重组人血管内皮抑制素联合顺铂治疗肺癌的实验研究

目的：探讨重组人血管内皮抑制素（恩度）联合化疗对肺癌的作用。方法：建立肺癌裸鼠移植模型１６只,随机分为４组：空白对照组、恩度组、顺铂组、恩度联合顺铂组。治疗结束第２天处死裸鼠,测量肿瘤体积和质量,免疫组化法测微血管密度（ＭＶＤ）及瘤组织血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）的表达。结果：治疗结束后,空白对照组、恩度组、顺铂组和联合组的肿瘤体积分别为（４ ６８４.９±４９９.３）ｍｍ^３、（３ ９０３.４±３２７.４）ｍｍ^３、（２ ６８９.６±２３２.９）ｍｍ^３和（２ ００７.９±３１７.３）ｍｍ^３（Ｐ＜０.０５）。恩度组、顺铂组和联合组的肿瘤抑制率分别为１３.５％、１８.９％和３５.１％（Ｐ＜０.０５）。免疫组化结果显示,联合组肿瘤ＭＶＤ低于其他各组（Ｐ＜０.０５）;用药组ＶＥＧＦ的表达与空白对照组比较有统计学差异（Ｐ＜０.０５）。结论：肺癌裸鼠移植瘤模型中恩度与顺铂联合抗肿瘤作用较单药明显增强,能够有效地抑制肺癌的生长。     

胃肠道间质瘤中Ｍａｓｐｉｎ、ｕＰＡ、ＶＥＧＦ和ＶＥＧＦ-Ｃ的表达及其意义

目的　探讨胃肠道间质瘤（ＧＩＳＴ）组织中Ｍａｓｐｉｎ、ｕＰＡ、ＶＥＧＦ和ＶＥＧＦ-Ｃ的表达及临床意义。方法　应用免疫组织化学方法和逆转录ＰＣＲ法检测ＧＩＳＴ组织中Ｍａｓｐｉｎ、ｕＰＡ、ＶＥＧＦ及ＶＥＧＦ-Ｃ的表达情况,并分析各指标表达与ＧＩＳＴ生物学行为之间的关系以及Ｍａｓｐｉｎ与ｕＰＡ、ＶＥＧＦ、ＶＥＧＦ-Ｃ表达的相关性。结果　４２例ＧＩＳＴ组织中,Ｍａｓｐｉｎ、ｕＰＡ、ＶＥＧＦ和ＶＥＧＦ-Ｃ蛋白的表达率分别为６１.９％（２６／４２）、６４.３％（２７／４２）、５９.５％（２５／４２）和５４.８％（２３／４２）。逆转录ＰＣＲ检测显示,Ｍａｓｐｉｎ、ｕＰＡ、ＶＥＧＦ和ＶＥＧＦ-ＣｍＲＮＡ在ＧＩＳＴ组织中均有表达,且与其相应蛋白表达的趋势基本一致。随着ＧＩＳＴ侵袭危险性增加,Ｍａｓｐｉｎ表达显著降低,ｕＰＡ蛋白及ＶＥＧＦ、ＶＥＧＦ-Ｃ表达均显著增加（Ｐ＜０.０５）,而ｕＰＡｍＲＮＡ表达无显著性差异（Ｐ＞０.０５）。随着ＧＩＳＴ出现复发转移,Ｍａｓｐｉｎ表达显著降低,ＶＥＧＦ和ＶＥＧＦ-Ｃ表达显著增加（Ｐ＜０.０５）,而ｕＰＡ表达无显著性差异（Ｐ＞０.０５）。Ｍａｓｐｉｎ与ｕＰＡ、ＶＥＧＦ、ＶＥＧＦ-Ｃ表达均呈显著负相关（ｒ＝－０.４２９,Ｐ＜０.０５;ｒ＝－０.３１２,Ｐ＜０.０５;ｒ＝－０.２９２,Ｐ＜０.０５）。结论　Ｍａｓｐｉｎ表达下调或缺失促进ｕＰＡ、ＶＥＧＦ和ＶＥＧＦ-Ｃ表达上调在ＧＩＳＴ演进过程中可能扮演重要角色,４种蛋白均有可能是预测ＧＩＳＴ生物学行为及预后的重要辅助因子;Ｍａｓｐｉｎ基因有可能是ＧＩＳＴ靶向治疗新的研究靶点。     

重组人血管内皮抑素联合顺铂对Ｓ１８０肉瘤ＶＥＧＦ和ＭＭＰ-９表达的影响

目的　观察重组人血管内皮抑素（恩度）联合顺铂对Ｓ１８０肉瘤Ｃ５７ＢＬ／６鼠模型以及小鼠肿瘤组织中血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）和基质金属蛋白酶-９（ＭＭＰ-９）表达的影响。方法　建立Ｓ１８０肉瘤Ｃ５７ＢＬ／６鼠模型,成瘤后随机分为对照组、恩度组、顺铂组、顺铂＋恩度联合组,检测肿瘤组织中ＶＥＧＦ及ＭＭＰ-９的表达。结果　成瘤后对照组、恩度组、顺铂组、顺铂＋恩度联合组中的ＶＥＧＦ及ＭＰＰ-９表达Ｈ评分分别为５１.４±２.５、４８.４±５.３、４１.４±５.２、３２.３±３.９和４７.２±３.６、４６.１±６.１、３６.５±６.４、３１.３±３.２;与对照组比较,顺铂组和联合组均有显著差异（Ｐ＜０.０５）;顺铂组与联合组之间亦有显著差异（Ｐ＜０.０５）。结论　恩度联合顺铂能够显著抑制ＶＥＧＦ及ＭＭＰ-９的表达,减少肿瘤血管生成,从而减少肉瘤浸润及转移。     

热化疗对小鼠移植性Ｓ１８０肉瘤细胞凋亡、增殖及血管生成的影响

目的　探讨热疗联合化疗对小鼠Ｓ１８０肉瘤模型细胞凋亡、增殖及血管生成的影响。方法　建立荷瘤小鼠模型,随机分为对照组、化疗组、热疗组和热化疗组,化疗组予以平阳霉素０.２ｍｇ／只,热疗组予以（４３±０.２）℃水浴１ｈ,热化疗组同时予以化疗＋热疗,每４天１次,重复３次。治疗结束后,取瘤体,测瘤重,计算抑瘤率,流式细胞仪测定肿瘤细胞周期、凋亡率及增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）蛋白含量,ＲＴ-ＰＣＲ检测血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）ｍＲＮＡ、ＰＣＮＡｍＲＮＡ,免疫组化法检测ＶＥＧＦ蛋白,计数微血管密度（ＭＶＤ）值。结果　Ｓ期细胞对热疗最敏感。化疗组、热疗组和热化疗组均可抑制小鼠Ｓ１８０肉瘤的生长,细胞凋亡率均较对照组高（Ｐ＜０.０５）,ＰＣＮＡ、ＶＥＧＦ蛋白表达和ＭＶＤ均较对照组降低（Ｐ＜０.０５）,其中热化疗组变化最显著（Ｐ＜０.０５）。ＲＴ-ＰＣＲ检测ＶＥＧＦｍＲＮＡ、ＰＣＮＡｍＲＮＡ亦得到上述同样结果。直线相关性分析示,ＶＥＧＦ蛋白表达与ＭＶＤ呈正相关（ｒ＝０.９１５,Ｐ＜０.０１）。结论　热疗可以诱导Ｓ１８０细胞凋亡,抑制ＰＣＮＡ、ＶＥＧＦ表达,使ＭＶＤ下降。热疗与化疗联合具有协同作用,显著提高对Ｓ１８０肉瘤的疗效。     

肝细胞癌中Ｓｕｒｖｉｖｉｎ、ＥＧＦＲ和ＶＥＧＦ的表达及临床意义

目的　研究Ｓｕｒｖｉｖｉｎ、ＥＧＦＲ和ＶＥＧＦ在肝细胞癌中的表达情况,为肝癌预后判断和靶向治疗提供理论依据。方法　应用免疫组织化学ＰＶ６０００法检测８１例人肝细胞癌组织、癌旁组织Ｓｕｒｖｉｖｉｎ、ＥＧＦＲ和ＶＥＧＦ的表达并分析其与相关临床病理特征的关系。结果　肝细胞癌组织与癌旁组织Ｓｕｒｖｉｖｉｎ的阳性率无显著差别;肝细胞癌组织ＥＧＦＲ、ＶＥＧＦ的阳性率分别为４９.４％、６３.０％,显著高于癌旁组织的阳性率２１.０％、４４.４％（Ｐ＜０.０５）。Ｓｕｒｖｉｖｉｎ的表达与肿瘤的ＴＮＭ分期和肿瘤直径有关（Ｐ＜０.０５）;ＥＧＦＲ的表达与病理分化和术后复发转移有关（Ｐ＜０.０５）;ＶＥＧＦ的表达与ＴＮＭ分期、术前局部转移及术后复发转移有关（Ｐ＜０.０５）。ＥＧＦＲ与ＶＥＧＦ表达呈正相关（ｒ＝０.３０７,Ｐ＝０.００７）。ＴＮＭ分期、Ｓｕｒｖｉｖｉｎ、ＥＧＦＲ是肝细胞癌的独立预后因子（Ｐ＜０.０５）。结论　肝细胞癌组织Ｓｕｒｖｉｖｉｎ、ＥＧＦＲ和ＶＥＧＦ表达水平较高,其中Ｓｕｒｖｉｖｉｎ、ＥＧＦＲ可以作为肝细胞癌的预后因子。ＥＧＦＲ与ＶＥＧＦ表达正相关,对研发多靶点药物或联合使用多种靶向药物有一定指导意义。     

Ｓｕｒｖｉｖｉｎ在喉鳞癌中的表达及其与肿瘤细胞增殖和凋亡的关系*

目的　分析Ｓｕｒｖｉｖｉｎ在喉鳞癌中的表达及其与肿瘤细胞增殖、凋亡的关系,并探讨其与喉鳞癌临床病理特征之间的关系。方法　应用免疫组化染色技术检测Ｓｕｒｖｉｖｉｎ和Ｋｉ-６７在８６例喉鳞癌组织及３２例正常喉黏膜上皮组织中的表达;ＴＵＮＥＬ法检测喉鳞癌细胞的凋亡情况。结果　Ｓｕｒｖｉｖｉｎ在喉鳞癌组织中阳性表达率为６０.５％,高于正常喉黏膜上皮组织的１２.５％（Ｐ＜０.０５）,Ｓｕｒｖｉｖｉｎ阳性表达率与肿瘤临床分期、病理分级、淋巴结转移有关（Ｐ＜０.０５）;喉鳞癌Ｓｕｒｖｉｖｉｎ阳性组中凋亡指数（ＡＩ）低于阴性组（Ｐ＜０.０５）,增殖指数（ＰＩ）高于阴性组（Ｐ＜０.０５）,且Ｓｕｒｖｉｖｉｎ表达与ＡＩ呈负相关（ｒ＝－０.８３１,Ｐ＜０.０５）,与ＰＩ呈正相关（ｒ＝０.８８３,Ｐ＜０.０５）。结论　Ｓｕｒｖｉｖｉｎ在喉鳞癌中高表达,可能与喉鳞癌细胞的增殖和凋亡均有一定的关联。     

蜂胶对大鼠急性放射性肠损伤作用的实验研究

目的　研究蜂胶对大鼠照射引起的肠黏膜损伤的作用。方法　３６只ＳＤ雄性大鼠随机分为正常组（ｎ＝１２）、照射组（ｎ＝１２）和蜂胶组（ｎ＝１２）,除正常组外,其余两组于给药后第７天用６ＭＶ高能Ｘ线全腹照射９Ｇｙ,照射后第３天处死大鼠。观察小肠黏膜病理形态变化,测定组织ＳＯＤ、ＭＤＡ、ＮＯ以及血浆ＤＡＯ含量,原位末端标记法（ＴＵＮＥＬ）观察肠黏膜细胞凋亡,细菌培养观察肠道细菌移位感染情况。结果　放射损伤模型制备成功,单纯照射组大鼠肠黏膜病理形态和结构较正常组明显损伤,小肠组织ＮＯ、ＭＤＡ含量与血浆ＤＡＯ含量均明显升高（Ｐ＜０.０５）,ＳＯＤ活性明显下降（Ｐ＜０.０５）,细胞凋亡指数和细菌感染率明显升高（Ｐ＜０.０５）。与单纯照射组相比,蜂胶处理后明显改善大鼠肠黏膜病理损伤,抑制小肠组织ＮＯ、ＭＤＡ含量和血浆ＤＡＯ含量升高（Ｐ＜０.０５）,提高组织ＳＯＤ活性（Ｐ＜０.０５）,并使细胞凋亡指数和细菌感染率明显下降（Ｐ＜０.０５）。结论　蜂胶在减轻大鼠放射性肠黏膜损伤和维持黏膜屏障功能方面有一定作用。     

促血管生成素在大肠癌组织的表达及其临床病理意义

目的　观察促血管生成素（Ａｎｇ）-１、Ａｎｇ-２及其受体Ｔｉｅ-２在大肠癌中的表达,探讨其与大肠癌血管生成的关系及临床病理意义。方法　采用免疫组化ＰＶ-９０００二步法观察５０例大肠癌和１０例正常大肠黏膜组织中Ａｎｇ-１、Ａｎｇ-２、Ｔｉｅ-２的表达,采用ＣＤ１０５标记检测微血管密度（ＭＶＤ）。结果　大肠癌组织Ａｎｇ-１的表达低于正常大肠黏膜,Ａｎｇ-２、Ｔｉｅ-２的表达高于正常大肠黏膜,差异均有统计学意义（Ｐ＜０.０５）;Ａｎｇ-１、Ａｎｇ-２的表达在不同分化程度间差异有统计学意义（Ｐ＜０.０１）;Ａｎｇ-１在淋巴结转移组的表达低于无转移组（Ｐ＜０.０５）;Ａｎｇ-２在淋巴结转移组高于无转移组（Ｐ＜０.０５）,在Ｄｕｋｅｓ'Ｃ、Ｄ期明显高于Ｄｕｋｅｓ'Ａ、Ｂ期（Ｐ＜０.０１）;Ｔｉｅ-２在淋巴结转移组的表达高于无转移组（Ｐ＜０.０５）;Ａｎｇ-２、Ｔｉｅ-２的表达与ＭＶＤ均呈正相关（ｒ＝０.３４５,Ｐ＜０.０５;ｒ＝０.２９９,Ｐ＜０.０５）。结论　促血管生成素与大肠癌的病理分化程度、Ｄｕｋｅｓ分期、淋巴结转移有关,并且在大肠癌血管生成过程中发挥重要作用。     

胃癌组织中ＭＣＰ-１、ＭＭＰ-９的表达与间质中ＴＡＭｓ浸润的关系

目的　检测胃癌组织中单核细胞趋化蛋白-１（ＭＣＰ-１）和基质金属蛋白酶-９（ＭＭＰ-９）的表达,分析它们与肿瘤相关巨噬细胞（ＴＡＭｓ）浸润的关系及对胃癌生物学行为的影响。方法　采用免疫组化ＳＰ法检测５０例胃癌组织中ＭＣＰ-１、ＭＭＰ-９的表达及ＴＡＭｓ计数,以２０例胃炎作对照组。结果　（１）ＭＣＰ-１在胃癌组织中的阳性率为（５３.２７±３０.９８）％,高于对照组的（１６.２１±７.６４）％,两者差异有统计学意义（Ｐ＜０.０１）;ＭＣＰ-１与胃癌的淋巴结转移有关（Ｐ＜０.０５）,与分化及分型均无关。（２）胃癌中ＭＭＰ-９表达的阳性率为（３７.６４±２４.８８）％,高于对照组的（１６.９６±１２.８８）％,两者差异有统计学意义（Ｐ＜０.０５）;ＭＭＰ-９与胃癌的分化、分型和转移均相关（Ｐ＜０.０５）。（３）ＴＡＭｓ在胃癌组织中的计数为１６.９４±５.９８,高于对照组的６.７２±３.４１,两者差异有统计学意义（Ｐ＜０.０１）;在胃癌组织中ＴＡＭｓ计数与胃癌的组织学分型及分化无关（Ｐ＞０.０５）,但有淋巴结转移组的ＴＡＭｓ计数明显高于无淋巴结转移组（Ｐ＜０.０５）。结论　ＭＣＰ-１与ＴＡＭｓ之间可能具有协同作用,共同促进肿瘤的生长和转移;ＴＡＭｓ有可能通过上调肿瘤细胞ＭＭＰ-９表达,促进肿瘤的侵袭和转移。     

动态增强磁共振评价重组人血管内皮抑素抑制人肺癌裸鼠皮下移植瘤的血管生成

目的　探讨动态增强磁共振（ＤＣＥ-ＭＲＩ）评价重组人血管内皮抑素（恩度）抑制人ＮＣＩ-Ｈ４６０肺癌裸鼠皮下移植瘤血管生成的可行性。方法　１０只人ＮＣＩ-Ｈ４６０肺癌荷瘤裸鼠,随机分为对照组和实验组,每组各５只。肿瘤接种第１０天开始给药,实验组每日腹腔注射恩度０.２ｍｌ,对照组每日腹腔注射生理盐水０.２ｍｌ。连续给药７天后行ＤＣＥ-ＭＲＩ扫描,扫描结束后剖取肿瘤组织行ＣＤ３４免疫组化染色。结果　实验组肿瘤体积为（０.２４９±０.１３８）ｃｍ^３,小于对照组的（０.４４８±０.０９６）ｃｍ^３,差异有统计学意义（Ｐ＝０.０３２）。实验组Ｋｔｒａｎｓ、Ｋｅｐ、Ｖｅ及ｉＡＵＣ均值分别为（０.０５２±０.０１５）／ｍｉｎ、（０.３３４±０.１１１）／ｍｉｎ、０.２８０±０.１９１和１１.９１２±７.７３８,均小于对照组（０.１４９±０.０２６）／ｍｉｎ、（０.４７８±０.２９４）／ｍｉｎ、０.５５８±０.０５２和３６.４６３±１２.５３４,其中Ｋｔｒａｎｓ、Ｖｅ和ｉＡＵＣ两组差异有统计学意义（Ｐ＜００５）。实验组微血管密度（ＭＶＤ）计数为（１１.３６±４.５７）条／高倍视野,明显低于对照组的（２０.４４±３.４６）条／高倍视野（Ｐ＜０.０５）。结论　抗肿瘤血管生成药物恩度对裸鼠肺癌皮下移植瘤具有良好的抑瘤作用,ＤＣＥ-ＭＲＩ是评价肿瘤血管生成及抗血管生成药物疗效的一种有效手段。     

重组人血管内皮抑素与紫杉醇联合诱导人食管癌细胞Eca-109凋亡的实验研究

目的 探讨重组人血管内皮抑素（恩度）与紫杉醇联合作用对人食管癌细胞Eca-109增殖和凋亡的影响。方法 MTT法检测恩度与紫杉醇联合用药48h后对Eca-109细胞增殖的抑制作用;倒置显微镜下观察恩度、紫杉醇单药与联合作用于人食管癌Eca-109细胞48h后细胞形态学的改变;Annexin V/PI双染流式细胞术检测恩度、紫杉醇不同用药组作用48h后的细胞凋亡率;RT-PCR法检测凋亡相关基因Bcl-2、Bax、p21、p53 mRNA的表达情况。结果恩度、紫杉醇作用于Eca-109细胞48h后的半数抑制浓度（IC₅₀）分别为276.6627μg/ml和3.8789μg/ml。恩度单药组、紫杉醇单药组、恩度+紫杉醇组、恩度→紫杉醇组、紫杉醇→恩度组作用Eca-109细胞48h后的抑制率分别为（33.62±2.30）%、（49.14±1.45）％、（56.29±0.71）％、（41.88±1.23）％和（51.48±0.98）％;与阴性对照组比较,恩度、紫杉醇各加药组对Eca-109细胞均有明显的抑制作用（P＜0.01）;恩度+紫杉醇组的抑制率高于其他各组（P＜0.05）。光镜下恩度、紫杉醇作用48h后Eca-109细胞具有典型的凋亡形态学改变,恩度单药组、紫杉醇单药组、恩度+紫杉醇组、恩度→紫杉醇组、紫杉醇→恩度组的总凋亡率分别为（8.78±0.19）％、（13.82±0.15）％、（18.88±0.29）％、（11.37±0.24）％和（14.88±0.34）％;恩度、紫杉醇各加药组的总凋亡率均高于阴性对照组（P＜0.05）;恩度+紫杉醇组的总凋亡率明显高于其他各组（P＜0.01）。与阴性对照组比较,恩度单药组、紫杉醇单药组、两药序贯组的Bcl-2 mRNA表达均明显降低;恩度与紫杉醇联合用药组的Bax mRNA表达均降低;各用药组的p21 mRNA表达均降低;恩度与紫杉醇序贯用药组的p53表达降低。结论 恩度与紫杉醇联合可协同诱导人食管癌细胞的凋亡,其作用机制可能与下调凋亡抑制基因的表达有关。     

恩度对横纹肌肉瘤移植瘤放疗增敏作用的实验研究

目的 观察瘤周局部注射重组人血管内皮抑素（恩度）联合放疗对横纹肌肉瘤裸鼠移植瘤的抑制作用,并探讨其增强放疗疗效的可能机制。方法 建立A673裸鼠移植瘤模型,并将实验裸鼠随机分为4组：对照组、恩度组、放疗组、恩度联合放疗组。观察、测量不同处理组移植瘤的生长情况,治疗结束后取各组瘤组织,应用免疫组化法检测各组血管内皮生长因子（VEGF）的表达情况,计数各组微血管密度（MVD）。 结果 恩度组、放疗组、恩度联合放疗组的抑瘤率分别为13.16％、23.82％和34.04％。与对照组比较,恩度组或放疗组具有抑制移植瘤生长的趋势,但差异无统计学意义（P＞0.05）;与对照组比较,恩度联合放疗组显著抑制了移植瘤的生长（P＜0.05）。对照组、恩度组、放疗组、恩度联合放疗组的MVD值分别为21.16±6.53、13.02±1.99、12.21±1.58、7.84±0.91。各治疗组与对照组比较均可降低MVD（P＜0.05）,恩度联合放疗组的MVD降低更为显著（P＜0.05）。对照组、恩度组、放疗组、恩度联合放疗组VEGF表达水平分别为2.01±0.16、1.46±0.46、3.37±0.74、2.41±0.21,放疗组的VEGF表达水平较对照组、恩度组显著升高（P＜0.05）,恩度联合放疗组的VEGF水平较放疗组明显降低（P＜0.05）。结论 恩度可能通过下调放疗诱导的VEGF水平增加、降低MVD,实现与放疗联合协同抑制横纹肌肉瘤裸鼠移植瘤的生长。     

重组人血管内皮抑素对血管新生的影响研究

目的 探讨重组人血管内皮抑素（Endostar,恩度）对血管内皮细胞趋化、迁移、粘附、增殖及小管形成等与血管新生相关生物学行为的影响。方法 以原代培养的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）为细胞模型,通过Boyden小室荧光定量分析、划痕试验、HUVEC荧光定量粘附分析、CFSE染色流式细胞术、CCK-8定量检测、小管形成试验和Matrigel栓试验研究恩度对HUVEC与血管新生相关的生物学行为的影响。结果 恩度在5～50 000ng／ml范围内可抑制血管内皮生长因子诱导HUVEC的迁移运动,且浓度为50ng／ml和500ng／ml时效果最明显;恩度在5～50 000ng／ml间可呈剂量依赖的方式抑制HUVEC向损伤部位的迁移。与0ng／ml相比,50、500和5000ng／ml 恩度处理的HUVEC的粘附率、增殖率及HUVEC形成网状小管结构的数量、面积和长度均降低,差异均有统计学意义（P＜0.05）; Matrigel栓实验结果显示,恩度在50～5000ng／ml间对SCID小鼠体内血管新生有明显的抑制作用。结论 恩度在细胞水平能抑制HUVEC与血管新生相关的生物学行为,包括HUVEC的趋化、迁移、粘附、增殖和小管形成;在动物水平能抑制SCID小鼠体内的血管新生,据此推断恩度能抑制血管新生。     

吉非替尼联合紫杉醇对食管癌细胞体内外生长抑制实验研究

目的：探讨吉非替尼联合紫杉醇对人食管癌细胞株Eta-109在体内外生长的影响及其可能机制。方法：按两因素析因设计试验,并应用MTT法观察单用吉非替尼、紫杉醇及联合应用对Eca-109细胞增殖的抑制作用,流式细胞术检测细胞周期和凋亡。按单因素影响设计,建立裸鼠人食管癌皮下移植瘤模型,并分为4组各10只,分别为对照组、紫杉醇组、吉非替尼组及吉非替尼＋紫杉醇联合组。经过不同处理4周后,切除瘤灶,称瘤质量,计算抑瘤率。结果：MTT法结果显示,药物干预72h后,各用药组与对照组比较,吸光度A值均减小,吉非替尼作用72h的半数抑制浓度为（1．72±0．27）μmol／L,紫杉醇的半数抑制浓度为（5．27±0．88）μmol／L。流式细胞术检测结果显示,4组G0／G1、S和G2／M期细胞比较差异均有统计学意义,P〈0．05;对照组Eca-109细胞的凋亡率为（9．69±1．42）％,紫杉醇组为（12．41±2．75）％,吉非替尼组为（22．0±4．26）％,吉非替尼＋紫杉醇联合组为（33．1±3．78）％,差异有统计学意义,P〈0．001。对照组肿瘤体积为（1．56±0．16）cm3,紫杉醇组为（0．81±0．15）cm3,吉非替尼组为（1．35±0．08）cm3,紫杉醇＋吉非替尼联合组为（O．54±0．11）cm3,差异有统计学意义,P＜0．05。结论：吉非替尼与紫杉醇合用对体内外食管癌Eta-109细胞具有显著的抑制作用,且强于药物单一作用。     

人canstatin基因治疗人食管癌裸鼠移植瘤的实验研究

背景与目的：Canstatin是一种新内源性血管生成抑制剂,以往的研究显示canstatin能有效的抑制肿瘤的生长,作用甚至强于endostatin。本研究将探讨人canstatin基因对人食管鳞状细胞癌移植瘤模型的抑制作用。方法：应用人食管癌细胞株KYSE150建立移植瘤模型。将裸鼠随机分成3组：腺病毒携带的canstatin基因组（Ad—GFP—canstatin）、腺病毒携带的绿色荧光蛋白组（Ad—GFP）和磷酸盐缓冲液组（PBS）。治疗期间测量皮下移植瘤的长径和短径;30d后处死裸鼠,取下肿瘤行常规病理切片,观察药物的毒性反应;检测肿瘤组织中caspase-3、内皮细胞生长因子受体1（fetal liver kinase-1,Flk-1）和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）的表达和微血管密度（microvessel density,MVD）。结果：第二次注射病毒后3d,canstatin基因治疗组肿瘤体积显著小于其余两组（P〈0．05）,治疗第6天抑瘤率达到61％;HE染色显示：各组肿瘤组织中都有坏死．尤其在canstatin基因治疗组坏死更加明显;canstatin基因治疗组caspase-3表达高于空载体组和对照组（P〈0．05）;Flk-1的表达低于空载体组和对照组（P〈0．05）：VEGF的表达3组相比差异无统计学意义（P〉0．05）：canstatin基因治疗组MVD低于空载体组和对照组（P〈0．05）。结论：人canstatin基因对人食管癌移植瘤的生长具有抑制作用,作用机制可能是降低Flk-1的表达进而抑制肿瘤的血管生成,抑制肿瘤的生长。     

瘤内局部注射重组人血管内皮抑制素对小鼠Lewis肺癌抑瘤作用的研究

目的探讨瘤内直接注射重组人血管内皮抑制素（恩度）联合腹腔注射顺铂对Lewis肺癌的抑制效果。方法成功建立小鼠Lewis肺癌移植瘤模型。按体质量将小鼠随机分为生理盐水组、顺铂组、瘤内注射恩度组、顺铂联合腹腔注射恩度组、顺铂联合瘤内注射恩度组5组。治疗后处死小鼠,计算肿瘤体积抑瘤率,用免疫组织化学法测定各组小鼠肿瘤组织血管内皮生长因子（VEGF）的表达水平及微血管密度（microvessel density,MVD）。结果顺铂组、瘤内注射恩度组、顺铂联合腹腔注射恩度组、顺铂联合瘤内注射恩度组的抑瘤率分别为61.8%、24.9%、70.3%、74.3%。免疫组织化学结果显示,顺铂联合瘤内注射恩度组的VEGF表达及MVD计数在各实验组中均最低,与顺铂联合腹腔注射恩度组比较两者差异均有统计学意义（均P〈0.05）。结论经皮穿刺瘤内注射恩度联合顺铂有协同抗肿瘤作用,能有效抑制肺癌的生长及转移,并且相同剂量的恩度,肿瘤内局部注射效果优于腹腔注射。     

活体观察贝伐单抗对人骨肉瘤裸鼠移植瘤模型的作用

目的 探讨贝伐单抗（Avastin）对人骨肉瘤143-B裸鼠移植瘤模型生长和血管生成的影响。方法 将成功建立的红色荧光蛋白标记的人骨肉瘤143-B裸鼠原位种植模型随机分为3组：对照组（生理盐水）、低剂量贝伐单抗组（Avastin-L,2.0mg/kg）和高剂量贝伐单抗组（Avastin-H,5.0mg/kg）,每组7只。贝伐单抗每次腹腔注射0.2ml,1周2次,持续3周;对照组给予等体积生理盐水。每隔3天记录各组体质量,每隔7天用荧光影像系统测量原位肿瘤大小并计算抑瘤率;采用免疫组化En Vision法检测各组肿瘤组织中的CD34表达并计算微血管密度（MVD）;酶联免疫吸附法检测各组血浆和肿瘤组织的血管内皮生长因子（VEGF）的水平。结果 3组实验裸鼠体质量及肺部转移率的差异无统计学意义（P＞0.05）;与对照组相比,Avastin-L组和Avastin-H组的肿瘤体积减小,MVD、血浆及肿瘤组织的VEGF水平降低,差异均有统计学意义（P＜0.05）;Avastin-H组对上述指标的改善程度优于Avastin-L组（P＜0.05）。结论 Avastin对人骨肉瘤143-B肿瘤生长有抑制作用,同时可降低血管生成及VEGF水平,但对肺部转移无明显抑制作用。     

ＩＧＦ-Ⅱ和ＶＥＧＦ在食管鳞癌中的表达及相关性研究

目的：探讨胰岛素样生长因子Ⅱ（ｉｎｓｕｌｉｎ ｌｉｋｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ Ⅱ,ＩＧＦ Ⅱ）和血管内皮生长因子（ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅ ｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＶＥＧＦ）的基因产物在人食管鳞癌组织中的表达及其相关性。方法：应用原位杂交和免疫组织化学法检测６３例人食管鳞癌组织和２２例癌旁正常食管黏膜标本中ＩＧＦ Ⅱ ｍＲＮＡ、ＶＥＧＦ和微血管密度（ｍｉｃｒｏｖｅｓｓｅｌｄｅｎｓｉｔｙ,ＭＶＤ）的表达,对ＣＤ３４阳性组织进行ＭＶＤ计数,对ＩＧＦ Ⅱ ｍＲＮＡ和ＶＥＧＦ的表达采用半定量计数法判定,并结合临床资料进行统计学分析。结果：ＩＧＦ Ⅱ ｍＲＮＡ、ＶＥＧＦ在食管鳞癌组织中的阳性率分别为７６.１９％和６８.２６％,而在癌旁正常组织中的阳性率分别为２２７３％和１８１８％,癌组织和癌旁组织比较差异有显著性（Ｐ＜０.０５）。癌组织ＭＶＤ值为３０.２５３０±５.４５１４,癌旁组织ＭＶＤ值为２０.１１５０±１.６８６０,两者差异有显著性（Ｐ＜０.０５）。ＩＧＦ-Ⅱ ｍＲＮＡ、ＶＥＧＦ和ＭＶＤ表达都与细胞分化程度和淋巴结转移有关（Ｐ＜０.０５）,且ＶＥＧＦ和ＭＶＤ还与肿瘤大小有关（Ｐ＜０.０５）,而与性别、年龄无关（Ｐ＞０.０５）。ＩＧＦ-Ⅱ ｍＲＮＡ和ＶＥＧＦ共阳性表达组ＭＶＤ值为３２.３１５１±５.１９９５,高于ＩＧＦ-Ⅱ ｍＲＮＡ和ＶＥＧＦ共阴性表达组ＭＶＤ值（２２.５０００±１.４７６０）,差异非常显著（Ｐ＜０.０１）,且ＩＧＦ-Ⅱ ｍＲＮＡ在食管鳞癌组织中的表达与ＶＥＧＦ呈正相关（Ｐ＜０.０５）,随着ＩＧＦ-Ⅱ ｍＲＮＡ强度的增加,ＶＥＧＦ表达增强。结论：食管鳞癌组织中ＩＧＦ-Ⅱ基因表达显著增加,并可能诱导ＶＥＧＦ的过表达,且与食管鳞癌的侵袭性生物学行为密切相关。     

肿瘤抑素抑制肝癌移植瘤生长的实验研究

目的 观察肿瘤抑素慢病毒载体对裸鼠肝癌移植瘤生长的抑制作用,探讨其在肝癌基因治疗中的应用前景。方法 建立人肝癌细胞株SMCC-7721裸鼠皮下移植瘤模型,当肿瘤直径达到0.3～0.5cm时分别在瘤周及瘤体内多点注射100μl磷酸盐缓冲液（PBS组）、5×109 TU慢病毒绿色荧光蛋白（Lenti-GFP组）和5×109 TU 肿瘤抑素重组慢病毒（Lenti-Tum组）。观察3组的肿瘤体积变化,采用RT-PCR和Western blotting法分别检测3组肿瘤组织中肿瘤抑素的mRNA和蛋白水平,并采用Kaplan-Meier法进行生存分析。结果 注射21天后,Lenti-Tum组的肿瘤体积为（702.1±143.7）mm3,小于PBS组的（1622.2±253.8）mm3和Lenti-GFP组的（1538.5±284.9）mm3（P＜0.05）;Lenti-Tum组的抑瘤率为56.7％,显著高于Lenti-GFP组的5.2％（P＜0.05）;Lenti-Tum组中肿瘤抑素的mRNA和蛋白水平均高于其他两组。Lenti-Tum组小鼠的中位生存时间为100天,明显高于PBS组的58天和Lenti-GFP组的59天（P＜0.05）。结论 肿瘤抑素经慢病毒转染能够明显抑制肝癌移植瘤的生长,延长荷瘤裸鼠的生存时间。