c－met基因表达与胃癌增殖在幽门螺杆菌感染中的关系

目的 研究c-met基因蛋白及增殖细胞核抗原（PCNA）在幽门螺杆菌（H.pylori)感染的胃粘膜病变演进中的表达及关系。方法 145例经病理证实不同胃粘膜病变，采用免疫组化法检测c-met和PCNA基因表达，Warthin-starry法检测H.pylori感染。结果 在浅表性胃炎（CSG）、萎缩肠化性胃炎（CAG＋IM）、异型增生（ATP）、早期胃癌和进展期胃癌中，两种基因CAG＋IM、ATP、胃癌均显高于CSG（P＜0．05）。胃粘膜增殖程度与c-met和PCNA阳性表达强度有显关联（P＜0．01）。c-met和PCNA阳性表达与胃癌组织类型、浆膜浸润和淋巴结转移密切相关。c-met和PCNA－LI在胃癌中等级相关表达有极其显的相关性（P＜0．001）。c-met阳性表达与肠型胃癌H.pylori感染有关。CAG＋IM、ATP和GC组c-met阳性表达中H.pylori感染明显高于阴性。结论 c-met和PCNA基因表达与胃粘膜增殖和恶化有关。c-met基因可能成为评估胃癌恶化的一项新的重要指标。H.pylori感染和c-met表达与胃粘膜增殖和进展有关。     

人脑胶质瘤中端粒酶活性的表达

目的：探讨人脑胶质瘤中端粒酶活性表达的临床病理意义。方法：应用聚合酶链反应－酶联免疫吸附法（PCR－ELISA）检测了32例人脑胶质瘤组织、5例正常脑组织中端粒酶活性的表达。结果：32例人脑胶质瘤中有26例端粒酶表达为阳性（81．3％）,而正常脑组织中无端粒酶活性的阳性表达（P＜0．005）,不同恶性程度胶质瘤中端粒酶活性表达有 差异（P＜0．01）。结论：端粒酶活性可以作为脑胶质瘤的恶性标记之一,测定胶质瘤端粒酶活性对其诊断及预后判断具有重要价值。     

转录因子Sp1和Sp3对JurkatT细胞端粒酶活性的调节作用

目的：探讨转录因子Sp1、Sp3对Jurkat T细胞端粒酶活性和粒酶逆转录酶（hTERT）的调节作用。方法：用脂质体将Sp1、Sp3表达载体转入JurkatT细胞，用Western blotting方法检测蛋白表达水平，用端粒酶PCR－ELISA法检测细胞端粒酶活性并用银染显示端粒酶活性梯度；用RT－PCR方法检测hTERT mRNA水平。结果：Sp1、Sp3载体转化36h的细胞Sp1、Sp3蛋白水平分别升高59．6％（P＜0．01）和36．8％（P＜0．05）；随着Sp1表达水平的增加，端粒酶活性和hTERT mRNA水平明显增加，增加率分别为38．5％（P＜0．05）和25．4％（P＜0．05）。而Sp3表达载体对端粒酶活性和hTERT mRNA水平无明显影响。结论：转录因子Sp1通过调节hTERT mRNA转录水平而调节Jurkat T细胞端粒酶活性，Sp3无此作用。     

原发性胃癌组织端粒酶活性的表达

目的 探讨端粒酶活性表达与胃癌各临床病理参数间的关系。方法 采用TRAP－ELISA法对32例原发性胃癌组织及对应切缘粘膜组织端粒酶活性进行定量检测。结果 32例肿瘤组织端粒酶活性明显高于切缘粘膜组织（P＜0．001）。肿块最大径≥5cm肿瘤组的端粒酶活性明显高于最大径＜5cm肿瘤组（P＜0．001）。淋巴结转移阳性组端粒酶活性明显高于淋巴结转移阴性组（P＜0．001）。早期（I、Ⅱ期）胃癌端粒酶活性明显低于晚期（Ⅲ、Ⅳ期）胃癌（P＜0．01）。结论 端粒酶活性的异常增高与胃癌的发生、发展密切相关;端粒酶活性检测可作为胃癌的诊断及预后判断的重要生物学指标。     

胃癌及癌前组织中端粒酶RNA与端粒酶活性检测及其临床意义

目的：研究胃癌及癌前病变胃粘膜端粒酶RNA与端粒酶活性检测及其意义。方法：选取经病理组织学证实的有粘膜活检标本共150例，包括慢性浅表性胃炎（CSG）32例、肠上皮化生（IM）36例、不典型增生（AH）34例、胃癌（GC）48例，分别采用原位逆转录聚合酶链反应（PCR）、端粒酶重复序列扩增法（TRAP）检测上述胃粘膜端粒酶RNA与端粒酶活性。结果：原位逆转录PCR检测胃粘膜活检标本的端粒酶RNA阳性率为55．3％（83／150），显高于TRAP法检测端粒酶活性检出率（40．0％、60／150，P＜0．05）。在不同胃粘膜病变中，IM、AH及GC的端粒酶RNA阳性率分别为47．2％、52．9％、100％，而CSG胃粘膜中未检出端粒酶RNA；IM、AH组端粒酶RNA阳性率亦明显低于GC组（P＜0．05）。端粒酶RNA主要分布于胃粘膜癌细胞及癌前病变上皮细胞的胞核内。结论：端粒酶RNA与胃癌的发生密切相关。原位逆转录PCR检测胃粘膜端凿酶RNA对胃粘膜癌变的早期诊断和预测有重要价值，而且可能是较端粒酶活性更灵敏的生物学指标。     

食管癌组织端粒酶活性检测的临床意义

目的 检测食管癌及癌旁食管粘膜组织中端粒酶活性,探索端粒酶活性与食管癌发生发展的关系。方法 采用PCR－TRAP方法检测43例食管癌和癌旁组织以及10例癌周正常食管粘膜的端粒酶活性。结果 43例食管癌组织38例（88．4％）表达阳性,癌旁组织7例（16．3％）表达阳性（P＜0．01）,10例正常食管膜表达阴性（P＜0．01）。端粒酶活性表达与病人的性别、肿瘤部位和大小、分化程度、临床分期、有无淋巴结转移无明显相关。结论 端粒酶活性与食管癌发生发展有密切关系,并有可能成为食管癌的临床肿瘤标记物,进而为食管癌早期诊断与治疗提供可靠指标。     

幽门螺杆菌感染与慢性胃炎胃粘膜端粒酶活性的相关性探讨

目的 探讨幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，HP）感染与慢性胃炎胃粘膜端粒酶活性的关系。方法通过胃镜活检获取34份快速尿素酶检测HP阳性组织标本，-80℃冻存，然后集中对标本进行TRAP—PCR银染法检测端粒酶活性。结果34例胃镜活检标本中有3例出现端粒酶活性阳性。结论在良性组织中端粒酶活性表达低，但HP感染的慢性浅表性胃炎HP的根治值得重视。     

宫颈癌及各级宫颈上皮内瘤变端粒酶活性变化的探讨

目的：检测宫颈浸润癌及宫颈上皮内瘤样病变（CIN）各级组织中端粒酶活性的表达，探讨端粒酶活性测定作为肿瘤进展依据及鉴别诊断依据的可能性。方法：用免疫组化S－P法检测端粒酶TPT单克隆抗体，应用计算机图像分析系统测定TRT阳性指数，检测12例正常宫颈，23例CINⅠ，16例CINⅡ，12例CINⅢ，16例浸润癌组织端粒酶活性阳性表达情况。结果：随着宫颈病变的进展，端粒酶的阳性表达率显逐渐增高趋势（P＜0．05），两者呈正相关。CINⅠ、CINⅡ端粒酶阳性表达率比较，有显著性差异（P＜0．05），CINⅢ明显高于CINⅡ（P＜0．05）；各级CIN明显高于正常宫颈（P＜0．01）；CINⅢ与浸润癌无显著性差异（P＞0．05）。结论：端粒酶激活与宫颈癌变的进程有关，端粒酶活性表达有可能成为检测宫颈上皮内瘤变进展及CIN各级鉴别诊断的辅助指标。     

大蒜油抑制幽门螺杆菌感染BALB/c小鼠实验研究

目的：研究大蒜油对BALB／c小鼠感染H．pylori根除治疗作用，探索新的理想的抗H．pylori药物。方法：将建立H．pylori感染BALB／c小鼠模型60只分成3组，阴性药物对照组（20只）、大蒜油治疗组（20只）和感染模型对照组（20只）；另取无H．pylori感染BAIB／c小鼠20只为正常对照组，治疗1、4周后分别抽取10只剖杀，取其胃粘膜组织进行快速尿素酶实验、细菌学培养和组织病理学Warthin-Starry银染，观察小鼠H．pylori感染率、根除率和胃内定植情况。结果：大蒜油治疗组1周后有6只小鼠胃内的H．pylori被根除，根除率为60％（6／10），1个月后有7只小鼠胃内的H．pylori被根除，根除率为70％（7／10），两批小鼠总的根除率为65％（13／20），阴性药物对照组及感染模型对照组的小鼠胃内均有H．pylori生长；而无H．pylori感染的正常对照组未见H．pylori生长。结论：大蒜油治疗H．pylori感染小鼠疗效显著（根除率为65％）。无明显毒副反应。     

宫颈癌中端粒酶活性的研究

目的;研究宫颈癌组织及相应癌旁组织中的端粒酶活性,以探讨其作为宫颈癌肿瘤标志物的可能性。方法：采用TRAP法检测20例宫颈癌及相应癌旁组织中的端粒酶活性。结果：20例宫颈癌组织中端粒酶的阳性表达率为80％（16／20）,而相应癌旁组织的端粒酶阳性表达率为15％（3／20）,两者比较差异有显著性（P＜0．01）。结论：端粒酶是特异性较强的恶性肿瘤基因标志,有可能成为宫颈癌早期诊断和治疗的理想标志物。     

胃粘膜活检标本端粒酶活性的检测及其临床意义

目的：检测胃粘膜病变组织的端粒酶活性，探讨端粒酶活化在胃癌发生发展中的作用。并阐明它的临床意义。方法：采用非放射性PCR－ELISA法检测胃粘膜活检标本的端粒酶活性，结果：93例胃粘膜活检标本中，慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎、肠上皮化生、异型增生及胃癌的端粒酶阳性率分别为0％（0／10）、28．13％（9／32）、16．67％（1／12）、30．00％（3／10）、86．21％（25／29）。胃癌组织端粒酶阳性率与性别、肿瘤部位，大体类型及组织学分类无明显相关。结论：端酶活性的检测对胃癌的诊断可能具有重要意义。有望成为一种理想的胃癌标志物。     

胃粘膜肠化中π类谷胱甘肽转移酶的表达及其与幽门螺杆菌感染的相关性

目的 探讨π类谷胱甘肽转移酶（GST－π）在胃癌发生过程中的表达,及在肠化阶段以GST－π为代表的人体对致癌物解毒系统与幽螺杆菌（Hp)致毒作用间的相互作用。方法 利用S－P法对219例胃粘膜活检标本进行GST－π单克隆抗体的检测;利用HID－ABpH2.5-PAS粘蛋白组织化学技术对171例肠化粘膜进行分型;利用HE及Hp-DNA PCR及ELISA方法对正常胃粘膜和肠化粘膜进行Hp的检测。对80例Hp阳性患者进行Hp根除治疗,停药3个月后进行Hp、GST－π的检测。结果 正常胃粘膜未见GST-π的表达,肠化粘膜GST－π阳性率为69．6％,胃癌GST－π阳性率为44．4％,高于正常胃粘膜（P＜0．01）,低于肠化粘膜（P＜0．05）。Hp阴性组GST－π阳性率高于Hp阳性组（P＜0．05）。Hp根除治疗后,根除组GST－π表达高于未根除组（P＜0．05）。正常胃粘膜→肠化粘膜→胃癌组织中GST－π表达由无→高→低,GST－π弱阳性或阴性的Ⅲ型肠化与胃癌关系密切;肠化粘膜中GST－π弱阳性或阴性表达又合并Hp感染者,胃癌发生的危险性增加。结论 在胃粘膜上皮肠化阶段Hp的致毒作用与GS－π解毒作用彼此相互拮抗。     

非小细胞肺癌端粒酶活力表达及其临床意义

目的：探讨非小细胞肺癌组织端粒酶活性表达及其临床意义。方法：应用TRAP－PCR－ELISA方法检测36例非小细胞肺癌组织及相应的32例癌旁组织,9例肺良性病变组织和9例正常肺组织中端粒酶活性表达。结果：肺癌组织中端粒酶活性表达阳性率为75％（27／36）,癌旁组织为6．25％（2／32）,肺良性病变组织为11．1％ （1／9）,正常肺组织为0％（0／9）。肺癌组织端粒酶活性表达与肺癌病理类型、组织分化程度、原发性肿瘤大小、淋巴结转移情况及临床分期无明显相关。结论：端粒酶在肺癌组织中的高表达可作为肺癌诊断和鉴别诊断的重要分子生物学指标之一。     

幽门螺杆菌对蒙古沙土鼠胃上皮细胞增殖的影响

目的：在幽门螺杆菌（H.pylori)长期感染蒙古沙土鼠腺胃模型基础上，探讨H.pylori感染诱致胃癌发生的可能机制。方法：采用H.pylori国际标准 株NCC11637灌喂蒙古沙土鼠，建立H.pylori长期感染动物模型，用免疫组化及原位杂交方法检测H.pylori感染致胃上皮细胞增殖的改变。结果：成功建立了H.pylori长期感染蒙古沙土鼠腺胃模型，其胃粘膜的组织学变化显示，H.pylori感染可致正常胃粘膜发生慢性胃炎－胃萎缩－胃上皮肠化生－胃上皮异型增生的发展过程。H.pylori感染能引起胃窦上皮细胞增殖增加（P＜0．05），随着H.pylori感染时间的延长，表皮在子（epidermal growth factor,EGF)mRNA及表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR)mRNA的阳性信号表达呈逐渐增加的趋势（P＜0．05），结论：H.pylori定植致胃窦上皮细胞增殖的异常，对正常胃窦粘膜向不典型增生进展的过程起重要作用；EGF及EGFR在mRNA水平的异常表达可能是H.pylori定植致胃窦上皮细胞增殖异常的重要原因。     

胶质瘤及脑脊液中端粒酶活性的检测

目的：明确胶质瘤及患者脑脊液（CSF）中端粒酶的活性表达情况。方法：采用TRAP（telomeric repeat amplification protocol)法检测50例胶质瘤、3例转移瘤及17例肿瘤端粒酶呈阳性患者CSF中端粒酶活性表达情况，统计学处理要用X^2检验。结果：（1）肿瘤端粒酶；胶质瘤（WHO分级）中阳性率为22／50（44．0％），其中Ⅰ级为3／16（18．8％），Ⅱ级为3／12（25．0％），Ⅲ级为9／14（64．3％），Ⅳ级为7／8（87．5％），3例转移性瘤端粒酶活性检测为3／3（100％）。胶质瘤分级越高，端粒酶活性出率就越高（P＜0．005），25例Ⅲ级以上恶性肿瘤中（包括转移性低分化癌）19例端粒酶活性表达阳性（76．0％），明显高于Ⅱ级以下胶质瘤（6／28，21．4％，P＜0．005）。（2）CSF中端粒酶的活性；6例术前、17例术后采取脑脊液（包括5例术前曾采取CSF的患者，其切除的肿瘤中端粒酶检测均为阳性）端粒酶检出率分别为3／6（50．0％）和2／17（70．6％）。3例术前CSF呈阴性的患者，检测2例术后CSF呈阳性。结论：（1）端粒酶可能是新的恶性脑肿瘤的瘤标；（2）检测脑脊液中端粒酶的活性应作为脑胶质瘤诊断的辅检查，以便早期发现恶性胶质瘤或判断肿瘤的恶性程度。（3）对首次基本全切，短期内复发的胶质瘤或怀疑为脑转移瘤的患者应行CSF端粒酶检测；（4）手术是促进恶性脑肿瘤扩散和转移的主要因素之一，提示恶性脑肿瘤患者术后有必要进行化疗和（或）放疗，甚至是包括脑和脊髓的全中枢系统的放疗；（5）脑脊液端粒酶的检查优于细胞学检查。     

宫颈尖锐湿疣组织中HPV分型与端粒酶活性的研究

目的由于宫颈尖锐湿疣(CA)皮损中HPV高危型感染常与其癌变有关，而端粒酶活性增高多见于恶性疾病。该研究探讨宫颈CA皮损中HPV分型与端粒酶活性的关系。方法采用荧光定量PCR检测HPV病毒分型，端粒重复序列扩增文件-酶标法(TRAP—ELISA)检测端粒酶活性。结果尖锐湿疣患者皮损中端粒酶活性明显高于正常皮肤组织；24例(40．0％)HPV16／18型阳性，34例(56．7％)HPV6／11型阳性，2例未检测到HPV；HPV16／18型感染的皮损中端粒酶活性明显高于HPV6／11型感染者。结论认为端粒酶活性与HPV型别有关，可能与HPV病毒协同参与CA发病，HPV16／18型阳性者在临床可能有癌变倾向，抑制端粒酶活性可能可以阻碍疣体生长，为临床治疗提供一个新的方向。     

支气管肺泡灌洗液端粒酶与P53基因检测在肺癌诊断中的应用

目的研究支气管肺泡灌洗液（BALF）中端粒酶活性、P53基因变异对肺癌的诊断价值。方法收集86例肺癌患者与82例肺良性疾病患者的BALF,采用端粒酶重复序列扩增法（TRAP）和PCR—SSCP法进行端粒酶和P53基因检测,同时经纤维支气管镜（纤支镜）进行活检和刷检。结果①实验组患者BALF端粒酶活性、P53基因突变率分别为82．56％和32．56％,均高于对照组的4．48％和0（P〈0．01）;②不同组织学类型肺癌患者BALF端粒酶活性阳性表达率和P53基因突变率之间差异均无统计学意义（P〉0．05）;③中央型肺癌患者BALF端粒酶活性和P53基因变异联合检测阳性率为94．34％,常规纤支镜检查阳性率为86．79％,两者差异无统计学意义（P〉0．05）。周围型肺癌患者BALF端粒酶活性和P53基因变异联合检测阳性率75．76％,高于常规纤支镜检查阳性率45．45％（P〈0．05）。结论①肺癌患者BALF端粒酶活性与P53基因变异均高于肺良性疾病患者;②端粒酶活性阳性表达率、P53基因突变率与肺癌的病理类型无关;③BALF端粒酶活性和P53基因变异联合检测对周围型肺癌的诊断有一定的实用价值。     

食管鳞癌组织端粒酶活性与PCNA和CK17关系的研究

目的：通过对食管鳞癌及癌旁组织端粒酶活性测定、增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞角蛋白(CKl7)免疫组化染色．了解端粒酶活性与食管鳞癌发生发展及其与PCNA和CK17表达之间的关系；探讨端粒酶活性作为诊断食管鳞癌、判断其生物学行为和预后指标的可能性。方法：食管鳞癌组织30例，癌旁2cm和癌旁5cm组织各25例及正常食管组织3例。标本离体后液氨速冻并深低温保存．以端粒酶PCR—ELISA试剂盒进行端粒酶活性测定，石蜡包理切片HE染色和免疫组化染色观察PCNA和CK17表达。结果：3例正常食管粘膜组织端粒酶活性均阴性。食管鳞癌癌组织86．7％(26／30)，癌旁2cm组织60％(15／25)，癌旁5cm组织8％(2／25)端粒酶活性阳性，三组阳性率有显著性差异(P＜0．01)。癌端粒酶活性与患者年龄，肿瘤大小，浸润深度，淋巴结转移无关；与临床分期(TNM分期)相关(P＜0．05)；PCNA阳性指数在食管鳞癌癌组织、癌旁2cm与癌旁5cm表达三组比较有差异(P＜0．05)；端粒酶与PCNA无相关关系(P＞0．05)；CK17在癌组织表达率为83．3％，三组间CK17表达率有显著性差异(P＜0．01)。癌组织端粒酶活性阳性率与CK17阳性表达率之间存在相关性。结论：正常食管粘膜组织无端粒酶活性表达。癌旁组织中端粒酶活性随与肿瘤间距离的增加逐渐降低，Ⅲ期者端粒酶活性阳性率明显高于临床分期Ⅰ、Ⅱ期者。癌灶端粒酶活性与PCNA阳性指数间无相关关系；与CK17表达有明显相关性，端粒酶活性有可能作临床诊断食管鳞癌和预测其生物学行为及预后的分子生物学指标。     

胃癌及癌前组织中端粒酶活性的检测及其临床意义

目的探讨端粒酶在胃癌及癌前组织中的活性表达。方法采用端粒酶反复扩增法（ＴＲＡＰ）检测了１７６例不同病变胃粘膜组织端粒酶活性,其中慢性萎缩性胃炎（ＣＡＧ）５７例、肠上皮化生（ＩＭ）１８例、异型增生（Ｄｙｓ）８例及胃癌（ＧＣ）６５例（包括３例早期胃癌）。结果ＣＡＧ、ＩＭ、Ｄｙｓ及ＧＣ端粒酶阳性检出率分别为２４．６％、３８．５％、３７．５％及９２．３％,而正常组织（ＮＴ）未检出端粒酶活性,明显低于以上各组（Ｐ＜０．０１～０．０５）。癌组织端粒酶阳性率亦明显高于ＣＡＧ、ＩＭ及Ｄｙｓ组（Ｐ＜０．０１）;端粒酶阳性检出率与患者性别、肿瘤大小、浸润深度、大体类型、分化程度、有无淋巴结转移及临床分期无明显相关性。结论端粒酶不仅在胃癌组织中可以检测得到,而且在胃粘膜癌前病变或疾病中亦有表达。     

卵巢恶性肿瘤端粒酶活性的研究

目的 探讨端粒酶活性与卵巢恶性肿瘤发生发展的关系以及端粒酶活化作为卵巢肿瘤标志物的可能性。方法 应用端粒重复序列扩增（TRAP－PCR）技术检测36例卵巢组织，包括17例卵巢恶性肿瘤及其盆腔相关组织、淋巴结，4例交界性肿瘤，10例良性肿瘤，5例正常卵巢组织中端粒酶活性。结果 端粒酶活性表达在恶性肿瘤组织中阳性率为88．2％（15／17），弱阳性（＋）者3例，中等阳性（ )4例，强阳性（ )者8例；4例交界性肿瘤阳性率75．0％（3／4），均为弱阳性（ )；10例卵巢良性组织中阳性率为10．0％（1／10），为弱阳性（ )；5例正常卵巢组织全部为阴性。统计学分析表明端粒酶活性表达在卵巢恶性肿瘤、交界性肿瘤与良性肿瘤组织及正常卵巢组织之间存在非常显著性差异（P＜0．05）。但与卵巢恶性肿瘤的病理类型、组织分化、分期均无关。结论 端粒酶活性表达在卵巢恶性肿瘤组织中普遍存在，端粒酶活性检测有可能成为卵巢恶性肿瘤诊断的重要辅助手段，同时对卵巢恶性肿瘤细胞减灭术效果的判定可能具有一定的参考价值。