神经营养因子对大鼠学习记忆及海马一氧化氮合酶阳性神经元数目的影响

背景：神经营养因子在神经系统发育和正常生理功能维持及神经损伤中起着重要的作用。对神经营养因子的研究是目前神经科学领域的热点和前沿课题之一。目的：研究脑室内注射脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor，BDNF)抗体阻断内源性BDNF对大鼠海马一氧化氮合酶(nitric oxide synthase，NOS)阳性神经元数目的影响。设计：随机对照的实验研究。地点和对象：实验地点在中山大学基础医学院脑研究室。实验对象为健康雄性SD大鼠13只。干预：大鼠脑室内注射BDNF抗体1周后，采用Morris水迷宫进行行为检测。主要观察指标：观察大鼠定位航行试验和空间探索试验状况，并用NADPH-黄递酶组化染色方法观察海马NOS阳性神经元数目的变化。结果：定位航行试验：实验组大鼠平均逃避潜伏期为(33．46&;#177;2．64)s，对照组为(17．71&;#177;1．86)s，两者差异具有非常显著性意义(t=4．8733。P&;lt;0．01)；空间探索试验：实验组大鼠在平台象限游泳距离百分比为(28．89&;#177;6．31)％，对照组为(41．99&;#177;7．46)％，实验组明显低于对照组(t=3．3907，P&;lt;0．01)；与对照组相比，实验组大鼠空间学习和记忆能力明显下降。实验组大鼠海马CA1区NOS阳性神经元数目(38．37&;#177;5．23)明显少于对照组(49．53&;#177;5．74)(t=8．200，P&;lt;0．01)：实验组DG区NOS阳性神经元数目(48．77&;#177;5．51)明显少于对照组(60．40&;#177;7．39)(t=7．091．P&;lt;0．01)。结论：脑室内注射BDNF抗体可导致大鼠空间学习记忆能力下降，以及海马NOS阳性神经元数目减少，表明BDNF对学习和记忆的影响可能与海马NOS阳性神经元数目的变化有关。     

足底电击应激对大鼠空间参考记忆维持及海马神经元性一氧化氮合酶表达的影响

目的：观察足底电击应激对大鼠空间参考记忆维持及海马神经元性一氧化氮合酶表达变化的影响。方法：实验于2004-03／2005-03在兰州大学基础医学院解剖教研室完成。健康雄性Wistar大鼠20只，所有大鼠均进行4天Morris水迷宫训练，建立空间记忆模型后随机分为足底电击应激组和鼠笼对照组，每组10只。足底电击应激组每天在8．00-14．00给以足底电击，30V，每30min一次，每次2s，共14d。鼠笼对照组用硬尼龙丝触摸足底，12h内每30min一次，每次2s。共14d。第15天两组大鼠重新进行Morris水迷宫检测，每天训练1次。共训练4d，观察并记录各组大鼠潜伏期、游泳距离、游泳速度、记忆得分。水迷宫实验结束后立即取脑、固定、行冰冻切片（片厚250μm），采用SABC法神经元性一氧化氮合酶免疫组化染色，光镜下进行观察分析、摄像，并记录各组神经元性一氧化氮合酶阳性细胞数。结果：各组大鼠均进入结果分析。①第1次Morris水迷宫实验各指标测试结果：训练至第4天所有大鼠的空间记忆已经形成，4天中游泳速度没有明显的变化。随着训练次数的增加，大鼠空间学习记忆能力逐渐增强。②电击应激后各组大鼠Morris水迷宫实验各指标测试结果：与鼠笼对照组相比，足底电击应激组大鼠游泳距离长、记忆得分低、而游泳速度快，两组比较差异有显著性妒〈0．05）。③各组大鼠海马神经元性一氧化氮合酶免疫组化染色结果：足底电击应激组大鼠海马中神经元性一氧化氮合酶免疫反应阳性细胞在CA1、CA2、CA3、CA4及齿状回稀疏，数目较相应鼠笼对照组明显减少（P〈0．05）。结论：电击应激可造成大鼠空间参考记忆获得和维持能力的损伤，减少大鼠海马各亚区及齿状回神经元性一氧化氮合酶阳性细胞数。     

捕食应激对大鼠海马一氧化氮及神经型一氧化氮合酶的影响

目的 探讨一氧化氮(NO)在创伤后应激障碍(PTSD)样行为异常大鼠的变化规律，以进一步揭示PTSD的神经生物学机制。方法 将144只Wistar大鼠随机分组为捕食应激组(n=72)及正常对照组(n=72)，在大鼠捕食应激PTSD动物模型基础上，动态检测大鼠海马、额叶皮层组织匀浆NO、一氧化氮合酶(NOS)含量及神经元型NOS(nNOS)表达。结果 应激大鼠海马NO含量于捕食应激后即刻明显高于对照组[(2．8&;#177;0．8)μmol／g，F=23．112，P=0．000]，12h达高峰(3．9&;#177;1．1)μmol／g，与对照组比较，F=56．616，P=0．000；与同组其他时相比较．F=14．917，P&;lt;0．05，24h时仍明显增多[(2．6&;#177;0．7)μmol／g，F=23．094，P=0．000]；海马nNOS表达亦同步增高(应激后即刻，12及24h，F=14．228，21．772，18．500，P&;lt;0．01)，而海马总NOS活性仅在应激后12h内增高[应激后即刻及12h NOS分别为(9．8&;#177;2．5)mmol／(s&;#183;kg)，F=32．812，P=0．000及(10．2&;#177;2．7)mmol／(s&;#183;kg)，F=31．395，P=0．000]。结论 严重心理／生理应激所致海马nNOS持续性高表达与NO释放明显增多．在实验大鼠持续性PTSD样行为异常中可能有重要作用。     

捕食应激对大鼠海马一氧化氮及神经型一氧化氮合酶的影响

目的探讨一氧化氮(NO)在创伤后应激障碍(PTSD)样行为异常大鼠的变化规律,以进一步揭示PTSD的神经生物学机制。方法将144只Wistar大鼠随机分组为捕食应激组(n=72)及正常对照组(n=72),在大鼠捕食应激PTSD动物模型基础上,动态检测大鼠海马、额叶皮层组织匀浆NO、一氧化氮合酶(NOS)含量及神经元型NOS(nNOS)表达。结果应激大鼠海马NO含量于捕食应激后即刻明显高于对照组犤(2.8±0.8)μmol/g,F=23.112,P=0.000犦,12h达高峰(3.9±1.1)μmol/g,与对照组比较,F=56.616,P=0.000;与同组其他时相比较,F=14.917,P<0.05,24h时仍明显增多犤(2.6±0.7)μmol/g,F=23.094,P=0.000犦;海马nNOS表达亦同步增高(应激后即刻,12及24h,F=14.228,21.772,18.500,P<0.01),而海马总NOS活性仅在应激后12h内增高犤应激后即刻及12hNOS分别为(9.8±2.5)mmol/(s·kg),F=32.812,P=0.000及(10.2±2.7)mmol/(s·kg),F=31.395,P=0.000犦。结论严重心理/生理应激所致海马nNOS持续性高表达与NO释放明显增多,在实验大鼠持续性PTSD样行为异常中可能有重要作用。     

足底电击应激对大鼠空间参考记忆维持及海马神经元性一氧化氮合酶表达的影响

目的:观察足底电击应激对大鼠空间参考记忆维持及海马神经元性一氧化氮合酶表达变化的影响。方法:实验于2004-03/2005-03在兰州大学基础医学院解剖教研室完成。健康雄性Wistar大鼠20只,所有大鼠均进行4天Morris水迷宫训练,建立空间记忆模型后随机分为足底电击应激组和鼠笼对照组,每组10只。足底电击应激组每天在8:00～14:00给以足底电击,30V,每30min一次,每次2s,共14d。鼠笼对照组用硬尼龙丝触摸足底,12h内每30min一次,每次2s,共14d。第15天两组大鼠重新进行Morris水迷宫检测,每天训练1次,共训练4d,观察并记录各组大鼠潜伏期、游泳距离、游泳速度、记忆得分。水迷宫实验结束后立即取脑、固定、行冰冻切片(片厚25μm),采用SABC法神经元性一氧化氮合酶免疫组化染色,光镜下进行观察分析、摄像,并记录各组神经元性一氧化氮合酶阳性细胞数。结果:各组大鼠均进入结果分析。①第1次Morris水迷宫实验各指标测试结果:训练至第4天所有大鼠的空间记忆已经形成,4天中游泳速度没有明显的变化。随着训练次数的增加,大鼠空间学习记忆能力逐渐增强。②电击应激后各组大鼠Morris水迷宫实验各指标测试结果:与鼠笼对照组相比,足底电击应激组大鼠游泳距离长、记忆得分低、而游泳速度快,两组比较差异有显著性(P<0.05)。③各组大鼠海马神经元性一氧化氮合酶免疫组化染色结果:足底电击应激组大鼠海马中神经元性一氧化氮合酶免疫反应阳性细胞在CA1、CA2、CA3、CA4及齿状回稀疏,数目较相应鼠笼对照组明显减少(P<0.05)。结论:电击应激可造成大鼠空间参考记忆获得和维持能力的损伤,减少大鼠海马各亚区及齿状回神经元性一氧化氮合酶阳性细胞数。     

神经营养因子对大鼠学习记忆及海马一氧化氮合酶阳性神经元数目的影响

背景:神经营养因子在神经系统发育和正常生理功能维持及神经损伤中起着重要的作用。对神经营养因子的研究是目前神经科学领域的热点和前沿课题之一。目的:研究脑室内注射脑源性神经营养因子(brain-derivedneurotrophicfactor,BDNF)抗体阻断内源性BDNF对大鼠海马一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,NOS)阳性神经元数目的影响。设计:随机对照的实验研究。地点和对象:实验地点在中山大学基础医学院脑研究室。实验对象为健康雄性SD大鼠13只。干预:大鼠脑室内注射BDNF抗体一周后,采用Morris水迷宫进行行为检测。主要观察指标:观察大鼠定位航行试验和空间探索试验状况,并用NADPH-黄递酶组化染色方法观察海马NOS阳性神经元数目的变化。结果:定位航行试验:实验组大鼠平均逃避潜伏期为(33.46±2.64)s,对照组为(17.71±1.86)s,两者差异具有非常显著性意义(t=4.8733,P<0.01);空间探索试验:实验组大鼠在平台象限游泳距离百分比为(28.89±6.31)%,对照组为(41.99±7.46)%,实验组明显低于对照组(t=3.3907,P<0.01);与对照组相比,实验组大鼠空间学习和记忆能力明显下降。实验组大鼠海马CA1区NOS阳性神经元数目(38.37±5.23)明显少于对照组(49.53±5.74)(t=8.200,P<0.01);实验组DG区NOS阳性神经元数目(48.77±5.51)明显少于     

2周和6周冷水游泳运动对大鼠海马中神经营养素家族及其mRNA表达水平的影响

目的:分别探讨2周和6周冷水游泳对大鼠海马中神经营养素家族及其mRNA表达水平的影响.方法:将64只SD大鼠随机分为4组:空白对照组I(C1),空白对照组2(C2),冷水游泳2周组(S2)和冷水游泳6周组(S6),每组16只.S2组和S6组分别进行冷水游泳训练,并分别在2周和6周最后一次冷水游泳后24h取材,分离出海马.ELISA检测脑区中BDNF、NGF和NT-3的蛋白水平,RT-PCR检测BDNF、NGF和NT-3 mRNA的表达水平.结果:C1和C2组大鼠海马中BDNF、NGF、NT-3及其mRNA的表达水平均没有显著性差异.与C1相比,S2组大鼠海马中BDNF、NGF及其mRNA的水平显著升高,但是NT-3及其mRNA的水平未发生显著性改变.与C2相比,S6组大鼠海马中BDNF、NGF和NT-3的表达水平均显著性升高BDNF和NGF mRNA的表达水平显著升高,NT-3 mRNA的表达水平未见显著性改变.与S2组相比,S6组大鼠海马中BDNF及其mRNA的表达水平显著降低,但是NGF、NT-3及其mRNA的表达水平未发生显著性改变.结论:2周和6周冷水游泳均可对大鼠海马中神经营养素家族及其mRNA的表达水平产生影响,6周冷水游泳影响的程度更为广泛.随着冷水游泳时间的加长,大鼠海马中神经营养素水平可能有适应性下降的趋势,表现为6周冷水游泳对BDNF及其mRNA的影响比2周时的水平降低.     

模拟高原低氧对大鼠皮质和海马神经颗粒素表达的影响

目的：分析高原低氧环境对大鼠大脑皮质、海马神经颗粒素表达的影响以及与学习记忆的关系。方法：实验于2005-01／07在中国协和医科大学基础医学院病理生理学系实验室进行。取成年健康雄性Wistar大鼠20只，随机分成对照组和模拟高原低氧组，每组10只。置于模拟海拔5000m高度的低压舱内4周，复制慢性高原低氧动物模型。低氧结束后进行Morris水迷宫实验，测试大鼠空间学习记忆能力的改变。采用反转录-聚合酶链反应和Western blot方法分别检测皮质和海马中神经颗粒素mRNA水平和蛋白水平的表达。结果：大鼠20只全部进入结果分析，无脱失值。①模拟高原低氧组的逃避潜伏期明显低于对照组，差异有显著性[（32．70&;#177;5．01），（51．30&;#177;7．11）s，t=6．76，P〈0．01]。②神经颗粒素mRNA在大鼠皮质、海马中均有表达。与对照组相比，皮质组织中神经颗粒素mRNA在4周低氧后明显下降，差异有显著性[（1．39&;#177;0.19），（0．98&;#177;0.20），t=3．351，P〈0．01]，而海马中组织内神经颗粒素mRNA的水平与对照组接近，差异无显著性[（1．33&;#177;0．42），（1．16&;#177;0．27），P〉0．05]。③两组大鼠皮质，海马的神经颗粒素均有表达，慢性低氧后模拟高原低氧组皮质中神经颗粒素比对照组明显降低，差异有显著性[（96.32&;#177;7．50），（57．23&;#177;13．41），t=7．307，P〈0．01]。而海马中神经颗粒素在两组间未见明显变化[（53．29&;#177;8．33），（42．49&;#177;19．19）P〉0．05]。结论：模拟高原低氧环境使大鼠空间学习记忆能力明显下降，大脑皮质中神经颗粒素mRNA水平和蛋白水平显著降低，而海马中则无明显变化。高原低氧环境下大鼠空间学习记忆能力的下降，可能与皮质中神经颗粒素表达的减少有关。     

铅对大鼠海马和大脑皮质NOS活性的影响

目的 观察实验性铅中毒对大鼠海马和大脑皮质一氧化氮合酶（NOS）性的影响，探讨NOS在铅中毒中枢系统损害中的作用机制。方法 4周龄Wistar雄性大鼠按45mg/kg剂量行醋酸铅灌胃30d；大鼠海马和大脑皮质总NOS和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）活性测定采用NOS催化L-Arg和氧分子生成NO法。结果 与空白对照纽大鼠比较，染铅组大鼠海马和大脑皮质总NOS活性明显降低，而iNOS活性均升高，差异有显著性（P〈0．01）。结论 铅可以使大鼠海马和大脑皮质总NOS活性降低，iNOS活性升高。     

神经干细胞移植对阿尔茨海默病大鼠海马突触素表达和学习记忆能力的影响

背景:前期实验已证实,移植入阿尔茨海默病大鼠脑内的神经干细胞能够存活、增殖,但其是否可替代损伤或坏死的神经细胞而重建神经通路,改善学习记忆能力尚不清楚.突触素是突触重建的重要标记之一.目的:观察神经干细胞移植对阿尔茨海默病大鼠学习记忆能力及突触表达的影响.方法:SD大鼠随机数字表法分为正常对照组、阿尔茨海默病模型组、2周移植组和4周移植组,除正常对照组外制各阿尔茨海默病模型.另取新生24 h SD大鼠海马齿状回分离、培养神经干细胞,经Hoechst33258标记后植入2周和4周移植组海马CA1区,行Y迷宫实验检测大鼠的学习记忆能力,然后取脑进行尼氏染色和突触寨免疫组织化学染色.阿尔茨海默病模犁组则以同样的方法、同样的位点注入等量无菌生理盐水.正常对照组不施以任何处理.结果与结论:①2周和4周移植组海马CA1区细胞比阿尔茨海默病模型组增多,但仍少于正常对照组(P＜0.05),平均吸光度与正常对照组相比差异无显著性意义(P＞0.05).②2周移植组和4周移植组大鼠海马结构内突触奈吸光度值明显高于正常对照组和阿尔茨海默病模型组(P＜0.05).③与阿尔茨海默病模型组相比,2周和4周移植组大鼠学习能力和记忆能力均显著增强,正确反应率明显提高(P＜0.05),而与正常对照组相比,差异无显著性意义(P＞0.05).提示移植入脑内的神经干细胞可促进突触形成,改善学习记忆能力.     

发育期大鼠反复惊厥后海马组织NO、NOS变化及川芎嗪的干预研究

目的 探讨发育期大鼠反复惊厥后海马组织一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）的变化及川芎嗪对其的影响，方法 三氟乙醚反复吸入（连续6次，每天1次）制成发育期大鼠惊厥动物模型，观察川芎嗪对反复惊厥后6h、1d、3d、7d海马组织NO含量、NOS活性及光镜下海马组织病理变化的影响。结果 ①反复惊厥后6h、ld、3d海马组织NO含量及NOS活性明显升高，与对照组相比有显著性差异（P〈0．01），第7天已恢复正常。②反复惊厥后6h海马神经细胞即有轻度水肿，第1～3天水肿、变性坏死明显，第7天有大量炎性细胞浸润、胶质细胞增生明显。③川芎嗪干预组海马组织病理变化明显改善．NO含量及NOS活性明显低于惊厥组，两组相比在第6h、1d、3d有显著差异（P〈0．01）。结论 反复惊厥发作可导致大鼠海马组织损伤，可能与NO大量生成，NOS活性明显增高有关。川芎嗪能改善惊厥后脑组织病理损伤，其机制可能与降低NO含量及NOS活性有关。     

人参皂甙Rd对高原大鼠运动疲劳后学习记忆及海马CA1区超微结构的影响

目的:观察人参皂甙Rd对高原运动疲劳后大鼠学习记忆能力及海马CA1区超微结构改变的影响。方法:健康成年Wistar大鼠24只,由兰州用汽车直接引入青海省可可西里高原,随机分为对照(A)组、生理盐水重度疲劳(B)组及人参皂甙重度疲劳(C)组各8只;A组正常饲养,不运动;采用跑台运动方式建立重度疲劳模型,B、C组分别腹腔给予生理盐水(2mg/kg)或人参皂甙Rd(2mg/kg);Morris水迷宫测试大鼠学习记忆能力,HE染色观察大鼠海马组织形态学改变,透射电子显微镜观察海马CA1区神经元超微结构的改变。结果:与A组相比,B组大鼠逃避潜伏期显著延长(P0.01),海马CA1区超微结构发生病理性改变,C组大鼠逃避潜伏期较B组缩短(P0.05),海马CA1区超微结构病理性改变减轻。结论:人参皂甙Rd可缓解高原环境重度疲劳导致的大鼠学习记忆能力减退及海马神经元损伤。     

不同运动负荷对大鼠海马神经c-fos表达的影响

目的探讨不同运动负荷对大鼠海马神经c-fos表达的影响机制。方法将40只Wistar雄性大鼠随机分为对照组和每天进行15 mins、30 mins、60 mins的小、中、大负荷游泳训练的实验组。实验8周后,利用S-P免疫组化法,检测海马神经c-fos的表达水平。结果与对照组相比,中、大运动负荷组均具有非常显著性差异（P〈0.01）;与小强度负荷组比,中、大运动负荷组具有显著性和非常显著性的差异（P〈0.05和P〈0.01）;大强度负荷组显著高于中等强度负荷组（P〈0.05）。结论脑海马神经c-fos表达水平,随着运动负荷的增加而显著表达。     

模拟高原低氧对大鼠皮质和海马神经颗粒素表达的影响

目的:分析高原低氧环境对大鼠大脑皮质、海马神经颗粒素表达的影响以及与学习记忆的关系。方法:实验于2005-01/07在中国协和医科大学基础医学院病理生理学系实验室进行。取成年健康雄性Wistar大鼠20只,随机分成对照组和模拟高原低氧组,每组10只。置于模拟海拔5000m高度的低压舱内4周,复制慢性高原低氧动物模型。低氧结束后进行Morris水迷宫实验,测试大鼠空间学习记忆能力的改变。采用反转录-聚合酶链反应和Westernblot方法分别检测皮质和海马中神经颗粒素mRNA水平和蛋白水平的表达。结果:大鼠20只全部进入结果分析,无脱失值。①模拟高原低氧组的逃避潜伏期明显低于对照组,差异有显著性[(32.70±5.01),(51.30±7.11)s,t=6.76,P<0.01]。②神经颗粒素mRNA在大鼠皮质、海马中均有表达。与对照组相比,皮质组织中神经颗粒素mRNA在4周低氧后明显下降,差异有显著性[(1.39±0.19),(0.98±0.20),t=3.351,P<0.01],而海马中组织内神经颗粒素mRNA的水平与对照组接近,差异无显著性[(1.33±0.42),(1.16±0.27),P>0.05]。③两组大鼠皮质,海马的神经颗粒素均有表达,慢性低氧后模拟高原低氧组皮质中神经颗粒素比对照组明显降低,差异有显著性[(96.32±7.50),(57.23±13.41),t=7.307,P<0.01]。而海马中神经颗粒素在两组间未见明显变化[(53.29±8.33),(42.49±19.19)P>0.05]。结论:模拟高原低氧环境使大鼠空间学习记忆能力明显下降,大脑皮质中神经颗粒素mRNA水平和蛋白水平显著降低,而海马中则无明显变化。高原低氧环境下大鼠空间学习记忆能力的下降,可能与皮质中神经颗粒素表达的减少有关。     

富氧室对低氧大鼠学习记忆功能及运动能力的影响

目的：研究海拔5400m富氧室改善低氧大鼠学习记忆损伤及运动能力的作用。方法：3月龄Wistar大鼠56只随机分为平原组、低氧1组、富氧1组、低氧2组、富氧2组，低氧组在模拟海拔5400m的低压舱内24h，富氧组在模拟海拔5400m的低压舱内12h，然后富氧(270mL／L的氧混合气)12h。平原组、低氧1组、富氧1组进行Morris水迷宫试验测定大鼠的学习记忆能力，低氧2组、富氧2组进行力竭性负重游泳试验。结果：与低氧组比较，富氧组寻找平台潜伏期的时间缩短(t=14．79，P&;lt;0．01)，力竭负重游泳时间延长(t=4．31，P&;lt;0．01)。低氧组运动水迷宫游泳呈周边型，富氧组呈向平台型。结论：富氧能改善缺氧大鼠的学习记忆功能，提高低氧环境运动作功能力。     

多发性脑梗死大鼠海马一氧化氮合酶改变

目的:探讨一氧化氮合酶与多发性脑梗死的关系,探讨其发病机制。方法:选用Wistar大鼠,应用微栓子栓塞阻断法建立多发性脑梗死性缺血模型,借用一氧化氮合酶组织化学染色方法、透射电镜技术并结合显微图像分析观察大鼠海马CA1区神经元的一氧化氮合酶变化。结果:手术后1h和4h实验组一氧化氮合酶阳性反应物平均灰度值(152.4±5.6,164.1±7.6)与正常对照组190.5±6.0比较明显减低(P<0.01)。缺血对照组189.3±6.2与正常对照组比较,差异无显著性意义。结论:一氧化氮合酶阳性反应物的减少与多发性脑梗死的发生、发展具有一定的关系。     

胍丁胺对吗啡戒断大鼠海马神经元型一氧化氮合酶的影响

背景：胍丁胺具有增强吗啡的镇痛作用、对抗吗啡的耐受和依赖等作用。目的：观察注射胍丁胺对吗啡戒断大鼠海马神经元型一氧化氮合酶的影响，分析海马一氧化氮通路是否参与胍丁胺抑制吗啡的戒断作用。设计：随机对照实验。单位：解放军总医院麻醉科。材料：实验于2004-04／07在解放军总医院麻醉科实验室完成。选取健康SD大鼠18只，随机分为盐水对照组、吗啡组、胍丁胺吗啡组。6只／组。方法：盐水对照组皮下注射生理盐水10mg／kg；吗啡组进行5d预处理，分别皮下注射吗啡10，20，30，40，50mg／kg，2次／d；胍丁胺吗啡组每次给予吗啡前30min皮下注射胍丁胺10mg／kg。末次给吗啡后6h，吗啡组和胍丁胺吗啡组均腹腔注射纳洛酮5mg／kg。激发吗啡戒断症状，记录1h内各项吗啡戒断症状的次数（包括湿狗样抖动、咀嚼、激惹、流涎、腹泻等体征），根据动物在纳洛酮激发戒断症状的前后体重差值计算体质量减轻数。行为学测定后将各组动物麻醉处死，取海马作冰冻切片，神经元型一氧化氮合酶免疫组织化学染色。用CMIAS系统进行图像分析．每张切片选5个视野积分吸光度的均值作为阳性神经元的积分吸光度。主要观察指标：①各组大鼠吗啡戒断症状测定结果。②各组脑海马中神经元型一氧化氮合酶的表达变化。结果：实验纳入大鼠18只，全部进入结果分析。①各组大鼠吗啡戒断症状测定结果：胍丁胺吗啡组大鼠湿狗样抖动、咀嚼、激惹、流涎、腹泻、体质量减轻等戒断症状均明显低于吗啡组[（2．0&;#177;1．3），（5．0&;#177;1．1）；（0．3&;#177;0．4），（1．8&;#177;0．7）；（3．2&;#177;1．2），（6．8&;#177;3．1）；（0．2&;#177;0．4），（1．2&;#177;0．9）；（2．7&;#177;2．1），（6．7&;#177;2．1）；（6．0&;#177;3．0），（12．8&;#177;2．7）次；P均〈0．01]，与盐水对照组基本相近（P〉0．05）。②各组脑海马中神经元型一氧化氮合酶的表达变化：各组大鼠脑海马中神经元型一氧化氮合酶阳性神经元主要分布在CA1区，其胞浆被染成棕黄色，圆形的细胞核被苏木精染成淡紫色。胍丁胺吗啡组阳性神经元免疫荧光吸光度值较吗啡组显著降低（24．32&;#177;8.31，50．82&;#177;15．13，P〈0．01），与盐水对照组基本相似（24．32&;#177;8．31，15．24&;#177;1．88，P〉0．05）。结论：胍丁胺能抑制吗啡的戒断症状，降低吗啡戒断大鼠脑海马CA1区神经元型一氧化氮合酶的活性，海马一氧化氮通路参与胍丁胺抑制吗啡的戒断。     

游泳训练对大鼠空间学习记忆能力及海马、纹状体内c-fos、c-jun mRNA表达的影响

目的:探讨8周游泳运动训练对大鼠空间学习记忆能力的影响及其与脑内学习记忆相关基因c-fos、c-junmRNA的关系,同时探讨其中的机制.方法:以大鼠为实验对象,采用Morris水迷宫法,研究8周游泳训练对大鼠空间学习记忆能力的作用:采用RT-PCR的方法研究8周游泳训练对大鼠海马、纹状体内学习记忆相关基因c-fos、c-jun mRNA的影响.结果:①Moms水迷官的测试中,综合定位航行实验和空间搜索实验数据可以表明,8周的游泳训练之后,运动组大鼠的迷宫总成绩显著好于安静组;②与安静组相比,8周游泳训练可使大鼠海马c-fos、c-junmRNA显著增加(分别上调17%、28%),但纹状体内c-fos、c-jun mRNA的增加并小显著.结论:适宜的运动训练可以促进海马内c-fos、c-jun mRNA的表达.从而促进学习记忆,这从一个侧向揭示了运动促进学习记忆的分子学机制.     

中药复方驱铅制剂对铅染毒大鼠脑海马齿状回及CA1区和CA3区一氧化氮合酶的影响

目的：观察中药复方驱铅制剂对铅染毒大鼠记忆改善的影响，并以依地酸钙钠做标准对照。方法：实验于2001-11／12在湖南师范大学生命科学院动物实验室完成。①选用健康SD大鼠60只，随机分成6个组，每组lO只。阴性对照组、阳性对照组、驱铅灵（由党参15g、鸡血藤15g等组成）3．3g／（kg&;#183;d）组、驱铅灵6．6g／（kg&;#183;d）组、驱铅灵13．2g／（kg&;#183;d）组、依地酸钙钠组。②阳性对照组、依地酸钙钠组、驱铅灵各组均用20g／L的醋酸铅溶液以10μ／g体质量的剂量灌胃，1次／d，第11天停染1d，共3周。③停止染毒后第2天，驱铅灵各组分别用相应剂型的中药复方驱铅灵10μ／g体质量灌胃，1次／d，第11天停1d，共3周。④依地酸钙钠组用5g／L依地酸钙钠溶液以10μL／g体质量的剂量（50mg／kg）腹腔注射，1周注射4d，停3d，共3周。⑤阴性对照组、阳性对照组用蒸馏水灌胃，1次／d，第11天停染1d，共3周。⑥观察驱铅灵制剂对铅染毒大鼠脑海马组织结构的改善以一氧化氮合酶阳性细胞数目的多少及阳性细胞产物平均吸光度的大小作为评价指标，对大鼠海马结构形态学损伤以一氧化氮合酶阳性产物吸光度表示。结果：纳入60只，均进入结果分析，无缺失值。①铅染毒大鼠脑齿状回阳性产物吸光度情况：驱铅灵33g,6．6g，13．2g／（kg&;#183;d）组与依地酸钙钠组显著大于阳性对照组[（0．0692&;#177;0．0043），（0．0707&;#177;0．0022），（0．0645&;#177;0．0027）．（0．0720&;#177;0．0037），（0．0538&;#177;0．0068）A，（F=12．383，P〈0.01）]。②铅染毒大鼠脑CA1区阳性产物吸光度变化：驱铅灵3．3g，6．6g，13．2g／（kg&;#183;d）组与依地酸钙钠组的阳性产物吸光度显著大于阳性对照组[（0．0638&;#177;0．0033）。（0．0648&;#177;0．0027），（0．0613&;#177;0．0029），（0．0655&;#177;0．0037）。（0．0605&;#177;0．0026），（F=10．585，P〈0．01）]。③铅染毒大鼠脑CA3区阳性产物吸光度变化：驱铅灵33g，6．6g，13．2g／（kg&;#183;d）组与依地酸钙钠组在脑CA3区显著大于阳性对照组[（0．0682&;#177;0．0044），（0．0702&;#177;0．0047），（0．0630&;#177;0．0044）．（0．0733&;#177;0．0051），（0．0545&;#177;0．0027）。（F=18．867．P〈0．01）]。结论：中药复方驱铅制剂低、中、高各剂量组均能改善铅染毒大鼠脑海马结构的形态学损害，改善铅致学习记忆的损害，其效果与依地酸钙钠相似，不同剂量的驱铅制剂作用效果比较无显著差别。     

金雀异黄酮对去卵巢大鼠基底前脑一氧化氮合酶神经元的影响

目的：研究去卵巢及金雀异黄酮(genistein，GS)治疗后基底前脑一氧化氮合酶(nitric oxide synthase，NOS)阳性神经元数目变化，探讨GS改善去卵巢大鼠学习记忆能力的可能机制，为使用GS防治绝经后老年性痴呆提供理论依据。方法：实验于2003—03／2004-01在中山大学人体解剖学教研室脑研究室进行。将36只3月龄雌性SD大鼠分为假手术组、去卵巢对照组、苯甲酸雌二醇组及金雀异黄酮组，每组9只，分别进行干预。术后8周取脑切片，进行NADPH-d组化方法染色，计数分析基底前脑各区NOS阳性神经元数目。结果：各组大鼠基底前脑内侧隔核NOS阳性神经元数目差异无显著性意义(P&;gt;0．05)；去卵巢对照组斜角带核垂直支及水平支的NOS阳性神经元数目分别为(33．13&;#177;9．80)个和(48．55&;#177;6．60)个，均高于假手术组、苯甲酸雌二醇组及金雀异黄酮组(P&;lt;0．01)，金雀异黄酮组斜角带核垂直支及水平支的NOS阳性神经元数目与假手术组、苯甲酸雌二醇组相比差异均无显著性意义(P&;gt;0．05)。结论：去卵巢之后大鼠基底前脑一氧化氮增加，产生神经元的毒性作用，使中枢神经系统退行性变导致大鼠学习记能力下降；GS能减少基底前脑一氧化氮水平，有望替代雌激素用于防治疗女性绝经期后中枢神经系统退行性疾病。