小四五颗粒对糖尿病肾病大鼠血浆蛋白质图谱的影响

目的：探讨小四五颗粒对糖尿病肾病（ DN）大鼠血浆蛋白质图谱的影响。方法将24只大鼠随机分为正常对照组、模型组和治疗组各8只,正常对照组不处理,模型组和治疗组采用链脲佐菌素（ STZ ）诱导的方法制备DN大鼠模型,造模成功后,治疗组给予小四五颗粒灌胃,模型组与正常对照组给予等体积生理盐水灌胃。4周后采用双向凝胶电泳技术分离各组的血浆蛋白,银染后对凝胶图像进行差异表达分析。结果与正常对照组相比,模型组血浆蛋白质银染双向凝胶电泳图谱中高表达的蛋白质斑点54个,低表达的蛋白质斑点19个;小四五颗粒治疗组上述差异表达的蛋白质斑点有16个较模型组明显恢复。结论小四五颗粒治疗组16个差异表达的蛋白质斑点可能与DN的发生发展密切相关。     

心气虚证模型大鼠脑内β淀粉样蛋白及其前体蛋白mRNA表达的变化

目的观察心气虚证模型大鼠脑内β淀粉样蛋白(Aβ)沉积及其前体蛋白(APP)mRNA表达。方法采用强迫跑步结合灌服盐酸普萘洛尔片(心得安)的方法建立心气虚证模型大鼠,将75只SD大鼠随机分为正常对照组、疲劳对照组、小、中和大剂量心得安+疲劳组,用ELISA法检测其大鼠脑内Aβ1～40蛋白表达,用RT-PCR法检测脑内APP mRNA的表达。结果与正常对照组比较,在模型大鼠脑内Aβ1～40明显升高(P<0.01),小剂量组心得安+疲劳组皮层前体蛋白APP(kpi)mRNA表达在明显升高(P<0.01),中剂量组和大剂量组表达则明显降低(P<0.05),APP(mpi)mRNA表达与正常对照组无显著差异。结论心气虚证模型大鼠大脑皮层可出现Aβ表达增高,可能与阿尔茨海默病(AD)的发病有关。     

萎胃颗粒对慢性萎缩性胃炎大鼠胃黏膜核因子-κB和内源性抑制因子表达的影响

[目的]探讨萎胃颗粒对慢性萎缩性胃炎(CAG)大鼠核因子(NF)-κB及其内源性抑制因子(IκBα)表达的影响,进一步明确其作用机制.[方法]采用综合法复制大鼠CAG模型,造模成功后随机分为正常组、模型组及萎胃颗粒低、中、高剂量组,每组10只,观察萎胃颗粒对CAG大鼠胃黏膜NF-κB和IκBa表达的影响.[结果]NF-κB蛋白NF-κBOD值正常组为0.116±0.033,模型组0.183±0.035,萎胃颗粒低剂量组0.158±0.031,中剂量组0.144±0.039,高剂量组0.126±0.036.与模型组比较,萎胃颗粒各治疗组NF-κBOD值均有明显下降(P＜0.01),且这种作用呈剂量依赖性:低剂量组＞中剂量组＞高剂量组,3组比较差异有统计学意义(P＜0.01).IκBα蛋白OD值正常组为4.25±1.02,模型组为2.08±0.74,萎胃颗粒低剂量组2.77±0.78,中剂量组3.46±0.84,高剂量组4.12±0.96.与模型组比较,萎胃颗粒各治疗组IκBαOD值均有明显的升高(P＜0.01),且这种作用呈剂量依赖性:低剂量组＜中剂量组＜高剂量组,3组比较差异有统计学意义(P＜0.01).[结论]萎胃颗粒可能通过增加CAG大鼠胃黏膜IκBα的表达,促进IκBα与NF-κB结合,进而抑制NF-κB的活化,降低胃黏膜炎症程度,从而有效抑制胃黏膜的增生,避免CAG进一步向胃癌转化.     

肠易激综合征脑-肠交互作用模型结肠组织蛋白指纹图谱初探

目的 建立肠易激综合征(IBS)动物模型,利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术分析结肠组织差异蛋白质表达谱,为探索IBS发病机制提供线索.方法 雄性成年Wistar大鼠14只,随机分为模型组和正常组,每组7只.对模型组大鼠采用慢性轻度不可预见性应激联合急性束缚应激制作IBS慢急性联合应激大鼠模型,以行为学方法 评估模型.以MALDI-TOF-MS技术观察大鼠结肠蛋白质伞景,从整体上探索IBS这一功能性肠病有无差异表达蛋白.结果 (1)一般情况:模型组体重低于正常组[(298.88±18.61)g比(348.00±12.44)g,P<0.01];肠道动力:模型组大鼠制模后1 h的排便颗粒数明显多于正常组[(6.00±1.69)粒/1h比(1.14±0.69)粒1 h,P<0.01];行为检测:模型组与正常组相比,糖水消耗量显著减少[(13.63±1.69)ml/1 h比(19.00±3.06)ml/1 h,P<0.05];内脏敏感性:模型组在各个气囊容量下腹肌收缩次数均明显高于正常组(P<0.05).(2)MALDI-TOF-MS 鉴定结果 :模型组与正常组大鼠结肠组织有12个标志蛋白表达有明显差异,分为4类,分别与肠上皮细胞离子分泌、蛋白质合成、G蛋白系统、免疫有关;12种差异表达蛋白在模型组均高于正常组(P<0.05).结论 慢急性联合应激大鼠可部分模拟人类IBS脑-肠交互作用.差异蛋白质的检测为IBS发病机制及治疗靶点的选择提供了参考依据.     

生芪降糖颗粒对2型糖尿病大鼠血糖、血脂及血管内皮素表达的影响

目的 探讨生芪降糖颗粒对糖尿病大鼠血糖、血脂及血管内皮素表达的影响.方法 制作2型糖尿病大鼠模型,随机分为生芪降糖颗粒低剂量组、中剂量组、高剂量组、文迪雅组、对照组.正常组给予蒸馏水灌胃,模型组分别给予生芪降糖颗粒低剂量、中剂量、高剂量、文迪雅、蒸馏水灌胃,至血糖下降至正常组水平或与造模时比较有统计学差异为治疗有效.测定各组血糖、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、胰岛素、主动脉内皮素1(ET-1)的变化及ET-1mRNA表达.结果 药物干预后生芪降糖颗粒中、高剂量组和文迪雅组血糖、TC、TG和胰岛素明显下降(P均<0.01).文迪雅组和生芪降糖颗粒高剂量组ET-1和主动脉El-1mRNA表达量较对照组均显著下降(P均<0.01).结论 ①生芪降糖颗粒有抗糖尿病作用,并呈剂量依赖性;②生芪降糖颗粒降低ET-1mRNA的表达,可保护和改善糖尿病大鼠主动脉内皮和心肌的功能.     

不同剂量益气化瘀化痰养阴中药对肝纤维化大鼠肝组织结构及PPARγ的影响

目的观察不同剂量益气化瘀化痰养阴方药对肝纤维化大鼠肝组织结构及过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)表达的影响。方法将雄性SD大鼠随机分为正常组、肝纤维化模型组、秋水仙碱组、益气化瘀化痰养阴低剂量组、中剂量组及高剂量组。除正常组外,其余各组均采用"皮下注射CCl4+低蛋白高脂饮食+酒精饮料"的造模方法制备肝纤维化大鼠模型。正常组和模型组灌服生理盐水,其余各组分别灌服秋水仙碱及不同剂量的益气化瘀化痰养阴中药煎剂。12 w后处死大鼠,通过光镜和电镜观察各组肝脏病理学变化,并采用RT-PCR及Western印迹方法检测各组大鼠肝组织PPARγ基因和蛋白表达水平。结果与正常组相比,模型组大鼠肝组织PPARγ基因和蛋白表达明显减少(P<0.05);与模型组相比,各治疗组肝组织内纤维化程度均有不同程度减轻;秋水仙碱组、益气化瘀化痰养阴中剂量及高剂量组大鼠肝组织PPARγ基因和蛋白表达明显增加(P<0.05),其中以益气化瘀化痰养阴中、高剂量组最明显;益气化瘀化痰养阴中剂量组及高剂量组间无明显差异(P>0.05)。结论中、高剂量益气化瘀化痰养阴中药可以减轻肝纤维化模型大鼠肝组织内纤维化程度,其机制可能与增加肝组织内PPARγ的表达有关。     

补肾活血颗粒对骨质疏松大鼠骨组织中OPG/RANKLmRNA及蛋白表达的影响

目的探讨补肾活血颗粒对骨质疏松(OP)大鼠骨组织中骨保护蛋白/核因子-β受体活化因子配体(OPG/RANKL)mRNA及蛋白表达的影响。方法采用卵巢摘除法建立SD大鼠OP模型。分别给予生理盐水(模型组)、50 mg/kg补肾活血颗粒(低剂量组)、100 mg/kg补肾活血颗粒(中剂量组)、200 mg/kg补肾活血颗粒(高剂量组)、30μg/kg 17β-雌二醇(雌激素组)干预治疗12 w,设立假手术组为对照。比较各组骨密度(BMD)、骨组织中OPG/RANKL mRNA及蛋白表达水平。结果与假手术组比较,模型组大鼠BMD、OPG/RANKL mRNA及蛋白表达显著减低(P0.05)。与模型组比较,低、中、高剂量组及雌激素组BMD、OPG/RANKL mRNA及蛋白表达明显提高(P0.05)。高剂量组BMD、OPG/RANKL mRNA及蛋白表达显著高于低、中剂量组及雌激素组(P0.05)。结论补肾活血颗粒可有效改善OP大鼠骨密度,调节OPG/RANKL可能是其作用机制。     

稳心颗粒对慢性心力衰竭大鼠血浆内皮素及心肌细胞结构的影响

目的观察稳心颗粒对慢性心力衰竭（CHF）大鼠血浆内皮素（ET）水平及心肌细胞结构的影响,探讨稳心颗粒治疗CHF的作用机制。方法腹腔注射阿霉素（ADR）法复制CHF大鼠模型,采用放射免疫法测定ET的含量,电镜观察心肌细胞结构。结果与正常对照组大鼠血浆ET的含量（129±26）ng/L比较,CHF模型组大鼠血浆ET的含量显著升高[（280±25）ng/L,P<0.01];各给药组与模型组比较,血浆ET水平均显著降低[稳心颗粒低剂量组（239±35）ng/L,中剂量组（219±32）ng/L,高剂量组（191±15）ng/L,地高辛组（187±17）ng/L,P<0.01]。稳心颗粒高剂量组与阳性对照组（地高辛）比较无显著性差异。稳心颗粒各给药组均不同程度改善CHF大鼠心肌细胞的结构。结论稳心颗粒能显著降低CHF血浆ET水平,明显改善CHF心肌细胞结构,是改善CHF的有效药物。     

丁基苯酞对慢性脑缺血大鼠海马Chat蛋白表达的影响

制作老龄大鼠慢性脑缺血模型,并分别应用高剂量、低剂量丁基苯酞(NBP)进行治疗.应用斑点免疫测定法检测对照组、单纯缺血组、缺血低剂量治疗组、缺血高剂量治疗组和预防组大鼠脑海马组织中胆碱乙酰基转移酶(Chat)蛋白的表达.结果单纯缺血组海马Chat蛋白表达水平最低,缺血高剂量治疗组蛋白表达明显高于缺血低剂量治疗组和预防组(P均＜0.05).认为慢性脑缺血后大鼠海马Chat蛋白表达水平下降,NBP可使Chat蛋白表达水平提高.     

林蛙卵油通过影响Bcl-2蛋白质家族抑制卵巢凋亡的机制

目的 观察Wistar大鼠卵巢中Bcl-2和Bax的表达水平,分析林蛙卵油的卵巢保护作用机制.方法 乙醇萃取法提取林蛙卵精油,初生期予雄激素制造动物模型,分为高剂量组、中剂量组、低剂量组和模型组四组,并设置正常对照组.成年后给予治疗组相应剂量林蛙卵油灌胃后处死大鼠,Tunnel检测凋亡比率,Western印迹法检测各组Bcl-2和Bax的蛋白质表达水平.结果 Tunnel染色显示模型组的凋亡指数较正常对照组升高,给予林蛙卵油灌胃后,凋亡指数降低.正常对照组与模型组之间有显著差异,中剂量组和大剂量组与模型组比较有显著差异,小剂量组与模型组比较无显著差异.Western印迹实验显示:Bcl-2在模型组的表达较正常对照组低,给予林蛙卵油后,低、中、高剂量组表达有升高趋势,与模型组比较差异显著;Bax在模型组的表达较正常对照组高,给予林蛙卵油后,低、中、高剂量组表达有降低趋势,与模型组比较差异显著.结论 林蛙卵油可以通过影响Bcl-2蛋白质家族抑制卵巢细胞的凋亡,发挥保护卵巢的作用.     

胰腺癌组织相关蛋白质分子的差异表达

目的用双向凝胶电泳的方法建立胰腺癌、癌旁组织和正常胰腺组织的蛋白质组二维图谱并分析差异蛋白质点.方法提取人正常胰腺组织、胰腺癌和癌旁组织总蛋白质,双向电泳分离蛋白,比较不同组织中蛋白质表达的差异.每份组织均重复电泳3次.结果在同一份组织的3张银染的凝胶蛋白质图谱上均可辨识1 000个左右的蛋白质点,蛋白质点在形状、位置和密度上一致,重复性好.在不同组织之间发现了22个明显差异的蛋白质点,初步确定了其等电点和分子量.正常胰腺组织有一个高表达的蛋白质点,癌和癌旁组织有21个高表达的蛋白质点.结论正常胰腺组织、胰腺癌、癌旁组织蛋白质组二维图谱存在明显的差异,部分差异蛋白质可能具有诊断应用价值.     

糖尿病肾病患者血浆动态蛋白质组学研究

目的探讨糖尿病肾病（DN）患者血浆差异蛋白表达情况,为寻找DN敏感血浆蛋白标志物提供依据。方法 4例确诊的DN患者（DN组）和4例健康人群（对照组）作为研究对象,应用荧光差异双向凝胶电泳分析两组血浆蛋白质组差异表达,以上调或下调1.5倍为截断值筛选出差异表达的蛋白质斑点进行质谱分析。结果成功构建DN患者血浆蛋白差异表达双向凝胶电泳图谱,并分析鉴定出6种差异表达蛋白;通过质谱分析和蛋白质数据库（UniProtKB/Swiss-Prot）比对鉴定出6种蛋白质,分别为补体C3、C4、凝溶胶蛋白前体、纤维蛋白原γ、载脂蛋白E和细胞骨架蛋白16。结论荧光差异双向凝胶电泳可鉴定筛选出DN患者与正常人群差异表达的血浆蛋白质,并为进一步筛选DN血浆蛋白标志物提供依据。     

苦瓜总皂苷对心力衰竭大鼠心肌凋亡的影响

目的探讨苦瓜总皂苷对心力衰竭大鼠心功能和心肌凋亡蛋白Caspase-8、Bcl-2表达的影响。方法取清洁级雄性SD大鼠60只,适应性喂养14d后按照随机数字表法分为正常组、模型组及苦瓜总皂苷低剂量、中剂量和高剂量组,每组12只。苦瓜总皂苷低剂量、中剂量和高剂量治疗组分别给予苦瓜总皂苷10mg/(kg·d)、20mg/(kg·d)、40mg/(kg·d)皮下注射,正常组和模型组分别给予0.5mL/(kg·d)生理盐水皮下注射。全程记录大鼠精神活动状态、毛色以及饮食等一般情况,治疗8周后处死大鼠,检测心功能相关指标以及炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平,苏木精-伊红染色(HE染色)检测心肌组织病理学改变;免疫组化、实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)、Western印迹检测心肌组织中Caspase-8和Bcl-2相关蛋白。结果正常组大鼠精神良好,饮食正常;模型组有明显精神萎靡,饮食量较低;苦瓜总皂苷低、中、高剂量治疗组较模型组上述症状明显减轻。与正常组比较,模型组平均心室舒张压(LVDP)明显升高(P 0.05),平均左室峰压(LVSP)、心室内压最大上升速率(+dp/dtmax)及平均等容舒张期室内压最大下降速率(-dp/dtmax)明显降低(P 0.05);与模型组比较,苦瓜总皂苷中、高剂量组LVDP明显降低(P 0.05),LVSP、+dp/dtmax和-dp/dtmax明显升高(P 0.05)。与正常组比较,模型组TNF-α、IL-6明显增加(P 0.05);与模型组比较,苦瓜总皂苷低、中、高剂量治疗组TNF-α、IL-6明显降低(P 0.05);HE染色可见正常组大鼠心肌细胞排列整齐,而模型组有明显心肌细胞排列紊乱,苦瓜总皂苷低、中、高剂量组心肌组织较模型组均有不同程度的改善。与正常组比较,模型组大鼠心肌组织Bcl-2蛋白表达明显下降(P 0.05),Caspase-8蛋白表达明显升高(P 0.05);与模型组比较,苦瓜总皂苷中、高剂量组Bcl-2蛋白表达均升高(P 0.05),Caspase-8蛋白表达则明显降低(P 0.05)。结论苦瓜总皂苷可以明显改善慢性心力衰竭大鼠心功能,降低炎性因子TNF-α、IL-6的表达,可能与其下调Caspase-8、上调Bcl-2表达有关。     

疏肝祛瘀通络降浊法对大鼠非酒精性脂肪性肝炎的保护作用

目的探讨非酒精性脂肪性肝炎大鼠内毒素性肝损伤机制及中药对其影响。方法用喂饲高脂饮食的方法建立非酒精性脂肪性肝炎大鼠模型。4周后用疏肝祛瘀通络降浊法分小、中、大剂量进行治疗,12周后处死测定血脂、ALT、内毒素(ET)、肿瘤坏死因子(TNF-α)和白细胞介素(IL-1β)的含量;免疫组化法观察肝组织CD14和核转录因子(NF-κB)的表达;RT-PCR检测脂多糖结合蛋白(LBP)和4型Toll样受体(TLR-4)mRNA的表达。同期正常饮食饲养大鼠作对照。结果第12周时,模型组大鼠腹主动脉血清内毒素水平较正常组明显升高,有显著性差异;中剂量治疗组大鼠血清ET、TNF-α、IL-1β水平明显低于模型组,差异有显著意义。模型组大鼠肝组织CD14阳性细胞数量明显增多,主要分布于肝窦内,部分呈灶型聚集;与模型组相比,中剂量治疗组大鼠肝组织CD14阳性细胞数量明显减少。模型组可见少量细胞核染色的NF-κB阳性细胞散在分布于汇管区。模型组肝组织LBPmRNA和TLR-4mRNA表达均明显上调,与正常组比较差异均有显著意义;中剂量治疗组大鼠肝组织LBPmRNA和TLR-4mRNA表达均较模型组明显下调,且有显著性差异。结论疏肝祛瘀通络降浊法对非酒精性脂肪肝有疗效,可能与其降低血清内毒素水平和下调肝组织内毒素相关受体表达继而减轻炎症性肝损害有关。     

生芪降糖颗粒对糖尿病大鼠脂肪组织TNF-αmRNA表达的影响

以高脂饲料饲养 腹腔注射链脲佐菌素制备胰岛素抵抗(IR)的2型糖尿病大鼠模型,根据灌胃药物不同分为低、中、高剂量生芪降糖颗粒组、文迪雅组、对照组(蒸馏水).正常组饲以普通饲料.采用逆转录聚合酶链反应法检测各组肾周脂肪组织中TNF-αmRNA表达.结果 与对照组比较,正常组TNF-α mRNA表达明显降低,生芪降糖颗粒中、高剂量组和文迪雅组明显升高(P均<0.05);生芪降糖颗粒低、中剂量组高于正常组(P<0.05).提示生芪降糖颗粒与文迪雅均有抗糖尿病作用,高、中剂量可改善IR,可能与降低TNF-α mRNA表达有关.     

痛泻要方对内脏高敏感大鼠结肠黏膜蛋白质表达谱的影响

背景:肠易激综合征(IBS)是一种常见的功能性肠道疾病,近年研究发现其发生可能与分子异常改变有关。蛋白质组学的研究方法已用于消化系统肿瘤疾病,但较少用于功能性胃肠病的研究。目的:应用蛋白质组学技术观察痛泻要方对内脏高敏感大鼠结肠黏膜蛋白质表达谱的影响。方法:24只雌性Sprague-Dawley大鼠随机分为空白对照组、模型对照组和治疗组。以樟脑丸特殊气味作为条件刺激、结直肠扩张结合经典的肢体束缚作为非条件刺激建立大鼠内脏高敏感模型。治疗组以痛泻要方煎剂灌胃4周。实验第45 d,处死所有大鼠,提取结肠黏膜总蛋白。应用荧光差异双向凝胶电泳技术筛选差异蛋白质,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术鉴定差异蛋白质。结果:与模型对照组相比,治疗组内脏敏感性明显降低(P<0.01)。共有61个蛋白点在模型对照组和治疗组中存在表达差异,其中23个蛋白点在治疗组中的表达上调,38个蛋白点表达下调。从5个明显差异表达的蛋白点中鉴定出3个特异蛋白质,表达上调的蛋白质为Transgelin蛋白和乙醛脱氢酶2,表达下调的蛋白质为角蛋白8。结论:痛泻要方可下调某些炎症相关蛋白的表达,这可能是其降低大鼠内脏敏感性的机制之一。     

甘西鼠尾草总酚酸提取物对嘌呤霉素氨基核苷大鼠足细胞损伤的保护作用

目的:研究甘西鼠尾草总酚酸提取物(SPE)对嘌呤霉素氨基核苷(PAN)大鼠足细胞损伤的保护作用。方法:建立PAN肾病大鼠动物模型,给予他克莫司和SPE干预治疗,分别在第5、10、15、21天留取血尿标本,同时采用肾组织病理观察大鼠肾小球组织形态学改变,透射电镜观察肾小球足细胞超微结构改变,并分别从mRNA和蛋白水平分析足细胞裂孔膜蛋白的表达水平。结果:(1)除正常组外,各组大鼠尿蛋白定量第5天时已明显升高,第10天上升至高峰,而后开始下降,第15天时仍明显高于正常。给予药物干预后,可降低大鼠的尿蛋白排泄量,且阳性对照组与SPE高剂量组降低尿蛋白的程度较为接近。(2)光镜下未见肾小球形态异常。电镜结果显示第5天时已出现肾小球足细胞足突融合,第10天时足突融合最明显,随后开始恢复,第21天基本恢复正常;SPE高剂量组和阳性对照组的足突融合程度较轻。(3)阳性对照组和SPE组大鼠的nephrin、podocin蛋白表达水平高于模型对照组。第5天时各组大鼠蛋白表达低于正常,第10天时下降更为明显,第15天蛋白表达已开始回升,至第21天时恢复至正常水平。阳性对照组和SPE高剂量组大鼠蛋白表达均明显高于其余三组。(4)大鼠nephrin、podocin的mRNA表达量在第5天时已下降,至第10天明显下降至最低水平,而后开始上升,直至第21天恢复至正常水平。阳性对照组和SPE高剂量组的表达水平明显高于其他各组(P0.05)。结论:SPE对PAN大鼠肾小球足细胞损伤有一定的保护作用,可降低PAN大鼠蛋白尿。     

疲劳应激对血管内皮功能障碍大鼠脂蛋白相关磷脂酶A2含量和4型G蛋白耦联受体表达的影响及通络干预的作用

目的方法探讨通络干预对疲劳应激致内皮功能障碍大鼠血清脂蛋白相关磷脂酶A2(lp-PLA2)水平和主动脉4型G蛋白耦联受体(GPR4)表达的影响。方法将60只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、疲劳应激组、人参组和通心络组。采用"基础饮食+负重力竭游泳"方法建立疲劳应激模型。通过游泳时间、爬杆时间评价模型建立,扫描电镜观察血管内皮形态,并检测一氧化氮(NO)、内皮素(ET)评价内皮功能;应用ELISA方法检测血清lp-PLA2水平,应用Real Time PCR和Western印迹分析检测主动脉GPR4 mRNA、蛋白表达水平。结果疲劳应激组血管内皮结构损伤,内皮分泌NO明显减少,ET明显增加(均P<0.05)。疲劳应激组血清lp-PLA2水平显著升高(P<0.01),主动脉GPR4 mRNA和蛋白表达水平明显高于正常对照组(P<0.05)。人参、通心络干预后,血清NO水平明显增加,血浆ET含量明显降低(均P<0.01);血清lp-PLA2水平明显下降(均P<0.01),主动脉GPR4表达水平显著下降(均P<0.05)。结论疲劳应激模型大鼠血管内皮出现明显损伤,血清lp-PLA2含量明显增加,主动脉GPR4 mRNA和蛋白表达水平明显升高。通络治疗能显著降低疲劳应激大鼠血清lp-PLA2水平,抑制主动脉GPR4 mRNA和蛋白表达,因此通络治疗可有效抑制ox-LDL对血管内皮的损伤。     

内毒素休克小鼠肝脏细胞质膜差异蛋白质组的二维液相色谱分析

目的:建立和优化肝脏细胞质膜蛋白质研究的方法系统,并对正常组小鼠和内毒素休克小鼠组肝脏细胞质膜蛋白质进行二维液相色谱分离,分析两者之间的差异表达谱.方法:BALB/c 小鼠20只随机分为正常组和内毒素休克小鼠组(10只,LPS刺激3 h,LPS剂量为35 mg/kg),n=10.采用差速离心结合蔗糖密度梯度离心法分离和富集两组肝脏细胞质膜蛋白,分别将两组样品按蛋白质PI进行一维的色谱聚焦分离,然后每个PT组分再按蛋白质的疏水性经二维HPLC分离,利用Proteo Vue软件将UV光吸收图谱转换成PI对疏水性的胶样图谱,再利用DeltaVue软件分析两组肝脏质膜蛋白质组的表达差异.结果:图像分析显示两组比值在≥2.0及≤0.5的差异蛋白点共有24个,与正常组比较,在内毒素休克小鼠的肝脏质膜蛋白中有16个蛋白点表达上调,8个蛋白点表达下调.结论:正常组和内毒素休克小鼠组的肝脏质膜蛋白质组有明显差异.     

补肾活血中药复方对去卵巢大鼠骨密度和骨组织神经肽Y的影响

目的探讨补肾活血中药复方对去卵巢大鼠骨密度及血浆和骨组织神经肽Y(NPY)的影响及对防治骨质疏松的作用机制。方法选择6月龄SD雌性大鼠32只,随机分为假手术组、模型组、补肾活血中药复方低剂量组和高剂量组。模型组、复方低剂量组与高剂量组均行双侧去卵巢手术,手术1 w后中药复方低、高剂量组用灌胃法1.16 g/100 g和10.44 g/100 g给服中药,模型组灌服生理盐水,12w后观察各组大鼠骨密度的改变,采用实时荧光定量(RT-PCR)检测骨组织NPY m RNA的表达美联免疫吸附(ELISA)法检测各组大鼠血浆和骨组织NPY含量,Western印迹检测骨组织NPY的表达。结果与假手术组比较,模型组骨密度明显降低(P0.01),骨组织中NPY蛋白和m RNA的表达量明显升高(P0.01),血清和骨组织中NPY的含量也明显升高(P0.01)。中药复方低剂量和高剂量组骨密度明显高于模型组(P0.01),血浆和骨组织中NPY蛋白和m RNA的表达量明显降低(P0.01或0.05),但仍高于假手术组(P0.01)。结论补肾活血中药复方能够调节血浆和骨组织的NPY,这可能是其抗骨质疏松的作用机理之一。