川芎嗪对肾缺血再灌注时c-fos bcl-2 ICAM-1蛋白表达的影响

目的　探讨大鼠肾缺血再灌注损伤不同时间c -fos、细胞淋巴瘤 /白血病 - 2、细胞间粘附分子- 1蛋白的表达及川芎嗪对其影响。方法　用免疫组化法检测大鼠急性肾缺血再灌注不同时间内及川芎嗪干预后c -fos、细胞淋巴瘤 /白血病 - 2、细胞间粘附分子 - 1蛋白表达的分布及强度变化。结果　c -fos蛋白分布于近曲小管、远曲小管、集合管上皮细胞的细胞核、细胞浆内 ,再灌注后 1h表达明显增强 ,3h达高峰 ,6h锐减。细胞淋巴瘤 /白血病 - 2蛋白主要分布于近曲小管上皮细胞的细胞浆 ,再灌注后 1h表达明显增强 ,6h达高峰 ,2 4h仍有较强表达。细胞间粘附分子 - 1蛋白分布在肾血管、肾小管等部位 ,其中以肾血管为著 ,其表达增强于再灌注后 1h ,直到 2 4h仍有增高趋势。川芎嗪干预后c -fos、细胞间粘附分子 - 1蛋白表达明显下降 (P <0 0 1 )。细胞淋巴瘤 /白血病 - 2表达明显增高 (P <0 .0 1 )。结论　川芎嗪对肾缺血再灌注损伤有较好的保护作用     

地塞米松对肾缺血再灌注时c—fos bcl—2 ICAM—l蛋白表达的影响

目的：探讨大鼠肾缺血再灌注损伤不同时间c—fos、bcl—2、ICAM—1蛋白的表达及地塞米松对其影响。方法：用免疫组化法检测大鼠急性肾缺血再灌注不同时间内及地塞米松干预后c—fos、bcl—2、ICAM—1蛋白表达的分布及强度变化。结果：c—fos蛋白分布于近曲小管、远曲小管、集合管上皮细胞的细胞核、细胞浆内，再灌注后1h表达明显增强，3h达高峰，6h锐减。bcl—2蛋白主要分布于近曲小管上皮细胞的细胞浆，再灌注后1h表达明显增强，6h达高峰，24h仍有较强表达。ICAM—1蛋白分布在肾血管、肾小管等部位，其中以肾血管为著，其表达增强于再灌注后1h，直到24h仍有增高趋势。地塞米松干预后c—fos、ICAM—1蛋白表达明显下降(P＜0．01)。bcl—2表达明显增高(P＜0．01)。结论：地塞米松对肾缺血再灌注损伤有较好的保护作用。     

SIN-1抑制缺血再灌注肾脏ICAM-1表达

目的进一步探讨一氧化氮(NO)供体SIN-1对急性缺血性肾衰(IARF)的治疗作用机制.方法分别采用ICAM-1和整合素β2多克隆抗体,免疫组化方法观察NO供体对大鼠肾脏缺血再灌注损伤后ICAM-1表达及炎细胞浸润的影响,同时进行肾功能测定.结果肾脏缺血再灌注损伤后ICAM-1表达进行性增强,于再灌注24h达峰值,以外髓直小血管表达显著,整合素β2阳性细胞同样于再灌注24h达峰值,以外髓明显;再灌注同时灌注NO供体SIN-1可显著抑制缺血再灌注后ICAM-1的表达增强,减少局部炎细胞浸润,改善肾功能.结论NO供体SIM-1可通过抑制肾组织ICAM-1的表达及炎细胞浸润,发挥对急性缺血性肾衰的治疗作用.     

大鼠缺血再灌注损伤后肾组织ICAM-1表达及炎细胞浸润

局部炎细胞的浸润是导致缺血、再灌注后肾脏损伤及移植肾排斥反应的重要原因[1].本研究观察在体缺血再灌注损伤后大鼠肾血管ICAM-1表达与肾组织炎细胞浸润的关系,探讨内皮细胞粘附性改变在急性缺血性肾脏损害中的作用.     

c-fos在急性肾缺血再灌注后大鼠脑组织中的表达

目的研究c-fos在急性肾缺血再灌注后大鼠脑组织中不同时间段的表达及调控作用。方法取SD大鼠90只,建立肾缺血再灌注大鼠模型,采用免疫组化染色,光镜下观察肾及蓝斑、杏仁核、海马的病理改变,用c-fos免疫组化染色,观察c-fos于不同时间段在蓝斑、杏仁核、海马的阳性细胞数。结果 I、I/R 0～8 h组间比较c-fos表达差异均有统计学意义(P<0.05)。肾缺血再灌注损伤诱导c-fos表达,在杏仁核、蓝斑于8 h时达高峰,c-fos表达在海马于4 h时达高峰。结论肾缺血再灌注可引起脑组织损伤。c-fos在肾缺血再灌注引起脑组织损伤中发挥调控作用,其中杏仁核、蓝斑、海马参与调控。     

银杏叶复方制剂对家兔肾脏缺血再灌注损伤时ICAM-1、P-selectin表达的影响

目的探讨银杏叶复方制剂对家兔肾脏缺血再灌注损伤时细胞间粘附分子-1（ICAM-1）、p-选择素（P-selectin）表达的影响。方法 40只家兔随机分为对照组、缺血组、再灌注组和银杏复方治疗组,每组10只,治疗组家兔应用银杏叶复方制剂灌胃（10mL/kg）,每天1次,共4周;对照组、缺血组、再灌注组家兔均给予等量生理盐水灌胃。各实验组家兔均于再灌注30min后处死取材。光镜下观察肾脏组织学改变,免疫组织化学方法检测肾脏ICAM-1、P-selectin表达。结果缺血再灌注组肾组织ICAM-1、P-selectin表达升高,治疗组表达抑制,与缺血再灌注组比较,差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论 ICAM-1、P-selectin参与肾缺血再灌注损伤机制,银杏叶复方制剂能够明显减少其表达,从而保护缺血再灌注损伤肾脏。     

羟乙葛根素对脑缺血再灌注大鼠脑组织ICAM-1表达的影响

目的 探讨羟乙葛根素对脑缺血再灌注大鼠脑组织ICAM—1表达的影响：方法 56只大鼠分为假手术组、缺血再灌注组和缺血再灌注＋羟乙葛根素组，制作脑缺血再灌注模型，应用免疫组织化学方法测定ICAM—1的表达情况，并进行组织病理学观察。结果 缺血再灌注组再灌注后12h、24h、48h脑组织ICAM—1的表达显著高缺血再灌注＋羟乙葛根素组（P〈0.05），且核固缩细胞明显增多，淋巴细胞和中性粒细胞附壁和浸润明显；假手术组未见明显的异常变化。结论 羟乙葛根素对缺血再灌注脑组织具有保护作用，其机制可能通过降低ICAM—1的表达，有效地抑制脑缺血再灌注后的炎性反应，从而减轻脑缺血再灌注损伤。     

大鼠肾缺血再灌注损伤时c-fos基因的表达

为探讨原癌基因c－fos在急性缺血性肾脏损伤修复中的分子调控作用，用免疫组织化学法及原位分子杂交技术，对急性肾缺血再灌注后大鼠肾组织内Fos蛋白及c－fosmRNA表达的分布、强度、时程和动力学等特征进行了研究。缺血再灌注早期即可诱导肾组织中c－fos的高效表达，肾缺血45min，Fos蛋白表达在再灌注1h、2h～4h达高峰、8h锐减、24h消失。c-fosmRNA0.5h出现、1h达高峰、2h锐减，到4h时极少。原癌基因c－fos的高效表达可能参与缺血再灌注所致肾脏损伤修复的分子调控，从而影响其病变过程。     

地塞米松预处理小鼠肾缺血再灌注损伤研究

目的:验证地塞米松预处理是否可减轻肾缺血再灌注损伤,并探讨其使用剂量与肾缺血再灌注损伤减轻程度的相关性。方法:30只健康雄性C57BL/6小鼠随机分成5组,假手术组、肾缺血再灌注组、地塞米松2mg/kg组、4mg/kg组、6mg/kg组,每组6只。假手术组及缺血再灌注组,术前30min给予生理盐水腹腔注射。地塞米松预处理组小鼠,术前30min分别予以2mg/kg、4mg/kg及6mg/kg剂量的地塞米松腹腔注射。不同剂量地塞米松预处理小鼠及缺血再灌注组小鼠开腹后用血管夹夹闭右侧肾蒂,生理盐水浸湿纱布覆盖切口置于32℃温箱45min,然后松开血管夹,恢复肾脏血流灌注,去除左侧肾脏,缝合腹部,术毕放回动物房。松开血管夹后24h处死小鼠,收集血清和肾脏标本进行相关检测。结果:地塞米松预处理组小鼠的尿素氮、肌酐水平均显著低于缺血再灌注组小鼠,且肾脏病理可见其肾小管上皮细胞肿胀、空泡变性程度及炎性细胞浸润程度也轻于缺血再灌注组。2mg/kg组小鼠的尿素氮、肌酐水平显著高于4mg/kg组与6mg/kg组,差异有统计学意义,而4mg/kg组与6mg/kg组间差异无统计学意义。肾脏病理可见2mg/kg组小鼠的肾小管上皮细胞肿胀、空泡变性程度及炎性细胞浸润程度较4mg/kg组与6mg/kg组重,差异有统计学意义,但4mg/kg组与6mg/kg组间差异无统计学意义。结论:地塞米松预处理可以减轻肾缺血再灌注损伤,但其减轻程度与其使用剂量不完全呈正相关。     

视网膜缺血再灌注后c-fos、c-jun蛋白表达

目的:观察大鼠视网膜缺血再灌注(RIR)后,凋亡即刻基因cfos、cjun在视网膜各层细胞中的表达变化,进一步明确凋亡即刻基因和RIR损伤发生机制的关系。方法:采用视网膜中央动脉结扎方法诱导大鼠视网膜缺血60min,解除结扎,建立RIR模型。缺血60min,再灌注0,1,3,6,12,24h作视网膜石蜡切片,cfos,cjun免疫组化观察。结果:正常对照组和缺血组未见cfos、cjun表达,RIR后,视网膜神经节细层(ganglioncelllayer,GCL)和内核层(innernuclearlayer,INL)1h开始少量表达(P<0.05),3h达到高峰(P<0.05),6h开始下降(P<0.05),24h几乎趋于正常组表达(P>0.05)。而外核层(outernuclearlayer,ONL)几乎无阳性表达。结论:cfos、cjun参与RIR损伤发生,RIR中视网膜节细胞层和内核层细胞存在凋亡征象,尤以3h组最为显著。     

七氟烷对大鼠缺血再灌注肺组织的保护作用机制研究

目的探讨七氟烷对大鼠缺血再灌注损伤肺组织的保护作用及其机制。方法 30只SD大鼠分为假手术组（Sham组）、缺血再灌注组（Ischemia reperfusion,I/R组）及七氟烷处理组（Ischemia reperfu-sion＋sevoflurane;I/R＋S组）,每组10只。在全身麻醉下建立大鼠肺缺血再灌注损伤模型,Sham组：开胸游离左肺门后,未予阻断;I/R组：阻断左肺门45min而后松开血管夹形成缺血再灌注;I/R＋S组：在实验过程中持续吸入七氟烷。再灌注后180min的Sham组、I/R组、I/R＋S组的肺组织观察形态学变化,免疫组化法检测各组肺组织ICAM-1及NF-кB表达情况,检测光密度值（OD）。检测支气管肺泡灌洗液（Bronchoalveolar lavage fluid;BALF）中总蛋白含量、肺组织干/湿质量比（Dry/Wet;D/W）、肺组织髓过氧化物酶（Myeloperoxidase;MPO）及超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase;SOD）含量。结果病理切片显示,I/R组肺泡和肺间质内白细胞聚集成团,肺泡结构破坏,间隔增宽,肺泡腔严重出血水肿,肺损伤较I/R＋S组更加严重。I/R组、I/R＋S组均随着再灌注时间的延长表现出明显的肺损伤变化,肺组织ICAM-1及NF-кB表达明显增加,OD值明显增高（P〈0.05）;肺组织BALF总蛋白和MPO含量明显升高、肺组织D/W和SOD显著降低（P〈0.05）;与C组、I/R组相比,I/R＋S组各项观察指标在不同时间点均存在统计学差异。结论七氟烷降低缺血再灌注肺组织ICAM-1及NF-кB的表达,可减轻大鼠肺缺血再灌注损伤。     

缺血预处理对在体大鼠缺血再灌注损伤心肌ICAM—1mRNA表达的影响

目的：利用大鼠在体心肌缺血再灌注模型,应用原位杂交来观测ICAM－1mRNA在各组大鼠心肌中的表达,以了解缺血预处理对ICAM－1表达的影响,并探讨其机制。方法：雄性Sprague-Dawley大鼠60只,随机分为心脏缺血／再灌注组（IR,n=20),预处理组（IPC,n=20)及假缺血组（Sham,n=20),术毕抽血5ml,查血清SOD,MDA,应用原位杂交方法检测ICAM－1mRNA在各组大鼠心肌中的表达,结果：再灌注2hIR组血清MDA较Sham组及IPC组有明显升高（P＜0．01）,IR组血清SOD较Sham组及IPC组有明显降低（P＜0．01）,再灌注2h后,IR组心肌ICAM－1mRNA表达较IPC组明显增加（P＜0．01）,结论：缺血预处理可有效的保护缺血再灌注心肌,同时对于心肌ICAM－1mRNA表达具有下调作用,且后者有可能是前者的原因。     

大鼠肝缺血再灌注后不同时相ICAM-1分子表达和肝损伤的关系

目的：探讨大鼠肝缺血再灌注后不同时相细胞间粘附分子（ICAM－1）表达和肝损伤的关系。方法：Wistar大鼠随机分为假手术组、再灌注30min组、再灌注60min组、再灌注24h组、再灌注72h组共5组；建立大鼠肝缺血再灌注模型，观察不同时相血清丙氨酸转氨酶（ALT）和天冬氨酸转氨酶（AST）水平，以及应用免疫组化方法（SP法）检测肝组织中不同是相ICAM－1分子的表达。结果：大鼠血清ALT和AST水平在再灌注30min升高显著（P＜0．05），再灌注60min组达高峰（P＜0．01），再灌注24h、72h组血清ALT和AST水平降至正常水平；再灌注后不同时相ICAM－1分子表达水平与血清ALT和AST水平呈显著正相关（P＜0．05）。结论：ICAM－1分子参与肝再灌注损伤的过程，其表达的强弱与肝损伤程度密切相关。     

视网膜缺血再灌注损伤后凋亡相关基因表达的变化

目的 研究视网膜缺血再灌注损伤（RIRI）中凋亡相关基因野生型p53（WTp53）、bax和bcl-2表达的变化,探讨其作用机制。方法 将28只Wistar大鼠随机分为正常组、缺血组,其中缺血组又分为再灌注后1、6、12、24、48和72h等6个组。建立RIRI动物模型,用免疫组织化学链霉亲和素-生物素过氧化物酶复合物（SABC）法检测再灌注后不同时段视网膜组织中WTp53、bax和bcl-2基因表达的变化。结果 缺血组视网膜再灌注后WTp53、Bax蛋白表达增加,与正常组比较．再灌注6～72h差异有显著意义（F=487．19、281．97,q=11．526～52．401,P〈0．05）。缺血组视网膜再灌注后Bcl-2蛋白表达无明显变化,与正常组比较,差异无显著性（P〉0．05）。结论 缺血再灌注损伤引起WTp53、bax基因在视网膜神经节细胞层、神经纤维层与内核层表达增高;WTp53和bax可能通过诱导或促进神经节细胞凋亡参与了视网膜缺血再灌注损伤的发生。     

STUDY ON INTERCELLULAR ADHESIONMOLECULE-1 AND P-SELECTIN IN LIVER ISCHEMIA AND REPERFUSION INJURY

ResumeObjectifL'articleapourbutd'dtudierieroledeL'adhesionmolecule--iintercellulaire(ICAM--I)etP--sdlectindanslagendsedelesionhdpatiqueparischemie--reperlusion.MethodesLe/Oiedesratscumisdl'ischdmie--reper/usionpendant60minutesaservicommemodule.Lesanimauxscutdivisdsen3groupes.iegroupefantome;iegrooveischemiquedecontrblecUl'donneseulementduserumphysiologique,etiegroupetraitsoUondonnel'anticorpsmonoclonalanti--P--selectine(Mab)ddosedeZing/kg15minutesavantlareperfusion.RdsultatsCommeresulta…     

雌激素对大鼠部分肝缺血再灌注损伤的影响

目的:观察雌激素在大鼠部分肝缺血再灌注损伤中的作用.方法:60只SD大鼠随机分为雌性组(F组)、雄性组(M组)、雌性卵巢切除组(O组)、雄性雌二醇组(E2组),每组15只,分别研究雌激素在大鼠部分肝缺血再灌注损伤中的作用,以血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(AKP)水平作为评定肝损伤的指标.结果:F组的ALT、AST、AKP水平明显低于M组及O组(P＜0.05);E2组的ALT、AST、AKP水平明显低于M组及O组(P＜0.05).结论:雌激素对大鼠部分肝缺血再灌注损伤具有明显的保护作用.     

藏药莪达夏对大鼠心肌缺血-再灌注损伤Bcl-2和Bax表达的影响水

目的探讨藏药莪达夏对大鼠心肌缺血-再灌注损伤保护作用可能的分子机制。方法以结扎大鼠冠脉左前降支方法造成心肌缺血再灌注模型,再灌注40min后采用酶联免疫方法检测大鼠心肌凋亡蛋白Bcl-2和Bax含量,并行组织形态学观察。结果心肌组织中Bcl-2的含量缺血再一灌注模型组明显低于正常对照组,莪达夏高、中、低剂量组均高于模型组;心肌组织中Bax的含量缺血再一灌注模型组明显高于正常对照组,莪达夏高、中、低剂量组均低于模型组。结论对大鼠心肌缺血一再灌注损伤保护作用可能的分子机制是莪达夏能够通过促进Bcl-2蛋白的表达、抑制Bax蛋白的表达从而抑制细胞凋亡的发生,发挥抗缺血缺氧性损伤的保护作用。     

大鼠脑缺血再灌注中iNOS源性NO/ONOO-对Caspase-1蛋白表达的影响

目的探讨大鼠局灶性脑缺血2 h再灌注48 h诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)来源的一氧化氮(nitric oxide,NO)和过氧亚硝基阴离子(peroxynitrite,ONOO-)对Caspase-1蛋白表达的影响.方法闭塞大鼠左侧大脑中动脉造成局灶性脑缺血模型.给予选择性iNOS抑制剂氨基胍,采用硝酸还原酶法检测脑组织NO含量、流式细胞术检测硝基酪氨酸表达、免疫组织化学法检测Caspase-1蛋白表达的变化.结果与单纯缺血/再灌注组比较,腹腔注入氨基胍抑制iNOS活性可使Caspase-1蛋白表达降低.结论大鼠局灶脑缺血再灌注过程中,iNOS来源的NO/ONOO-可促进Caspase-1蛋白表达,这可能是iNOS活性增加促进细胞凋亡的机制之一.