细胞色素P450 1A2酶基因内含子1多态性与血浆氯氮平浓度的相关研究

目的：研究中国汉族人P4501A2酶基因内含子1多态性以及此多态性对血浆氯氮平浓度的影响。方法：50例符合CCMD-3诊断标准的精神分裂症患者，应用药物达治疗量-周后，于展6时取肘静脉血5毫升置于EDTA抗凝管中，分离白细胞从中抽提DNA，然后用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析法（PCR—RFLP）分析患者P4501A2酶基因内含子1多态性。测定22例应用氯氮平250mg／d治疗患者的血浆氯氮平浓度。结果：50例精神分裂症患者中P4501A2酶基因为A／A者22例（44％），酶基因为A／C者24例（48％），酶基因为C／C者4例（8％）。9例A／A型患者平均血浆氯氮平浓度（210．11±78．14）ng／ml，13例A／C型和C／C型患者平均血浆氯氮平浓度（228．69±82．84）ng／ml，两组间血浆氯氮平浓度无显著性差异。结论：中国汉族人P4501A2酶基因内含子1多态性出现频率与高加索人相似，P4501A2酶基因多态性在用中等剂量氯氮平治疗精神分裂症时对血浆氯氮平浓度影响不大。     

广东汉族妇女细胞色素P450 1A1基因多态性检测分析

目的探讨广东汉族妇女细胞色素P450 1A1(CYP1A1)基因的多态性分布规律.方法采用等位基因特异性扩增和PCR-RFLP技术,对160例广东汉族正常妇女的CYP1A1基因多态性进行了检测.结果 CYP1A1基因7号外显子A4889G多态位点A,G等位基因频率分别为75.0%和25.0%.AA,AG,GG基因型分布频率分别为57.5%,35.0%,7.5%;CYP1A1基因3′端非翻译区的MspⅠ多态位点m1及m2等位基因的频率分别为65.0%及35.0%.m1m1,m1m2,m2m2基因型分布频率分别为42.5%,45.0%,12.5%.广东汉族妇女CYP1A1基因A4889G多态与MspⅠ多态存在连锁不平衡关系(χ2=23.394,P<0.005).结论广东汉族妇女CYP1A1基因多态分布与日本人相近,与欧美人不同.广东汉族妇女CYP1A1基因两位点多态存在连锁不平衡关系.     

CYP2C19的基因多态性与临床

随着对CYP2C19基因多态性研究的不断深入,人们发现它同时存在个体差异和种群差异,而且这些差异影响到多学科疾病的诊断和治疗.它对酸相关性疾病及幽门螺杆菌感染的治疗疗效、慢性肝病及肝移植患者的药物选择、抗癫NFDA9药物及抗抑郁药物剂量的调整以及肿瘤高危性的判断、免疫抑制剂不良反应的大小等均有影响.本文对CYP2C19的基因多态性及其临床意义的研究进展进行了介绍.     

汉族人群酒精性肝病ALDH2和CYP2E1基因多态性研究

目的:研究乙醛脱氢酶(Aldehyde dehydrogenase,ALDH)和细胞色素P4502E1(Cytochrome P4502E1,CYP2E1)基因多态性与汉族人群酒精性肝病(Alcoholic liver disease,ALD)的关系.方法:应用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)方法检测汉族人群中对照组(45例)、ALD组(48例)、嗜酒无肝病组(38例)和非酒精性肝病组(42例)中ALDH和CYP2E1各基因型及等位基因的频率并进行比较.结果:ALDH2*1、ALDH2*2 2种等位基因在对照组与ALD组和非洒精性肝病组与ALD组之间的分布差异有显著性(P＜0.05),在嗜酒组和ALD组中以ALDH2*1/1基因型为主.CYP2EI的cl、c2两种等位基因在ALD组与其他3组比较分布均有显著性筹异(P＜0.05).结论:ALDH与CYP2EI基因多态性与ALD的发生关系密切.等位基因ALDH2*2可能是汉族人群中嗜酒和ALD的负性危险因素.B(c1/c2)型基因型在ALD发生中起着重要的作用,c2等位基因与ALD的发生有关.     

CYP2C19基因多态性与云南汉族人群冠心病的相关性研究

目的 冠心病(CHD)是一种致死率高,严重危害人类健康的疾病,我国该病发病率呈现上升趋势。遗传因素可增加冠心病风险。CYP2C19基因编码蛋白为细胞色素P450超家族成员之一,是人体重要的药物代谢酶。本研究旨在探讨CYP2C19基因多态性与中国云南汉族人群冠心病(CHD)的相关性。 方法 采用Sequenom MassARRAY®飞行质谱方法对云南省第二人民医院2012年9月-2015年9月根据知情同意原则收集的198例正常人(对照组)和514例冠心病患者(冠心病组)CYP2C19基因rs4986893、rs4244285、rs4917623三个单核苷多态(SNP)位点进行基因分型,Logistic回归法分析该基因多态性与冠心病的相关性。 结果 正常对照组和冠心病组3个位点的基因型和等位基因分布差异无统计学意义(P>0.05),Logistic回归分析校正年龄、性别、体重指数等,显示rs4986893位点携带A等位基因者患冠心病的风险增加[显性模 AA/AG vs.GG:OR 1.07,95%CI (1.00~1.14),P=0.036]。 结论 CYP2C19基因多态性可增加云南汉族人群冠心病发生风险,但仍需大样本人群进一步研究。      

蒙古族人群细胞色素P4501A1基因MSPI多态性的研究

目的:探讨内蒙古地区蒙古族人群细胞色素P4501A1(cytochrome P4501A1,CYP1A1)基因MSPI多态性.方法: 用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,分析了526名蒙古族正常健康成人CYP1A1基因3ˊ端限制内切酶MSPI位点的3种基因型(A、B、C)的分布频率.结果:MSPI基因型A占32.7%,基因型B占53.2%,基因型C占14.1%,等位基因m1、m2分别为59.3%、40.7%.结论:内蒙古地区蒙古族人群CYP1A1基因存在MSPI多态性,此人群CYP1A1基因MSPI多态位点的等位基因和基因型的分布与中国北方汉族人无显著性差异.     

广东人群CYP2C9基因T269C位点多态性研究

目的研究广东人群CYP2C9基因T269C位点多态性。方法PCR扩增跨越CYP2C9基因T269C位点的DNA片断,用MvaI酶切PCR产物,通过PAGE-银染判断基因型。结果在接受检测的158例健康广东人中,共检出2名CYP2C9 T269C位点杂合子个体,其余156人均为野生型纯合子个体。结论广东人群存在CYP2C9 269C即CYP2C9*13等位基因,其频率为0.006;中国人群和韩国人群CYP2C9*13等位基因频率差异无显著性。     

CYP1A1基因多态性与食管癌发生和发展的关系

细胞色素P4501A1(CYP1A1)酶是CYP酶超家族的成员。CYP1A1基因定位于人类染色体15q22~q24,参与致癌物亚硝胺和苯并芘的代谢活化,主要编码产物是芳烃羟化酶。目前CYP1A1基因多态性已经成为研究热点,其与食管癌的发生、发展有关。随着对食管癌易患性基因的深入研究、精准医学的发展,CYP1A1基因研究将会在预测食管癌高危人群和判断食管癌易患个体方面发挥重要作用,对食管癌的预防、早诊断、早治疗提供帮助,从而为人类战胜食管癌奠定基础。     

细胞色素P450 1A2酶基因内含子1多态性与血浆氯氮平浓度的相关研究

目的研究中国汉族人P450 1A2酶基因内含子1多态性以及此多态性对血浆氯氮平浓度的影响.方法50例符合CCMD-3诊断标准的精神分裂症患者,应用药物达治疗量1周后,于晨6时取肘静脉血5毫升置于EDTA抗凝管中,分离白细胞从中抽提DNA,然后用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析法(PCR-RFLP)分析患者P450 1A2酶基因内含子1多态性.测定22例应用氯氮平250 mg/d治疗患者的血浆氯氮平浓度.结果50例精神分裂症患者中P450 1A2酶基因为A/A者22例(44%),酶基因为A/C者24例(48%),酶基因为C/C者4例(8%).9例A/A型患者平均血浆氯氮平浓度(210.11±78.14) ng/ml,13例A/C型和C/C型患者平均血浆氯氮平浓度(228.69±82.84) ng/ml,两组间血浆氯氮平浓度无显著性差异.结论中国汉族人P450 1A2酶基因内含子1多态性出现频率与高加索人相似,P450 1A2酶基因多态性在用中等剂量氯氮平治疗精神分裂症时对血浆氯氮平浓度影响不大.     

CYP3A和MDR1基因多态性对环孢素A药代动力学的影响

环孢素A（CsA）属环状多肽化合物,作为基础免疫抑制剂广泛用于实体器官移植后的抗排斥反应,其主要经P-糖蛋白（P-gp）转运,细胞色素P450（CYP）3A酶代谢,CYP3A及多药耐药基因1（MDR1）的多态性可能影响CYP3A酶和P-gp的表达水平和生物活性,进而可能对CsA的药代动力学过程产生影响。本文就CYP3A和MDR1基因多态性对CsA药代动力学的影响进行综述,以期指导临床制定合理的个体化用药方案。     

注射用盐酸头孢他美对大鼠肝微粒体CYP1A2、CYP3A4和CYP2E1活性的影响

目的 研究注射用盐酸头孢他美对大鼠肝微粒体细胞色素P450(CYP450)酶系CYP1A2、CYP3A4和CYP2E1活性的影响。方法 将SD大鼠分成盐酸头孢他美给药组和生理盐水空白组,每组6只,雌雄各半,给药组尾静脉注射盐酸头孢他美50 mg/(kg·d),连续给药7 d,每天2次。HPLC法同时测定CYP450的3种同工酶特异性探针底物在SD大鼠肝微粒体内代谢产物生成量和原型探针底物降解量,判断酶亚型活性变化。分析柱Diamonsil C₁₈ (150 mm×4.6 mm,5 μm),流速1.0 mL/min。CYP1A2代谢样品测定条件为甲醇(0.1%甲酸)(A)-水(0.1%甲酸)(B),0~5 min: 18%A,5~10 min: 18%~60%A,10~15 min: 60%A,检测波长为247 nm;CYP3A4代谢样品测定条件为甲醇(A)-水(0.02%甲酸)(B),0~11 min: 40%~60%A,检测波长为223 nm;CYP2E1代谢样品测定条件为甲醇(A)-水(B),0~10 min: 37%~75%A,检测波长为287 nm。结果 探针底物及其代谢产物在测定浓度范围内线性关系良好(r≥0.999 7),精密度RSD<6％(n=5),提取回收率83.2%～97.5%。SD大鼠连续注射给予盐酸头孢他美后,CYP3A4的活性与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),可能存在诱导作用;CYP1A2和CYP2E1的活性与对照组比较差异无统计学意义 (P>0.05)。结论 静注给予盐酸头孢他美能诱导SD大鼠肝微粒体CYP3A4,对CYP1A2和CYP2E1没有诱导或抑制作用。提示经CYP3A4 代谢的药物在临床上与注射用盐酸头孢他美合用时,可能存在潜在药物-药物相互作用。     

细胞色素P450酶1A2基因多态性与度洛西汀抗抑郁临床疗效的关系

目的 研究细胞色素P450酶1A2（CYP1A2）基因C734A及G-2964A位点多态性与度洛西汀临床疗效的关系.方法 用度洛西汀对223例抑郁症患者进行为期6周的治疗,用汉密尔顿抑郁量表（HAMD）评定疗效,聚合酶链反应扩增及限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）检测CYP1 A2基因C734A及G-2964A位点单核苷酸多态性,用单因素方差分析分析两者的关系.结果 （1）223例患者中,C734A突变率为63.64％,G-2964A突变率为26.82％.（2）共计220例患者完成全程治疗.两突变位点联合分析结果表明,高活性组、中间活性组及低活性组在治疗后的HAMD减分率分别为（56.05± 10.13）％、（66.36±8.66）％和（73.82±7.10）％,3组之间两两比较均差异具有统计学意义（均P＜0.01）.结论 CYP1A2基因C734A及G-2964A位点多态性与度洛西汀治疗抑郁症的临床疗效密切相关.     

含CYP2E1基因的重组腺病毒载体转染人骨髓间充质干细胞联合达卡巴嗪的抗肿瘤效应

目的 构建含人细胞色素P-450 CYP2E1(CYP2E1)基因的缺陷型重组腺病毒载体,检测其协同化疗药物的抗肿瘤效应,为基因介导酶前药治疗提供新的思路.方法 克隆人肝CYP2E1全长cDNA,制备高滴度的重组腺病毒颗粒(1.2×1012 pfu/ml).分离、培养、传代纯化及鉴定人骨髓间充质干细胞(BMSC).用Transwell小室检测BMSC向肿瘤细胞的趋化迁移.将重组腺病毒分别转染BMSC和人黑色素瘤细胞A375细胞.荧光显微镜和RT-PCR、Western印迹法分别检测转基因细胞中外源增强绿色荧光蛋白(EGFP)、CYP2E1的表达.倒置显微镜、四甲基偶氮唑盐(MTT)和膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)和碘化丙啶(PI)双染色法检测CYP2E1协同酶前药达卡巴嗪(DTIC)的抗肿瘤效应(实验分A375-CYP2E1组、BMSC-CYP2E1组和BMSC-CYP2E1+A375组,并以各自空载体组作为对照;细胞接种后分别加入不同浓度DTIC).结果 成功构建重组腺病毒载体pAd5CMV-NpA-CYP2E1和pAd5CMV-NpA-EGFP.成功分离BMSC,并证明BMSC可通过聚碳酸酯膜分别向下室内的K562和A375细胞迁移.荧光显微镜检测到转基因靶细胞EGFP表达,RT-PCR和Western印迹法均检测到目的基因在转基因细胞中高表达.倒置显微镜下见加入DTIC后BMSCCYP2E1+A375组的死亡细胞明显多于对照组.MTT法示DTIC呈浓度依赖性抑制转CYP2E1基因的细胞生长,其中BMSC-CYP2E1+A375组药物半数抑制量(IC50)值为(0.17±0.13)mmol/L,其对照组为(0.65±0.20)mmol/L,二者差异有统计学意义(P＜0.01),可选0.05 mmol/L DTIC浓度作人BMSC的相对安全浓度.Annexin V/PI法示0.05 mmol/L DTIC处理细胞48 h后BMSC-CYP2E1+A375组细胞凋亡率明显高于其对照组(26.8±2.0比8.7±1.3,P＜0.01).结论 BMSC体外具有向肿瘤细胞趋化迁移的特性.重组腺病毒载体介导的CYP2E1转染BMSC具有协同化疗前药的抗肿瘤效应.     

CYP2C19和CYP2C9基因型与苯妥英血药浓度关系的研究

目的　探讨细胞色素氧化酶P4 5 0 2C19(CYP2C19)和CYP2C9基因型对癫痫患者苯妥英血药浓度的影响。方法　对 32例癫痫患者应用变性高效液相技术分析中国人常见的 2个CYP2C19和 1个CYP2C9等位基因变异 ,应用荧光偏振免疫法测定患者苯妥英的血药浓度 ,在进行标准化以排除剂量和体重对血药浓度的影响后 ,分析CYP2C19和CYP2C9基因型和苯妥英血药浓度的关系。结果　服用单一苯妥英药物的 32例患者中 ,CYP2C19 2、CYP2C19 3和CYP2C9 3等位基因频率分别为 31%、8%和 6 %。根据携带CYP2C19和CYP2C9突变等位基因的数量 ,将患者分为基因型为CYP2C19 1/ 1合并CYP2C9 1/ 1的野生型纯合子强代谢者 (EM) ,基因型为CYP2C19 1/ 2或CYP2C19 1/ 3的杂合中间代谢者 (IM) ,基因型为CYP2C19 2 / 2或CYP2C19 2 / 3或CYP2C19 1/ 2合并CYP2C9 1/ 3的突变型纯合子弱代谢者 (PM)。 3组频率分别为 34%、4 4 %、和 2 2 %。并且突变基因携带数量与标准化血药浓度呈正相关。PM患者服用同等剂量苯妥英时血药浓度比EM患者高 34% (P <0 0 1)。结论　苯妥英代谢受CYP2C9和CYP2C19基因调控。根据患者CYP2C19和CYP2C9基因型可以预测患者的药物浓度 ,有利于临床选择适宜的苯妥英初始剂量     

中国汉族人CYP2J2基因外显子8等位基因多态性研究

目的：探讨中国汉族人CYP2J2基因外显子8等位基因是否存在基因多态性改变及其与原发性高血压的关系。方法：采用聚合酶链反应(PCR)和限制性片段分析。随机对150例汉族健康体检者及150例汉族原发性高血压患者进行CYP2J2基因外显子8位点进行多态性分析。结果：300例均为野生型，未发现杂合子或纯合子。结论：未发现中国汉族人CYP2J2基因外显子8等位基因突变，中国汉族人高血压可能与CYP2J2基因外显子8等位基因突变导致的氨基酸改变引起的AA代谢异常无关。     

姜黄和乙醇对染苯小鼠CYP2E1活性及血液学毒性的影响

目的 观察染苯小鼠CYP2E1活性改变及血液学毒性的影响,继之研究乙醇、姜黄对苯毒性的干预作用.方法 昆明种小鼠80只,每组20只,随机分为4组,A组为生理盐水对照组,B组为单纯染苯组(苯中毒模型),即皮下注射苯制剂2 ml/kg;C组为乙醇干预组,即在B组处理的基础上,自由饮用10%乙醇;D组为姜黄干预组,即在给苯前,腹腔注射姜黄提取液.结果 (1)B组与A组比较,外周血及骨髓红细胞微核率上升出现高峰,同时外周血白细胞(WBC)、血红蛋白(Hb)、血小板(PLT)等指标明显低[(2.6±1.0)×109/L、(93±11)g/L、(593±81)×109/L],达到了苯中毒模型的标准.(2)C组与B组比较,外周血WBC、Hb、PLT等指标均低(均P<0.05);CYP2E1活性上升显著;骨髓嗜多染红细胞微核率高于B组,且差异有统计学意义[(8.8±1.8)‰比(6.5±1.0)‰,P<0.01].(3)D组与B组比较,外周血WBC、Hb、PLT数值均高(均P<0.01),但未达到正常水平;CYP2E1活性低于B组(P<0.01).结论 (1)对照比较CYP2E1活性改变后,染苯小鼠血液学毒性发生了变化;(2)乙醇诱导了CYP2E1活性,从而在体内增加了苯的血液学毒性;(3)姜黄在体内降低CYP2E1活性,一定程度上减轻了苯的血液学毒性.姜黄作为一种中药在防治苯中毒、抗炎、抗氧化、护肝及护胃等方面有着广泛的生物活性.     

温州地区汉族人群CYP2C19和CYP2C9基因多态性分析

目的：研究温州地区汉族人群CYP2C19、CYP2C9基因多态性分布。方法：采用聚合酶链式反应和测序方法,对287例健康人群CYP2C19、CYP2C9基因多态性进行分析。结果：温州地区汉族人群的CYP2C19*1、CYP2C19*2和CYP2C19*3三种等位基因的频率分别为65.16%、29.27%和5.57%;CYP2C19*1/*1、CYP2C19*1/*2、CYP2C19*1/*3、CYP2C19*2/*3、CYP2C19*2/*2和CYP2C19*3/*3基因型的频率分别为44.95%、33.45%、6.97%、4.18%、10.45%和0.00%,弱代谢率为14.63%;CYP2C9*1和CYP2C9*3等位基因频率分别为97.74%和2.26%,CYP2C9*1/*1和CYP2C9*1/*3的基因频率为95.47%和4.53%,未发现CYP2C9*3/*3。结论：温州地区汉族人群CYP2C19和CYP2C9弱代谢率与已报道的汉族人群基本一致,与日本人群相近,显著高于欧美人群。