黄芪多糖对脂肪组织巨噬细胞活化的影响及作用机制

目的 探讨黄芪多糖(APS)对脂肪组织巨噬细胞活化的影响及作用机制.方法 2018年11月至2019年5月,通过0.4μm孔径大小的Transwell小室共培养方式,将巨噬细胞种于上室,将脂肪细胞种于下室.实验分为三组,空白对照组(NC组)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导干预组(TNF-α组)和APS干预组(APS+TNF-α组),酶联免疫吸附测定(ELISA)检测细胞培养上清液中白细胞介素-6(IL-6)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)水平,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测巨噬细胞诱生型一氧化氮合酶(iNOS)和TNF-αmRNA表达水平,蛋白质印迹法(Western blotting)检测iNOS和磷酸化AMP活化蛋白激酶α1(p-AMPKα1)和沉默信息调节蛋白1(SIRT1)水平.同时,采用8μm孔径大小的Transwell小室共培养方式,结晶紫染色观察巨噬细胞的趋化情况.结果 与NC组比较,TNF-α组细胞培养上清液中IL-6和MCP-1水平显著升高(P<0.05),巨噬细胞中TNF-αmRNA、iNOS mRNA和蛋白水平显著升高(P<0.05),p-AMPKα1和SIRT1蛋白水平显著降低(P<0.05),趋化巨噬细胞数显著升高(P<0.05),其中NC组iNOS mRNA和蛋白水平分别为(1.00±0.17)、(0.43±0.05),TNF-α组分别为(3.57±0.31)、(1.18±0.16).与TNF-α组比较,APS+TNF-α组细胞培养上清液中IL-6和MCP-1水平显著降低(P<0.05),巨噬细胞中TNF-αmRNA、iNOS mRNA和蛋白水平显著降低(P<0.05),p-AMPKα1和SIRT1蛋白水平显著升高(P<0.05),趋化巨噬细胞数显著降低(P<0.05),其中TNF-α组iNOS mRNA和蛋白水平(3.57±0.31)、(1.18±0.16),APS+TNF-α组分别为(1.87±0.22)、(0.62±0.08).结论 APS可抑制巨噬细胞的活化,其作用机制与激活AMPK/SIRT1信号通路有关.     

小叶黑柴胡多糖对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响

目的研究小叶黑柴胡多糖（BPs）对巨噬细胞免疫功能的影响。方法收集KM小鼠腹腔巨噬细胞,用不同质量浓度的BPs溶液(10、100、200 mg·L^-1)刺激,检测巨噬细胞吞噬E.codi、趋化和分泌一氧化氮（NO）的功能。结果 HPs各个浓度组均能显著促进巨噬细胞吞噬E.codi和趋化作用（P<0.001）,但对巨噬细胞分泌NO无明显影响;BPs 100、200 mg·L^-1可明显抑制脂多糖诱导的巨噬细胞分泌NO（P<0.05）。结论 BPs可增强巨噬细胞免疫功能,但能抑制脂多糖诱导的炎症介质分泌。     

灵芝多糖对小鼠巨噬细胞免疫功能的影响研究

目的了解灵芝多糖对小鼠巨噬细胞免疫功能的影响。方法采用小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验(半体内法),以灵芝多糖溶液连续灌胃小鼠后,经腹腔注射鸡红细胞悬液,取腹腔洗液制作涂片,固定染色后置于显微镜下观察,同时计数小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的数目并计算吞噬率和吞噬指数,对结果进行统计学分析。结果①21g/kg、84g/kg组小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬率及吞噬指数明显高于低剂量组和对照组,经统计学分析有显著性差异(P<0.05);②84g/kg组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率及吞噬指数高于21g/kg剂量组,经统计学分析有显著性差异(P<0.05)。结论灵芝多糖能够提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬率和吞噬指数,从而增强机体的免疫功能,但与剂量有关,低剂量灵芝多糖对小鼠巨噬细胞免疫功能无明显影响,只有中、高剂量才能提高小鼠巨噬细胞免疫功能。     

枸杞多糖对小鼠巨噬细胞免疫功能的影响研究

目的了解枸杞多糖对小鼠巨噬细胞免疫功能的影响。方法采用小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验,以不同浓度枸杞多糖溶液连续灌胃小鼠后,经腹腔注射鸡红细胞悬液,取腹腔洗液制作涂片,固定染色观察,计数,并计算吞噬率和吞噬指数,对结果进行统计学分析。结果枸杞多糖低浓度（10mg/kg）、中浓度（20mg/kg）、高浓度（40mg/kg）浓度组吞噬百分率及吞噬指数与正常对照组比均具有显著性差异,有统计学意义。结论枸杞多糖能够提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力,从而增强机体的免疫功能。     

隐丹参酮对骨髓来源巨噬细胞功能的影响

目的研究隐丹参酮对骨髓巨噬细胞功能的影响。方法激光共聚焦检测巨噬细胞吞噬功能;庆大霉素保护法检测巨噬细胞杀菌能力;q-PCR法检测TNF-α、IL-6、IL-10的表达水平;Western blot检测NF-κB通路;LPS(lipopolysaccharides)及IL-4刺激检测巨噬细胞分型。结果隐丹参酮能够增强巨噬细胞吞噬功能及杀菌能力;促进抗炎因子IL-10并抑制促炎因子TNF-α及IL-6的表达;阻断NF-κB信号通路;诱导巨噬细胞向M2型分化。结论隐丹参酮能促进巨噬细胞向M2型分化,并上调骨髓巨噬细胞的免疫功能。     

哮喘大鼠肺泡巨噬细胞IL-6及TNF-α的表达水平及其意义

目的调查哮喘大鼠肺泡巨噬细胞IL-6和TNF-αmRNA表达水平的变化及其在哮喘发病中的作用。方法利用卵蛋白(ovialbumin,OVA)致敏并激发大鼠建立哮喘模型,对照组则用生理盐水代替;收集支气管肺泡灌洗液(bronchusalveolar lavage fluid,BALF)并用RMPI1640培养AM。各组细胞在利用LPS(5μg.ml-1)处理12小时前后,通过RT-PCR技术检测肺泡巨噬细胞中IL-6和TNF-αmRNA的表达水平。结果病理学检测发现哮喘模型组(n=7)炎症细胞浸润明显增加,支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞总数显著增高,与对照组(n=7)比较差异显著(P<0.01)。两组肺泡巨噬细胞经LPS处理后,IL-6和TNF-αmRNA的表达水平明显增高(n=7,P<0.01)。无论LPS处理与否,哮喘组肺泡巨噬细胞IL-6的表达水平与对照组相比明显增高(n=7,P<0.01);TNF-α的表达水平变化情况与IL-6相似,但其显著性不及IL-6高(n=7,P<0.05)。结论哮喘大鼠肺泡巨噬细胞IL-6和TNF-αmRNA的表达水平与对照组相比明显增高。由此可见,哮喘大鼠的肺泡巨噬细胞被激活并且产生IL-6和TNF-α从而参与哮喘的发生发展。     

猪苓多糖通过Toll样受体4对小鼠腹腔巨噬细胞的活化作用

目的观察猪苓多糖(PPS)对小鼠腹腔巨噬细胞的活化作用,并研究Toll样受体4(TLR4)在其中的作用。方法用PPS12.5,25,50及100mg·L-1刺激C3H/HeN小鼠和TLR4缺陷的C3H/HeJ小鼠脾细胞72h或腹腔巨噬细胞24h,以[3H]TdR掺入法检测脾细胞增殖反应;以Griess法测定腹腔巨噬细胞培养上清一氧化氮(NO)水平,ELISA检测白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量;以溴化氰活化多糖的方法制备荧光胺(Flu)标记的PPS(Flu-PPS)及Flu-葡聚糖,应用流式细胞仪及激光共聚焦显微镜检测Flu-PPS与小鼠腹腔巨噬细胞的结合。结果 PPS可明显促进C3H/HeN小鼠脾细胞增殖并诱导腹腔巨噬细胞分泌NO,IL-1β和TNF-α,且具有浓度依赖性(r=0.999,P<0.01)。用抗TLR4单抗20mg·L-1与C3H/HeN小鼠腹腔巨噬细胞预孵育1h后加入PPS50mg·L-1,与单独PPS50mg·L-1孵育比较,巨噬细胞培养上清IL-1β和TNF-α浓度分别由(0.38±0.06)μg·L-1和(0.29±0.05)μg·L-1降至(0.18±0.01)μg·L-1和(0.12±0.02)μg·L-1,降幅达52.6%和58.6%(P<0.01)。PPS对C3H/HeN小鼠的脾细胞增殖、腹腔巨噬细胞产生IL-1β和TNF-α的作用明显强于C3H/HeJ小鼠:PPS12.5～100mg·L-1组脾细胞增殖分别增加了2.4,1.7,1.5和22.2倍,IL-1β增加了0.9,1.3,1.2和1.1倍,TNF-α增加了1.3,0.9,0.6和0.6倍,差异均有统计学意义(P<0.01)。流式细胞仪及激光共聚焦显微镜分析结果表明,Flu-PPS1mg·L-1与小鼠腹腔巨噬细胞结合的荧光强度显著高于Flu-葡聚糖,增加Flu-PPS浓度至5mg·L-1,荧光强度并未相应增强,表明Flu-PPS与小鼠腹腔巨噬细胞的结合具有饱和性;未标记的PPS100mg·L-1及抗TLR4单抗200mg·L-1可明显阻断Flu-PPS与巨噬细胞的结合。结论 PPS可能通过TLR4活化小鼠腹腔巨噬细胞。     

灰树花多糖抗荷瘤小鼠S180肉瘤的实验研究

目的研究灰树花多糖(GFP)抗实验性肉瘤作用的效果及其对肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-2(IL-2)的影响,探讨其作用机制。方法将瘤细胞悬液接种于小鼠右前肢腋皮下制备荷瘤小鼠动物模型,分为GFP高、中、低剂量组和环磷酰胺(Cy)组、生理盐水组。以高、中、低剂量GFP溶液和环磷酰胺分别灌胃10d,检测小鼠肿瘤的抑制率,小鼠血清中TNF-α、IL-2的水平变化。结果3种剂量的GFP、环磷酰胺对S180荷瘤小鼠的抑瘤率分别为34.37%、42.67%、47.92%和41.5%,GFP组荷瘤小鼠血清内TNF-α、IL-2含量明显高于Cy组和生理盐水组(P<0.05)。结论GFP具有抗肿瘤作用,TNF-α、IL-2的释放可能是其抗肿瘤作用的机制之一。     

肉苁蓉类药材多糖提取工艺优化及多糖的平均分子质量分布

本文以肉苁蓉多糖的得率以及质量分数为评价指标,通过单因素考察以及正交试验确定复合酶联合超声提取工艺的最适提取条件,从而得到一种简便、高效提取肉苁蓉多糖的方法.用此方法提取荒漠肉苁蓉、管花肉苁蓉、盐生肉苁蓉、沙苁蓉中的多糖,通过高分子排阻色谱-十八角度激光光散射仪配置示差检测器测定4种肉苁蓉多糖的平均分子质量、分布以及多...     

肉苁蓉多糖的超声提取及含量分析

目的　从肉苁蓉中提取多糖并测定其含量。方法　采用超声法提取 ,分光光度法测定多糖含量。结果　肉苁蓉中多糖含量 13.2 2 % ,平均回收率为97.36 % ,RSD =1.2 8% (n =5 )。结论　超声法提取多糖 ,速度加快 ,收率提高     

肉苁蓉提取工艺优化及其神经保护作用的分析

目的研究肉苁蓉提取工艺条件及其神经保护作用。方法利用生物酶对肉苁蓉进行提取,通过单因素试验优选工艺条件,提取液经卷式膜纯化,冷冻干燥后获得肉苁蓉提取物,并对其进行抗氧化活性测试,再采用斑马鱼体内试验评价肉苁蓉提取物对斑马鱼中枢神经损伤的保护作用。结果最优工艺为加8倍量纯化水,温度为45～50℃,调整pH为7.0,加入药材质量0.1%的中性蛋白酶,搅拌2 h,煮沸灭活后,经微滤卷式膜进行过滤,收集透过液。所制备的肉苁蓉提取物收率在60%以上,肽含量不低于20%,总苷含量在7%左右,糖类成分在63%左右。抗氧化活性测试表明肉苁蓉提取物对2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)(ABTS)自由基和超氧阴离子自由基具有较强的清除作用(IC50值分别为314.9μg·m L~(-1)和393.5μg·m L~(-1)),斑马鱼体内活性实验表明肉苁蓉提取物对斑马鱼中枢神经损伤具有较好的保护作用。结论该工艺具有绿色环保、操作简便等优点,所制备的肉苁蓉提取物具有较好的抗氧化和神经保护作用。     

肉苁蓉的愈伤组织培养

报道由肉苁蓉（Cistanchedeserticola）不同部位诱导出愈伤组织，并筛选出适合于愈伤组织快速生长的最佳培养条件。结果表明：幼芽愈伤组织诱导率较种子高；愈伤组织生长的基本培养基以B5最好；适宜的激素种类和配比为IAA0．5mg／L和KT2mg／L。适宜的培养条件为pH6．0。     

肉苁蓉HPLC指纹图谱研究

目的：建立肉苁蓉的HPLC指纹图谱分析方法。方法：以毛蕊花糖苷为参照物，采用梯度洗脱HPLC法。色谱条件如下：Shim-pack VP-ODS色谱柱（150min×4．6mm，5μm）；流动相A为甲醇－乙腈（50：50），B为0．05mol／L乙酸钠缓冲液（冰乙酸调pH值至4．0），梯度洗脱；检测波长：334nm。结果：方法的精密度、稳定性、重现性较好，共标示出肉苁蓉27个共有峰。结论：该方法可用于肉苁蓉药材的质量控制。     

Isolation and characterization of alpha-(1-->6)-glucans from Cistanche deserticola

Three unique polysaccharides (1-3) have been obtained from the 0.5 M NaOH extract of the stem of Cistanche deserticola Y. C. Ma. The results of methylation analysis, partial acid hydrolysis, 13C, 1H NMR, 1H-1H COSY, HMQC and HMBC spectroscopic analyses indicate that they are all composed of glucose, having a backbone of alpha-(1 --> 6)-glucan, and have different molecular weights. Their structures differ from that of linear starch.     

来自于肉苁蓉的一个新天然产物

从中药肉苁蓉（Cistanche deserticola Y.C.Ma)中得到一个新天然产物,2,5－二氧－4－咪唑烷基－氨基甲酸,经光谱鉴定和X－射线衍射推定其化学结构和立体构型。     

来自于肉苁蓉的一个新天然产物(英)

从中药肉苁蓉（CistanchedeserticolaY.C.Ma）中得到一个新天然产物,2,5-二氧-4-咪唑烷基-氨基甲酸,经光谱鉴定和X-射线衍射推定其化学结构和立体构型。     

肉苁蓉化学成分及改善智力抗衰老研究

随着老龄人口的增加,老年性痴呆的发病率越来越高,寻找和开发具有自主知识产权的天然药物,以预防和治疗老年痴呆等学习记忆障碍疾病已成为近年来研究的热点之一.现代研究表明,肉苁蓉具有抗氧化、清除自由基、减少细胞凋亡、提高机体免疫力等药理活性,能够改善智力,提高小鼠学习记忆能力,有进一步研究开发的前景.本文就近年来国内外有关肉苁蓉化学成分、抗衰老及改善学习记忆障碍等研究成果作一综述.     

肉苁蓉与沙苁蓉中6种苯乙醇苷类成分的UPLC含量测定及化学计量学评价

目的:建立肉苁蓉、管花肉苁蓉及沙苁蓉中松果菊苷、管花苷A、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷、金石蚕苷和2'-乙酰金石蚕苷的UPLC含量测定方法,并比较其含量的异同.方法:采用Waters HSST3(100 mmx 2.1 mm,1.8 μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.1％甲酸水,梯度洗脱,流速0.3 mL·min-1,检测波...     

枸杞多糖对外周血单核细胞激活作用

目的:探讨枸杞多糖对外周血单核细胞是否具有激活作用。方法:贴壁法分离培养外周血单核细胞并进行鉴定。应用中性红实验检测枸杞多糖对单核细胞吞噬作用;用非特异性酯酶染色及电镜技术检测枸杞多糖诱导单核细胞内溶酶体的改变;用0.312,1.250,5.000g.L-1枸杞多糖对体外培养的外周血单核细胞进行诱导培养12h,ELISA法测定单核细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的表达。结果:枸杞多糖能增强单核细胞的吞噬作用,增加单核细胞胞质内溶酶体量,显著诱导单核细胞表达TNF-α和IL-6。结论:枸杞多糖对单核细胞具有激活作用。     

双环醇对脂多糖诱导巨噬细胞iNOS蛋白的表达和NF-κB活化的抑制作用

目的炎症是肝炎病毒或其它因素所致的肝损伤的一个共同特征,该文目的系研究抗肝炎新药双环醇对与炎症反应相关分子的调节作用。方法以无毒性浓度双环醇预先与巨噬细胞株RAW264.7和小鼠腹腔巨噬细胞温孵1h后,加入一定量脂多糖(LPS)共同培养适当时间以诱导上述细胞的活化,培养上清中NO2-的含量和TNF-α的水平分别用Griess试剂及L929细胞株生物法测定,用Westernblot方法测定iNOS蛋白的表达和NF-κB的活化。结果双环醇在0.1～0.5mmol.L-1剂量依赖性降低1mg.L-1LPS引起的RAW264.7和小鼠腹腔巨噬细胞NO的释放以及TNF-α的分泌,双环醇0.5mmol.L-1能够明显抑制1mg.L-1LPS引起的iNOS蛋白的表达和NF-κB的活化。结论双环醇对与炎症相关的调控因子iNOS蛋白的表达和NF-