山楂总黄酮对人血管内皮细胞的作用

目的 探讨山楂总酮对人血管内皮细胞的保护作用及其机理。方法 通过原代培养人脐静脉内皮细胞（EC），从细胞形态学、细胞生长状况、细胞内乳酸脱氢酶（LDH）释放、内皮细胞对单核细胞（MC－EC）的粘附作用，以及低密度脂蛋白脂质过氧化（TBARS值）测定等，观察不同剂量（25，50，100mg／L)山楂总黄酮对氧化型低密度脂蛋白（oxLDL）诱导的EC损伤的影响和对EC的直接作用。结果 oxLDL对EC具有明显的损伤作用，oxLDL组的细胞生存率低于正常对照组（P＜0．05），LDH释放和MC－EC粘附率均高于正常对照组（P＜0．05）；山楂黄酮可以有效地抑制oxLDL对EC的损伤，3个剂量的山楂黄酮＋oxLDL组的细胞生存率均显高于oxLDL组（P＜0．05），LDH释放率、MC－EC粘附率和TBARS值均显低于oxLDL组（P＜0．05），呈剂量－效应关系。单纯山楂黄酮组的中、高剂量组MC－EC粘附率均显低于正常对照组（P＜0．05）。结论 山楂黄酮可以有效地保护内皮细胞免受oxLDL的损伤，其机理与山楂黄酮的抗氧化作用和对EC的直接作用有关。     

维生素E对体外氧化低密度脂蛋白诱导血管内皮细胞损伤的保护作用

为探讨维生素E(VE)对体外氧化低密度脂蛋白 (ox LDL)所致血管内皮细胞 (VEC)氧化损伤的保护作用。利用体外培养人脐静脉血管内皮细胞 ,建立了氧化损伤模型。将细胞分为 5组 :对照组、ox LDL组、VE L +ox LDL组 ,VE M +ox LDL组和VE H +ox LDL组。各剂量组首先在含有不同浓度的VE培养液中孵育 ,2 4小时后加入ox LDL进行氧化损伤 ,继续培养 2 4小时后收集细胞 ,进行有关指标测定。结果显示 ,ox LDL组MDA含量高于对照组和各VE组 (P <0 0 5) ;ox LDL组SOD活性低于对照组和各VE组 (P <0 0 5) ;ox LDL组、VE L +ox LDL组GSH Px活性低于其它各组 (P <0 0 5)。提示维生素E对ox LDL诱导的血管内皮细胞损伤有一定的保护作用     

氧化修饰低密度脂蛋白对血管内皮细胞氧化损伤的研究

目的　用氧化修饰低密度脂蛋白 (OX LDL)建立对血管内皮细胞的氧化损伤模型。方法　将人脐静脉内皮细胞暴露于OX LDL环境下 ,测定细胞活力及丙二醛含量。结果　当内皮细胞暴露于OX LDL不同剂量组 (10、5 0、10 0 μg ml) 2 4h后 ,其细胞活力显著降低 ,丙二醛含量增加 ,特别是OX LDL高浓度组最为明显。结论　OX LDL对内皮细胞有明显损伤作用 ,能促发动脉粥样硬化的形成。     

镁对人体低密度脂蛋白氧化修饰的影响

目的 :　观察镁对人体低密度脂蛋白 (LDL)氧化修饰的影响。方法 :　一次性密度梯度超速离心法制备人天然 LDL,共轭二烯法检测 Mg2 +对 Cu2 +介导的 LDL氧化反应敏感性的影响 ,硫代巴比妥酸反应物 (TBARS)法检测 Mg2 +对 Cu2 +和内皮细胞介导的 LDL氧化修饰程度的影响。结果 :　 1 .LDL+Cu2 + +Mg2 +各剂量组 LDL氧化反应潜伏期较 LDL+Cu2 +组明显延长 ;2 .LDL+Cu2 + +0 .3mmol/L Mg2 +组和 LDL+Cu2 + +0 .6mmol/L Mg2 +组 TBARS低于 LDL+Cu2 + 组 ,P<0 .0 1 ;3.在内皮细胞介导的 LDL氧化体系中 ,补 Mg2 + 各剂量组 TBARS低于空白对照组 ,LDL+Mg2 +各剂量组 TBARS低于 LDL组 ,差异均具有显著性 (P<0 .0 5)。结论 :　在一定实验条件下 Mg2 +可阻断 LDL的氧化反应     

黑加仑提取物保护血管内皮细胞氧化损伤的实验研究

目的研究黑加仑提取物对过氧化氢所致血管内皮细胞ECV-304损伤的影响。方法建立体外过氧化氢损伤模型,测定细胞存活率、上清液中丙二醛(MDA)含量、乳酸脱氢酶(LDH)活力、一氧化氮(NO)、内皮素(ET)和前列环素(PGI2)含量,并运用流式细胞仪观察黑加仑提取物对过氧化氢对内皮细胞ECV-304凋亡的影响。结果黑加仑提取物各剂量都能显著提高H2O2损伤内皮细胞的存活率(P<0.05);显著抑制H2O2损伤引起内皮细胞的LDH和ET的释放(P<0.05);显著减少H2O2损伤的内皮细胞MDA的生成(P<0.05);增加H2O2损伤的内皮细胞NO和PGI2水平(P<0.05)。黑加仑提取物的各组、阳性对照组和正常对照组早期凋亡率和总凋亡率明显低于H2O2模型组(P<0.05)。结论黑加仑提取物对过氧化氢损伤的脐静脉内皮细胞ECV-304具有保护作用;黑加仑提取物可降低H2O2诱导的ECV-304凋亡的早期凋亡率和总凋亡率,以达到保护内皮细胞的作用。     

有机酸对人血管内皮细胞的保护作用

目的：探讨氯原酸（CHA）、抗坏血酸（AA）、柠檬酸（CA）和苹果酸（MA）4种有机酸对人血管内皮细胞的保护作用。方法：通过人脐静脉内皮细胞培养,从形态、生长状况和乳酸脱氢酶（LDH）释放方面,观察预先4h、与oxLDL同时加入、加oxLDL3h后加入有机酸3种情况,以及3个不同剂量（10、20、40mg/L)的有机酸＋oxLDL(100mg/L)对内皮细胞的作用。结果:oxLDL对内皮细胞具有明显的损伤作用,细胞生存率低于正常对照组,LDH释放率高于正常组。预先和同时加入CAH、AA、CA、和MA各组对oxLDL引起的内皮细胞损伤具有不同程度的保护作用,而后加入有机酸各组对oxLDL引起的内皮细胞损伤没有影响。3个剂量的CHA和AA＋oxLDL各组,以及CA和MA＋oxLDL的高剂量组的细胞生存率均高于oxLDL组,LDH释放率均低于ocxLDL组,呈明显的剂量效应关系。结论、氯原酸、抗坏血酸、柠檬酸和苹果酸4种有机酸对oxLDL诱导的内皮细胞损伤具有不同程度的预防性保护作用,其中以氯原酸和抗坏血酸的作用最佳,柠檬酸次之,苹果酸最终。     

不同地区大气PM2.5对人血管内皮细胞毒性作用的实验研究

目的比较不同地区大气PM2.5对血管内皮细胞的毒性,并探讨其作用机制。方法采集广州、东莞、深圳和肇庆4个城市的PM2.5。试验细胞为人脐静脉内皮细胞。将PM2.5分别以10、50、100、200、300μg/ml剂量染毒,作用于细胞24 h,测定细胞NO释放量、SOD活力、LDH漏出量及细胞存活率(MTT试验)。以肇庆作为对照,观察PM2.5对各指标的影响。经剂量与指标回归分析,以斜率评价不同城市PM2.5的效应大小。结果各城市PM2.5致细胞NO释放量和LDH漏出量随剂量增加而升高,SOD活力和细胞存活率随剂量升高而降低(P<0.05)。广州和深圳PM2.5在高剂量时致NO释放量明显高于肇庆(P<0.05)。广州、东莞和深圳PM2.5致SOD活力降低的程度在各剂量组均强于肇庆(P<0.05)。深圳PM2.5致LDH释放量明显高于肇庆,广州、东莞在高剂量时高于肇庆(P<0.05)。广州、深圳PM2.5致细胞死亡率高于肇庆(P<0.05)。回归分析表明,广州PM2.5致LDH漏出和细胞死亡的毒性效应最高,深圳PM2.5对NO释放和SOD活力降低的毒性效应最高,肇庆PM2.5对NO、SOD、LDH的细胞毒性均处于最低水平。NO释放量、LDH漏出量与细胞存活率呈负相关,SOD活力与细胞存活率呈正相关(P<0.01)。结论不同城市PM2.5对血管内皮细胞的毒性表现不同。NO、SOD、LDH与细胞存活率有关联,氧化应激损伤可能是其作用机制之一。     

反油酸对血管内皮细胞功能及形态的影响

目的通过建立血管内皮细胞(EC)与血管平滑肌细胞(SMC)的联合培养模型,探讨反油酸对内皮细胞的损伤作用。方法将与平滑肌细胞联合培养的内皮细胞用浓度为50μmol/L的油酸和反油酸分别作用48h。试剂盒测定乳酸脱氢酶(LDH)活力、一氧化氮(NO)含量;RT-PCR测定细胞粘附因子(VCAM-1、ICAM-1和E-slectin)基因表达量;激光共聚焦显微镜观察处理后的内皮细胞形态。结果反油酸促进LDH渗出,且紧密接触模型中内皮细胞LDH渗出率较旁分泌模型显著增加;反油酸抑制内皮细胞NO分泌,两种模型间无显著性差异;紧密接触模型中内皮细胞与旁分泌模型中的内皮细胞相比,VCAM-1、ICAM-1、E-slectin基因表达量均显著上升,且反油酸促粘附因子表达作用强于油酸;与平滑肌细胞紧密接触的内皮细胞出现形态不规则,反油酸使内皮细胞变形。结论与平滑肌联合培养可增加反油酸对内皮细胞的损伤。     

有机酸对人血管内皮细胞保护作用的机制研究

目的: 研究氯原酸(CHA)、抗坏血酸(AA)、柠檬酸(CA)和苹果酸(MA)四种有机酸(OA)对单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)和单核细胞聚集刺激因子(M-CSF)的影响及其抗氧化作用,探讨有机酸保护人血管内皮细胞的作用机制。 方法: 在体外原代培养人脐静脉内皮细胞(EC)中,分别加入不同剂量(10,20,40 mg/L)的CHA、AA、CA和MA,以及氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL,100 mg/L),观察四种OA对ox-LDL引起人血管EC损伤的保护作用。另观察单纯CHA和AA(40 mg/L)对EC的直接作用。 结果: (1)ox-LDL组的TBARS值明显升高,是正常LDL组的14.85倍;加OA各组TBARS值有不同程度的降低,并呈明显的剂量效应关系,其中CHA和AA作用较强,CA和MA作用较弱。(2)ox-LDL组MCP-1和M-CSF较LDL组显著升高;加OA组(40 mg/L)MCP-1和M-CSF分别显著低于ox-LDL组;单纯CHA和AA组分别低于空白对照组。 结论: OA对EC的保护作用与其抗氧化作用有关,而且可能与对EC分泌MCP-1和M-CSF的影响有关。     

反式C18:1对血管内皮细胞损伤的影响

目的通过检测相关细胞损伤指标,探讨trans C18:1对血管内皮细胞的损伤机制。方法体外细胞培养方法将含trans C18:1终浓度分别为0、50、100、200、400、600μmol/L的达氏修正依氏培养基(DMEM)与血管内皮细胞(EC)于37℃、5%CO2共同孵育24～48 h后,分别测乳酸脱氢酶(LDH)活性和一氧化氮(NO)含量及细胞中一氧化氮合酶(NOS)活性,采用单四唑(MTT)法计算trans C18:1对EC作用后细胞存活率的变化。结果 EC的存活率下降。随时间的延长,与trans C18:1的浓度呈剂量依赖关系;NO分泌量和NOS活性的下降及LDH渗出率的升高与trans C18:1浓度呈剂量依赖关系。Trans C18:1的各浓度梯度与对照组比,以上指标都有显著性差异。结论 transC18:1可造成血管内皮损伤。     

硒对培养大鼠心肌细胞抗氧化损伤作用的研究

目的　探讨硒对培养心肌细胞的抗氧化损伤作用。方法　应用不同浓度的过氧化氢 (H2 O2 ) ,分别作用不同时间 ,动态观察其对心肌细胞的损伤作用。同时观察硒对培养心肌细胞的保护作用。结果　H2 O2 作用于培养心肌细胞可造成乳酸脱氢酶 (LDH)从心肌细胞泄漏、细胞周期发生改变、心肌细胞和培养液中脂质过氧化物 (丙二醛 ,MDA)含量增加 ,同时发生 HE-染色可见的形态学改变。培养液中加入一定浓度的硒后 ,培养细胞和介质中 LDH和 MDA水平显著下降 (P<0 .0 1 ) ,噻唑蓝 (MTT)测定培养心肌细胞的存活率显著升高 ,细胞周期和形态学表现与正常细胞基本相同。结论　 H2 O2 作为一种自由基 ,依其浓度和作用时间可造成不同程度的心肌细胞的损伤。硒作为具有抗氧化作用的微量元素 ,能明显抑制自由基对心肌细胞的损伤作用。     

二十二碳六烯酸和二十碳四烯酸对早产儿脂肪酸状况和生长的影响

目的 :　探讨补充模拟母乳水平的二十二碳六烯酸 (DHA)和二十碳四烯酸 (AA)对早产儿体内脂肪酸状况和生长发育的影响。方法 :　选取体重 <2 1 0 0 g,胎龄 <37w的早产儿 32名 ,分为三组 :A组 ,母乳喂养组 ;B组 ,传统配方喂养组 ;C组 ,DHA和 AA补充组。C组配方补充至婴儿体重达 (2 .5± 0 .1 0 ) kg。出生后 1 mo± 7d、2 mo± 7d、3mo± 7d分别测量身长、体重、头围 ;出生时和体重达 (2 .5± 0 .1 0 ) kg时分别测血浆和红细胞中的 DHA和 AA的水平。结果 :　至 3个月时 ,B组的头围明显低于 A组及 C组 ,差异具有统计意义 (P<0 .0 5) ;三组早产儿刚出生时 ,红细胞和血浆中各种脂肪酸比例无显著差异 ;至体重 (2 .5± 0 .1 0 ) kg时 ,B组的 DHA和 AA明显低于A组和 C组 (P<0 .0 5)。相关分析显示 :头围与血浆中的 AA水平相关 (r=0 .466,P<0 .0 1 )。结论 :　给早产儿补充模拟母乳水平的 DHA和 AA,不仅能维持其正常的生长发育 ,而且可将早产儿血浆和红细胞中的 DHA和 AA提高至与母乳喂养早产儿相当的水平     

锌对缺血再灌注大鼠肝脏金属硫蛋白-1基因表达的影响

目的　研究锌对肝脏缺血再灌注损伤 (HIRI)保护作用的分子机制。方法　采用RT- PCR技术 ,检测分析金属硫蛋白 - 1 (MT- 1 )基因在 HIRI大鼠肝组织中的表达和锌对其表达的调节。结果　各组大鼠肝组织均有MT- 1基因表达 ;缺血 30 min、再灌 90 min大鼠肝组织中 MT- 1m RNA较对照组显著降低 (P<0 .0 1 ) ;灌胃补锌后 ,HIRI大鼠肝 MT- 1 m RNA转录水平较对照组明显增高 (P<0 .0 1 ) ,单纯补锌亦可上调其组织中 MT- 1基因表达 (P<0 .0 1 )。结论　在锌对HIRI产生保护作用的分子机制中 ,调节其肝组织中 MT- 1转录水平的表达可能是一条重要途径。     

支链氨基酸提高大鼠游泳耐力作用探讨

目的 :　探讨支链氨基酸 (BCAA)对提高大鼠运动耐力的作用。方法 :　取雄性Wistar大鼠 2 1只 ,随机分为三组 :正常组、游泳对照组及游泳补充 5% BCAA饲料组。两个游泳组每天游泳训练 1 h,1 0 d后 ,游泳 6h,观察游泳大鼠的存活率 ,测定血乳酸和尿素氮水平 ,血清和骨骼肌乳酸脱氢酶 (LDH)活力 ,线粒体脂质过氧化物 (LPO)水平和线粒体膜的粘度系数。另取昆明种小鼠 ,随机分为三组 ,用实验一相同的饲料喂养 ,两周后 ,于每只小鼠尾静脉注射 15N-甘氨酸 (15N-Gly) 1 .0 mg,注射后 和 组立即游泳 ,分别于注射后的 1、2、3及 4h,测定各组骨骼肌蛋白质中15N-甘氨酸 (15N- Gly)的丰度。结果 :　BCAA可明显提高大鼠游泳存活率 ,抑制游泳运动后大鼠的血乳酸浓度、LDH活力、骨骼肌 LPO的升高幅度 ,抑制骨骼肌 LDH活力和膜流动性下降的趋势。并且 BCAA还可增加 15N- Gly在骨骼肌蛋白质中的滞留时间。结论 :　BCAA可改善运动后骨骼肌线粒体功能 ,改善运动性疲劳 ,提高大鼠的运动耐力     

肉碱对不全饥饿大鼠脂肪利用的影响

目的　探讨肉碱对不全饥饿大鼠脂肪利用的影响。方法　用限食的方法造成不全饥饿大鼠模型 ,在给予高脂饲料基础上观察对照组与给予肉碱的实验组血浆肉碱浓度、附睾脂肪垫重量、粪便中脂肪含量、尿酮体、糖原等指标的变化。结果　补充肉碱后 ,实验组动物血浆总肉碱浓度显著高于对照组 ( P<0 .0 0 1 ) ;附睾脂肪组织重量及粪便中脂肪含量均显著低于对照组 ( P<0 .0 5) ,而肝糖原和肌糖原含量显著高于对照组 ( P<0 .0 5) ;实验前期和中期实验组尿酮体排出减少 ,与对照组相比 P<0 .0 5。结论　补充肉碱对不全饥饿大鼠脂肪利用有一定的促进作用     

牛磺酸和复合微量营养素对大鼠视网膜mGluR6 mRNA的影响

目的　探讨牛磺酸和复合微量营养素对光照和暗适应条件下大鼠视网膜代谢型谷氨酸受体 6亚型 (m Glu R6) m RNA的影响。方法　在幼年大鼠饲料中添加牛磺酸或 VA、VB1、VB2 、尼克酸、Zn、Se等复合微量营养素 ,营养干预 4wk后 ,采用原位分子杂交技术检测各组大鼠视网膜 m Glu R6m RNA在光照和暗适应条件下的分布和表达。结果　光照和暗适应时 m Glu R6m RNA均集中表达于内、外核层和神经节细胞层。牛碘酸能增加光照和暗适应时上述部位m Glu R6m RNA的表达 ,而复合微量营养素对其表达无明显影响。结论　除双极细胞外 ,部分神经节细胞也表达 m Glu R6;光感受器突触前膜存在反馈性的 m Glu R6。牛磺酸可能通过促进光照和暗适应条件下 m Glu R6m RNA的表达 ,调制大鼠视杆通路视觉信号传递     

维持生长大鼠最佳学习记忆功能的补锌量研究

目的　研究不同含锌饲料对生长大鼠学习记忆的影响及与其脑中生长抑素、锌和钙含量的关系 ,以确定维持大鼠最佳学习记忆状态的补锌范围。方法　以含锌量为 2 0、50、1 0 0、2 0 0、40 0和 80 0 mg/kg的饲料饲喂 88g左右的 Wistar大鼠 ,雌雄各半 ;以避暗法测试各组实验动物学习记忆能力 ,并以放免法测定了脑组织生长抑素 ;以原子吸收光谱法测定脑组织锌和钙含量。结果　 1 0 0 mg/kg和 2 0 0 mg/kg的饲料锌含量 ,使大鼠学习记忆功能最好 ,而较低和较高的饲料锌水平对学习记忆功能均有不同程度的不利影响 ;同时较低和较高的饲料锌水平使下丘脑、海马和大脑皮层生长抑素水平都有不同程度的降低 ;另外 ,较低的饲料锌水平可使血液锌、海马、大脑皮层和下丘脑锌水平一致性地降低 ,同时使大脑皮层钙含量降低。结论　 1 0 0～ 2 0 0 mg/kg饲料锌含量 ,对维持大鼠学习记忆功能是最适的补锌范围 ,这与大鼠脑组织较高的生长抑素、锌和钙水平一致。     

硒对大鼠胃癌的作用及对其内分泌细胞的影响

目的　探讨硒在机体自然抗肿瘤发生过程中的作用。方法　给断乳雄性 Wistar大鼠 MNNG(N甲基 - N -硝基 - N亚硝胍 2 0 mg/kg)灌胃 ,每天一次 ,连续 1 0 d,以诱导大鼠胃粘膜异倍体形成 (大鼠胃癌模型形成 )。第 2 5wk时 ,用流式细胞仪测定硒对大鼠胃幽门粘膜异倍体形成的影响 ,用免疫组织化学 ABC法观察大鼠胃粘膜异倍体形成过程中 ,其胃的胃泌素细胞 (G细胞 )、生长抑素细胞 (SS细胞 )、5-羟色胺细胞 (5- HT细胞 )的免疫组织化学变化 ,并对以上结果进行定性、定位、定量分析以及统计学处理。结果　 1 .硒能抑制 MNNG所致大鼠胃粘膜细胞异倍体的形成。 2 .实验对照组与正常对照组比较 ,大鼠胃粘膜胃泌素细胞的免疫组织化学反应明显增强 (P<0 .0 1 ) ,SS细胞、5- HT细胞也有增强的趋势 (P>0 .0 5)。 3.加硒各组与实验对照组比较 ,大鼠胃粘膜胃泌素细胞的免疫组织化学反应明显减弱 (P<0 .0 1 ) ,SS细胞、5- HT细胞也有减弱的趋势 (P>0 .0 5)。结论　内分泌细胞可能与 MNNG所致大鼠胃粘膜细胞异倍体的形成和发展有关 ;硒可能对大鼠胃内分泌细胞的功能有一定影响     

硒和维生素E缺乏诱导大鼠肝细胞凋亡

目的　研究硒 (Se)和维生素 E(VE)缺乏对大鼠肝细胞的影响。方法　以天然低Se低 VE的克山病病区粮作为饲料进行动物试验 ,与人工半合成低 Se低 VE饲料的实验互相印证 ;用光镜、电镜、流式细胞术 (FCM)、末端脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记 (TUNEL)、DNA琼脂糖凝胶电泳 5种方法进行肝细胞凋亡检测。结果　无论天然饲料还是人工半合成饲料实验 ,低 Se低 VE组光镜下均可见较多肝细胞胞浆着色深 ,核浓缩。主要分布在中央静脉周围。电镜检查天然低 Se低 VE组可见较多肝细胞核体积缩小 ,核染色质呈块状聚集在核膜下。用流式细胞术检测 ,天然低 Se低 VE组较对照组肝细胞凋亡百分率明显增加 ,补 Se和 /或 VE使调亡百分率有所下降 ,以联合补充 Se和 VE凋亡百分率下降最明显。人工半合成饲料低 Se低 VE组凋亡百分率较高 ,补 Se和 /或 VE使凋亡百分率有所下降 ,但均未达到显著差异。无论天然饲料还是人工半合成饲料实验 ,低 Se低 VE组均可见较多 TUNEL染色阳性细胞 ,加 Se和 /或 VE可使上述改变的细胞有不同程度减少。DNA琼脂糖凝胶电泳 ,无论天然还是人工半合成饲料实验低 Se低 VE组均可见 DNA梯状图象 ,其余各组未见梯状改变。结论　Se和 VE缺乏可诱导大鼠肝细胞凋亡