及血清炎症因子、海马组织神经营养因子的影响。  方法  SD大鼠分为假手术组、卒中后抑郁组、电针组和氟西汀组,建立大鼠脑中动脉缺血(MCAO)模型,手术后进行慢性不可预测温和刺激(CUMS)4周,建立PSD模型同时进行电针治疗。治疗结束后进行行为学检测、TTC染色、HE染色、血清炎症因子、神经营养因子等方面检测。  结果  与假手术组相比,MCAO手术后脑组织梗死面积明显增大;HE染色明显看出MCAO组脑组织损伤严重。经过PSD造模后,与假手术组相比,糖水消耗量明显减小,强迫游泳不动时间明显延长,水平与垂直活动距离无明显变化;炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量升高;脑源性神经营养因子(BDNF)、胰岛素样生长因子1(IGF-1)、神经生长因子(NGF)含量下降;尼氏染色后明显看出海马神经元缺失。与卒中后抑郁组相比,电针组和氟西汀给药组糖水消耗量明显增加,强迫游泳不动时间明显缩短,水平与垂直活动距离无明显变化;炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α含量减小;神经营养因子BDNF、IGF-1、NGF含量增加;神经元明显增多。  结论  电针疗法可以很好地改善PSD模型大鼠的抑郁症相关行为学变化,其机制可能与调节血清炎症因子,增加神经营养因子,促进神经保护有关。      

龙蛭汤对大鼠脑缺血再灌注损伤后Caspase-1和IL-18蛋白表达的影响

目的 通过使用龙蛭汤对大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型大鼠进行干预,观察脑组织中焦亡相关蛋白Caspase-1和IL-18表达情况,探讨其对脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injury,CIRI)的保护作用.方...     

细胞外组蛋白通过促进凋亡参与新生大鼠缺氧缺血性脑病损伤过程

目的：研究细胞外组蛋白是否通过促进凋亡参与新生大鼠缺氧缺血性脑病的损伤。方法：将54只7日龄新生SD大鼠随机分为假手术组、缺氧缺血性脑损伤（HIBD）组和治疗组,每组18只,各组组内再随机分为3个亚组：6 h组、24 h组及72 h组,每亚组6只;采用改良Rice法制备HIBD模型,治疗组予选模前5 min尾静脉注射特异性组蛋白H4中和抗体20 mg/kg。各组大鼠在造模后6 h、24 h和72 h检测血浆中细胞外组蛋白的含量、脑组织病理学及凋亡相关指标。结果：相比于假手术组,HIBD组大鼠脑含水量较高（P ＜0.05）,HE染色显示脑组织结构破坏,尼氏染色显示脑组织损失率增加（P ＜0.05）,血浆细胞外组蛋白含量上升（P ＜0.05）,Tunel 染色显示脑组织凋亡细胞增加（P ＜0.05）,凋亡蛋白cleaved casepase-3表达升高（P ＜0.05）;相比于HIBD组,治疗组大鼠脑含水量减少（P ＜0.05）,HE染色显示脑组织结构破坏减少,尼氏染色显示脑组织损失率减少（P ＜0.05）,血浆细胞外组蛋白含量降低（P ＜0.05）,Tunel 染色显示凋亡细胞减少（P ＜0.05）,凋亡蛋白cleaved casepase-3 表达下降（P ＜0.05）。结论：细胞外组蛋白可能是通过促进凋亡,从而参与新生大鼠缺氧缺血性脑病的损伤。     

四氯化碳诱导犬早期肝损害所致门静脉高压的形态学观察

目的　探讨实验性犬肝脏早期损害所致的门静脉高压形成的形态学基础。方法　以小剂量四氯化碳 (CCl4)腹腔内注射诱导犬早期肝损害 ,制备门静脉高压犬模型。通过光镜、电镜观察肝脏形态学的改变。结果　腹腔内注射CCl47周后 ,共有 15头犬形成门静脉高压 (门静脉压力 2 2 7cmH2 O± 1 5cmH2 O ,1cmH2 O =0 0 98kPa,与给药前相比 ,P <0 0 5 )。HE染色示肝脏损害轻微。Masson染色、电镜 ,示肝窦毛细血管化。α 平滑肌肌动蛋白 (α SMA)免疫组化染色示肝星形细胞(HSC)大量活化。结论　肝脏受损早期 ,门静脉高压形成的可能原因是肝窦毛细血管化和HSC活化所致的肝窦血流阻力增加。