应用短串联重复序列快速诊断21三体

目的　采用聚合酶链反应 -单链构象多态性技术 ,对短串联重复序列 (short tandem repeat,STR)进行分析 ,探讨应用串联重复序列信息进行 2 1三体定性诊断的可行性。方法　以染色体 G显带核型分析为对照 ,选择 19例 2 1三体阳性患儿和 3例高风险胎儿及其双亲为对象 ,抽提基因组 DNA,用聚合酶链反应扩增 D2 1S14 11和 D2 1S11位点的 STR片段 ,并对其进行单链构象多态性分析 ,通过电泳带型特征诊断 2 1三体。结果　本法可以通过检测三条染色体的 STR片段电泳带型来诊断 2 1三体。应用该基因诊断方法分析了 2 2例 2 1三体患儿 ,除 1例患儿的 D2 1S11电泳谱带与父母的电泳条带完全相同不能诊断外 ,其他病例的 D2 1S14 11和 D2 1S11位点的诊断结果与细胞遗传学核型分析结果相符 ,其中 3例孕中期高风险胎儿的分析结果被流产样品的核型分析所证实。结论　基于短串联重复序列的聚合酶链反应 -单链构象多态性分析技术是一种简单、快速和可靠的 2 1三体定性基因诊断技术 ,可应用于 2 1三体的基因诊断和遗传筛查。     

间期FISH技术和短串联重复序列快速诊断21三体综合征

目的利用间期FISH技术和短串联重复序列PCR相关技术快速诊断21三体综合征,两者进行比较,以筛选出更适合基层医院推广的技术。方法一是对患者外周血淋巴细胞进行间期FISH检测21三体综合征,二是对患者外周血进行短串联重复序列PCR检测21三体综合征。结果两种诊断21三体综合征的准确性均无显著性意义,但从经济、技术要求、出结果时间比较,短串联重复序列PCR更适合于基层医院推广。     

21三体综合征的快速基因诊断

目的探讨一种快速、简便、准确检测21三体综合征的基因诊断方法。方法选用位于21号染色体Down′s综合征核心区（21q21-21q22）内及其附近的短串联重复序列（STR）（D21S1432,D21S11,D21S1436,D21S1442,D21S1270,D21S1411,D21S1446）,建立STR-PCR快速诊断平台。通过对经染色体核型分析的10例正常胎儿的羊水脱落细胞DNA,及4例判定为21三体综合征胎儿的绒毛组织DNA进行21号染色体STR分析,从而进行方法评价。结果在上述7个STR位点中,10名正常胎儿除在D21S1436位点存在2∶1条带的占5/10,其余位点杂合度（64.29%-92.86%）及相互间的符合率为100%。4例21三体胎儿经6个STR位点联合分析,均被确诊为21三体综合征。结论6个STR位点（D21S1432,D21S11,D21S1442,D21S1270,D21S1411,D21S1446）可作为21三体综合征有价值的遗传标记,可用于对其做出快速、准确的基因诊断。     

联合STR连锁分析和PCR-SSCP分析对新疆地区PKU基因诊断

联合采用PCR -STR和PCR -SSCP 2种基因诊断方法分析 5个PKU家系。除家系 4母亲为STR纯合型外 ,其余家系双亲皆为杂合子。对家系 1(维族 ) 1例风险胎儿 (妊娠 6周流产 )进行了产前基因诊断和 1例新生儿 (出生 1天 )进行了基因诊断 ,均为携带者 ,并经出生后证实。应用PCR -SSCP分析发现 ,家系 2 (回族 )患儿为Exon7突变纯合子 ,家系 4 (汉族 )患儿为Exon7和Exon11突变复合体 ,其Exon11突变位于第 399位点 (GTA→GTT) ,可能为一致病突变。实践证明上述 2种基因诊断方法联合使用可对 5个家系所有其他成员进行 10 0 %基因诊断和产前基因诊断 ,并可有效检出突变所在位置。     

21-三体嵌合型母亲二次妊娠21-三体患儿

目的报告1例嵌合型母亲连续2次孕育单纯型21-三体患儿。方法对21-三体患儿、21-三体胎儿和其父母的血标本、父亲精子进行了DNA多态性检测,选择2个SRTR多态性位点,即D21S1412和D21S11,进行荧光定量PCR检测以确定额外21号染色体的起源。对父亲和母亲的外周血染色体和母亲皮肤染色体也进行了分析。结果对2个患儿与双亲的STR结果进行比较,显示2个患儿的额外21号染色体都来自母亲。双亲的STR检测中仅发现有2个微卫星标志物,外周血淋巴细胞染色体也均为正常。但母亲皮肤成纤维细胞检测到21-三体的细胞存在,占4%。结论母亲是21三体细胞/正常细胞的嵌合体,推测母亲生殖细胞中存在21三体细胞与正常细胞的嵌合,这可能是导致连续2次孕育21-三体患儿的原因。     

亲子鉴定中检出21三体综合征一例

我们在亲子鉴定案例中检出1例21三体综合征(Down’s syndrome)，其3个位于21号染色体的短串联重复序列(short tandem repeat,STR)基因座图谱均表现为3个峰(或3条带)．现报道如下。     

天津地区D21S1411和D21S1413 2个STR基因座遗传多态性的研究

目的研究天津地区D21S1411和D21S14132个STR基因座的遗传多态性,探讨其在唐氏综合征基因诊断及产前基因诊断应用的可行性。方法随机选择301例天津地区无亲缘关系的汉族个体及313例染色体核型分析正常的胎儿样本,盐析法提取DNA,聚合酶链式反应扩增,非变形聚丙烯酰胺凝胶电泳,硝酸银染色,凝胶图像分析管理系统分析扩增产物。结果D21S1411基因座共发现9种等位基因、45种基因型;D21S1413基因座共发现7种等位基因、28种基因型。外周血样本D21S1411基因座的PIC、DP、PE和Ho分别为0．85、0．967、0．483和73．4％,D21S1413基因座的PIC、DP、PE和Ho分别为n83、0．949、0.719和86．20k;胎儿样本D21S1411基因座的PIC、DP、PE和H0分别为0．80、n927、0．494和78．5％,D21S1413基因座的PIC、DP、PE和Ho分别为0．76、0．915、0．808和87．2％。结论D21S1411和D21S14132个STR基因座基因杂合度高、具有高鉴别力,是21号染色体上理想的遗传标记,可用于DS的基因诊断及产前基因诊断。     

STR新位点产前诊断21、18、13三体综合征

目的短串联重复新位点D13S252、D13S305、D13S628、D13S325,D18S390、D18S819、D18S978、D21S1409、D21S1435在产筛高危孕妇中产前诊断21、18、13三体。方法选择产前血清学筛查高危和或胎儿B超异常100例孕妇羊水和脐血样本为研究对象,包含上述位点的单管多重体系检测21、18、13三体,PCR产物测序检测,Gene MapperID3.2软件分析处理。计算体系中各位点杂合度和多态信息含量。结果 97例扩增,检测出25例染色体非整倍体,包括18例21-三体,6例18-三体,1例13-三体,和72例正常二体,3例扩增失败。所有结果与染色体核型分析相符。体系中各STR位点的等位基因数4～14个,H为0.61～0.88,PIC为0.556～0.870。新位点的PIC为0.575～0.793,均0.5。21号染色体联合使用4个以上STR位点,18号染色体5个以上位点检出率才能达100%。结论上述STR新位点杂合度和多态信息含量高,可用于21、18、13三体产前诊断。     

应用STR判断唐氏综合征额外21号染色体来源

目的用短串联重复序列(short tandem repeat,STR)的多态性诊断唐氏综合征(Down syndrome,DS)患者中额外21号染色体来源.方法选择21号染色体上6个具有高度多态性的STR位点,应用PCR技术,对10个DS家系个体进行基因的检测、分析,判断DS患儿额外21号染色体来源.结果在10个已知的DS家系的分析中,未发现这6个STR位点有突变基因出现,遗传方式符合孟德尔常染色体共显性遗传规律;分析10例唐氏综合征患者体内额外的21号染色体的双亲来源,其中9例为母源性不分离,77.8%发生于减数分裂I,22.2%发生于减数分裂Ⅱ;1例来自父源性第1次减数分裂不分离.结论应用PCR技术检测这6个STR位点的基因状况可以确定DS患儿中额外21号染色体来源.该项技术对于唐氏综合征发生的病因学研究具有一定的实用价值.     

牡丹江地区汉族群体6个STR基因座的遗传多态性研究

目的 调查牡丹江地区汉族群体6个基因座的基因多态性。方法 应用扩增片段长度多态性（Amp-FLP）分型技术，检测牡丹江地区100名无血缘关系汉族个体CSFlPO，TPOX，TH01， D16S539，D7S820，D13S317 6个基因座等位基因频率和基因型分布。结果 经χ2检验表明6个STR基因座基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡；6个基因座的总偶合率为1.98618E-06，总个体识别率达1.000，三联体累计非父排除率OCE=0.9878，二联体累计非父排除率0.9160。结论 6个基因座在牡丹江地区汉族群体中有较高的非父排除率和个人识别机率，可应用于法医学亲子鉴定和个体识别。牡丹江地区的汉族与朝鲜族基因频率相比较，TPOX、TH01和D16S539基因座有显著性检差别，CSFlPO、D7S820和D13S317基因座无显著性差别。     

3个STR基因多态性与男性身高的关系

目的探讨DYS458、DYS391、DYS392多态性与畲族健康男性身高之间的关系。方法调查长期居住在福建的畲族健康男性152例,测量其身高。应用AmpFlSTR~ Yfiler~TM荧光标记复合扩增系统及自动测序法,对152例研究对象进行DYS458、DYS391、DYS392的等位基因分型。结果方差分析结果显示,畲族成年男性DYS458各等位基因之间的身高差异有统计学意义(0.05),DYS391、DYS392各等位基因之间的身高差异无统计学意义(0.05)。结论 DYS458可能是影响男性身高增长的基因之一。     

中国人群9号染色体10个STR基因座的遗传多态性及其在法医学中的应用

目的：了解９号染色体１０个ＳＴＲ基因座在中国汉族群体的遗传多态性及其法医学应用价值。方法：无血缘关系的８３份个体样本采自甘肃省白银地区汉族群体。１８个无关汉族家系共１３１份血样采自同一地区。ＰＣＲ扩增９号染色体１０个ＳＴＲ基因座。ＰＣＲ产物由非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析。结果：１０个ＳＴＲ基因座在中国汉族群体均具有遗传多态性。家系调查结果表明,１０个ＳＴＲ基因座在世代传递中遵循孟德尔常染色体共显性遗传规律。结论：为人类群体遗传研究提供了９号染色体１０个ＳＴＲ基因座的中国汉族群体数据。     

中国汉族人群四个STR的多态性及其与IDDM的相关性研究

目的 获得Ｄ１５Ｓ６５７、Ｄ１１Ｓ１３６９、Ｄ６Ｓ２４２０、Ｄ６Ｓ５０３位点在中国成都汉族人群中的群体遗传数据，并研究上述４种短串联重复序列（ｓｈｏｒｔ ｔａｎｄｅｍ ｒｅｐｅａｔｓ，ＳＴＰ）的多态性与胰岛依赖型糖尿病（ｉｎｓｕｌｉｎ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｄｉａｂｅｔｅｓ ｍｅｌｌｉｔｕｓ，ＩＤＤＭ）的关系。方法 应用ＰＣＲ－ｐｏｌｙａｃｒｙｌａｍｉｄｅ ｇｅｌ ｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ（ＰＡ     

浙南地区汉族6个STR基因座的遗传多态性调查

目的研究D6S477、D1S549、D3S1358、D16S539、D8S1179、vWA、的遗传多态性及其法医学应用价值。方法应用聚合酶链式反应(PCR)、聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染显带技术对温州地区汉族147名无关个体的D6S477、DIS549、D3S1358、D16S539、D8S1179、vWA位点进行分型,并检验D6S477、DIS549、D3S1358、D16S539、D8S1179、vWA基因型频率分布是否符合Hardy-Weinberg平衡定律。结果D6S477、D1S549、D3S1358、D16S539、D8S1179、vWA位点分别检出9、7、6、9、9和11个等位基因,29、18、18、20、34和27个基因型;联合检测6个STR基因座,累积Dp值为0.9999997,累积PIC值为0.9998,各基因型分布经χ2检验,P>0.05,符合Hardy-Weinberg平衡定律。结论该研究所得到的等位基因频率数据在法医学个人识别和亲子鉴定中有较高实用价值,适用于浙南地区的汉族人群。     

联合应用PCR-单链构象多态性和短串联重复序列连锁分析方法进行20例苯丙酮尿症产前基因诊断

目的 建立技术简便、准确性高的苯丙酮尿症产前基因诊断方法,探索遗传性疾病的产前基因诊断的临床应用价值.方法 应用聚合酶链反应.单链构象多态性和短串联重复序列连锁分析的方法,对20例经典型苯丙酮尿症再怀孕家系进行了产前基因诊断.结果 经过产后基因诊断和新生儿血苯丙氨酸浓度筛查的验证,取得令人满意的产前诊断结果.结论 联合应用聚合酶链反应.单链构象多态性和短串联重复序列方法是技术简便、准确性高的产前基因诊断方法,具有较高的临床应用价值.     

亲子鉴定中23个STR基因座在河南汉族人群中的突变分析

目的 观察和分析河南地区汉族人群23个短串联重复序列(STR)基因座在亲子鉴定案例中的突变现象,并分析该复合扩增系统在法医物证中的应用价值.方法 收集1051例亲子鉴定案件的2696份样本,采用Chelex-100方法提取样本的基因组DNA,使用的PowerPlex? Fusion System荧光检测试剂盒进行PCR...     

多重PCR联合DHPLC诊断21三体综合征方法的建立

目的初步建立多重PCR联合DHPLC技术检测21-三体综合征的方法。方法针对21号染色体上特异的3个STR位点(D21S1435、D21S1411、D21S11)设计引物,对100例外周血标本(其中25例21三体标本)提取基因组DNA进行多重PCR扩增,得到的PCR产物通过DHPLC仪进行结果分析。结果 DHPLC分析100例标本中21例为21-三体标本,其中20例21-三体标本的诊断结果与染色体核型分析结果一致,DHPLC技术检测21-三体异常灵敏度和特异度分别为80%,98.67%。结论 DHPLC技术诊断外周血标本结果与染色体核型诊断结果具有同一性,DHPLC技术可以对21三体综合症作出快速、较为准确的诊断。     

浙南汉族人群18号染色体上三个STR位点的遗传多态性研究

目的研究浙南汉族人群18号染色体上三个STR位点D18S865、D18S1364和D18S535的遗传多态性分布,获得相应的群体遗传学数据.方法应用聚合酶链式反应(PCR)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)及银染显带技术对浙南地区汉族184名无关个体的D18S865、D18S1364和D18S535位点进行分型.结果D18S865观察到6个等位基因及17种基因型,D18S1364观察到9个等位基因及35种基因型,D18S535观察到8个等位基因及29种基因型,多态性分布都符合Hardy-Weinberg平衡.各基因座的杂合度(H)分别为:0.723、0.848、0.783;多态性信息含量(PIC):0.72、0.81、0.79.结论三个STR基因座具有较高杂合度和多态性信息含量,在遗传学研究和法医学应用中有较高的价值.     

广西壮族D6S477等四个STR基因座的遗传多态性

目的 研究广西壮族人群4个STR（short tandem repeats）基因座：D6S477、D18S865、D19S400、D20S161的遗传多态性。方法 应用PCR扩增结合聚丙烯酰胺凝胶电泳技术分析200名广西壮族无关个体。结果 4个STR基因座平均期望杂合度为0．8442,平均多态信息总量为0．8247,累积个体识别力达0．999994474,累积非父排除率达0．9856。D6S477的等位基因15、D18S865的等位基因10和11、D19S400的等位基因11、D20S161的等位基因18可能是广西壮族群体中相应STR基因座最原始的等位基因。结论 广西壮族的4个STR基因座属高度遗传多态性。     

贵州布依族人群三个STR基因座遗传多态性

目的 调查贵州布依族人群CSF1PO、TPOX和TH01 3个人类短串联重复序列(STR)基因座遗传多态性。 方法 用chelex100提取法对101名布依族无关个体DNA进行提取,聚合酶链反应（PCR）复合扩增,变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)和银染分型,数据统计采用ModifiedPowerstat统计软件。 结果 CSF1PO、TPOX和TH01基因座分别检出 8个、6个和 7个等位基因,基因型为17、15和18种,各基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律（P＞0.05）。CSF1PO、TPOX和TH01基因座杂合率(H)分别为07129、06238和07030;多态信息量(PIC)为0.6934、0.5714和0.6830; 个体识别率(DP)为0.8809、0.7929和0.8523;非父排除率(PPE)为0.5485、0.4204和0.5329。 结论 贵州布依族CSF1PO和TH01两个基因座具有较高的遗传多态性,在群体遗传学和法医学个体识别中有较高的应用价值。