益气复生方抑制人胃癌细胞BGC-823增殖和迁移的研究

目的探讨益气复生方对人胃癌细胞BGC-823增殖和迁移的影响。方法采用MTT法检测益气复生方对人胃癌细胞BGC-823活性的抑制作用;划痕实验检测益气复生方对细胞迁移的影响;流式细胞术检测益气复生方对细胞周期和凋亡的影响。结果与空白对照组比较,不同浓度(0.05 mg/mL、0.1 mg/mL、0.2 mg/mL、0.4 mg/mL、0.8 mg/mL、1 mg/mL)益气复生方作用的细胞,细胞活性降低;划痕结果显示益气复生方处理的细胞迁移能力明显低于空白对照组;细胞周期检测显示益气复生方能阻滞人胃癌细胞BGC-823的周期进展;细胞凋亡检测表明益气复生方能诱导人胃癌细胞BGC-823凋亡。结论益气复生方能有效抑制人胃癌细胞BGC-823的增殖和迁移,从而起到抗胃癌BGC-823细胞生长的作用。     

活血益气方对心梗后大鼠缺血心肌血管新生及VEGF表达的影响

目的:观察活血益气方对心肌梗死后大鼠缺血心肌血管新生的作用及其相关生长因子VEGF表达的影响。方法:健康雄性SD大鼠行左冠状动脉前降支结扎术致急性心肌梗死模型,随机分为模型组、活血益气方组和倍他乐克组,并设立假手术组,假手术组只穿线不结扎。连续给予相应药物4周后,处死大鼠,迅速摘取心脏在乳头肌横切面切取心肌组织,4%的多聚甲醛固定,石蜡包埋,切片。以免疫组化法测定心梗边缘区微血管数和VEGF的表达;取梗塞边缘区心肌组织,进行总RNA抽提,RT-PCR法检测心梗边缘区VEGF mRNA的表达。结果:(1)假手术组、模型组、倍他乐克组和活血益气方组均可看到新生的微血管。假手术组可见微血管增生不明显,模型组可见少量微血管增生,倍他乐克组和活血益气方组可见较多增生的微血管。模型组与假手术组比较,有统计学差异;倍他乐克组和活血益气方组与模型组比较,有统计学差异;(2)各组大鼠梗塞边缘区均可见到VEGF表达,模型组VEGF表达高于假手术组(P<0.05),倍他乐克组和活血益气方组VEGF表达高于模型组(P<0.01);(3)模型组VEGF mRNA表达水平高于假手术组(P<0.05),活血益气方组VEGF mRNA表达高于模型组(P<0.05)。结论:活血益气方对心肌梗死后大鼠缺血心肌血管新生具有促进作用,其作用机制可能与上调心肌局部VEGF及其mRNA表达有关。     

益气通脉解毒方治疗心肌梗死疗效观察及对血管新生指标的影响

目的:观察益气通脉解毒方对心肌梗死患者的疗效及患者体内血管新生指标的影响.方法:将心肌梗死患者96例,分为2组.对照组给予常规对症治疗,观察组在对照组基础上给予益气通脉解毒方治疗,分析2组患者治疗后的临床疗效.结果:2组治疗前血管新生指标、炎症因子水平组间比较,差异无统计学意义(P＞ 0.05).观察组治疗后血管内皮生...     

基于VEGF相关信号通路研究益气除痰方对缺氧血管新生的影响

目的:研究益气除痰方(YQCTF)对缺氧人脐静脉内皮细胞(HUVEC)血管新生的影响及机制探讨。方法:设立HUVEC常氧(Norm)组、缺氧造模(Hyp)组、缺氧+YQCTF低浓度(L)组、缺氧+YQCTF中浓度(M)组、缺氧+YQCTF高浓度(H)组,采用CCK8法和流式细胞术(Annexin V/PI染色)检测细胞增殖和凋亡;管腔形成实验和transwell小室测定细胞血管生成和细胞迁移能力;Western blot检测HIF-1α、VEGFA、VEGFR2、PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达。结果:与常氧组比较,缺氧造模组HUVEC无明显增殖抑制和凋亡,但迁移和管腔形成能力增强,且HIF-1α、VEGFA、VEGFR2、PI3K、AKT、P-AKT蛋白表达上调;与缺氧造模组比较,YQCTF可明显抑制缺氧下HUVEC增殖,促进凋亡,降低迁移及管腔形成能力,呈现剂量依赖性,并可下调HIF-1α、VEGFA、VEGFR2、PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达。结论:益气除痰方可抑制缺氧诱导的血管新生,可能与其调控VEGF相关信号通路有关。     

益气复生方对荷瘤小鼠血清D-乳酸影响的实验研究

目的:观察益气复生方对荷瘤小鼠血清D-乳酸的影响,并探讨益气复生方对肠粘膜屏障影响的机制。方法:将50只昆明小鼠随机分为空白组、模型组、中药组(益气复生方组),西药组(5-FU组),联合组(益气复生方+5-FU组),每组10只。除正常组外,其他组小鼠给予荷瘤造模。中药组给予中药灌胃,西药组采用5-Fu腹腔注射,联合组予中药灌胃同时给予5-Fu腹腔注射。用药14天后处死小鼠,观察抑瘤率、血清D-乳酸的含量。结果:1)与模型组相比,中药组、西药组、联合组中抑瘤率均显著增加(P<0.05);2)与模型组相比,中药组、西药组、联合组中血清-D乳酸的含量均极显著降低(P<0.01),且联合组更接近空白组。结论:1)益气复生方降低荷瘤小鼠血清D-乳酸同时抑制体内肿瘤的生长;2)益气复生方能够保护肠粘膜屏障的机制可能是与降低荷瘤小鼠血清D-乳酸有关。     

补肾益气方及其拆方对ox-LDL所致"AS"症血管平滑肌细胞病理模型的影响

目的:研究补肾益气方及其拆方(黄芪、首乌)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)所致动脉粥样硬化(AS)症血管平滑肌(VSMC)病理模型细胞的增殖及其调控基因的影响。方法:用ox-LDL处理VSMC复制"AS"细胞病理模型,用MTT法、流式细胞仪、RT-PCR法观察含受试药物血清对模型细胞增殖、泡沫细胞形成、增殖周期及相关基因表达影响。结果:补肾益气方及其拆方(黄芪、首乌)能降低模型细胞的增殖率及泡沫细胞形成率;降低S期细胞的百分率,下调VSMC增殖促进基因PDGF-a、c-MYC,上调增殖抑制基因P27的表达。结论:补肾益气方及其拆方具有抑制AS症的血管平滑肌细胞增殖和泡沫细胞的形成。     

益气祛瘀化痰法对视网膜新生血管作用的临床研究

目的:观察益气祛瘀化痰法对视网膜新生血管形成的临床疗效。方法:采用自身前后对照试验,将符合纳入标准的48例83眼气虚痰瘀互结型患者(视网膜静脉阻塞和糖尿病性视网膜病变视网膜新生血管形成患者分别为30例、18例),用益气祛瘀化痰复方治疗,从视力、眼底检查、中医证候观察治疗后疗效。结果:治疗后眼科检查总有效率84.34%,无效15.66%;中医证候总有效率73.49%,无效26.51%;治疗前后视力对照差异有统计学意义(P<0.05),在视力、眼底检查、中医证候3项指标中,视网膜静脉阻塞患者疗效均优于糖尿病性视网膜病变视网膜新生血管形成患者(P<0.05)。结论:益气法瘀化痰法对视网膜新生血管形成治疗有效,但对视网膜静脉阻塞患者比糖尿病视网膜病变患者疗效更为明显。     

益气祛瘀化痰方治疗糖尿病视网膜新生血管形成的临床研究

目的观察益气祛瘀化痰方防治糖尿病视网膜新生血管形成的临床疗效。方法将60例气虚痰瘀互结型中重度糖尿病视网膜病变（DR）患者随机分为益气祛瘀化痰方治疗组和导升明对照组，各30例：观察两组患者视力、眼底表现、中医证候、生存质量等变化。结果中医证候、视力、生存质量改善方面治疗组明显优于对照组（P〈0．05），但眼底的改善两组无显著差异（P〉0．05）。结论益气祛瘀化痰方能明显改善气虚痰瘀互结型糖尿病视网膜新生血管形成患者视力、中医证候和生存质量。     

益气除痰方对小鼠lewis肺癌细胞凋亡的影响

目的 探讨益气除痰方对小鼠Lewis肺癌生长的抑制及诱导细胞凋亡的作用。方法 复制C57BL/6小鼠Lewis肺癌模型,将96只接种Lewis肺癌的小鼠随机分为6组:益气除痰方高、低剂量组,顺铂对照组,顺铂联合中药高、低剂量组,模型组,每组16只。给药1周后停药观察1周,其中一半动物处死观察细胞凋亡相关指标,另一半动物用于观察生存期。结果 与模型组比较,益气除痰方高、低剂量组均能明显降低瘤质量指数,差异有统计学意义(P < 0.05,P < 0.01)。益气除痰方低剂量组肺转移抑制率为 28 %、高剂量组为 52 %,顺铂对照组为 50 %,顺铂联合低剂量组为40 %、高剂量组为50 %,与模型组比较,差异均有统计学意义(P < 0.05)。与模型组比较,益气除痰方组高、低剂量组和顺铂对照组、联合用药组均能明显提高肿瘤细胞凋亡率,差异均有统计学意义(P < 0.05,P < 0.01,P < 0.001)。与模型组比较,益气除痰方低剂量组及顺铂对照组能有效延长模型小鼠的生存期,差异均有统计学意义(P < 0.01)。结论 益气除痰方有抑制肿瘤生长、延长肿瘤动物生存期及促进Lewis肺癌细胞凋亡的作用。     

痰火方对脑缺血大鼠Caspase-3、GFAP蛋白表达及血管新生的影响

目的:观察痰火方对脑缺血模型大鼠Caspase-3、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）表达及血管新生的影响。方法:将大鼠按随机数字表法分为假手术组、模型组、痰火方低剂量组、痰火方中剂量组、痰火方高剂量组、金纳多组。除假手术组外,其余各组采用线栓法建立大鼠中动脉栓塞模型。造模2 h后,痰火方低、中、高剂量组分别灌胃0.92、1...     

健脾解毒方对人结肠癌多药耐药细胞的逆转作用

目的:探讨健脾解毒方对人结肠癌多药耐药细胞HCT8/V的逆转作用及其可能机制.方法:人结肠癌HCT8/V多药耐药细胞常规培养,5％健脾解毒方药物血清作用48 h后,MTT法检测HCT8/V细胞对化疗药敏感性的影响,高效液相色谱法( HPLC)检测耐药细胞内长春新碱(VCR)药物浓度,流式细胞仪分析健脾解毒方对5-氟尿嘧啶(5-Fu)诱导的HCT8/V细胞凋亡和细胞周期的影响.结果:健脾解毒方能增加HCT8/V细胞对VCR、顺铂(DDP)、5-Fu、吡柔比星(THP)4种化疗药物的敏感性,4种化疗药的IC50分别从( 191.08±18.18 )mg·L-1下降到(90.13±6.33 )mg·L-1;(290.79±28.38) mg·L-1下降到(22.16±1.82) mg·L-1;(23.12±1.99) mg·L-1下降到(9.88±0.86 )mg·L-1;(26.40±2.92) mg·L-1下降到(19.41±1.48) mg·L-1;健脾解毒方药物血清作用HCT8/V细胞48 h后细胞内VCR浓度明显增高(P＜0.01),且呈剂量依赖性.健脾解毒方能提高5-Fu诱导的HCT8/V细胞的凋亡率,使细胞阻滞于G1期.结论:健脾解毒方通过增加结肠癌多药耐药细胞内化疗药物浓度,抑制细胞增殖,诱导其凋亡,逆转HCT8/V细胞株的多药耐药性.     

益气健脾方治疗结肠癌外科术后的临床疗效观察

目的:观察用益气健脾方治疗结肠癌外科术后患者的临床疗效及安全性。方法:60例结直肠癌患者随机分为观察组和对照组。两组患者均行根治性切除,观察组术后第2天开始服用益气健脾中药煎剂治疗,对照组仅采用术后常规西药治疗。两组连续治疗1个月后评价临床疗效。观察两组术后首次排气、排便时间、白细胞(WBC)计数,比较肠道功能恢复时间以及不良反应发生情况。结果:观察组中医证候积分临床疗效有效率为86.7%,显著高于对照组66.7%,两组中医证候积分临床疗效有效率比较有显著性差异(P<0.01)。观察组卡氏评分临床疗效有效率为90.0%,显著高于对照组70.0%,两组卡氏评分临床疗效有效率比较有显著性差异(P<0.01)。观察组治疗后白细胞计数明显著低于对照组,相比较有显著性差异(P<0.05);首次排气和排便时间明显提前,与对照组比较有显著性差异(P<0.05)。观察组Ⅲ～Ⅳ不良反应发生率为20.0%,显著低于对照组73.3%,相比较有显著性差异(P<0.01)。结论:益气健脾方应用于结肠癌手术患者临床疗效明显,可以促进患者术后肠道功能恢复,减轻术后炎性反应,且能降低患者不良反应的发生率和发生程度,因而是安全而有价值的一种治疗方法。     

健脾化瘀方含药血清对人结肠癌细胞LoVo凋亡的影响

目的:探讨健脾化瘀方含药血清对人结肠癌细胞LoVo凋亡的影响。方法:①应用MTT法检测健脾化瘀方含药血清对人结肠癌细胞LoVo的增殖抑制作用;②运用TUNEL法和AnnexinV/PI法检测LoVo细胞的凋亡率。结果:①健脾化瘀方含药血清高浓度(20%)可抑制LoVo细胞的增殖(P<0.01);②健脾化瘀方含药血清作用细胞48h后可以诱导细胞凋亡。结论:健脾化瘀方含药血清能抑制结肠癌细胞LoVo的增殖能力,并诱导细胞凋亡。     

益气活血方促心梗后大鼠缺血心肌血管新生及对VEGF-B表达的影响

本研究观察了中药复方制剂益气活血方对实验性心肌梗死(AMI)大鼠缺血心肌血管新生的影响,并通过测定梗死边缘区心肌组织中VEGF-B蛋白的表达来初步探讨其作用的分子学机制。1材料与方法1·1实验材料1·1·1实验动物Wistar大鼠,雄性,体重230g±20g(郑州大学动物中心提供,合格证号:410116)。1·1·2药物及试剂①益气活血方干浸膏(人参、黄芪、黄精、赤芍、西红花),每1g干浸膏相当于原生药材2·81g,由河南省中医院制剂室提供。②麝香保心丸:上海和黄药业有限公司生产,批号:A040214。③小鼠抗大鼠CD34单克隆抗体,购自美国Santa公司;兔抗鼠V…     

抑癌方对结肠癌转移潜能及血管生成拟态的影响

目的:观察结肠癌细胞的转移潜能(迁移、侵袭力)是否和血管生成拟态(VM)存在相关性;探讨抑癌方对结肠癌转移潜能的影响,及其机制是否与VM有关。方法:以实验中可以形成VM的人结肠癌细胞为VM(+)组,不能形成VM的人结肠癌细胞为VM(-)组,划痕、Transwell侵袭实验观察其迁移、侵袭能力;对VM(+)组细胞进行后续实验,分组如下:抑癌方处理过的中药组和未经处理的空白对照组,划痕、侵袭实验观察其迁移、侵袭能力,体外三维培养法观察其血管生成拟态的形成情况。结果:三维培养环境下,人结肠癌细胞株HCT116可以形成VM为VM(+)组,HT29不能形成VM为VM(-)组,VM(+)组的迁移、侵袭力明显强于VM(-)组(P<0.05),且VM密度和细胞的迁移呈正相关(r=0.994,P<0.05),VM密度和侵袭力呈显著正相关(r=0.998,P<0.05);经抑癌方处理的中药组其迁移、侵袭力明显弱于未处理的对照组(P<0.05),中药组的VM密度和对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:结肠癌的迁移、侵袭能力和VM存在相关性,抑癌方可以抑制结肠癌细胞的迁移和侵袭能力,其机制可能和抑制VM的形成有关。     

抑癌方对结肠癌转移潜能及血管生成拟态的影响

目的:观察结肠癌细胞的转移潜能(迁移、侵袭力)是否和血管生成拟态(VM)存在相关性;探讨抑癌方对结肠癌转移潜能的影响,及其机制是否与VM有关。方法:以实验中可以形成VM的人结肠癌细胞为VM(+)组,不能形成VM的人结肠癌细胞为VM(-)组,划痕、Transwell侵袭实验观察其迁移、侵袭能力;对VM(+)组细胞进行后续实验,分组如下:抑癌方处理过的中药组和未经处理的空白对照组,划痕、侵袭实验观察其迁移、侵袭能力,体外三维培养法观察其血管生成拟态的形成情况。结果:三维培养环境下,人结肠癌细胞株HCT116可以形成VM为VM(+)组,HT29不能形成VM为VM(-)组,VM(+)组的迁移、侵袭力明显强于VM(-)组(P<0.05),且VM密度和细胞的迁移呈正相关(r=0.994,P<0.05),VM密度和侵袭力呈显著正相关(r=0.998,P<0.05);经抑癌方处理的中药组其迁移、侵袭力明显弱于未处理的对照组(P<0.05),中药组的VM密度和对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:结肠癌的迁移、侵袭能力和VM存在相关性,抑癌方可以抑制结肠癌细胞的迁移和侵袭能力,其机制可能和抑制VM的形成有关。     

益气健脾中药对血管平滑肌细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响

目的：探讨益气健脾中药血清体外诱导血管平滑肌细胞凋亡的作用及其分子机制。方法：采用缺口末端标记（terminal deoxynucleotidyl transferase mediated dUTP nicked labeling,TUNEL)分析、透射电镜、流式细胞仪分析、DNA电泳分析检测细胞凋亡；应用Northern印迹检测bcl-2、c-myc和p53基因表达活性。结果：经中药血清处理的血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cell,VSMC)，可出现典型的凋亡特征，DNA电泳呈梯状图谱；流式细胞仪分析显示G0／G1期细胞阻滞现象，亚二倍体凋亡细胞增多，出现典型的凋亡峰，细胞凋亡率与中药血清浓度具有量效关系。杂交结果提示，30％中药血清可抑制抗凋亡基因bcl-2的表达，上调促凋亡基因c-myc和p3 mRNA水平。结论：益气健脾中药通过影响凋亡相关基因bcl-2、c-myc和p53的表达活性而诱导VSMC凋亡。     

益气化瘀方对椎间盘纤维环细胞凋亡的影响

研究益气化瘀方及其拆方药理血清对诱导凋亡椎间盘纤维环细胞凋亡率的调控情况。采用TUNNEL法和流式细胞仪技术检测不同药物作用下纤维环细胞凋亡率的变化,比较分析益气化瘀方及其拆方益气方、化瘀方药理血清,以及IGF- Ⅰ对抗-Fas抗体诱导凋亡大鼠椎间盘纤维环细胞凋亡率的影响。结果显示,益气化瘀方可降低细胞凋亡指数,作用低于IGF -Ⅰ组,有显著性差异(P<0. 05)。提示益气化瘀方及其拆方可以调控细胞凋亡率,调控细胞的凋亡可能是其治疗颈椎病的机理之一。     

益气化痰散结方联合XELOX化疗方案治疗晚期复发性结肠癌的临床研究

目的 :探讨益气化痰散结方联合XELOX化疗方案治疗晚期复发性结肠癌的临床疗效。方法:将60例晚期复发性结肠癌患者随机分成对照组和治疗组各30例,对照组予XELOX方案化疗:奥沙利铂130 mg/m2,静滴,第1 d;希罗达1000 mg/m2,口服,每日2次,第1¹4 d;治疗组在化疗的同时内服益气化痰散结方,均21 d为1个周期。3周期后对临床近期疗效、疾病无进展生存期(PFS)、不良反应及生活质量进行评估。结果:两组治疗后,治疗组和对照组的有效率分别为56.7%,50.0%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗组的中位PFS为(254.00±6.25)d,对照组的中位PFS为(217.00±7.38)d,治疗组优于对照组(P<0.05);治疗组与对照组血液学毒性主要表现为白细胞减少,发生率分别为53.3%和70.0%;恶心呕吐的发生率分别为40.0%,56.7%,治疗组明显低于对照组,两组比较有显著差异(P<0.05)。两组患者在治疗后生活质量评分均有明显升高,与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05),两组治疗后比较差异亦有统计学意义(P<0.05)。结论:与单纯化疗相比较,益气化痰散结方与化疗联合能进一步延长晚期结肠癌患者疾病无进展生存期,改善生活质量,并降低化疗毒副反应。     

益气活血方对实验性心肌梗死大鼠促血管新生机制研究

1 现代中医学对冠心病的认识 由《诸病源候论·心病诸侯》中"心为诸脏主而藏神,其正经不可伤,伤之而痛为真心痛"一句,可以推断出,在中医领域,冠心病心肌梗死隶属于"胸痹心痛","厥心痛"等疾病."急性心肌梗死"在国家标准《中医临床诊疗术语》中所对应的中病名为"厥(真)心痛",其病机主要由于内因久患胸痹之疾,心气亏虚,心阳渐衰,心阴血不足,寒、痰、瘀血内阻,外因寒冷、饱食、酗酒、劳累或喜怒不节等,徒生气血逆乱,心脉猝然闭阻,营气不从,逆陷于心而成瘀血内结,气滞于内致热结不散,痰瘀互结,形成心体失营,脉络瘀阻,治疗上"益气化瘀通络"是急性心肌梗死的重要治则.中医认为,气血具有相关性,气血相生,血脉同源.因此,心肌梗死后促心肌内微血管新生的前提条件是保证气血的流畅.