白念珠菌和新生隐球菌系统感染裸小鼠模型的建立

目的建立白念珠菌和新生隐球菌系统感染裸小鼠模型。方法采用对裸小鼠腹部注射白念珠菌及隐球菌菌悬液的方法,观察记录1～2d内裸小鼠的毒性反应情况和死亡分布,并进行病理检查。根据寇氏法设计测定半数致死量(LD50),并检测感染前后脾脏自然杀伤(NK)细胞活性的变化。结果分别观察白念珠菌和新生隐球菌菌悬液对裸小鼠的急性毒性;检测到裸小鼠腹腔注射白念珠菌菌悬液的LD50为1.6×107cfu/ml,注射新生隐球菌菌悬液的LD50为2.0×107cfu/ml。白念珠菌、新生隐球菌感染裸小鼠时,脾脏组织NK细胞的活性下降。结论建立了白念珠菌和新生隐球菌系统感染裸小鼠模型,为讨论在T细胞为主的细胞免疫缺失的情况下,以B细胞NK细胞为主的体液免疫系统如何应对白念珠菌和新生隐球菌感染提供了一个极好的实验动物模型。     

封闭群FMMU白化豚鼠与短毛三色豚鼠血液成分比较

３０只无合格证的Ｗｉｓｔａｒ大鼠发生了酷似小鼠脱脚病的疾病，发病率高达３３．３％（１０／３０）。取病鼠的皮肤经组织学检查，发现其病理变化呈痘病毒感染的特征性改变。病鼠的肝、脾奖浆接种于ＳＰＦ鸡胚绒毛尿囊膜后，出现痘斑并已连续传至第４代，经电镜检查有成熟的病毒粒子和许多幼稚型病毒。病毒开矿与痘病毒一致，有囊膜，直径在１７０－２１２．５ｎｍ之间。异常肝、组织和经传代接种鸡胚绒毛尿囊膜的匀浆上清液，对鸡     

AIDS患者血液与脑脊液中真菌检测及药敏分析

目的 分析艾滋病(AIDS)患者血液及脑脊液中真菌种类及其耐药性,为临床诊疗AIDS患者机会性感染提供参考。方法收集2011～2014年某传染病医院接诊AIDS患者的血液和脑脊液标本,对其中病原性真菌进行分离、鉴定,并对新生隐球菌进行药敏分析。结果共分析AIDS患者血液培养阳性标本477份、脑脊液培养阳性标本109份,真菌检出率分别为66.88%(319/477)和66.97%(73/109),其中血液中以马内菲青霉菌检出率最高,为53.04%(253/477),脑脊液中以新生隐球菌检出率最高,占66.06%(72/109)。新生隐球菌对两性霉素B、氟康唑、5-氟胞嘧啶均高度敏感。结论AIDS患者合并真菌感染率较高,其中常见的是马内菲青霉菌和新生隐球菌。     

社区感染肺隐球菌病临床特点分析

目的 研究社区感染肺隐球菌病的特点.方法 回顾性分析2003年1月～2007年12月在复旦大学中山医院住院的30例肺隐球菌病患者的临床资料.结果 30例患者中,男19例,女11例;年龄16～70岁,平均(44±12.64)岁.66.7%无明显基础疾病,HIV抗体均阴性.30%无症状,70%有以下表现:干咳(16.7%)、咳痰(46.7%)、发热(23.3%)、胸痛(13.3%)、胸闷(13.3%).症状轻,体征不明显,有一定自限性.影像学表现:53.3%表现为单发或多发的结节、团块影,40%以渗出、实变为主,余为弥漫性混合病灶.病理学改变:96.7%见肉芽肿性病变,其中93.1%多核巨细胞胞浆内外见透亮空泡样隐球菌孢子,过碘酸雪夫(PAS)和Grocott六胺银(GMS)染色阳性率皆为89.7%;3.3%为慢性炎症.活检肺组织涂片或痰涂片找到新生隐球菌孢子各1例(3.3%),活检组织培养或痰培养新生隐球菌阳性率分别为16.7%和3.3%.15例行隐球菌乳胶凝集试验,阳性率93.3%.结论 社区感染肺隐球菌病多发生于健康状况较好的人群,临床表现轻微,影像学表现多样,病理学及相应病原学、血清学检查有较高的诊断价值.     

三个不同品种小鼠主要器官重量及长度的比较

本文着重报道NIH、ICR和KM三个不同品种的小鼠主要脏器和器官重量与长度之间的个体差异。结果提示，在相同的饲养环境、相同的营养标准，它们的主要脏器重量各品种之间具有一定差异。如NIH小鼠的肝脏比ICR小鼠和KM小鼠肝脏大；ICR小鼠的胃和大脑、心、脾比KM小鼠和NIH小鼠大，比较后均有显著性差异（P＜0．01和P＜0．05）。     

新型隐球菌感染的临床分析和药敏试验

目的 分析新型隐球菌感染的临床分布、症状体征、体外药敏及脑脊液生化检查,提高临床医生对新型隐球菌感染的认识,降低误诊率。方法 回顾性分析中国人民解放军联勤保障部队第910医院2014年-2020年确诊为新型隐球菌病患者的临床分布、症状、治疗情况及体外药敏结果。结果 28例患者中,男性18例,女性10例,HIV患者2例（7.1%）,非HIV患者24例（85.7%）,余2例（7.1%）患者未行HIV检测;18例（64.3%）有基础疾病。28株新型隐球菌,根据来源分别为：脑脊液源性18株（64.3%）,全血源性6株（21.43%）,灌洗液源性3株（4.68%）,皮肤脓液源性1株（3.57%）。18例隐球菌脑膜炎患者症状主要集中在头痛、发热、呕吐;6例隐球菌血流感染中有5例菌血症患者有发热,1例患者无发热,6例均无中枢神经系统感染症状;3例肺隐球菌感染中有2例合并肺结核,1例没有基础疾病。28株新型隐球菌中,6株患者未做药敏,22株药敏结果显示,除1株对伊曲康唑有获得性耐药、1株对伏立康唑有获得性耐药外,为非野生型菌,其余菌株均为野生型,没有获得性耐药。结论 新型隐球菌好发于细胞免疫功能低下患...     

新生隐球菌特异性探针的筛选

建立新生隐球菌质粒克隆库并从中筛选特异性探针。方法首先以Ａ型新生隐球菌标准株为实验菌株，以质粒ｐＵＣ１８为载体，大肠杆菌ＪＭ１０３为宿主，构建了新生隐球菌质粒克隆库Ａ（ｐＣＮ）。然后以在临床上，需要与隐球菌病鉴别的感染性疾病的病原菌，以及生物学性状与新生隐球菌相似的真菌为鉴别系统，应用双重杂交法筛选特异性克隆。结果克隆库的克隆片段大小为２８０ｂｐ～１８００ｂｐ，平均５８０ｂｐ，其中３２．４３％（１９２个克隆）为重复序列，６７．５７％（４００个克隆）为单拷贝序列。从该克隆库中筛选出３个特异性克隆，即ｐＣＮⅡＡ６为Ａ型特异性，ｐＣＮⅡＢ５为种特异性，ｐＣＮⅢＧ１为新生变种特异性。结论应用种特异性探针可以对新生隐球菌感染进行早期快速诊断，型特异性探针和变种特异性探针可用于流行病学调查区分血清型和变种。     

氯喹体外抗新生隐球菌的实验研究

目的:研究氯喹体外单独以及与两性霉素B(AmB)联合应用对新生隐球菌生长的影响.方法:(1)不同浓度氯喹分别与两种新生隐球菌变种的菌悬液共培养,检测4、6、8 h后菌悬液浓度的变化,并与不含氯喹的菌悬液对照比较;(2)检测3种浓度氯喹与AmB联合后对10株菌株的敏感性变化.结果:(1)在与隐球菌菌悬液共同孵育4、6和8 h时,50 μmol/L以下浓度的氯喹培养与生长对照之间隐球菌的生长百分率差异不显著;而在50～100 μmol/L浓度时,氯喹培养与生长对照之间隐球菌的生长百分率差异显著;氯喹浓度在500 μmol/L以上时,氯喹与隐球菌共孵育后,隐球菌菌悬液的浓度甚至低于原先浓度.但氯喹对隐球菌两种变种的作用没有差别.(2)氯喹与AmB联合应用可以明显降低AmB的MIC,而且也随着剂量增长而增强.结论:高浓度氯喹在体外具有抑制隐球菌生长和杀灭隐球菌的作用,并可增强AmB的抗隐球菌能力.     

影响新生隐球菌毒性及其他表型改变的微观进化

目的 :探讨微观进化在新生隐球菌感染中的作用。　方法 :取标准的产黑素和白化突变菌株分别培养 ,研究产黑素表型的变化 ,并用聚合酶链反应进行CNLAC1目的基因片段的扩增。　结果 :产黑素在转种培养后未见变化 ,而CNLAC1基因片段扩增时 ,发现转种后的菌株发生细微变化。　结论 :新生隐球菌微观进化现象不超越菌种 ,甚至表型都不发生明显变化 ,这为菌种保藏可能提供一个更早期的参考指标。     

中国和巴西临床新生隐球菌格鲁比变种菌株的种群和基因型比较分析

目的了解新生隐球菌格鲁比变种(Cryptococcus neoformans var.grubii)临床菌株在国内和巴西多位点微卫星位点定型(multilocus microsatellite typing MLMT)的种群分布特征,探讨并分析两国新生隐球菌格鲁比变种MLMT基因型差异。方法对已鉴定的69株新生隐球菌格鲁比变种进行DNA提取,采用3个微卫星位点(CNG1、CNG2、CNG3)的正反序列引物对相应的微卫星位点基因片段进行扩增后测序;测序后计算出每一菌株位点基序重复数(CNG1对应TA重复,CNG2对应GA重复,CNG3对应CAT重复);结合不同基序重复数判定各菌株的基因型。应用SPSS 11.5统计软件进行统计学分析。结果在33株被MLMT基因分型的国内新生隐球菌grubii变种菌株中有5种基因型被鉴定,其中29株为MLMT-17,占87.88%;而在36株巴西临床菌株中有10种基因型被鉴定,其中19株为MLMT-13,占52.78%。结论两国间新生隐球菌格鲁比变种临床菌株的主要基因型分布存在显著差异。巴西临床菌株的基因型分布表现为多样性。     

Zmu─1:DHP豚鼠生化基因位点多态性研究

为了研究Zmu－1：DHP育成品系豚鼠的遗传特征，以该品系亲本DHP（暂定名Zmu－2：DHP）豚鼠作对照，采用生化电泳法测定了14个同工酶的遗传标记。结果显示了二个品系的部分生化遗传概貌。Zmu－1：DHP品系10个基因位点无多态性，而Zmu－2：DHP品系有9个。二个品系的G－3－PD，G－6－PD、ES－6和ES－8位点呈多态性，DPH品系还有GOT-1位点呈多态性。上述5个多态性位点均有a、b二个等位基因，除此之外，Zmu—2：DHP品系在Es－8位点还存在c等位基因。从结果还看出，G－6－PD位点的等位基因类型与豚鼠的性别有关，多数雄性豚鼠呈b基因，多数雌性豚鼠则呈a基因。此外，还计算了5个多态性位点各种等位基因的频率。     

Zmu-1:DHP豚鼠的随机扩增多态性DNA分析

目的：研究Zmu-1：DHP豚鼠基因组DNA的遗传多态性及其遗传概貌，探讨随机引物PCR(RAPD—PCR)在豚鼠遗传质量检测中运用的可行性。方法：用RAPD—PCR法，对新培育的Zmu—1：DHP豚鼠和对照品系DHP豚鼠的基因组DNA进行PCR扩增。结果：从40条随机引物中，筛选出2条呈多态性的引物，分别是第S1202号和第S1219号引物。Zmu—1：DHP品系的扩增产物无多态性变化，而且其条带与多数DHP品系的个体相同。少数DHP品系的个体呈多态性变化，并找到该品系增加和缺失的特征性条带各一种。结论：Zmu—1：DHP品系的基因纯合性及个体一致性较DHP品系高。二个品系的DNA序列存在较少差异，说明豚鼠品系间遗传结构比较接近。一旦选定具有多态性的引物，RAPD—PCR法可以区分豚鼠品系，适用于豚鼠遗传质量检定。     

Zmu-1:DHP豚鼠染色体G带、C带及银染核仁组织者的观察

对本中心培育的Zmu－1：DHP豚鼠染色体的G带、C带及银染核仁组织者作了观察。结果表明大部分细胞有较恒定的8个银染点，G带与其他豚鼠有差异，C带则与其他哺乳动物相似，说明Zmu－1：DHP豚鼠在染色体核型上已发生变异。     

产黑素培养基在新生隐球菌病诊断和预后评估中的临床意义

目的:寻找新生隐球菌病的临床快速诊断方法和临床预后的评估指标.方法:用咖啡酸玉米吐温和多巴(CT)两种产黑素培养基培养128株已被明确鉴定的新生隐球菌,并以白念珠菌等作对照,25℃生长,了解显色结果.结果:非新生隐球菌及一部分新生隐球菌在两种培养基中均不显色,有12株新生隐球菌病仅在一种培养基中显色,2株临床分离株在两种培养基上均不显色.结论:产黑素培养基在新生隐球菌病的快速诊断和临床预后评估中均可起重要的作用.     

Ecological surveys of the Cryptococcus species complex in China

Background  Despite recent reports on the molecular epidemiology of cryptococcal infections in China, clinical isolates have been mostly reported from human immunodeficiency virus (HIV)-negative patients, and environmental isolates from China have rarely been included. The aim of this study was to investigate the ecological profile of Cryptococcus (C.) neoformans and C. gattii in China.

Methods  A survey was performed in 10 cities from 20°N (North latitude) to 50°N and in a Eucalyptus (E.) camaldulensis forestry farm at the Guixi forestry center, China.

Results  Six hundred and twenty samples of pigeon droppings from 10 cities and 819 E. camaldulensis tree samples were collected and inoculated on caffeic acid cornmeal agar (CACA). The brown-colored colonies were recultured to observe their morphology, growth on canavanine-glycine-bromothymol-blue (CGB) medium, phenol oxidase and urease activities, serotype and mating type. There were obvious differences in the positive sample rates of C. neoformans in pigeon droppings collected from the different cities, ranging from 50% in the cities located at latitudes from 30°N–40°N, 29% at 20°N–30°N and 13% at 40°N–50°N.

Conclusions  There were no differences in positive bevy rates (approximately 80%) among the three grouped cities. Mycological tests of 101 isolates purified from pigeon droppings revealed that they were C. neoformans var. grubii. We also observed variable capsular size around the C. neoformans cells in colonies with variable melanin production and the bio-adhesion of the natural C. neoformans cells with other microorganisms. One urease-negative C. neoformans isolate was isolated from pigeon droppings in Jinan city. No C. gattii was isolated in this study.

     

黑色素与新生隐球菌性脑膜炎的关系

目的：分析新生隐球菌黑色素生成的影响因素,初步探讨黑色素与新生隐球菌脑膜炎的相互关系。方法;在含左旋多巴的液体培养液中孵育各种血清型新生隐球菌,分光光度计测定不同条件下液体下的Ｄ值。结果：新生隐球菌黑色素的产生要多种因素的影响,其中以氮源、葡萄糖和温度的影响最为明显。结论：脑组织中富含黑色素的底物儿茶酚胺类物质,新生隐球菌侵犯脑膜和脑组织似与黑色素无关。     

T淋巴细胞与新生隐球菌免疫

T淋巴细胞在新生隐球菌的免疫中有重要的地位,通过多种机制发挥抵御新生隐球菌的作用。本文就T淋巴细胞与新生隐球菌免疫的研究进展和作用机制进行综述。