白血病和正常血细胞的一些细胞因子及受体表达的比较研究

目的:研究白血病细胞和正常血细胞的细胞因子及相应受体(R)的表达及其意义。方法:采用逆转录-聚合酶链反应方法检测红白血病细胞系(HEL、K562)、髓系白血病细胞系(HL-60)、单核细胞白血病细胞系(U937)、巨核细胞白血病细胞系(DAMI、MEG-01)、T淋巴瘤细胞系(HUT78)及EB病毒感染的B细胞系(CA)和正常血细胞(CD34⁺造血干细胞、外周血单个核细胞、成熟粒细胞、巨核细胞及血小板)的多种细胞因子及受体的表达。结果:①CD34⁺造血干细胞同时表达IL-1(α、β)、IL-3、IL-6、GM-CSF、G-CSF及相应受体和干细胞因子受体(SCFR)、血小板生成素受体(MPL)基因,在成熟粒细胞仅表达IL-6、IL-6R、G-CSFR、GM-CSF,巨核细胞、血小板仅表达IL-3R、IL-6、IL-6R、MPL。而TGFβ₁、TNFα及相应受体在上述正常血细胞均有持续表达。②HEL、K562、HL-60、U937、DAMI、MEG-01、HUT78及CA可同时表达至少两种以上正调控因子及相应受体,而负调控因子TGFβ₁、TNFα及受体在上述各细胞系均有表达。结论:白血病细胞株细胞存在正性多自泌环节,白血病细胞的正、负自分泌因子失衡与白血病发病有重要关系。     

HLA单倍型异基因骨髓联合外周血干细胞移植治疗MLL-AF4基因阳性合并WT1阳性急性淋巴细胞白血病一例

急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia, ALL)在成人中发病率较低, 且成人ALL缓解率低于儿童ALL缓解率[1]。目前临床ALL最基本的治疗方法仍是化疗, 一般先进行诱导缓解治疗, 从而减轻患者体内白血病细胞的肿瘤负荷, 使其恢复正常的造血功能, 接着通过造血干细胞移植、靶向治疗等消除体内残留的白细胞, 延长患者生存期[2]。近期中国人民解放军联勤保障部队第九四〇医院收治一例MLL-AF4基因阳性合并WT1阳性ALL患者, 经人类白细胞抗原(human leukocyte antigen, HLA)单倍型异基因骨髓联合外周血干细胞移植方案治疗后, 效果显著。由于MLL-AF4基因阳性合并WT1阳性急性淋巴细胞白血病发病率低, 预后较差, 目前关于此类疾病报道较少, 为提高该类疾病的临床及预后认识, 该病例情况报告如下。     

淋巴瘤组织切片CD10全自动免疫组化最佳染色条件初探

<正>CD10又称共同型急性淋巴细胞白血病抗原，表达于上皮和非上皮组织，在粒细胞、未成熟的淋巴细胞及生发中心细胞阳性[1-2]。在病理诊断中，该抗体主要用于一些淋巴瘤和白血病的分型和诊断，如弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lym-phoma, DLBCL)、滤泡性淋巴瘤(follicular lymphoma, FL)、Burkitt淋巴瘤、前驱B淋巴母细胞性淋巴瘤/白血病、     

血液系统肿瘤细胞系中CD34+干细胞特性研究

目的探讨造血系统多种肿瘤细胞系中CD34^＋干细胞是否存在,并对其性质进行研究。方法利用流式细胞检测技术,检测了急性单核细胞白血病细胞THP-1、红白血病细胞MEL、慢性粒细胞白血病细胞K562,急性淋巴细胞白血病细胞MOLT-4,恶性淋巴瘤细胞RAJ1,多发性骨髓瘤细胞RPM18226、SP2／0和树突状细胞肉瘤DCS肿瘤细胞中CD34^＋的肿瘤细胞所占的比例。选取了MOLT-4和K562细胞系,分选出CD34^＋细胞,继续培养,观察CD34^＋细胞比例变化;比较CD34^＋与CD34^＋肿瘤细胞在功能状态、细胞周期、分化状态、耐药性的差异。结果8种不同类型造血系统肿瘤细胞中CD34阳性率依次为2．5％、5．2％、3．1％、2．1％、1．4％、0、0和6．2％。从K562细胞中分选出CD34^＋细胞,继续培养后恢复为原来比例。MOLT-4和K562细胞系中分离出的CD34^＋细胞RNA含量低、细胞处于Gn／G,期的比率较高（81．5％和77．9％）、分化抑制蛋白Id-1表达强阳性／阳性（分化程度低）、多耐药蛋白p-gP高表达（耐药性强）。结论血液系统肿瘤细胞系中有一小部分肿瘤细胞带正常造血干细胞的标记,并且带有这种标记的细胞表现出更为原始的细胞特性,其中包括血液肿瘤细胞干细胞。     

抗菌肽hCAP-18/LL-375’非翻译区的分析

抗菌肽hCAP 18/LL 37在天然免疫中起重要作用,我们以前的工作发现,hCAP 18/LL 37mRNA在人白血病细胞系中广泛表达,但仅少数细胞系可检测到hCAP 18/LL 37蛋白表达。表明其表达调控主要在转录后水平[1] 。5’非翻译区(5’UTR )存在重要的翻译调控元件,如二级结构和上游开放阅读框对真核细胞翻译调控起重要作用[2 ] ,本文检测白血病细胞系中hCAP 18/LL 37基因5’UTR序列,探讨白血病细胞系是否因为5’UTR异常而引起其翻译阻滞。1　材料与方法1 1　细胞培养　人白血病细胞系Raji、NB4、HL 6 0、J6 1及U937均为我室液氮保存,按常…     

一种识别早期髓细胞样和某些淋巴细胞样前体及人类急白血病亚型分类的新的抗髓细胞样单克隆抗体

B_1—3C5是一种新的抗髓细胞样的单克隆抗体,可用于人类急性白血病的亚型分类,并可作为造血系统鉴别的标记。它只限于对某些淋巴细胞样特性(参考下面)的一种非常早期的髓细胞样的鉴别区。所有连锁27种造血细胞系仅与KG_1(急性骨髓性白血病)反应,而与     

SOX11转录因子在不同类型B细胞淋巴瘤中表达的意义

SOX11蛋白是胚胎发育中促进中枢神经系统细胞分化的一种转录因子，可表达于不成熟的神经元和胶质瘤，但在成人正常组织内不表达[1-2]。有学者发现在不同类型的淋巴造血系统肿瘤内有SOX11的表达，并主要表达在套细胞淋巴瘤(MCL)的细胞核上[3]，可能对MCL的诊断和预后有一定辅助价值。我们收集了淋巴母细胞性淋巴瘤和其他几种不同类型的成熟B细胞淋巴瘤，观察SOX11在不同类型淋巴瘤中的表达情况并探讨其意义。     

Met-tRNAiMet载体蛋白在急性髓系白血病(AML)中的表达及功能

目的探讨Met-tRNAi~(Met)载体蛋白eIF2A、eIF2D和MCTS1在正常造血干细胞(HSCs)和急性髓系白血病(AML)细胞中的表达,并研究上述蛋白对AML细胞增殖的影响。方法利用公共测序数据集分析Met-tRNAi~(Met)载体蛋白在小鼠HSCs分化不同阶段中的表达;利用单细胞转录组测序数据集分析Met-tRNAi~(Met)载体蛋白在人HSCs分化不同阶段中的表达;利用公共测序数据集分析Met-tRNAi~(Met)载体蛋白在健康人和AML患者骨髓细胞中的表达。在人急性髓细胞样白血病细胞系MOLM13中利用慢病毒传导分别抑制eIF2A或eIF2D的内源表达,检测细胞的增殖和周期变化。利用salubrinal (10μmol/L)处理和血清饥饿的方式处理白血病细胞系使其进入应激状态,检测eIF2A和eIF2D的表达改变。结果 eIF2A和eIF2D在造血干祖细胞中的表达显著高于成熟血液细胞,并且eIF2A和eIF2D在AML患者中表达高于健康人。与之相反,MCTS1在正常造血分化过程和AML细胞中均未见表达差异。抑制内源eIF2A或eIF2D的表达后,MOLM13细胞的增殖能力受到显著抑制(P0.001),且细胞周期阻滞在G_2/M期(P0.001)。当MOLM13受到salubrinal或血清饥饿处理后,eIF2A和eIF2D的表达显著增加。结论 eIF2A和eIF2D通过促进细胞周期的正常进行调控白血病细胞的增殖。     

流式细胞术在抗原异常表达淋巴瘤/白血病诊断中的应用

目的 探讨流式细胞免疫分型在抗原异常表达淋巴瘤诊断及鉴别诊断中的作用。方法 应用流式细胞术对伴有抗原异常表达的淋巴瘤3例,B淋巴细胞性白血病8例,T淋巴细胞性白血病1例及伴有淋巴细胞分化抗原表达的急性非淋巴细胞白血病17例,急性粒细胞白血病累及淋巴结1例的免疫表型进行回顾性分析,每例均作胞质CD3ε、CD79a、髓过氧化物酶(MP0)的En Vision两步法染色。结果 11例B细胞淋巴瘤／白血病胞质CD79a阳性,胞质CD3ε及MP0阴性,其中5例伴CD5表达,2例同时伴CD5及1-2项髓系分化抗原表达;1例T淋巴细胞白血病胞质CD3ε阳性,胞质CD79a及MP0阴性,伴CD13、CD33表达;18例急性非淋巴细胞白血病(包括1例急性粒细胞白血病累及淋巴结)胞质髓过氧化物酶(MP0)均阳性,胞质CD3ε及C1979a均阴性,其中8例(包括1例急性粒细胞白血病累及淋巴结)伴T细胞分化抗原表达,8例伴B细胞分化抗原表达,2例同时伴T细胞及B细胞分化抗原表达。结论流式细胞免疫分型不仅能发现淋巴瘤／白血病抗原异常的表达,而且可通过表面免疫标记及胞质CD3s、CD79a、MP0的表达来确定抗原异常表达淋巴瘤／白血病的细胞来源,对抗原异常表达淋巴瘤／白血病的诊断及鉴别诊断具有十分重要价值。     

转录因子PU.1在造血分化中的作用

PU 1是Ets转录因子家族成员 ,主要在造血系统如髓细胞和B淋巴细胞中表达 ,调节大量髓系基因的转录从而调节造血系统的分化 ,近期研究发现其功能的阻断与急性髓细胞性白血病 (acutemyeloidleukemia ,AML)的发生有关。     

病毒性L6565白血病细胞克隆株的建立及其特性研究进展

Ｔ638和Ｌ6565模型是目前国内仅有的两株ＲＮＡ病毒诱发的白血病 ,均属于我国天津 (Ｔ) -上海 (Ｓ) -遵义 (Ｚ)小鼠白血病系统之内[1 ,2 ] 。近年来未见Ｔ638白血病研究的进一步报道 ,情况不详。Ｌ6565病毒性淋巴细胞白血病是由程立等于 1 965年建立的瘤株[3～ 6] 。 1 986年张雷等[7] 应用Ｌ6565白血病小鼠外周血液无细胞提取液感染ＮＩＨ/3Ｔ3细胞 ,在体外建成了Ｌ6565-Ｂ1 细胞系 ,惜已失传。最近 ,殷莲华等[8] 将Ｌ6565白血病小鼠脾脏在灭菌条件下制成细胞悬液后 ,用ＲＰＭＩ 1 640液和 1 0 %小牛血清中培养 2 0代后 ,再用有限稀释法置…     

Sirt1去乙酰化酶抑制剂诱导成人白血病细胞系MT2生长阻滞及凋亡

目的:研究Sirtuin1(Sirt1)去乙酰化酶抑制剂对成人T细胞白血病细胞系MT2增殖及存活的影响。方法:采用RT-PCR方法,比较了成人白血病细胞系MT2与其他两种白血病细胞系(Jurkat,MOLT-4)中Sirt1 mRNA表达水平;通过Sirt1抑制剂尼克酰胺(Nicotinamide)处理MT2细胞后,观察其细胞形态学的变化,并采用MTT、流式细胞术等方法检测Nico-tinamide对MT2细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响。结果:成人白血病细胞系MT2中Sirt1表达水平明显高于Jurkat细胞系(P<0.05),而与MOLT-4细胞系无明显差异;抑制Sirt1的去乙酰化酶活性能明显抑制MT2细胞的增殖,引起细胞G2/M期阻滞,诱导细胞凋亡;镜下观察到细胞膜皱缩、卷曲及破裂等凋亡样形态改变。结论:抑制Sirt1去乙酰化酶活性可能是治疗成人T细胞白血病的可行途径之一。     

CD56阳性的大B细胞性淋巴瘤

CD56(NCAM),是一种神经黏附分子,正常表达于自然杀伤细胞(NK细胞)、部分T淋巴细胞、神经内分泌细胞和各种其它上皮细胞,在一些淋巴造血系统肿瘤如浆细胞性骨髓瘤、急性髓性白血病中也表达。在B细胞性肿瘤中除了50%微绒毛性B细胞性淋巴瘤表达CD56,其他均罕见表达。作者报道了20例CD56阳性的大B细胞性淋巴瘤,19例进行了流式细胞仪(FC)分析,其中5例同时进行了免疫组化检测,1例仅行免疫组化检测。20例中男13例,女7例(男女之比为1∶9),年龄23~84岁(平均60岁)。发生于淋巴结11例、腮腺2例、脑或脑脊液2例、乳腺、肺、回肠、结外腹腔内肿块…     

初发急性髓性白血病患者外周血中高表达TAL1基因及其意义

目的:分析调控造血分化的重要转录因子TAL1在急性髓性白血病(AML)细胞株及原代AML细胞中的表达特点。方法:利用real-time PCR法分别检测47例初发急性髓性白血病患者外周血单个核细胞以及急性白血病细胞株(Jurkat、CCRF-CEM、HL-60和NB4细胞株)中TAL1 mRNA的水平,并以12例健康志愿者外周血样本作为对照组。结果:TAL1 mRNA在AML细胞株(HL-60和NB4)、T细胞急性淋巴细胞白血病(T-ALL)细胞株(Jurkat和CCRF-CEM)和原代AML细胞中的水平均显著高于健康对照组(P0.05)。各AML亚型中TAL1的mRNA表达水平均较对照组显著升高,并以AML-M1和AML-M5 2个亚型升高最为明显(P0.05)。结论:AML细胞中TAL1异常高表达可能与其影响粒系的分化发育有关,其能否作为AML发病相关分子标志物有待进一步研究。     

急性白血病患者血清Th1细胞和Th2细胞部分相关细胞因子水平变化

正白血病是一种造血干/祖细胞增殖并伴有分化受阻的恶性疾病[1]。虽然联合开展化疗、造血干细胞移植及靶向治疗使白血病的缓解率已明显提高,但治疗后如何清除残留白血病细胞、防止复发的策略至目前仍无显著的进展。免疫治疗是目前已知的有望消灭恶性肿瘤细胞的有效手段。细胞因子介导的细胞免疫是机体抗肿瘤的重要方式,研究显示,急性淋巴细胞白血病患儿1型辅助性T细胞(type 1 T helper,Th1)细胞群减少、Th2细胞群增加,导致Th1     

白血病细胞系K562分化模型的建立及不同分化时解偶联蛋白2表达的变化

解偶联蛋白2(uncoupling protein2,UCP2)属于解偶联蛋白家族成员,参与机体的多种病理生理过程。白血病特征之一是细胞分化受阻,机制不清。应用氯化血红素(hemin)诱导白血病细胞系K562,联苯胺(Benzide)染色表明,细胞向红系分化;应用佛波酯(PMA)诱导白血病细胞系K562,CD41、CD51和CD61mRNA表达明显增高,表明细胞向巨核系分化。应用RT-Q-PCR及Westernblot检测,K562向红系分化时UCP2表达增高,向巨核系分化时UCP2表达降低,提示UCP2可能在白血病细胞分化过程中发挥作用。     

浆膜腔积液中的淋巴造血组织肿瘤细胞病理诊断分析

目的 探讨用细胞病理方法诊断浆膜腔积液中的淋巴造血组织肿瘤的可行性和准确性,避免漏诊和误诊,评估用细胞块切片进行免疫细胞化学染色的作用.方法 收集通过组织活检证实的伴发浆膜腔积液的淋巴造血组织肿瘤33例,对其临床特点、细胞形态、免疫表型特征等进行分析,另外1例结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤进行EBER原位杂交检测,3例T淋巴母细胞白血病/淋巴瘤、2例弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)和2例伯基特淋巴瘤进行了基因重排分析.结果 累及浆膜腔的33例淋巴造血组织肿瘤包括T淋巴母细胞白血病/淋巴瘤12例;成熟B细胞肿瘤16例,其中DLBCL 9例,伯基特淋巴瘤2例,浆细胞骨髓瘤2例,慢性淋巴细胞白血病/小B细胞淋巴瘤2例,套细胞淋巴瘤1例;成熟T细胞和NK细胞肿瘤3例,其中血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤、结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤、T细胞幼淋巴细胞性白血病各1例;粒细胞肉瘤和肥大细胞肉瘤各1例.8例DLBCL、2例浆细胞骨髓瘤、慢性淋巴细胞白血病/小B细胞淋巴瘤、1例套细胞淋巴瘤、T淋巴母细胞白血病/淋巴瘤、血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤、肥大细胞肉瘤共16例为复发病例,其余17例均以浆膜腔积液为首发表现并由细胞病理初诊.所有病例细胞病理学诊断均与组织病理学诊断结果相符.结论 结合临床特点、细胞形态、免疫表型、原位杂交和基因重排等检测,用细胞病理方法可以对浆膜腔积液中的淋巴造血组织肿瘤,特别是复发病例进行明确诊断和鉴别诊断.     

胚胎发育相关基因(EDAG)的研究进展

胚胎发育相关基因(EDAG)是新近发现的基因,主要表达于人类造血系统细胞中,可能参与调控造血细胞的增殖、分化。将EDAG稳定表达于小鼠成纤维细胞系NIH3T3中,可导致NIH3T3发生恶性改变。白血病细胞系中EDAG高表达,可能与白血病细胞未分化状态的维持有关。另外还发现,EDAG的表达可以提高NF-kB的转录活性和DNA结合活性,推测NF-_kB可能是EDAG发挥调控功能的途径之一。     

白血病中Wilms瘤基因WT1的突变

鉴于组织特异性Wilms瘤基因WT1在急性白血病中的异常表达及其负反馈抑制功能,作者应用单链构象多态性(SSCP)技术分析了36份急性白血病标本WT1突变状况,并分析其在正常骨髓和     

急性B或T淋巴母细胞性白血病/淋巴瘤及伯基特淋巴瘤的转录因子表达谱:PAX5可作为前体B细胞的免疫染色标志物

多数造血系统恶性肿瘤主要依据其免疫表型进行细胞谱系分类,但是一些淋巴瘤和白血病病例所表达的膜表面或胞质标志物可能与其细胞谱系不一致,因而导致诊断困难以及影响治疗方案的选择.未成熟恶性淋巴瘤如急性B或T淋巴母细胞性白血病/淋巴瘤(B或T-ALL)的谱系鉴定主要依据流式细胞检测分析结果.然而,一些病例由于标本量不足而不能采用流式细胞检测,因此其诊断和谱系鉴定需要免疫组织化学评价.关于在石蜡包埋组织中应用免疫组织化学方法进行B或T-ALL谱系鉴定的研究尚未广泛进行.