RP-HPLC法测定积雪草中积雪草苷和羟基积雪草苷

积雪草Centella asiatica（L．）Urb．为伞形科积雪草属植物，全草入药。性寒，味苦、辛，具有清热利湿、解毒消肿之功效。临床上用于跌打损伤、传染性肝炎、流行性脑脊髓膜炎等。曾建国等采用梯度洗脱，肖隽等采用衍生化法测定了积雪草中有效成分。本实验采用RP—HPLC法，建立了积雪草中积雪草苷和羟基积雪草苷的测定方法。     

不同产地积雪草中积雪草苷和羟基积雪草苷含量测定

目的采用高效液相法测定不同产地积雪草药材中积雪草苷和羟基积雪草苷含量。方法采用VP－ODS色谱柱,流动相为乙腈-水梯度洗脱,流速1.0mL＆#183;min-1,检测波长204nm,柱温40℃。结果积雪草苷和羟基积雪草苷的平均回收率分别是99.7%、101.4%,RSD分别是1.68%、1.07%（n=6）。结论不同产地的积雪草中积雪草苷和羟基积雪草苷的含量差别较大,广西柳州和广东湛江所产的积雪草中积雪草苷和羟基积雪草苷含量较高。     

HPLC法测定积雪苷胶囊中积雪草苷的含量

目的：采用外标法测定积雪苷胶囊中积雪草苷的含量,建立了积雪苷胶囊中积雪草苷含量的HPLC测定方法。方法：色谱柱：Phenomenex C18柱（150mmx4．6mm,5岬）;流动相：乙腈-水（30：70）,检测波长：205nm;流速：1．Oml·min^-1。结果：积雪草苷的线性范围为1．75—7．Oμg·ml^-1（r=0．9992）。结论：本方法简便、重复性好,可用于积雪昔胶囊中积雪草苷的含量测定。     

近红外漫反射光谱法快速测定积雪草总苷中积雪草苷的含量

目的：建立近红外漫反射光谱法快速测定积雪草总苷中积雪草苷的含量方法。方法：采用高效液相色谱法测定市场上流通的66批次积雪草总苷中积雪草苷的含量,同时采集近红外漫反射光谱,对原始光谱进行多元散射校正（ MSC）、二阶导数（2D）和Norris导数（ND）平滑等光谱预处理方法,采用偏最小二乘回归法（PLSR）建立近红外定量校正模型,实现积雪草总苷中指标性成分积雪草苷含量的快速测定。结果：所建立的积雪草苷近红外定量校正模型,验证集相对误差RMSEP、标准偏差与标准误差的比值RPD分别为0.0352和6.47,表明所建近红外模型预测准确度高。同时,校正集均方根误差RMSEC和验证集均方根误差RMSEP接近,分别为1.17和1.25,交叉验证均方根误差RMSECV为3.43,表明所建近红外模型稳健性好。结论：所建立的积雪草苷近红外定量校正模型具有很好的预测准确度和稳健性,为市场上积雪草总苷质量的快速评价提供方法。     

HPLC-CAD法分离测定三金片中同分异构体积雪草苷B和羟基积雪草苷

目的建立一种高效液相色谱-电喷雾检测器(HPLC-CAD)法分离测定三金片中积雪草苷B和羟基积雪草苷2个同分异构体含量的方法。方法采用Thermo AcclaimTM C30色谱柱,甲醇-乙腈-水(35∶8∶57)为流动相,柱温35℃,CAD气化温度为50℃,采集频率为10 Hz,分离测定积雪草苷B和羟基积雪草苷的含量。结果积雪草苷B和羟基积雪草苷线性关系良好,r分别为0.999 8、0.998 4,线性范围分别为0.240 7～2.406 9、0.573 1～5.730 8μg,平均加样回收率分别为100.26%、98.32%,RSD分别为0.69%、1.78%;11批样品中积雪草苷B为1.65～3.18 mg/g,羟基积雪草苷为3.49～7.90mg/g。结论该方法简便、灵敏、准确度高,能有效分离测定积雪草苷B和羟基积雪草苷2个同分异构体,可用于三金片现行药典标准的提高完善。     

手性流动相添加剂法测定积雪草中积雪草总苷的量及其总苷特征图谱

目的 以β-环糊精为流动相添加剂,拆分积雪草药材及其总苷中羟基积雪草苷和积雪草苷,建立羟基积雪草苷和积雪草苷的定量测定方法,同时建立积雪草总苷的高效液相色谱特征图谱.方法 采用Dikma Diamonsil(TM)C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱;流动相为乙腈-2 mmol/L β-环糊精溶液(24:76);柱温30℃;体积流量1.0 mL/min;检测波长205 nm;理论塔板数按积雪草苷峰计算应不低于4 000.结果 β-环糊精的加入很好地分离积雪草药材及其总苷中的羟基积雪草苷和积雪草苷,满足了定量分析的要求,其中有效成分羟基积雪草苷和积雪草苷的线性范围分别为0.181～18.1 μg(r=0.999 98)和0.195～19.5μg(r=0.999 98),积雪草药材的平均加样回收率(n=9)分别为101.2%和101.6%,积雪草总苷的平均加样回收率(n=9)分别为100.3%和99.3%,11批次的积雪草总苷样品的高效液相色谱特征图谱中确定6个共有峰作为定性的指标峰.结论 本法简便快速、结果准确、重现性好,可用于积雪草药材及其总苷的质量控制.     

羟基积雪草苷大鼠体内代谢研究

目的：研究羟基积雪草苷在大鼠体内的主要代谢产物,寻找羟基积雪草苷体内药效物质。方法：采用高效液相色谱一电喷雾串联质谱（HPLC—ESI—MS“）法鉴定大鼠腹腔注射羟基积雪草苷（50mg·kg-1）后体内的代谢产物。结果：从大鼠含药血浆、尿液及脑组织中检测到羟基积雪草苷原形成分和11种代谢产物,均为相代谢产物。结论：羟基积雪草苷在大鼠体内代谢广泛,主要的代谢途径为去甲基化、羟基化、脱水等反应。     

一测多评法同时测定积雪草总苷及其2种制剂中3种成分

目的建立一测多评法同时测定积雪草总苷及积雪苷片、积雪苷霜软膏中3种成分的含有量。方法各样品甲醇提取液的分析采用Eclipse XDB-C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-(2 mmol/L羟丙基-β-环糊精)(24∶76);体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长205 nm。以羟基积雪草苷为内标,计算其他2种成分的相对校正因子,测定含有量。结果积雪草苷B、羟基积雪草苷、积雪草苷在各自范围内线性关系良好(r≥0.999 8),平均加样回收率97.93%～102.05%,RSD 0.61%～2.06%。一测多评法所得结果与外标法接近。结论该方法稳定可靠,可用于积雪草总苷及其2种制剂的质量控制。     

积雪苷霜软膏质量标准研究

目的:建立了积雪苷霜软膏的质量标准。方法:采用HPLC测定软膏中的羟基积雪草苷的含量;流动相为甲醇-水(55:45);流速为1.0mL/min;检测波长204nm;柱温30℃。结果:在4~20μg范围内呈良好线性关系(r=0.9998),平均回收率99.1%,RSD=1.4%。结论:方法简便,准确,可用于积雪苷霜软膏的质量控制。     

HPLC法测定积雪草中三萜类化合物的含量

目的：建立一种能同时测定积雪草中四种主要三萜类成分积雪草苷、羟基积雪草苷、积雪草酸、羟基积雪草酸的含量分析方法。方法：采用１８柱,乙腈－水为流动相,梯度洗脱,检测波长２０５ｎｍ。结果：四种三萜组分的平均回收率分别为积雪草苷９７．６２％（ＲＳＤ＝１．９５％,ｎ＝５）;羟基积雪草苷９８．９６％（ＲＳＤ＝２．０１％,ｎ＝５）;羟基积雪草酸１０１．８９％（ＲＳＤ＝１．５４％,ｎ＝５）;积雪草酸１０１．２８％（ＲＳＤ＝１．３８％,ｎ＝５）。结论：此方法简单、准确,适用于积雪草原药材及其制剂的质量控制。     

高效液相色谱法测定积雪草苷片中积雪草苷、羟基积雪草苷的含量

目的:建立HPLC测定积雪草苷片含量的方法。方法:采用Agilent C18色谱柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(71︰29),流速1.0ml·min-1,检测波长205nm,柱温25℃。结果:积雪草苷平均回收率为99.5%,RSD=1.06%(n=6);羟基积雪草苷平均回收率为100.3%,RSD=1.21%(n=6)结论:所建方法简便,结果准确,可用于积雪草苷片的质量控制。     

积雪草化学成分的研究△

目的：研究中药积雪草Centella asiatlca（L．）Urban中的皂苷类化学成分。方法：利用各种色谱技术进行分离纯化，根据化合物的理化性质和光谱数据进行结构鉴定。结果：从积雪草苷提取物中分离得到6个化合物，分别鉴定为积雪草单糖苷（Ⅰ）、积雪草苷（Ⅱ）、积雪草二糖苷（Ⅲ）、积雪草酸（Ⅳ）、够一羟基积雪草酸（V）、α—L-鼠李糖（Ⅵ）。结论：化合物Ⅰ为首次从该科植物中分得，化合物Ⅵ为首次从该植物中分得。     

指纹图谱与一测多评法相结合测定积雪草中5种三萜类成分

目的 建立指纹图谱与一测多评法同时测定积雪草中5种代表性三萜类成分的含量,并验证该方法在积雪草质量控制中的适用性与准确性.方法 首先采用HPLC建立积雪草药材指纹图谱;以积雪草为研究对象,以积雪草苷为内参物,建立积雪草酸、羟基积雪草酸、羟基积雪草苷、积雪草苷B与其之间的相对校正因子(fs/k),用fs/k计算其他4种成...     

羟基积雪草苷与积雪草苷对LPS诱导大鼠发热模型的影响

目的观察积雪草苷和羟基积雪草苷的解热作用,并比较两者在解热作用上的差异。方法将80只SD大鼠随机分为空白组、模型组(LPS 100μg/kg)、溶酶对照组(羧甲基纤维素钠)、积雪草苷5,15,45 mg/kg、羟基积雪草苷10,20,40mg/kg、对乙酰氨基酚50 mg/kg组。腹腔注射LPS(100μg/kg)建立SD大鼠发热模型,绘制各组平均体温变化曲线,比较测量体温与基础体温差值ΔT。结果羟基积雪草苷(10,20,40 mg/kg)与积雪草苷(5,15,45 mg/kg)对LPS诱导的SD大鼠发热模型体温有显著的降温作用(P<0.05)。结论羟基积雪草苷和积雪草苷对LPS诱导的SD大鼠发热模型的体温均有降温作用,积雪草苷在某些时间点(如LPS注射5 h后)降温效应优于羟基积雪草苷。     

积雪草化学成分和药理作用研究进展及其质量标志物预测分析

积雪草为伞形科植物积雪草的干燥全草，应用历史悠久、药理作用广泛。本文通过查询相关文献对积雪草的化学成分、药理作用进行综述分析，并结合中药Q-Marker概念，从传统药性、传统药效、化学成分可测性、不同复方配伍中表达组分等角度对积雪草Q-Marker进行预测，发现积雪草具有促进创伤愈合及抑制瘢痕增生、抗阿尔茨海默病、改善肾肺损伤及关节炎等活性，主要含有三萜皂苷类、黄酮类、挥发油类及多炔烯烃类等成分，主要活性物质为三萜皂苷类成分，建议将积雪草苷、积雪草酸、羟基积雪草苷、羟基积雪草酸和积雪草苷B等三萜皂苷类，芦丁、槲皮素、山柰酚、黄芩素、木犀草素等黄酮类化合物及挥发油类成分作为积雪草Q-Marker的主要选择，有利于完善积雪草质量评价标准并建立科学全面的专属质量控制体系，为积雪草临床用药及其资源的开发利用提供理论依据。     

积雪草化学成分研究

目的研究积雪草Centella asiatica的化学成分。方法采用各种色谱技术进行分离纯化,通过理化性质和波谱分析进行结构鉴定。结果从积雪草中共分离得到14个化合物,其结构鉴定为β-谷甾醇(Ⅰ)、二十六醇辛酸酯(Ⅱ)、山柰酚(Ⅲ)、槲皮素(Ⅳ)、胡萝卜苷(Ⅴ)、香草酸(Ⅵ)、丁二酸(Ⅶ)、积雪草酸(Ⅷ)、羟基积雪草酸(Ⅸ)、ter-minolic acid(Ⅹ)、积雪草苷(Ⅺ)、积雪草二糖苷(Ⅻ)、羟基积雪草苷、积雪草苷-B。结论化合物为一新化合物;羟基积雪草酸和terminolic acid、羟基积雪草苷和积雪草苷-B为两对同分异构体。     

AB-8大孔树脂分离纯化积雪草总苷的工艺研究

目的：研究AB-8大孔树脂分离纯化积雪草总苷的工艺条件及技术参数。方法：用高效液相色谱法测定积雪草苷和羟基积雪草苷的含量,考察AB-8大孔树脂对积雪草总苷的吸附及解吸性能。结果：AB-8大孔树脂对积雪草总苷的适宜吸附条件为：药液质量浓度0．2g·mL^-1（相当于生药材）,pH值6～7,流速2BV·h^-1（BV为柱床体积倍数）,洗脱剂用3BV50％乙醇。结论：AB-8大孔树脂吸附积雪草总苷的纯化方法可行,具有较好的应用前景。     

HPLC法测定积雪草中三萜类化合物的含量

目的 :建立一种能同时测定积雪草中四种主要三萜类成分积雪草苷、羟基积雪草苷、积雪草酸、羟基积雪草酸的含量分析方法。方法 :采用 C1 8柱 ,乙腈 -水为流动相 ,梯度洗脱 ,检测波长 2 0 5 nm。结果 :四种三萜组分的平均回收率分别为积雪草苷 97.6 2 % (RSD=1.95 ,n=5 ) ;羟基积雪草苷 98.96 (RSD=2 .0 1 ,n=5 ) ;羟基积雪草酸 10 1.89 (RSD=1.5 4 ,n=5 ) ;积雪草酸 10 1.2 8 (RSD=1.38 ,n=5 )。结论 :此方法简单、准确 ,适用于积雪草原药材及其制剂的质量控制     

羟基积雪草苷对小鼠急性肝损伤的保护作用

目的研究羟基积雪草苷对小鼠急性肝损伤的保护作用及其初步机制。方法建立四氯化碳(CCl4)诱导的小鼠急性肝损伤模型,检测羟基积雪草苷(3、10、30 mg/kg)对血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)以及肝组织一氧化氮(NO)的影响;Western-blotting检测肝组织中诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)、环氧合酶-2(COX-2)蛋白的表达,并取部分肝组织进行HE染色,观察病理学改变。结果羟基积雪草苷明显降低急性肝损伤小鼠血清中ALT、AST活性及肝组织中NO的量,抑制肝组织中iNOS、COX-2蛋白的表达,病理切片显示羟基积雪草苷组病变程度远较模型组为轻。结论羟基积雪草苷具有一定的肝保护作用,其机制可能与其抗炎作用有关。     

HPLC-ELSD法测定心肌康注射液中黄芪甲苷及异黄烷苷的含量

目的：用高效液相色谱-蒸发光散射检测器（HPLC—ELSD）法对心肌康注射液中黄芪部分指纹图谱中的黄芪甲苷及异黄烷苷进行了定性和定量分析。方法：采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器，Kromasil C18（4．6mm×200mm，5μ）色谱柱，采用梯度洗脱，紫外检测波长280nm，流速1．0ml／min，漂流管温度110℃，载气流速3．1ml／min。结果：建立了心肌康注射液中黄芪部分指纹图谱，并对其2种成分进行了定性和定量分析。结论：本试验方法简便、准确、重现性好。