生物心脏瓣膜钙化机理及抗钙化研究

为了解决人工生物心脏瓣膜晚期钙化和衰坏的问题，作者从生物瓣组织胶原蛋白分子水平进行了一系列研究。发现生物瓣组织钙化与胶原蛋白分子末端游离羧基含量有关，并筛选出环氧氯丙烷化学改性戊二醛处理生物瓣的方法，可明显减低瓣膜组织胶原蛋白末端游离羧基含量。对化学改性后的猪主动脉瓣、牛心包瓣和猪心包瓣经新西兰幼兔皮下埋藏２、４、６周和心内移植半年后能明显减轻钙化，并能较好地保持组织结构和瓣叶功能。经化学改性后的瓣膜组织能保持较好的组织稳定性和机械抗张强度、免疫原性测试为阴性，符合临床应用要求。根据本组实验结果，可以为临床提供一种防止生物瓣膜晚期钙化和衰坏的途径。     

新型（XJ）异种猪瓣的研制与临床应用

目的介绍一种新型抗钙化异种猪瓣，并对其临床移植后的早期血流动力学进行评价。方法应用环氧氯丙烷（ＥＣ）化学改性戊二醛（ＧＡ）处理猪瓣。对这类改性后生物材料特性、弹性瓣架进行了实验研究，并应用Ｓｗａｎ－Ｇａｎｚ导管技术和二维超声心动图对换瓣病例进行了早期血流动力学观察。结果（１）ＥＣ改性后的猪瓣经移植于新西兰兔皮下２周、４周、６周后比对照组明显减轻钙化２．４～５．０倍；（２）ＥＣ改性后的猪瓣组织稳定性和机械抗张强度与对照组相比无明显差别；（３）游离羧基含量下降６．９倍，抗原性为阴性；（４）自行设计的三柱等距高弹性钢丝瓣架，对瓣叶承受的应力减小至９０％以下；（５）新型生物瓣体外流体力学测试平均跨瓣压差，有效开口面积，瓣口回流百分比以及流场均接近生理状态；（６）临床应用２４只新型生物瓣给２１例患者进行瓣膜移植，随访３月～５年未有瓣膜故障导致不良后果者。结论新型异种猪生物瓣既具有明显抗钙化效果，又保持了良好的组织结构和机械强度，组织相容性好，早期临床血流动力学满意。     

脱细胞猪肺动脉带瓣管道的支架材料研究

目的研究心血管组织在经过适当脱细胞处理后的组织结构和生物学特性。方法对带瓣猪肺动脉管道进行脱细胞处理，所得组织和作为对照的新鲜天然组织分别进行HE染色、ETVG染色、免疫组化染色及扫描电镜检查，并测定各种大分子物质的含量；在小鼠皮下移植6周后测定组织钙含量及钙定位染色。结果脱细胞后的组织内未见细胞结构，基质结构基本保持。胶原和弹性蛋白含量增加。脱细胞后的组织在小鼠皮下移植后钙含量较天然组织明显下降。结论经过合适的脱细胞处理后，可以去除几乎所有的细胞成分，基本保留的基质结构，能显著减轻在异种移植时引起的钙化。     

脱细胞猪主动脉瓣膜与可降解聚合材料共同构建复合组织工程瓣膜

目的对新型复合组织工程瓣膜进行体外生物力学和动物体内移植试验，为临床应用过渡提供依据。方法以脱细胞猪主动脉瓣作为支架，用可降解聚合材料3-羟基丁酸与3-羟基己酸共聚酯（3一hydroxybutyrate—co-3-hydroxyhexanoate，PHBHHx）涂层，构建新型复合组织工程瓣膜。（1）复合组织工程瓣膜、新鲜猪主动脉瓣和脱细胞猪主动脉瓣各12枚，用单轴生物拉伸机进行体外生物力学测试；（2）小尾寒羊10只，其中5只在全身麻醉非体外循环下接受复合组织工程瓣膜，移植到羊的肺动脉瓣位；其余接受脱细胞猪主动脉瓣作为对照。术后18周处死动物，取出移植瓣膜，进行组织学、免疫荧光染色、扫描电子显微镜检查和钙含量测定。结果复合组织工程瓣膜保持了自然瓣形态，抗拉强度显著提高（P〈0．05）；瓣膜柔软，表面光滑无血栓；免疫荧光染色检测，瓣膜新生内膜中内皮细胞呈CD31阳性反应，沿瓣表面连续排列，间质细胞呈现单克隆鼠抗人平滑肌actin（sMA）阳性反应；复合组织工程瓣膜钙含量明显低于脱细胞猪主动脉瓣（P〈0．05）。结论复合组织工程瓣膜具有自然瓣膜的三维形态结构，良好的生物力学特性、生物相容性和细胞引导性，初步具备组织工程瓣膜雏形。     

游离组织瓣移植分期尿道下裂修复术

目的：总结游离组织瓣移植分期尿道下裂修复术的经验。方法：采用游离皮瓣或(和)口腔黏膜瓣移植分期修复术治疗男性尿道下裂58例，其中冠状沟型10例，阴茎体型36例，阴囊型9例，会阴型3例；首次手术45例，二次或多次手术后13例。单纯应用包皮皮瓣移植者35例，单纯应用耳后皮瓣移植者8例，单纯应用口腔黏膜瓣移植者6例，联合应用包皮皮瓣和耳后皮瓣移植者6例，联合应用包皮皮瓣、耳后皮瓣和口腔黏膜组织瓣移植者3例。结果：一期手术移植组织瓣成活56例(97％)，包皮瓣坏死2例。二期手术后因感染使成形的新尿道完全裂开5例，发生尿漏8例，成功43例(77％)。40例随访6个月，排尿通畅，阴茎外观好。结论：游离组织瓣移植分期修复术治疗尿道下裂成功率较高，并发症少，术后阴茎外观好，是适用于各型尿道下裂治疗的一种较好方法。     

去细胞猪主动脉瓣移植于犬腹主动脉内构建组织工程瓣

目的 探讨在犬腹主动脉内构建组织工程心脏瓣膜的实验方法。方法 将预种犬血管间质细胞和内皮细胞的去细胞猪主动脉瓣叶(猪瓣),移植于6条犬的腹主动脉内,于术后4,6,8和10周对移植瓣叶进行形态、组织结构及免疫组化染色观察。结果 (1)移植术后4周时瓣叶周边有多层细胞长入,新细胞外基质形成,原支架组织部分吸收。(2)10周末猪瓣组织完全吸收,为宿主细胞及新合成的细胞外基质取代。基质中间质细胞主要为成纤维细胞和肌纤维母细胞。细胞外基质成分主要为Ⅰ、Ⅲ型胶原和少量弹力纤维,并含有中性和酸性黏多糖。(3)内皮细胞覆盖于瓣叶表面。结论 (1)移植于犬腹主动脉内的去细胞猪瓣于移植术后10周末基本构成组织工程瓣叶;(2)腹主动脉内异位移植是一种可供选择的实验研究方法。     

碳化二亚胺交联去细胞猪肺动脉带瓣管道物理性能的研究

目的研究碳化二亚胺（carbodiimide,EDC）交联去细胞猪肺动脉带瓣管道体外的物理性能。方法在相对无菌条件下取得20个猪带瓣肺动脉,沿肺动脉瓣膜交界处纵向剪开分成3份（每份样本都由肺动脉管壁及其瓣膜组织组成）。将3份样本用抽签法随机分为3组：A组为对照组,为新鲜猪肺动脉带瓣管道样本,不再进一步处理;B组为去细胞组织样本,采用胰蛋白酶＋去污剂Triton X-100对猪带瓣肺动脉样本进行去细胞处理;C组为EDC交联去细胞组织样本,即在B组处理的基础上进一步行EDC交联处理。测试肺动脉组织含水量、厚度、抗张强度和热皱缩温度,评价所有样本的物理性能。结果胰蛋白酶＋去污剂能完全去除猪肺动脉带瓣管道组织的内膜层内皮细胞和管壁及瓣膜组织的细胞和部分基质成分,保留比较完整的纤维支架成份。与A组相比,B组肺动脉壁样本含水量增加（P=0.000）,肺动脉瓣膜含水量变化不明显,肺动脉壁（P=0.000）和瓣膜（P=0.000）的厚度减少、抗张强度下降（P〈0.01）、热皱缩温度无明显变化。与B组比较,C组肺动脉管壁样本含水量减少（P=0.000）,肺动脉瓣膜样本含水量变化不明显。肺动脉管壁和瓣膜样本的厚度变化不明显、抗张强度增加（P〈0.01）、热皱缩温度增加（P=0.000,0.000）。与A组相比,C组肺动脉壁和瓣膜含水量变化不明显,肺动脉壁和瓣膜的厚度减小（P=0.000,0.000）,抗张强度无明显差别,热皱缩温度增加（P=0.000,0.000）。结论 EDC交联去细胞方法能够加强去细胞肺动脉带瓣管道的抗张强度、降低去细胞肺动脉管壁的含水量。     

去细胞和戊二醛处理对猪主动脉瓣内源性逆转录病毒影响的比较

我们应用聚合酶链反应(PCR)及逆转录．聚合酶链反应(RT-PCR)方法对去细胞猪瓣、猪外周血、犬腹主动脉内移植去细胞猪瓣1个月后外周血，并同时对经戊二醛处理猪主动脉瓣加以对照研究．探讨这两种方法对猪内源性逆转录病毒(PERV)的影响。     

组织瓣联合移植在四肢组织缺损中的应用

1991 年以来,应用组织瓣联合移植修复四肢各种组织缺损 85 例,其中 2 块组织瓣移植 70 例,3 块组织瓣移植 12 例,4 块组织瓣移植 3 例。我们体会,组织瓣联合移植适应四肢各种复杂性组织缺损的修复和功能重建。 组织瓣联合移植在四肢组织缺损中的应用@滕云升$兵器工业521医院、陕西手显微外科研究所     

一种新的心脏生物瓣膜材料：Ⅱ．猪腹膜与牛心包在动物体内钙化程度的比较

本实验用0．5％戊二醛，0．5％戊二醛70％，5％十二烷基硫酸钠（SDS），0．26％MgCl2及10％肌氨酸分别处理之猪腹膜和牛心包组织植入大白鼠皮下，采用原子吸收分光光度计，X线摄片，X衍射分析，光镜和电镜来确定植入组织钙化的程度。结果表明，各埋藏组猪腹膜和牛心包组织之钙含量相近。经0．5％戊二醛，5％SDS分别处理之猪腹膜及牛心包植入犬左心房24例周发现，经0．5％戊二醛处理之牛心包钙化程度较猪腹膜的重（P＜0．05）。     

组合与复合组织移植治疗手部套脱伤

目的探讨组合与复合组织移植治疗手部套脱伤及重建手功能的疗效。方法应用组合组织瓣和复合组织瓣移植治疗伴有指缺损的全手或手指皮肤套脱伤15例，共移植26块组织瓣。结果15例26块组织瓣，全部成活25块，部分坏死1块。术后随访5．36个月。手功能评定：优12例，良3例。结论组合与复合组织瓣移植是治疗伴有指缺损的手部皮肤套脱伤，重建手功能的良好治疗方法。     

心外带瓣管道在复杂先心病外科治疗中的应用

目的 总结心外带瓣管道在复杂先天性心脏病外科治疗中的应用经验。方法 1979年9月至2001年12月，采用心外带瓣管道对131例复杂性先天性心脏病病人行外科治疗。其中同种带瓣管道22例，异种(猪肺动脉瓣)带瓣管道73例及抗钙化猪心包瓣管道36例。结果全组手术死亡率17．5％。近10年手术65例，死亡率10．7％。近5年手术44例，死亡率4．5％。结论 液氮保存的同种带主动脉瓣或肺动脉瓣管道其取材困难，而抗钙化猪心包瓣管道可以弥补上述不足，还可制成各种型号管道备用。在使用时，按心脏病理解剖确定管道置入方法，掌握管道尺寸，可保持管道完好的几何形状，获得更好的血流动力学效果及持久性。     

双侧上颌骨缺损的显微外科修复

目的 探讨应用游离组织瓣移植行双侧上颌骨缺损修复的可行性和应用价值。方法 对1999年7月～2003年8月期间完成的16例应用游离组织瓣行双侧上颌骨缺损修复的病例作回顾性研究，分析上颌骨缺损的原因、缺损的分类、所采用组织瓣的类型、受区血管、游离瓣成活情况及术后并发症的发生情况，并分析应用游离组织瓣行双侧上颌骨缺损修复的适应证和可行性。结果 所采用的游离瓣包括腓骨瓣(9块)、腹直肌皮瓣(6块)、前臂皮瓣(3块)。术后1例腓骨瓣出现血管危象，经抢救成活，其余的游离瓣术后均未出现血管危象，并全部获得成活。受区和供区总的并发症发生率为31．3％，除了早期的2例供区并发症外，其余的并发症均不严重，没有造成严重后果。结论 应用游离组织瓣行双侧上颌骨缺损修复安全可靠，成功率高，且有利于改善患者术后的功能和外形，值得进一步研究和应用。应根据不同缺损的具体特点选择合适的游离组织瓣移植。     

Ionescu-Shiley异种心包瓣膜:随访6年以上的结果

自1970年戊二醛固定的牛心包瓣应用于临床以来,许多报告指出其血液动力学特性优于猪生物瓣。但尚需更多的资料证实其远期效果。本文回顾了Ottawa 大学心脏研究所应用这种生物瓣的经验。自1977年3月到1983年7月该研究所将497个lonescu-Shiley 异种心包瓣为463例患者进行瓣膜替换术。单瓣替换为432例;其中292例为主动脉瓣替     

不同试剂脱除猪主动脉瓣细胞的对比研究

目的 用不同方法去除猪主动脉瓣的细胞并比较效果，为组织工程瓣膜提供良好的实验材料。方法 采用十二烷基硫酸钠（SDS）、脱氧胆酯酸钠（SD）、曲拉通（Triton）X-100制备猪主动脉瓣脱细胞基质。标本进行大体、光镜、电镜观察，DNA提取、力学性能的检测并比较。结果 SD无法完全脱除主动脉瓣瓣根内的细胞。TritonX-100和SDS可以完全脱除瓣膜细胞。TritonX-100较好的保持了主动脉瓣胶原纤维和弹性纤维的原有排列和分布，并有较好的力学性能。而SDS对瓣叶和瓣根血管壁中的纤维支架都造成了一定的损伤。SDS和TritonX-100脱细胞时间无明显差别。结论 TritonX-100可以成功脱除猪主动脉瓣细胞，并较好的保持了主动脉瓣的结构和力学性能。     

192例头颈部游离组织瓣移植的临床分析

目的 对192例的204块头颈吻合血管的游离组织移植作回顾性分析。方法 1999年5月-2001年3月由同一术者完成手术192例，分析其一般情况、临床病理诊断、缺损情况、所采用组织瓣的类型、组织瓣成活情况及术后并发症的发生情况，并分析有可能影响皮瓣成活的各种因素。结果 前臂皮瓣（83块）、腓骨瓣（81块）和腹直肌肌皮瓣（32块）为采用最多的3种游离组织瓣，占全部组织瓣的96.1%；成功率为98.5%，术后11例发生血栓，其中8例经抢救成活，3例失败；57例受区和供区出现并发症，但大我数并发症均较轻，没有造成严重的后果；吸烟、饮酒、放疗和年龄（高龄和儿童）等均非影响组织瓣移植成功的重要因素。结论 头颈部游离组织瓣移植修复安全可靠，明显优于传统的带蒂组织瓣，值得进一步推广和应用。     

监测皮岛在多种深部移植组织瓣血供监测中的应用

骨关节与软组织缺损、神经损伤等通常需进行深部游离组织瓣移植来修复和重建。为了能像监测体表组织瓣一样监测深部移植组织瓣,1989年9月～2003年6月，我们根据深部移植组织瓣的解剖学特点，对85例多种深部移植组织瓣设计外置的血供同源的监测皮岛来观察血供，临床效果满意。报告如下。     

封闭负压吸引联合组织瓣移植治疗严重感染性骨外露

目的 探讨封闭负压吸引联合组织瓣移植治疗严重感染性骨外露的效果。方法12例感染性骨外露创面先行清创及封闭负压吸引（VSD，商品名维斯第），7～10d后应用组织瓣移位或移植方法覆盖骨外露创面。结果本组12例创面经封闭负压吸引7～10d后，感染得到控制，除骨外露处无肉芽组织生长外，其骨外露周边软组织缺损处均可见新鲜肉芽组织生长，细菌培养阴性，再次手术行游离植皮及组织瓣移植全部一次成活。结论封闭负压吸引可以控制感染、免除换药、刺激肉芽组织生长，为组织瓣移植提供了良好的条件。封闭负压吸引联合组织瓣移植对严重感染性骨外露具有很好的修复效果。     

组织瓣联合移植治疗严重手外伤

目的 探讨组织瓣联合移植治疗严重手外伤的方法。方法 用组织瓣联合移植治疗严重手外伤21例，其中足部组织瓣(包括2趾、Mu甲瓣、部分Mu趾、2趾加3趾、2趾加Mu趾腓侧皮瓣)联合移植治疗多指缺损10例；股前外侧皮瓣、胸脐皮瓣、臂下外侧皮瓣与足部组织瓣联合移植治疗手指伴手部较大面积软组织缺损11例。两块组织瓣联合移植11例，三块组织瓣联合移植10例。结果 21例52块组织瓣全部成活，经3个月—2年半随访，再造拇、手指外观、功能恢复满意，皮瓣均恢复了保护性感觉。结论 组织瓣联合移植可一次完成多手指的再造和创面的修复，是严重手外伤后手功能重建的良好方法。     

犬头面部复合组织同种异体移植模型的建立

目的建立犬头面部复合组织同种异体移植的实验动物模型。方法①解剖研究：用4只杂种犬进行头面颈部的解剖及复合组织瓣的切取研究。②自体回植（Ⅰ组n=5）：为选择最佳的复合组织瓣移植方式，进行了三种形式的复合组织瓣白体回植。③异体移植（Ⅱ组n=6）：以第三种复合组织瓣及其改良的组织瓣形式进行了两种头面部复合组织异体移植。免疫抑制治疗方案为环孢霉素A和皮质激素联合应用，依据环孢霉素A血药浓度调整用药剂量。分别在术后4、6、12周及6个月对眼轮匝肌进行肌电图检测。结果①犬头面部的解剖特征与人相似，以颈外动静脉为血管蒂能够为头面部复合组织瓣提供良好的血供。②IC组两只犬长期存活，但出现唾液漏。③Ⅱa组中1只犬于移植术后28d免疫排斥，通过调整环孢霉素A及强的松的用量并局部应用氯倍他索涂抹，2周后治愈，现已存活309d。Ⅱb组中3只犬现已分别存活159、129和108d，无并发症，肌电图显示眼轮匝肌功能逐步恢复。结论改良犬单侧上半头面部组织瓣异体移植模型是研究头面部复合组织异体移植的理想模型。