食道通结方对食管癌细胞株TE-1增殖和凋亡的影响

目的观察具有理气化痰功效的食道通结方对食管癌细胞株增殖和凋亡的影响。方法利用SD大鼠制备食道通结方含药血清,以食管癌TE-1细胞株为观察对象,用MTT法筛选合适的含药血清浓度;再用含药血清、顺铂和含药血清+顺铂分别作用于TE-1细胞株。采用MTT检测各组肿瘤细胞的生长情况,流式细胞仪检测各组细胞周期及细胞凋亡情况,Western印迹法检测各组凋亡相关蛋白(p-Akt、Akt、P53、Bcl-2、Bax、Caspase3)的表达。结果①确定20%的含药血清为最佳含药血清浓度。②含药血清组、顺铂组和含药血清+顺铂组细胞增殖抑制率均随干预时间的延长(0 h,12 h,24 h,48 h)而增加,48 h时的细胞增殖抑制率最高,分别为30.9%、35.4%和50.6%,组间差异有统计学意义(P0.01)。③与对照组比较,顺铂组和含药血清+顺铂组G1期细胞比例增高(P0.01),含药血清组和含药血清+顺铂组G2期细胞比例降低(P0.05);含药血清+顺铂组G1期细胞比例高于顺铂组和含药血清组,差异有统计学意义(P0.01)。④12 h、24 h组内比较,各组细胞凋亡指数差异均有统计学意义(P0.01);与对照组各观察时点比较,顺铂组、含药血清组和含药血清+顺铂组细胞凋亡指数均明显增加(P0.01);顺铂组、含药血清+顺铂组各观察时点细胞凋亡指数均高于含药血清组(P0.01),含药血清+顺铂组各观察时点细胞凋亡指数高于顺铂组(P0.01)。⑤与对照组比较,顺铂组、含药血清组和含药血清+顺铂组中p-Akt、Bcl-2表达明显下降(P0.01),P53、Bax、Caspase3表达显著增加(P0.01)。结论食道通结方含药血清对食管癌TE-1细胞株的增殖和生长有一定的抑制作用,能够促进细胞凋亡,与顺铂联合后具有较为明显的协同作用。     

启膈通噎汤配合放化疗治疗中晚期食管癌疗效观察

1994年3月～1998年3月,采用自拟启膈通噎汤配合放化疗治疗36例中晚期食管癌患者,并与同期采用放化疗治疗31例作对照,疗效满意,现总结如下.     

培正散结通膈汤联合TP方案治疗中晚期食管癌临床观察

目的观察中晚期食管癌患者采用培正散结通膈汤联合TP方案治疗的临床疗效。方法采用随机数字表法将医院2016年4月—2018年2月收治的84例中晚期食管癌患者分为对照组和观察组,各42例。对照组患者给予TP方案治疗,观察组在对照组基础上联合培正散结通隔汤治疗。两组患者均连续治疗9周,观察两组治疗效果、血清癌胚抗原(CEA)水平及化疗期间毒副反应。结果观察组治疗总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P <0. 05);治疗9周后,观察组血清CEA水平低于对照组,且化疗期间毒副反应低于对照组,差异有统计学意义(P <0. 05)。结论中晚期食管癌患者采用培正散结通膈汤联合TP方案治疗效果较好,降低血清CEA水平,减少化疗期间患者毒副反应发生。     

加味四逆散含药血清对大鼠肝星状细胞增殖与凋亡的影响

目的 观察加味四逆散含药血清对大鼠肝星状细胞-T6 (HSC-T6)增殖与凋亡的影响.方法 以不同浓度的加味四逆散含药血清[(加味四逆散低浓度组(含生药量0.78 g/ml)、加味四逆散中浓度组(含生药量1.56 g/ml)、加味四逆散高浓度组(含生药量3.12 g/ml)]作用于体外培养的HSC-T6细胞,作用时间分别为12、24、48 h后,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测各组HSC-T6.采用流式细胞仪和TUNEL法检测对HSC-T6凋亡的影响.结果 ①加味四逆散含药血清作用于大鼠HSC-T6后,细胞增殖受到抑制,呈时间和浓度依赖性,加味四逆散各浓度组与空白对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.01);加味四逆散高浓度组[48 h:(0.399±0.041)％]与鳖甲软肝片组[48 h:(0.429±0.037)％]比较差异有统计学意义(P＜0.05).②流式细胞仪分析结果:与空白对照组比较,加味四逆散各浓度组、复方鳖甲软肝片组与HSC作用12、24、48 h后,细胞凋亡增加.与鳖甲软肝片组[12 h:(8.31±0.30)％,24 h:(16.25±0.25)％,48 h:(27.12±0.39)％]比较,加味四逆散中浓度组[12h: (17.83±0.25)％,24 h:(26.06±0.26)％,48h:(39.30±2.25)％]、加味四逆散高浓度组[12h:(27.15±0.29)％,24h:(38.96±0.51)％,48h:(49.34±0.77) ％]细胞凋亡均增加(P＜0.05).③TUNEL检测,与鳖甲软肝片组[(30.0±3.92) ％]比较,加味四逆散各浓度[低浓度组(25.1±1.48)％、中浓度组(39.30±2.25)％、高浓度组(39.30±2.25)％]药物血清作用48 h后,细胞凋亡率均增加(P＜0.01).结论 加味四逆散含药血清可抑制体外HSC-T6的增殖、促讲其凋亡,以高剂量作用48 h最明显.     

启膈散、沙参麦冬汤、通幽汤和补气运脾汤对人食管癌EC9706细胞增殖及凋亡的影响

目的观察启膈散、沙参麦冬汤、通幽汤、补气运脾汤各证方对人食管癌细胞株EC9706细胞增殖和凋亡的影响作用。方法体外培养人食管癌细胞株EC9706细胞,分别用启膈散、沙参麦冬汤、通幽汤和补气运脾汤处理细胞,倒置显微镜下观察EC9706细胞增殖和形态变化;MTT法检测各证方对EC9706细胞增殖影响的量效关系;TUENL法和荧光显微镜观察各证方诱导EC9706细胞凋亡的作用;Annexin V FITC/PI双标记流式细胞术检测各证方诱导EC9706细胞凋亡率：结果启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤对EC9706细胞增殖的抑制率随药物浓度增加而上升,呈现剂量-效果依赖性关系,在药物浓度为6400μg/ml时,三组抑制率分别为78%、63%、78%。启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤不同程度地诱导细胞发生凋亡,各组诱导细胞的凋亡率依次为：沙参麦冬汤组〉启膈散组〉通幽汤组。结论启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤可不同程度地明显抑制人食管癌细胞株EC9706细胞增殖,补气运脾汤对体外培养细胞增殖的直接抑制作用很弱。启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤均可不同程度诱导人食管癌EC9706细胞凋亡。     

茶多酚对人癌细胞和人体细胞增殖及凋亡的实验研究

目的 选用4种人癌细胞和3种人体正常细胞进行试验，比较茶多酚(TP)对人肝癌细胞Bel—7402等和人体肝细胞CLC增殖周期的影响和诱导凋亡的作用。方法 用MTT法测定TP对人癌细胞和人体正常细胞的细胞毒作用，用流式细胞仪(FCM)观察TP对细胞的周期改变和诱导凋亡作用。结果 TP对人癌细胞Bel—7402，CNEl，KB和H—29的IC50依次为68．2，104．63，119．83和148．61μg／mL；对人体正常细胞CLC，HEK—293和HD—MEC的IC50均＞400μg／mL。150和300μg／mL TP处理Bel-7402细胞12，24和36h，细胞凋亡率分别为13．2％，37．6％，40．7％和17．1％，39．9％，57．7％。表明TP可诱导Bel—7402细胞凋亡，使细胞周期停滞于S—G2／M期，而对CLC细胞无此作用。结论 TP对人癌细胞的细胞毒作用显著高于对人体正常细胞的作用，提示TP对人癌细胞有一定的选择杀伤作用。     

解毒通膈汤联合放疗治疗老年食管癌30例临床观察

目的观察解毒通膈汤联合放疗治疗老年局部晚期食道癌的临床疗效。方法将60例老年局部晚期食管癌患者随机分为治疗组和对照组各30例,均采用6MV-X线做三维适形放疗,治疗组同时口服中药解毒通膈汤。治疗8周后观察对比2组疗效。结果治疗组和对照组总有效率分别为83. 3%和60. 0%,其差异有统计学意义(P 0. 05);治疗组急性放射性食管炎、放射性肺炎和骨髓抑制发生率分别为46. 7%、36. 7%、33. 3%,明显低于对照组发生率分别为73. 3%、63. 3%、60. 0%,其差异有统计学意义(P 0. 05)。结论老年局部晚期食管癌患者采用中药解毒通膈汤联合放疗,临床疗效明显,患者耐受性好,毒副作用减少,值得临床推广。     

加味四君子汤含药血清对B16恶性黑色素瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究加味四君子汤含药血清对B16恶性黑色素瘤细胞增殖和凋亡的影响.方法:应用血清药理学方法给药,37℃5％ CO2的恒温培养箱中培养B16恶性黑色素瘤细胞,收集对数期细胞,终浓度10％的小鼠含药血清,分别作用12,24,48 h.实验分为空白对照组、血清对照组、加味四君子汤含药血清组(高、中、低3个剂量组)、顺铂组,每组含5个样本数.分别应用MTT法、流式细胞仪Annexin V-FITC/PI法检测加味四君子汤含药血清对B16恶性黑色素瘤细胞增殖和凋亡的影响.结果:加味四君子汤含药血清作用12,24,48 h,与同时间段空白对照组和血清对照组相比,以剂量依赖方式抑制Bt6恶性黑色素细胞增殖,中剂量加味四君子汤含药血清组24,48 h抑制率为50.22％,53.81％,且48 h与24 h相比没有显著性变化;与空白对照组和血清对照组相比,中、高剂量加味四君子汤含药血清组、顺铂组的凋亡率分别为(19.70±0.98)％,(25.21±1.03)％,(21.31±1.00)％,显著促进B16恶性黑色素瘤细胞的凋亡(P＜0.05),但顺铂组凋亡率高于中剂量中药组,低于高剂量中药组.结论:加味四君子汤含药血清抑制B16恶性黑色素瘤细胞增殖;促进B16恶性黑色素瘤细胞的凋亡,这可能是加味四君子汤抗恶性黑色素瘤的机制之一.     

散结通膈汤联合常规化疗方案治疗中晚期食管癌(痰气互阻)临床研究

目的:观察散结通膈汤联合常规化疗方案治疗中晚期痰气互阻型食管癌的临床效果.方法:选取2018年8月～2020年8月于本院就诊接受化疗方案的80例中晚期痰气互阻型食管癌患者为研究对象,根据随机数表法分为对照组(40例)、观察组(40例),对照组给予常规化疗方案治疗,观察组在对照组的基础上联合散结通膈汤治疗,以21d为一个...     

汉黄芩素对食管癌KYSE150细胞周期和凋亡的影响

目的:观察汉黄芩素对食管癌KYSE150细胞生长的影响及其机制,为汉黄芩素应用于临床抗肿瘤提供理论依据。方法:不同浓度的汉黄芩素作用于KYSE150细胞后,MTS法检测细胞生长活性,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡。结果:KYSE150细胞的生长受汉黄芩素的抑制并且呈浓度依赖性,IC50=(68. 59±3. 43)μM;细胞周期检测结果表明,汉黄芩素可阻滞KYSE150细胞周期进展,将细胞周期阻滞在G0/G1期;细胞凋亡实验表明汉黄芩素可以诱导细胞凋亡。结论:汉黄芩素具有抗食管癌KYSE150细胞生长的作用,其机制为抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡。     

荔枝核含药血清对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨荔枝核含药血清对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用血清药理学方法制备荔枝核、环磷酰胺含药血清以及对照血清,作用于HepG2细胞,MTT法检测各种血清对HepG2细胞增殖的影响,Hochest33258荧光染色观察细胞凋亡,流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率。结果:荔枝核含药血清处理HepG2细胞后,呈剂量依赖性抑制肿瘤细胞增殖活性;并出现细胞核浓染与核碎裂;流式细胞仪检测HepG2细胞凋亡率明显高于对照组。结论:荔枝核含药血清能抑制人肝癌HepG2细胞增殖,其机制可能与诱导HepG2细胞凋亡有关。     

胃康宁含药血清对胃癌MGC-803细胞增殖的抑制作用及机理研究

目的:观察胃康宁含药血清对胃癌细胞的增殖影响,从细胞凋亡角度探讨作用机理。方法:制备胃康宁含药血清培养胃癌细胞,采用MTT法检测细胞增殖,Hoechst DNA荧光染色法检测细胞凋亡,并计数凋亡率。结果:胃康宁各剂量组在初期均有抑制细胞增殖的作用,而高、中剂量抑制时间更持久。胃康宁高剂量组具有诱导细胞凋亡的作用。结论:胃康宁含药血清可明显抑制细胞增殖,其机理除与诱导细胞凋亡有关,还与细胞周期受阻也有关系。     

地黄管食通口服液诱导放疗后大鼠食管癌组织细胞凋亡及对β-catenin和c-myc表达的影响

目的：探讨地黄管食通口服液对食管癌放疗后大鼠的作用机制。方法：皮下注射（5mg／kg）采用甲基戊基亚硝胺（MANA）诱发大鼠食管癌模型，大鼠食管局部钴印照射后，分别给予相应的受试药物5周，解剖大鼠食管组织，原位末端标记法（TUNEL）检测地黄管食通口服液对放疗后食管癌细胞凋亡的影响，免疫组化SABC法检测地黄管食通口服液对放疗后食管癌β-catenin和myc基因蛋白表达的影响。结果：药物治疗各组均可见较多的细胞凋亡，其中地黄管食通高剂量组最为明显，与放疗组及阳性对照组比较有显著性差异（P〈0．05）；地黄管食通治疗各组β—catenin和c—myc基因表达阳性率及强度均有所下降，与放疗组比较有显著性差异（P〈0．05）。结论：地黄管食通口服液抗食管癌放疗后复发机制可能在于抑制β—catenin异常表达，从而抑制靶基因c—myc的表达，促进食管癌细胞凋亡。     

地黄管食通口服液对放疗后食管癌大鼠细胞凋亡与相关调控基因的研究

目的：探讨以养阴润燥、解毒散结组方的地黄管食通口服液对食管癌放疗后大鼠的作用机制。方法：采用甲基戊基亚硝胺（MANA）皮下注射（5mg/kg）诱发的大鼠食管癌模型,大鼠食管局部钴60照射,用透射电镜和细胞凋亡原位末端标记法（TUNEL）观察地黄管食通口服液对放疗后食管癌细胞凋亡的影响,同时用免疫组化SABC法检测与凋亡相关的调控基因P53和Bcl-2基因蛋白的表达水平。结果：药物治疗各组均可见较多的细胞凋亡,其中地黄管食通高剂量组最为明显,与放疗组及阳性对照组比较有显著性意义（P〈0.05）;管食通治疗各组P53和Bcl-2基因表达阳性率及强度均有所下降,与放疗组比较有显著意义（P〈0.05）。结论：地黄管食通口服液抗食管癌放疗后复发机制可能在于抑制P53基因突变,下调Bcl-2,启动或招动细胞进入细胞周期,引发细胞周期特异性凋亡而实现的。     

启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤对人食管癌EC9706细胞Caspase-3介导的细胞凋亡信号转导的影响

目的:研究启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤对人食管癌EC9706细胞增殖影响,并从Caspase-3介导的细胞凋亡信号转导通路探讨三方作用机制。方法:体外培养食管鳞癌细胞株EC9706细胞,分别加入启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤提取液培养处理细胞,通过MTT染色观察细胞增殖变化,通过Western blot法检测Caspase-3介导的细胞凋亡信号转导通路蛋白表达。结果:启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤的IC50值分别是1462、1232、2875μg/m L,均可促进Caspase-3蛋白表达而诱导细胞凋亡,而Cyt.C蛋白表达较弱;启膈散和沙参麦冬汤对FADD、Fas、TNFR1和DR5蛋白表达有不同程度地影响。结论:三方可通过激活Caspase-3诱导细胞凋亡,其中启膈散主要通过非依赖FADD死亡受体途径,沙参麦冬汤主要通过依赖FADD死亡受体途径,通幽汤可能通过其他凋亡蛋白参与的上游信号途径而激活Caspase-3致细胞凋亡。     

愈银方含药血清对角质形成细胞增殖与凋亡的影响

目的：探讨愈银方对角质形成细胞株COLO-16增殖及凋亡的调节作用。方法：利用体外细胞培养技术、MTT法、流式细胞仪、荧光显微镜技术检测愈银方的大鼠含药血清对COLO-16细胞株增殖及凋亡的影响。结果：愈银方含药血清对COLO-16细胞株增殖的抑制作用与浓度呈一定的关系，浓度越高则抑制作用越强。含药血清的浓度为10%；20%；设相应的正常大鼠血清浓度为对照组，培养48h后，COLO-16细胞的凋亡率分别为12．93%、19．80%，正常对照组为3．71％、10．96%，两者相比差异显著。结论：抑制COLO-16细胞株的增殖及诱导其凋亡可能是愈银方治疗银屑病的机理之一。     

益肺方含药血清对肺腺癌A549细胞增殖的影响

目的:探究益肺方含药血清对肺腺癌A549细胞增殖的影响。方法选取15只大耳兔分别给予高剂量益肺方、低剂量益肺方和生理盐水连续灌胃14天处理,采心脏血液并取其血清,并在体外培养的肺癌A549细胞株中加入上述益肺方含药血清。使用MTT法检测肺腺癌A549细胞增殖能力,使用Annexin V/PI法检测细胞凋亡、使用Westen Bolt和RT-PCR定性、半定量检测Bcl-2、Bax、P-mTOR、P-AMPK、caspase-3、caspase-9的表达量。结果MTT比色结果显示,相比空白对照组,低剂量组和高剂量组细胞抑制率显著升高(P0.01),相比低剂量组,高剂量组的抑制率显著提高(P0.01);相比空白组,低剂量组和高剂量组含药血清caspase-3、caspase-9表达量显著增加,相比低剂量组,高剂量组caspase-3、caspase-9表达量显著增加(P0.01);相比空白组,低剂量组和高剂量组Bcl-2、P-mTOR表达量显著降低,Bax、P-AMPK表达量显著增加且两者有显著性差异(P0.01),相比低剂量组,高剂量组Bcl-2、P-mTOR表达量显著降低,Bax、P-AMPK表达量显著增加且两者有显著性差异(P0.01)。结论:益肺方含药血清可以抑制肺腺癌A549细胞增殖,同时可以通过调控AMPK/mTRO信号通路促进结直肠癌细胞的凋亡。     

中药启膈方诱导K562凋亡的实验研究

目的：发掘研究中药古方，探讨启膈Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号方剂的抗肿瘤机理，扩大古方的应用范围，为临床应用提供实验依据。方法：运用MTT法、Giemsa染色法、ELISA法观察启膈Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号方剂对肿瘤细胞增殖和凋亡的影响。结果：启膈Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号方均能抑制K562细胞和促进其凋亡。结论：抑制肿瘤细胞增殖和促进肿瘤细胞的凋亡是启膈Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号方剂的抗肿瘤机理之一。     

豆根管食通口服液对食管癌模型大鼠细胞凋亡及免疫逃逸的影响

目的 观察豆根管食通口服液对食管癌模型大鼠细胞凋亡及免疫逃逸的影响,从分子生物学角度分析其作用机制.方法 健康Wistar大鼠随机选择15只为空白组,其余大鼠均腹部皮下注射甲基戊基亚硝胺5mg/kg建立食管癌模型大鼠,将造模成功的75只大鼠随机分为模型组、高剂量组、中剂量组、低剂量组、替加氟组各15只,低、中、高剂量组分别按5g/kg、10g/kg、15g/kg给予豆根管食通口服液,空白组、模型组给等予容积生理盐水,替加氟组给予替加氟片20mg/kg,各组均于造模成功24h后灌胃给药,每日1次,连续4周.末次给药24h后取瘤检测,原位末端标记法检测细胞凋亡,免疫组织化学法检测Fas、FasL蛋白表达.结果 高、中、低剂量组及替加氟组食管癌细胞的凋亡指数与空白组、模型组比较差异均有统计学意义(P＜0.05),并且高剂量组明显优于替加氟组、低剂量组(P＜0.05).模型组Fas蛋白表达阳性率低于空白组、FasL蛋白表达高于空白组(P＜0.05或P＜0.01);各治疗组Fas蛋白表达阳性率均高于模型组(P＜0.05),高剂量组Fas蛋白表达阳性率高于替加氟组和低剂量组(P＜0.05);高、中、低剂量组FasL蛋白表达阳性率明显低于模型组(P＜0.05或P＜0.01).结论 豆根管食通口服液能促进模型大鼠食管癌细胞凋亡,其作用机制可能与其提高Fas表达、降低FasL表达有关,并且存在一定的量效关系,高剂量的豆根管食通口服液作用优于替加氟片.