抗藻酸盐血清对粘液型铜绿假单胞菌生物被膜杀菌活性的影响

目的研究抗藻酸盐血清与加替沙星的联合作用对粘液型铜绿假单胞菌生物被膜杀菌活性的影响.方法采用MTT方法测定粘液型铜绿假单胞菌生物被膜活菌数,用微量稀释法测定抗生素对其的最低生物被膜清除浓度(MBEC).结果11抗藻酸盐血清与1×MIC、4×MIC和8×MIC加替沙星联用可以使细菌生物被膜中的活菌数从6.63±0.85、6.48±1.12和5.73±1.10 1g(cfu/cm2)显著降低至5.76±0.90、5.02±0.93和4.70±0.621g(cfu/cm2),使加替沙星对铜绿假单胞菌的最低生物被膜清除浓度从8μg/ml降低至4μg/ml.结论抗藻酸盐血清与加替沙星联用后,能够增强抗生素对于生物被膜的杀菌活性.     

抗藻酸盐血清对粘液型铜绿假单胞菌粘附性和生物被膜渗透性的影响

目的研究抗藻酸盐血清对粘液型铜绿假单胞菌粘附性及其生物被膜渗透性的影响.方法采用结晶紫染色法测定粘液型铜绿假单胞菌的粘附性,采用HPLC法测定加替沙星在粘液型铜绿假单胞菌生物被膜的渗透浓度,从而观察抗藻酸盐血清对于粘液型铜绿假单胞菌生物被膜渗透性的影响.结果11抗藻酸盐血清在同8×MIC加替沙星联用的情况下,使细菌对硅胶片粘附性显著降低,硅胶片洗脱液在540nm波长处的光密度值从0.126±0.011降低到0.114±0.010;同时使加替沙星对细菌生物被膜的渗透性增强,4,8和16mg·L-1的加替沙星通过细菌生物被膜的浓度分别从1.210±0.091,2.911±0.112和5.511±0.213mg·L-1显著提高至1.752±0.122、3.908±0.154和7.898±0.321mg·L-1.结论抗藻酸盐血清能够降低粘液型铜绿假单胞菌对于生物医学材料的粘附性,增强抗生素对于生物被膜的渗透能力.     

藻酸盐裂解酶对粘液型铜绿假单胞菌细菌生物被膜的影响

粘液型铜绿假单胞菌分泌的藻酸盐是其形成生物被膜及严重耐药的重要因素.藻酸盐裂解酶可特异分解藻酸盐,因此对治疗粘液型铜绿假单胞菌细菌生物被膜相关感染有一定意义.本文对藻酸盐裂解酶及其作用作了全面简介,并重点阐明近年的研究新进展.     

抗藻酸盐血清对粘液型铜绿假单胞菌生物被膜形态学的影响

目的研究抗藻酸盐血清对粘液型铜绿假单胞菌生物被膜中细菌形态上的影响.方法采用改良的组织培养平板法建立粘液型铜绿假单胞菌生物被膜模型,经不同稀释度的抗藻酸盐血清与不同浓度加替沙星联合应用处理后,以银染色[1]快速鉴定,扫描电镜(scanning electronic microcope,SEM)确认细菌生物被膜形态并采用计算机图像处理系统进行图像分析.结果计算机图像分析系统显示,在加入抗藻酸盐血清后,11稀释度抗藻酸盐血清可以使4×MIC加替沙星作用后生物被膜的平均光密度值从0.82±0.06降低至0.70±0.04;光镜和电镜图像可见粘液样物变稀疏,细菌数减少,形态不甚规则.结论抗藻酸盐血清能够影响粘液型铜绿假单胞菌生物被膜构建和形态,与加替沙星联用后可以使粘液型铜绿假单胞菌生物被膜结构发生不同程度破坏.     

藻酸盐裂解酶对粘液型铜绿假单胞菌生物被膜的影响

细菌生物被膜可导致被膜下细菌不易与抗菌药直接接触,而对抗菌药产生耐药,另外,被膜也阻碍了机体免疫细胞或抗体与细菌的接触,导致 易被清除,从而引起感染长期不愈,反复发作,称为生物被膜相关感染,铜绿假单胞菌所致某些慢性感染,如慢性肺囊性纤维化,常迁延不愈,目前认为与生物被膜有关,铜绿假单胞菌分泌的藻酸盐是生物被膜殂成的重要因素,也是其主要成分,细菌所产生的藻酸 一种线性粘多糖,由6－磷酸甘露糖 为底物,依次经过磷酸甘露糖异构酶,磷酸甘露糖变位酶,甘露糖焦磷酸化酶,甘露糖脱氢酶的作用,最后聚合,乙经而成,藻酸盐裂解酶可通过分解藻酸盐,促进中性粒细胞,巨噬细胞的趋化和吞噬,从而解除生物被膜所致免疫逃逸。抑制铜绿假单胞菌的黏附,阻碍生物被膜的形成;清除生物被膜,促进抗菌药渗透,因此,藻酸盐裂解酶与抗菌药联合应用有较好的临床应用前景。     

抗藻酸盐血清对粘液型铜绿假单胞菌粘附性和生物被膜渗透性的影响

目的研究抗藻酸盐血清对粘液型铜绿假单胞菌粘附性及其生物被膜渗透性的影响.方法采用结晶紫染色法测定粘液型铜绿假单胞菌的粘附性,采用HPLC法测定加替沙星在粘液型铜绿假单胞菌生物被膜的渗透浓度,从而观察抗藻酸盐血清对于粘液型铜绿假单胞菌生物被膜渗透性的影响.结果11抗藻酸盐血清在同8×MIC加替沙星联用的情况下,使细菌对硅胶片粘附性显著降低,硅胶片洗脱液在540nm波长处的光密度值从0.126±0.011降低到0.114±0.010;同时使加替沙星对细菌生物被膜的渗透性增强,4、8和16μg/ml的加替沙星通过细菌生物被膜的浓度分别从1.210±0.091、2.911±0.112和5.511±0.213μg/ml显著提高至1.752±0.122、3.908±0.154和7.898±0.321μg/ml.结论抗藻酸盐血清能够降低粘液型铜绿假单胞菌对于生物医学材料的粘附性,增强抗生素对于生物被膜的渗透能力.     

克拉霉素对铜绿假单胞菌生物被膜的影响

目的 :研究克拉霉素对铜绿假单胞菌生物被膜生物特性的影响。方法 :采用结晶紫染色法测定生物被膜中细菌的粘附性 ;浓度梯度渗透法测定生物被膜的渗透性 :采用卡唑 /乙醇法测定克拉霉素对藻酸盐的合成抑制作用。结果 :采用平板法 7d可建立稳定的生物被膜 ,1/4MIC克拉霉素与 8×MIC加替沙星联合应用后光密度值由 ( 0 .12 6± 0 .0 11)显著的降低至 ( 0 .114± 0 .0 12 ) ,4μg/ml组、8μg/ml组、16 μg/ml组加替沙星的渗透浓度 ( μg/ml)可由 ( 1.2 10± 0 .0 91)、( 2 .911± 0 .112 )、( 5 .911± 0 .2 13)显著的增加至 ( 1.730± 0 .132 )、( 3.911±0 .111)、( 7.90 2± 0 .35 4) ;80 μg/ml、40 μg/ml、2 0 μg/ml、10 μg/ml克拉霉素组生物被膜中藻酸盐的含量 ( μg/108CFU)由 ( 10 .0 7± 0 .5 5 )显著的降低至 ( 2 .34± 0 .2 1)、( 4 .91± 0 .16 )、( 7.2 2± 0 .36 )、( 8.82± 0 .5 0 )。结论 :克拉霉素可降低铜绿假单胞菌生物被膜中细菌的粘附性 ,增强加替沙星在生物被膜中的渗透能力 ,抑制铜绿假单胞菌藻酸盐的合成。     

铜绿假单胞菌生物被膜研究进展

铜绿假单胞菌是临床上常见的机会致病菌和耐药菌之一,它的感染常伴随着生物被膜的产生,进而造成严重的慢性感染和持续性感染。由于铜绿假单胞菌生物被膜的产生使其产生耐药性,并能够逃避宿主免疫系统的攻击,因此传统治疗方法很难将其去除。以生物被膜为靶标开发新型抗感染药物可以降低病原菌的耐药性,有望发展成1种新的治疗方法。本文总结了铜绿假单胞菌生物被膜的形成过程、主要成分的结构、生物合成过程及其功能,并对已经报道的靶向生物被膜的新型药物进行了总结。     

克拉霉素对铜绿假单胞菌生物被膜的影响

目的研究克拉霉素对铜绿假单胞生物被膜生物特性的影响.方法采用平板法建立生物被膜模型,银染法快速鉴定;结晶紫染色法测定生物被膜中细菌的粘附性;浓度梯度渗透法测定生物被膜的渗透性;采用卡唑/乙醇法测定克拉霉素对藻酸盐的合成抑制作用.结果采用平板法7天可建立稳定的生物被膜,1/4MIC克拉霉素与8×MIC加替沙星联合应用后光密度值由0.126±0.011显著的降低至0.114±0.012,4μg/ml组、8μg/ml组、16μg/ml组加替沙星的渗透浓度(μg/ml)可由1.210±0.091、2.911±0.112、5.911±0.213显著的增加至1.730±0.132、3.911±0.111、7.902±0.354;80μg/ml、40μg/ml、20μg/ml、10μg/ml克拉霉素组中藻酸盐的含量(μg/108CFU)由10.07±0.55显著的降低至2.34±0.21、4.91±0.16、7.22±0.36、8.82±0.50.结论克拉霉素可降低铜绿假单胞菌生物被膜中细菌的粘附性,增强加替沙星在生物被膜中的渗透能力,抑制铜绿假单胞菌藻酸盐的合成.     

铜绿假单胞菌生物被膜耐药研究进展

铜绿假单胞菌(Pseuclomonas aerubqinosa,PA)是最严重的医院内获得性感染的病原菌之一,生物被膜(Biofilm,BF)多黏附在生物材料和植入的各种导管,以及牙龈、支气管、尿道等人体组织表面,它的形成使得铜绿假单胞菌生物被膜相关感染不断上升,致使慢性感染性疾病反复发作且难以控制,给治疗增加更大的难度.生物被膜通过营养限制、抗生素渗透障碍和免疫逃逸等机制对多种抗生素耐药.密度感应系统(quorum-sensing systems,QS)作为一种细胞信号传递方式,在基因水平上参与到生物被膜内细菌基因的表达,调节生物被膜内细菌的分化成熟,从而影响抗菌药物的敏感性.大环内酯类因作用于生物被膜,使得失去被膜保护的细菌易被抗生素杀灭.临床上被用于治疗铜绿假单胞菌生物被膜感染的主要药物,此外,中药有效成分联用抗生素,干扰密度感应系统也为治疗生物被膜病提供了新思路.     

氨溴索对环丙沙星透过铜绿假单胞菌生物膜的影响

目的 研究氨溴索对环丙沙星透过铜绿假单胞菌生物膜的影响。方法 孔径为0．22μm的医用微孔滤膜建立铜绿假单胞菌生物膜的体外模型；用高效液相色谱（HPLC）方法测定环丙沙星透过生物膜的量，并测定在2和0．75mg／ml氨溴索作用后环丙沙星透过细菌生物膜的量。结果 经过7d的连续培养后，铜绿假单胞菌可在微孔滤膜上形成均匀致密的生物膜。环丙沙星可缓慢透过细菌生物膜，8h左右达到平衡；2和0．75mg／ml氨溴索作用后可以明显增加环丙沙星8h内透过生物膜的量。结论 以医用微孔滤膜为载体可建立铜绿假单胞菌生物被膜体外模型；氨溴索可以显著地促进环丙沙星对细菌生物膜的透过。     

磷霉素与氨基糖苷类药物联用对铜绿假单胞菌生物被膜的影响

目的通过研究磷霉素与氨基糖苷类药物(阿米片星、异帕米星)联合应用对铜绿假单胞菌生物被膜的体外联合效应,探讨磷霉素对氨基糖苷类药物在抑制铜绿假单胞菌生物被膜形成的作用。方法采用改良的组织培养平板法建立铜绿假单胞菌(PAO1)生物被膜模型,应用扫描电镜观察经不同剂量的两类药物单用与联合作用处理后的PAO1生物被膜结构,对其形态学进行分析比较。结果扫描电镜的形态学结果显示,PAO1细菌呈杆状,为浓厚的粘液样物质紧密包绕,聚集成团,菌体之间相互粘连,生物被膜形态完整。经不同浓度的磷霉素、阿米卡星、异帕米星、磷霉素+阿米卡星、磷霉素+异帕米星处理后,随着药物剂量的增加,细菌数减少,聚集程度降低,细菌间粘液状物显著减少。磷霉素+阿米卡星和磷霉素+异帕米星联用的抑制被膜形成作用基本相似,磷霉素的抑制被膜形成作用较阿米卡星和异帕米星差,联药组的抑制被膜形成作用较单药组显著。结论磷霉素与氨基糖苷类药物联用对铜绿假单胞菌生物被膜形成的抑制具有显著增效作用。     

铜绿假单胞菌群体感应系统与生物膜形成

群体感应（quorum-sensing，QS）系统是细菌依赖于群体密度的信号交流机制，细菌依靠该机制对外界环境变化作出协调统一的应答。目前对铜绿假单胞菌的QS系统已有较深入的研究，该菌的QS系统由两种相互作用的酰化高丝氨酸内酯（AHL）及非-AHL分子调节系统组成，在转录或转录后水平上对细菌的群体行为作出调节。针对QS系统的抗生素将为治疗细菌生物膜感染带来广阔前景。     

铜绿假单胞菌生物膜的研究进展

铜绿假单胞菌引起的感染性疾病中,常常因为生物膜的形成造成疾病的反复和难以治愈,患者在遭受巨大痛苦的同时,引起了众多研究者的注意。通过对铜绿假单胞菌生物膜结构、致病机制等方面进一步研究,可能发现有效清除铜绿假单胞菌生物膜的方法,从而为临床治疗铜绿假单胞菌引起的感染性疾病提供科学的依据。     

Effects of iron depletion on antimicrobial activities against planktonic and biofilm Pseudomonas aeruginosa

Objectives Iron plays an important role in the development of Pseudomonas aeruginosa biofilm. Here we evaluated effects of iron depletion on the antimicrobial activity of ceftazidime, tobramycin and ciprofloxacin against planktonic and biofilm Pseudomonas aeruginosa. Methods We tested the sensitivities of wild‐type PAO1, type‐IV pilus mutant PAO‐ΔpilHIJK and the quorum‐sensing mutant PAO‐JP2 P. aeruginosa planktonic cultures and biofilms to antibiotics under iron‐depleted conditions. Key findings In planktonic bacteria, the minimum concentration that inhibited visible growth (MIC) of ciprofloxacin was increased slightly in an iron‐depleted environment in all three strains, whereas the MIC of tobramycin was similar in iron‐depleted and control environments. The MIC of ceftazidime increased in the PAO‐JP2 strain when iron was depleted. Tobramycin achieved the best bactericidal effect in biofilms. Viable counts were reduced by one log under iron‐depleted conditions in all three strains when tobramycin reached 4 MIC and when ceftazidime and ciprofloxacin reached 8 MIC. Conclusions This study suggests that once the biofilm is formed, iron depletion may only slightly promote the bactericidal effect of antibiotics on PAO1, PAO‐ΔpilHIJK and PAO‐JP2. Although these changes were relatively small, iron as one of the environmental factors should not be ignored when evaluating bactericidal effect of antibiotics. The combination of an iron chelator and antibiotics may have therapeutic value under certain bacterial growth conditions.     

尿激酶或蚓激酶与氟罗沙星联合应用对细菌生物被膜的影响

探讨尿激酶或蚓激酶与氟罗沙星联合应用对铜绿假单胞菌生物被膜的影响。MIC采用微量稀释法测定,应用银染法快速鉴定细菌生物被膜,应用扫描电镜观察细菌生物被膜中细菌的形态并用MTT法测定生物被膜中细菌数。扫描电镜显示通过尿激酶或蚓激酶与氟罗沙星联合应用,细菌生物被膜有显著改变,生物被膜中的细菌数量比单独应用氟罗沙星显著减少。实验结果表明尿激酶或蚓激酶与氟罗沙星联合应用表现出协同效应。     

Synthesis, molecular docking, and biofilm formation inhibitory activity of 5-substituted 3,4-dihalo-5h-furan-2-one derivatives on Pseudomonas aeruginosa

Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa) colonize on most wounds and live as biofilm, which causes antibiotic resistance and wounds unhealed. To investigate the effects of 5‐substituted 3,4‐dihalo‐5H‐furan‐2‐one compounds on biofilm formation of P. aeruginosa, a set of 5‐(aryl‐1′‐hydroxy‐methyl)‐ or 5‐(aryl‐2‐methylene)‐3,4‐dihalo‐5H‐furan‐2‐one compounds were designed and synthesized. Their inhibitory activities on biofilm formation of P. aeruginosa were studied by MIC assay, quantitative analysis of biofilm inhibition, and observation of biofilm formation with SEM. It was found that compounds 2i , 3f , 3i showed remarkable effects of biofilm formation inhibition on P. aeruginosa. Furthermore, molecular docking was performed to identify the key structural features of these compounds with the binding site of LasR receptor.