Flk-1在早产儿视网膜病大鼠模型中的表达和作用

目的：探讨血管内皮生长因子受体-2（flk-1）的表达与早产儿视网膜病（ROP）视网膜血管变化的关系。 方法： 86例新生未成熟SD大鼠随机分为高氧组和对照组，各组再随机分为1、3、7及14 d 4小组。高氧组吸入75%的氧（7 d后置入空气中饲养）建立ROP大鼠模型，对照组则在空气中饲养。取视网膜组织制作标本，HE染色及CD34标记血管内皮细胞观察视网膜血管改变，采用免疫组织化学方法测定flk-1在视网膜的表达。 结果： ①随着天数的增加对照组毛细血管密度指数（RCDI）呈逐渐上升（P<0.01）,7 d时高氧组RCDI最低,停氧7 d(即14 d)时增加（P<0.01）；②7 d时flk-1在对照组视网膜中表达最强，与第1 d和第14 d比较，表达强度均具有显著差异（P<0.05）；高氧组7 d时与对照组比较， flk-1的表达明显减弱，统计学处理具有显著差异（P<0.05）；而高氧组14 d flk-1的表达增强，与对照组比较，差异显著（P<0.05）。 结论： 当未成熟的视网膜处于高氧状态时，flk-1表达减弱，视网膜血管减少；当视网膜处于相对低氧状态时， flk-1表达增强，视网膜血管出现了明显的增生。flk-1在视网膜血管发育和ROP的血管改变过程中起着重要作用。     

高氧对新生鼠肺组织VEGF蛋白表达及肺血管内皮细胞超微结构的影响

目的探讨高浓度氧对新生鼠肺组织血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达及肺血管内皮细胞超微结构影响的动态变化规律。方法建立高浓度氧诱导新生鼠CLD模型,60只新生鼠随机分为实验组和对照组,分别采用免疫组化和透射电镜技术,测定实验组和对照组在生后1d、3d、7d、14d和21dl肺组织内VEGF蛋白表达,同时观察肺血管内皮细胞超微结构变化。结果对照组肺组织VEGF蛋白表达1d主要以传导气道上皮为主,3d以后远端气道上皮表达增加,7d以后肺泡上皮和肺泡间隔明显增多,14d达高峰,以后持续高表达,实验组肺组织VEGF蛋白表达水平7d开始下降,14d以后未见阳性表达。高氧可引起肺血管内皮细胞肿胀、线粒体肿胀和毛细血管基底膜厚薄不均等各种损伤性形态变化,损伤程度随高氧时间延长而加重。结论肺血管的生长是正常肺泡发育重要环节,推测肺组织VEGF蛋白表达下降和肺血管内皮细胞的损伤在高氧诱导CLD肺血管发育障碍中可能发挥重要作用。     

新生小鼠吸入高氧视网膜的血管发育与胶质纤维酸性蛋白表达的变化

目的:研究新生小鼠吸入高氧视网膜病(ROP)过程中胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的变化规律,探讨Müller细胞与血管发育的关系。方法:实验用生后7 d(P7)C57BL/6J小鼠。ROP模型组在75%氧环境中饲养。在P9、P12、P14、P17和P21等不同时间取眼球,分别用ADP酶组织化学染色方法显示视网膜血管发育及免疫组织化学方法标记视网膜GFAP的表达。结果:小鼠视网膜血管生后开始发育,P21基本成熟;吸高氧后从P14开始出现新生血管,在P17~P21达到高峰。模型鼠视网膜Müller细胞从P14起内侧突起开始表达GFAP,到P21已遍布细胞全层。结论:高氧可导致视网膜发育晚期大量血管新生,且与GFAP表达的变化规律相一致,提示Müller细胞与视网膜血管发育关系密切。     

视网膜神经血管发育及其相互影响研究进展

视网膜神经和血管分别按照各自的时间和空间顺序发育。视网膜血管发育可受到各种因素的影响,其中血管内皮生长因子(VEGF)和色素上皮衍生因子(PEDF)是目前发现功能最强的眼内血管新生促进因子和抑制因子,而视网膜中的星形胶质细胞和Müller细胞则可以影响血管的生长发育。视网膜神经和血管的发育过程存在相互联系。     

血管内皮生长因子及其受体在糖尿病小鼠视网膜的表达

目的：观察血管内皮生长因子（Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)及其受体flk-1在糖尿病视网膜细胞的表达,以期阐明VEGF与糖尿病性盲的关系。方法：应用免疫组织化学这及发病组视网膜VEGF和flk-1阳性细胞,并计算单位面积视网膜中神经节细胞VEGF阳性率和flk-1阳性细胞数,结果：发病组视网膜神经节细胞VEGF阳性率和flk-1阳性神经节细胞数从3月龄时开始增多（P＜0．05）,并随着病程延长有上升趋势,VEGF在6月龄后增多更显著,flk-1在8月龄后增加也更为明显。结论：VEGF和flk-1在糖尿病视网膜神经节细胞表达量增加,VEGF通过与flk-1相互作用,不仅使血管内皮细胞增殖,导致视网膜新生网管形成,而且还可能通过改变神经节细胞及Muller细胞膜上的受体数量而对神经节细胞功能活动产生影响。     

高氧对新生大鼠肺血管内皮生长因子及其受体表达的影响

目的研究高浓度氧持续吸入后新生大鼠肺部VEGF及其受体VEGFR1和VEGFR2的表达规律,探讨高氧性BPD肺血管发育异常的损伤机制;方法采用新生Wister大鼠制作BPD模型,免疫组化方法观察实验组和对照组在生后1d、4d、7d、14d、21d肺组织内VEGF、VEGFR1、VEGFR2的合成和分布情况;结果新生鼠肺部VEGF及其受体VEGFR1和VEGFR2表达生后随日龄增长而增加,高氧造成肺泡简化和肺纤维化的病理改变,导致上述血管因子表达减少;结论肺血管的生长是正常肺泡发育重要环节,推测高氧诱导的VEGF信号通路的改变可能是BPD病理改变的重要成因.     

Apelin及其受体和一氧化氮合酶在氧诱导的新生小鼠增生性视网膜病变中表达上调

 目的：通过观察apelin及其受体APJ和一氧化氮合酶（NOS）在氧诱导的新生小鼠增生性视网膜病变中的表达,探讨apelin/APJ和一氧化氮(NO)是否参与了早产儿视网膜病变新生血管的发生。方法：36只7日龄C57BL/6J新生小鼠随机均分为高氧组和对照组。高氧组暴露在75%±2%的氧浓度下5 d后,在正常空气环境下饲养5 d;对照组小鼠在正常氧环境下饲养10 d。两组均在17日龄处死,取左眼眼球做石蜡切片,HE染色计数突破内界膜的血管内皮细胞核数,以判断造模是否成功。实时荧光定量PCR检测右眼视网膜组织apelin和APJ mRNA的表达,免疫荧光组织化学法检测视网膜apelin、APJ、eNOS和iNOS蛋白的表达。结果：高氧组视网膜平均每个切面突破内界膜的血管内皮细胞核数(35.13±10.13)明显高于对照组(0.30±0.21,P<0.01）,说明造模成功。高氧组apelin和APJ mRNA水平显著高于对照组,分别为对照组的32.2倍和17.6倍（均P<0.01）。组织免疫荧光结果显示高氧组apelin和APJ蛋白表达明显强于对照组,并且主要强表达于新生血管周围;高氧组eNOS和iNOS蛋白表达明显强于对照组,但主要强表达于新生血管下方视网膜组织,在突破内界膜的血管内皮细胞核周围未见表达明显增强。结论：Apelin/APJ及NOS可能与氧诱导的新生小鼠增生性视网膜病变新生血管的发生有关。     

丹参促进小鼠冻融卵巢移植早期血管内皮生长因子的表达

目的探讨丹参对小鼠冻融卵巢同种异体移植后的血管化作用及可能机制。方法收集C57BL/6j雌鼠和BALB/c雄鼠杂交的F1代4周龄小鼠卵巢,慢速冻融后移植至B6C2F1代8～12周龄雄鼠的肾被膜下,移植后小鼠按给药不同分为生理盐水组和丹参组,分别于移植后1d(24h)、2d(48h)和7d回收移植物,将冻融以及移植后不同时间段的卵巢组织进行HE染色全卵巢卵泡计数,免疫组织化学及RT-PCR方法检测血管相关蛋白及基因的表达。结果移植卵巢组织各时间段全卵巢卵泡计数及卵泡存活率丹参组均高于生理盐水对照组(P0.05);移植后小鼠血管内皮生长因子(VEGF)的表达有上升趋势,第7天达最高峰,两组之间无显著性差异(P0.05);移植卵巢组织各时间段细胞凋亡指数,丹参组均低于生理盐水对照组(P0.05);移植后48h丹参组VEGF188mRNA和VEGF164mRNA的表达量较对照组高,两组之间有显著性差异(P0.05)。结论小鼠卵巢组织移植后早期阶段丹参能促进卵泡发育,减少卵泡凋亡,可能与提高移植卵巢组织内血管相关基因VEGF(主要是VEGF164mRNA和VEGF188mRNA)的表达而促进移植后早期血管化有关。     

丝胶对糖尿病肾病大鼠肾血管内皮生长因子和色素上皮衍生因子表达的影响

目的:观察彩色蚕茧提取物-丝胶对糖尿病肾病大鼠肾血管内皮生长因子(VEGF)和色素上皮衍生因子(PEDF)表达的影响.方法:雄性SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病肾病模型组、丝胶治疗组、二甲双胍治疗组和丝胶预防组.建立链脲佐菌素致动物模型,以血糖≥16.7mmol/L作为成模标准;丝胶治疗组和二甲双胍组大鼠分别给予丝胶(2.4g·kg-1·d-1,35d)和二甲双胍(55.33mg·kg-1·d-1,35d)灌胃;丝胶预防组大鼠于注射链脲佐菌素前给予丝胶(2.4g·kg-1·d-1)灌胃35d.分别检测各组大鼠的血糖和24h尿蛋白;免疫组织化学显色和免疫印迹法观察肾VEGF和PEDF蛋白的表达.结果:与正常对照组大鼠相比,模型组大鼠的血糖、24h尿蛋白定量和肾VEGF蛋白的表达升高,肾PEDF蛋白的表达降低;丝胶治疗组、丝胶预防组和二甲双胍组大鼠的血糖、24h尿蛋白定量和肾VEGF蛋白的表达低于模型组,肾PEDF蛋白的表达高于模型组,且丝胶治疗组、丝胶预防组与二甲双胍组比较无差别.结论:丝胶可通过上调肾PEDF蛋白、下调肾VEGF蛋白改善糖尿病肾病时肾血管生成的不平衡,发挥对糖尿病肾病大鼠肾的保护和预防作用.     

靶向性抗癌蛋白色素上皮衍生因子在肿瘤中的研究进展

在肿瘤靶向治疗研究中,抗血管生成治疗是近十年来的一个研究热点.目前已有许多血管生成抑制剂应用于临床试验中.色素上皮衍生因子(PEDF)是一个能有效抑制新生血管形成的蛋白,与血管内皮生长因子(VEGF)等共同调控新生血管的发生过程.PEDF表达和抑制肿瘤生长、减少转移、良好的预后相关,对PEDF的深入研究有助于发挥其在肿瘤治疗中的作用.     

菩人丹超微粉对糖尿病大鼠视网膜血管内皮生长因子和色素上皮衍生因子表达的影响

目的 探讨菩人丹超微粉(PRD)对糖尿病大鼠视网膜血管内皮生长因子(VEGF)及色素上皮衍生因子(PEDF)表达的影响.方法 48只Wistar大鼠随机分为4组:正常对照组、糖尿病模型组、PRD组和导升明组,每组12只.糖尿病模型组、PRD组和导升明组大鼠均采用链脲佐菌素连续腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型.模型成功建立...     

Effect of vascular endothelial growth factor on retinal ganglion cells of rats with chronic intraocular hypertension

Aim: To investigate the effect of vascular endothelial growth factor (VEGF) on the expression of pigment epithelium-derived factor (PEDF) in retina and the protective effect of VEGF on retinal ganglion cells (RGCs) of rats with chronic elevated intraocular pressure (EIOP) and it’s potential mechanism. Methods: 30 females Sprague-Dawley rats were randomly divided into three groups: EIOP + VEGF group (A), EIOP + vehicle group (B) and sham operated + VEGF group (C). The EIOP was introduced by obstructing episcleral veins in Group A and Group B. In the Group C, only the bulber conjunctiva was opened without obstructing episcleral veins. Immediately after surgery, rats in the Group A and Group C were intravitreously injected with 2 μL of VEGF. In the Group B, rats were intravitreously treated with 2 μL of normal saline. At 3 and 14 days after injection, animals were sacrificed and the eyes were collected for preparation of frozen sections. Results: After surgery, the IOP increased significantly in the Group A and Group B. There was no significant difference in the IOP at day 3 and day 14 after operation. The PEDF expression in the Group A and Group B was higher than that in the Group C. TUNEL staining showed the apoptotic RGCs markedly reduced after VEGF treatment when compared with rats without treatment. Conclusion: Intravitreal treatment with VEGF may reduce the apoptosis of RGCs in rats with chronic intraocular hypertension.     

色素上皮衍生因子和血管内皮生长因子在糖尿病大鼠肾脏的不平衡表达

目的检测色素上皮衍生因子（PEDF）和血管内皮生长因子（VEGF）在糖尿病大鼠肾脏的表达，探讨其在糖尿病肾病（DN）发生发展中的作用。方法40只雄性Wistar大鼠随机分为：正常对照组（NC）、糖尿病模型组（DM）。4、8周末，检测血糖、糖化血红蛋白、肾重指数、尿白蛋白排泄率，免疫组织化学法检测肾脏PEDF、VEGF的表达。结果4、8周末，DM组大鼠肾脏PEDF的表达较NC组明显减少（P〈0．01）；VEGF的表达较NC组明显增多（P〈0．01）；肾脏PEDF的表达与VEGF明显负相关（r=-0．823，P〈0．01）。结论PEDF和VEGF在肾脏的不平衡表达可能参与了DN的发病。     

Inhibition of platelet-derived growth factor promotes pericyte loss and angiogenesis in ischemic retinopathy

We investigated whether inhibition of platelet-derived growth factor (PDGF) receptor tyrosine kinase activity would affect pericyte viability, vascular endothelial growth factor (VEGF)/vascular endothelial growth factor receptor-2 (VEGFR-2) expression and angiogenesis in a model of retinopathy of prematurity (ROP). ROP was induced in Sprague Dawley rats by exposure to 80% oxygen from postnatal (P) days 0 to 11 (with 3 hours/day in room air), and then room air from P12-18 (angiogenesis period). Shams were neonatal rats in room air from P0-18. STI571, a potent inhibitor of PDGF receptor tyrosine kinase, was administered from P12-18 at 50 or 100 mg/kg/day intraperitoneal (i.p.). Electron microscopy revealed that pericytes in the inner retina of both sham and ROP rats appeared normal; however STI571 induced a selective pericyte and vascular smooth muscle degeneration. Immunolabeling for caspase-3 and alpha-smooth muscle cell actin in consecutive paraffin sections of retinas confirmed that these degenerating cells were apoptotic pericytes. In all groups, VEGF and VEGFR-2 gene expression was located in ganglion cells, the inner nuclear layer, and retinal pigment epithelium. ROP was associated with an increase in both VEGF and VEGFR-2 gene expression and blood vessel profiles in the inner retina compared to sham rats. STI571 at both doses increased VEGF and VEGFR-2 mRNA and exacerbated angiogenesis in ROP rats, and in sham rats at 100 mg/kg/day. In conclusion, PDGF is required for pericyte viability and the subsequent prevention of VEGF/VEGFR-2 overexpression and angiogenesis in ROP.     

血管内皮生长因子与肿瘤坏死因子-α在佐剂关节炎大鼠滑膜中表达

目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在佐剂关节炎(AA)大鼠滑膜组织中的表达及其与关节病理积分的关系。方法:建立AA大鼠模型,常规HE染色,计算关节病理积分,并用免疫组织化学染色检测VEGF和TNF-α蛋白表达。结果:AA组大鼠滑膜VEGF和TNF-α蛋白表达在3周、8周及20周时均明显高于健康对照组(均P<0.01),且二者均与关节病理积分呈显著正相关(均P<0.01),二者之间亦呈显著正相关(均P<0.01)。结论:VEGF和TNF-α在关节炎的形成及发展过程中起重要作用,二者互相作用并影响滑膜新生血管的形成。