248株肠球菌对抗菌药物的敏感性分析

目的了解全身感染和伤口分泌物感染的粪肠球菌、屎肠球菌对抗菌药物的敏感性,为临床提供治疗依据。方法采用微量稀释法对248株自临床送检的血液、尿液及其他标本分离的肠球菌进行药敏试验,测定其MIC值。结果248株肠球菌属中,粪肠球菌187株、屎肠球菌61株,两者的比例为3.06∶1。粪肠球菌对氨苄西林、环丙沙星、左氧氟沙星、青霉素G的敏感率为63.2%～99.1%,高于屎肠球菌的16.7%～31.9%;屎肠球菌对四环素的敏感率为40.3%,高于粪肠球菌的19.3%;2种肠球菌对红霉素的敏感率分别是13.9%和8.3%,对利奈唑烷和万古霉素的敏感性均＆gt;95%;分离自伤口分泌物的粪肠球菌对氨苄西林、环丙沙星、左氧氟沙星、青霉素G、四环素的敏感性略高于血液分离菌,分离自伤口分泌物的屎肠球菌对氨苄西林、红霉素、高浓度庆大霉素、青霉素G、四环素的敏感性低于血液分离菌,伤口分泌物和血液分离得到屎肠球菌对利奈唑烷均100.0%敏感。结论粪肠球菌、屎肠球菌对不同的抗菌药物的敏感性差异较大,治疗时应根据耐药特点及菌种间的耐药性差异选择相应的药物和方案,目前万古霉素和利奈唑烷仍然是治疗肠球菌属感染的有效药物。     

粪肠球菌和屎肠球菌的医院感染分布及耐药性

肠球菌广泛存在于自然界,可寄生于人类的胃肠道和女性生殖道,是人和动物肠道正常菌群的一部分,是仅次于葡萄球菌的重要院内感染病原菌[1],较多出现在有严重基础疾病的老年人和免疫力低下的患者中,主要引起尿路、腹腔、盆腔感染,还可引起菌血症、心内膜炎、呼吸系统感染.由于其固有的耐药性,对头孢菌素类、克林霉素、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶、低浓度的氨基糖苷类抗生素即使在体外实验可表现出敏感,但临床治疗往往无效[2],所致感染治疗困难.肠球菌属中粪肠球菌和屎肠球菌占临床分离的绝大多数[3].本文就医院感染标本中分离出的粪肠球菌和屎肠球菌的来源和耐药性进行分析,以期为临床治疗肠球菌医院感染提供参考依据.     

临床分离粪肠球菌和屎肠球菌菌株的检测及耐药性研究

目的分析粪肠球菌、屎肠球菌对抗菌药物的耐药性及敏感性,为合理使用抗菌药物提供证据。方法运用Phonex 100全自动微生物鉴定/药敏系统对临床分离的菌株进行鉴定和药敏试验。结果 103株肠球菌耐药率最高的药物依次为红霉素（94.2%）、环丙沙星（85.4%）、利福平（81.6%）,对万古霉素（94.2%）和替考拉宁（93.2%）的敏感性最高。发现万古霉素耐药的粪肠球菌和屎肠球菌各3株。粪肠球菌和屎肠球菌对青霉素的耐药率分别为22%和71.7%,对氨苄西林的耐药率分别为16.7%和86.8%。结论 肠球菌属总体耐药率较高,红霉素、环丙沙星、利福平对肠球菌的敏感率较低,已检测发现VRE,临床上应加强监测,并根据药敏结果、感染严重程度合理选择适当的抗菌药物。     

粪肠球菌在酒精性肝病中的研究进展

酒精性肝病(ALD)是世界范围内最常见的慢性肝病之一，包括脂肪变性、脂肪性肝炎、纤维化和肝硬化不同阶段。粪肠球菌是医院常见获得性感染菌群，对于酒精性肝炎患者预后具有重要影响。本篇综述重点介绍了ALD的发病因素和粪肠球菌的致病机理，总结了粪肠球菌在ALD中的研究进展，简述了临床上对于粪肠球菌感染的检测和治疗方法。由于临床上感染溶细胞性粪肠球菌的ALD患者死亡率极高，因此深入认识粪肠球菌成为当下重要问题。     

SD大鼠肺部感染粪肠球菌调查研究

2005年12月至2006年2月江西农业大学一位研究生用健康雄性SD大鼠48只，体重（200±5）g，以高脂饲料造模后随机分成4组，每组12只一笼，进行蜂花精辅助降血脂功能实验，饲养在普通环境设施内。当时正处冬季，为提高室温用电热油汀供暖，门窗关闭，室内空气不流通。观察期内各组动物均未观察到明显的异常症状，各组均出现1～2只的死亡情况（当时对死亡动物未进行大体解剖）。实验结束大体解剖时发现半数以上实验大鼠肺部感染。为查明病因我们进行了病理学、病原学、大鼠回归试验等调查研究。     

重型肝炎患者肠球菌感染及体外药敏监测

目的分析重型肝炎患者肠球菌感染的现状及体外药敏特点。方法采集重型肝炎患者的各类标本做细菌培养，并测定对常用抗菌药物的敏感性。结果所有纳入研究范围的重型肝炎患者共检出肠球菌112株，其中粪肠球菌89株，比例最高，占79．5％，屎肠球菌16株，占14．3％，居第二位。腹水中肠球菌检出率最高，达到57．1％。检出高耐庆大霉素肠球菌58株，占51．8％，耐氨苄西林肠球菌19株，占17．0％，多重耐药（庆大霉素高水平耐药合并氨苄西林耐药）肠球菌7株，占6．3％。肠球菌对万古霉素和替考拉宁的敏感率最高，分别达到96．4％和100％。未检出耐万古霉素肠球菌，但检出万古霉素中介肠球菌4株，占3．6％。结论肠球菌是重型肝炎患者感染的重要致病菌，尤以粪肠球菌为主。并发肠球菌感染时，应高度重视细菌培养和药敏实验，为合理抗菌治疗提供依据。万古霉素和替考拉宁是治疗肠球菌感染的首选药物。     

肠球菌感染的研究进展

肠球菌是革兰阳性球菌，主要存在人类或动物的肠道，是人体肠道的正常菌群，在人类粪便中的数量仅次于大肠菌群，其致病力较弱。但由于临床用药频率的增加，广谱抗生素的大量使用，使临床分离菌的耐药率明显上升。近年来肠球菌的感染已成为我国医院感染特别是革兰阳性球菌引起感染的重要致病菌。同时是耐万古霉素肠球菌(VRE)的出现．给临床治疗带来了极大的困难。     

肠球菌感染研究进展

肠球菌为院内感染的重要病原菌,不仅可引起尿路感染、皮肤软组织感染,还可引起危及生命的腹腔感染、败血症、心内膜炎和脑膜炎,由于其固有耐药性,所致感染治疗困难。本文就肠球菌的生物学特性、所致感染的临床表现、肠球菌在院内感染中的地位、致病性、耐药性及所致感染的治疗作一综述。     

粪肠球菌主要毒力因子研究进展

粪肠球菌为条件性致病菌,是许多国家医院内感染的主要病原菌,也是一种新的人畜共患病病原体。粪肠球菌感染和致死主要是由其毒力因子引起的,本文概述了粪肠球菌主要毒力因子尤其是溶血素的研究进展,为粪肠球菌致病机制的研究奠定基础。     

粪肠球菌心内膜炎抗原efaA蛋白的原核表达及纯化

目的原核表达纯化粪肠球菌心内膜炎抗原efaA蛋白,为粪肠球菌心内膜炎的致病机制研究及临床血清学诊断奠定基础。方法从粪肠球菌中扩增efaA基因,相应酶切后,克隆到原核表达载体pET30a中,构建pET30a-efaA重组质粒。经BamhI、XhoI酶切及测序鉴定,将pET30a-efaA质粒转化入BL21(DE3)。以IPTG诱导BL21(DE3)表达efaA融合蛋白,亲和层析纯化重组蛋白,SDS-PAGE、WesternBlot分析鉴定。结果PCR体外扩增efaA基因产物约943bp,重组表达质粒pET30a-efaA在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,通过亲和层析获得纯化重组蛋白。SDS-PAGE、Western免疫印迹显示蛋白表达带的分子量约为34kd。结论粪肠球菌心内膜炎抗原efaA蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达并纯化。     

Efficacy of Ciprofloxacin,Metronidazole and Minocycline in Ordered Mesoporous Silica against Enterococcus faecalis for Dental Pulp Revascularization: An In-Vitro Study

Pulp revascularization of teeth with necrotic pulp has become an alternative treatment in cases with immature apex. Microbial control is essential to achieve a successful outcome and continued root development. Enterococcus faecalis (E. faecalis) is the most frequently isolated bacterial species in root canals of endodontically failed teeth. Our main goal was to compare the in-vitro antimicrobial efficacy of different antibiotic formulations delivered by ordered mesoporous silica (OMS) against E. faecalis. To determine antibiotic susceptibility, we tested OMS and triple antibiotic paste (TAP; ciprofloxacin:metronidazole:minocycline) with different reagents in different concentrations, using the Kirby–Bauer disk diffusion method. OMS and metronidazole showed no antibacterial activity against E. faecalis. Mixtures of OMS and antibiotics in proportions of 2:2:14 and 4:1:7 (mg/L of ciprofloxacin:metronidazole:minocycline, respectively) showed the lowest antibacterial activity. The antibacterial activity of the combined solutions of ciprofloxacin and metronidazole was significantly higher (p < 0.005). Combinations in different concentrations of minocycline, ciprofloxacin, and metronidazole in OMS have shown activity against E. faecalis, although the combined use of ciprofloxacin and metronidazole has shown the most effective results. This study demonstrates the efficacy of intracanal antibiotic combination paste activity against E. faecalis, avoiding the use of minocycline, whose undesirable effect of teeth staining is a common problem for patients and professionals in dental clinic.     

耐亚胺培南鲍曼不动杆菌的体外联合药物敏感试验

目的 了解体外联合药物敏感试验对耐亚胺培南鲍曼不动杆菌的效果,为临床抗感染治疗提供依据.方法 收集自2007年3月至2008年2月耐亚胺培南鲍曼不动杆菌27株标本,以E test法和琼脂稀释法测定7种常用抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC),以肉汤稀释棋盘法进行联合药物敏感试验,用时间杀菌试验检测米诺环素和头孢哌酮-舒巴坦的协同率.结果 肉汤稀释棋盘法结果提示,米诺环素与头孢哌酮-舒巴坦、阿米卡星、环丙沙星的协同率分别为74.1%、28.0%、48.1%,阿米卡星与头孢哌酮-舒巴坦、环丙沙星的协同率分别为23.1%、37.0%,头孢哌酮-舒巴坦与环丙沙星的协同率为7.1%.米诺环素与头孢哌酮-舒巴坦联合后药物浓度均降至非耐药范围内.时间杀菌试验结果提示,米诺环素和头孢哌酮-舒巴坦的协同率为100%.结论 针对临床上多重耐药鲍曼不动杆菌的感染,推荐使用米诺环素加头孢哌酮-舒巴坦进行联合治疗.     

哌拉西林-舒巴坦等七种药物对非发酵菌体外抗菌活性的研究

目的 评价哌拉西林-舒巴坦等7种药物对非发酵菌的体外抗菌活性.方法 采用微量肉汤稀释法测定哌拉西林-舒巴坦对细菌的体外抗菌作用.结果 广州地区6家医院共收集菌株770株,其中铜绿假单胞菌216株,鲍曼不动杆菌242株,嗜麦芽窄食单胞菌100株,洋葱伯克霍尔德菌119株,黄杆菌属57株,产碱杆菌属36株.对所有铜绿假单胞菌,哌拉西林-舒巴坦的敏感性最高(71.9%),而亚胺培南、头孢吡肟、头孢他啶、头孢哌酮-舒巴坦敏感性均低于50%.对亚胺培南不敏感的铜绿假单胞菌,哌拉西林-舒巴坦敏感性仍可达55.8%.对碳青霉烯敏感的鲍曼不动杆菌,哌拉西林-舒巴坦和头孢哌酮-舒巴坦敏感性最高,分别为71.0%和73.0%.对嗜麦芽窄食单胞菌,26%和20%的菌株对哌拉西林-舒巴坦和哌拉西林-他唑巴坦的最低抑菌浓度(MIC)≤16 mg/L.对洋葱伯克霍尔德菌,69%的菌株对哌拉西林-舒巴坦的MIC≤16 mg/L.对黄杆菌属和产碱杆菌属,哌拉西林-舒巴坦、头孢哌酮-舒巴坦和哌拉西林他唑巴坦3种加酶复合制剂敏感性最高,分别为70.2%、63.2%、57.9%和94.4%、94.4%、91. 7%.结论 哌拉西林-舒巴坦对多种非发酵菌尤其是碳青霉烯不敏感的铜绿假单胞菌具有良好的体外抗菌活性.     

sprE基因敲除粪肠球菌突变株的构建和功能的初步研究

目的构建丝氨酸蛋白酶同源基因(serine protease gene,sprE)敲除粪肠球菌突变株,来研究sprE基因的功能。方法用pTX4577质粒构建粪肠球菌sprE基因重组自杀质粒pCQ001,通过体内同源重组,筛选获得sprE基因的突变株,体外研究不同温度和氧化条件对突变株生长能力的影响。结果经同源重组,利用卡那霉素抗性筛选,PCR、脉冲场电泳和southern blot进行鉴定获得基因突变株#sprE,突变株在40℃的生长能力以及在氧化条件下的存活率均明显降低。结论sprE基因敲除粪肠球菌突变株#sprE构建成功,为进一步研究其功能打下基础。     

2009～2013年齐齐哈尔市粪肠球菌基因序列进化研究及耐药性分析

目的研究化脓性胆管炎患者胆汁培养粪肠球菌基因序列,分析其对6种氟喹诺酮类药物的耐药性。方法对2009~2013年齐齐哈尔医学院附属三院ERCP治疗的化脓性胆管炎患者胆汁标本分离的60株粪肠球菌进行基因序列分析,并利用琼脂稀释法检测分离菌对6种氟喹诺酮类药物（FQs）的MIC50,MIC90和耐药率。结果本组粪肠球菌对6种氟喹诺酮类药物耐药率分别为：莫西沙星15.0%,加替沙星18.3%,左氧氟沙星25.0%,氧氟沙星和环丙沙星均为35.0%,诺氟沙星48.3%。粪肠球菌耐药株中的gyrA在喹诺酮类药物耐药决定区的第83位和87位氨基酸发生突变,分别为S83I,E87G。parC第80位氨基酸发生突变S80I,产生对氟喹诺酮类药物耐药。结论莫西沙星和加替沙星对粪肠球菌具有良好的抑制作用,但由于部分粪肠球菌菌株基因已发生突变,其耐药性还需进一步观察,同时还需开发更有效的具有抑制此类细菌DNA促旋酶和拓扑异构酶Ⅳ的氟喹诺酮类药物。     

Effect of Bacillus subtilis,Enterococcus faecium,and Enterococcus faecalis supernatants on serotonin transporter expression in cells and tissues

BACKGROUND Bacillus subtilis(B.subtilis),Enterococcus faecium(E.faecium),and Enterococcus faecalis(E.faecalis)are probiotics that are widely used in the clinical treatment of irritable bowel syndrome(IBS).Whether the supernatants of these three probiotics can improve gastrointestinal sensation and movement by regulating the serotonin transporter(SERT)expression needs to be clarified.AIM To investigate whether B.subtilis,E.faecium,and E.faecalis supernatants can upregulate SERT expression in vitro and in vivo.METHODS Caco-2 and HT-29 cells were stimulated with probiotic culture supernatants for 12 and 24 h,respectively.A male Sprague-Dawley rat model of post-infectious irritable bowel syndrome(PI-IBS)was established and the rats were treated with phosphate-buffered saline(group A)and three probiotics culture supernatants(groups B,C,and D)for 4 wk.The levels of SERT were detected by quantitative PCR and western blotting.RESULTS The levels of SERT at post-treatment 12 and 24 h were significantly elevated in Caco-2 cells treated with B.subtilis supernatant compared with those in the control group(aP<0.05).Those levels were markedly upregulated in Caco-2 cells stimulated with E.faecium and E.faecalis supernatants at 24 h(aP<0.05).In addition,SERT expression in groups B,C,and D was significantly higher than that in group A in the 2nd wk(aP<0.05).Increased SERT expression was only found in group D in the 3rd wk(aP<0.05).However,there was no significant difference in SERT expression between the groups in the last week(P>0.05).CONCLUSION The supernatants of B.subtilis,E.faecium,and E.faecalis can upregulate SERT expression in intestinal epithelial cells and the intestinal tissues in the rat model of PI-IBS.     

粪肠球菌丝氨酸蛋白酶基因突变株的构建和致病性研究

目的 构建粪肠球菌丝氨酸蛋白酶基因（sprE）突变株，并研究sprE基因的功能。方法 用自杀质粒pTX4577构建粪肠球菌基因重组自杀质粒pCQ001，通过体内同源重组，筛选获得sprE基因的突变株，体外研究不同温度和氧化条件对突变株生长能力的影响，通过小鼠腹膜炎和兔心内膜炎模型来研究突变株的毒力下降情况。结果 经同源重组，利用卡那霉素抗性筛选，PCR、脉冲场电泳和Southern印迹进行鉴定获得sprE基因突变株，命名为＊sprE，突变株在40℃的生长能力及在氧化条件下的存活率均明显低于野生株。在小鼠腹膜炎模型中，存活率明显高于野生株，差异有统计学意义（P〈0．01），引起的兔心内膜炎也较野生株轻，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论 sprE基因突变株＊sprEgg建成功，sprE基因在粪肠球菌致病中起重要作用，可能是粪肠球菌的毒力因子之一。     

利奈唑胺体外诱导粪肠球菌耐药株23S rRNA V区基因突变位点分析

目的阐明体外诱导利奈唑胺耐药粪肠球菌的核糖体23SrRNA V区基因位点变异特征。方法收集1株血流感染的粪肠球菌和1株粪肠球菌质控菌ATCC29212（编号分别为F3和F4菌株,均为利奈唑胺敏感株）,通过体外浓度倍增法诱导利奈唑胺耐药;挑取单克隆,经E-test条测定MIC值,获得各菌株的耐药浓度梯度;提取耐药菌株基因组DNA,PCR扩增23SrRNA V区基因,扩增产物经测序后与野生株比较,获得V区的突变位点。结果经体外多步法诱导利奈唑胺耐药的不同MIC值粪肠球菌共13株。PCR测序分析2株母株均无变异位点,23SrRNA V区的突变位点主要是G2576U,此外还有T2504A、G2505A、C2610A、C2424U。结论体外多步法可诱导粪肠球菌利奈唑胺耐药,耐药机制与23SrRNA V区位点突变密切相关,突变位点随着MIC值的增高而增多。     

粪肠球菌预测结直肠癌复发的研究

目的 探索结直肠癌患者粪便样本中粪肠球菌丰度对于患者复发的预测意义.方法 选取哈尔滨医科大学附属第四医院普外科结直肠癌复发患者与非复发患者的粪便样本共103例,通过16 s测序技术寻找差异的肠道菌群,通过统计学分析探索差异菌群与患者临床病理学指标及无复发生存之间的关系.结果 粪肠球菌在复发患者粪便组织中丰度更高;粪便样...