VEGF与MMP-9在人脑胶质瘤中的表达及相关性的研究

目的:研究血管内皮生长因子(VEGF)与基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在人脑胶质瘤中的表达及与胶质瘤恶性表型的关系。方法:免疫组化和原位杂交方法检测50例胶质瘤标本、10例正常脑组织中VEGF蛋白及MMP-9mRNA的表达。结果:高级别胶质瘤(Ⅲ-Ⅳ)高于低级别胶质瘤(Ⅰ-Ⅱ),P<0.05。结论:VEGF蛋白和MMP-9mRNA参与胶质瘤的发生发展且与胶质瘤的恶性表型有关。     

血管内皮生长因子在胶质瘤中的表达

目的：研究人脑胶质瘤组织中血管内皮生长因子mRNA的表达，同时分析肿瘤间质血管增生的情况，并探讨两者之间的关系。方法：采用半定量逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）方法，对49例人脑胶质瘤手术切除标本，U251等3株胶质瘤细胞以及12例脑外伤内减压术中得到的正常脑组织检测了VEGF mRNA表达水平水平。另外，用免疫组化SP法对组织中的微血管密度（MVD）进行了分析。结果：胶质瘤组织中的VEGF mRNA表达水平达65．3％，随着病理分级的提高其表达水平有升高趋势，HUVEC及3株胶质瘤细胞亦表达水平较高，而正常脑组织表达水平及表达率较低，胶质瘤中的微血管密度（MVD）与胶质瘤级别之间有等级相关性，VEGF mRNA表达同MVD呈正相关。结论：VEGF、MVD对胶质瘤的恶性质瘤的恶性生物学行为的评估有重要意义，VEGF的高表达导致肿瘤组织血管增生，在胶质瘤侵袭过程中发挥重要作用。     

胶质瘤组织中NF-κB p65和VEGF的表达与临床病理特征的关系

目的：探讨核因子κB p65(NF-κB p65)、血管内皮生长因子（VEGF）在胶质瘤组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法：应用免疫组织化学方法，检测64例胶质瘤及10例正常大脑组织中NF－κB p65及VEGF的表达情况。结果：胶质瘤组织中NF－κB p65阳性表达率为54．7％（35／64），VEGF阳性表达率为53．1％（34／64），10例正常脑组织中无1例NF－κB p65、VEGF呈阳性表达。NF－κB p65及VEGF表达与胶质瘤的恶性程度有关。NF－κB p65表达与VEGF表达呈显著正相关。结论：NF－κB p65是1种与胶质瘤相关的癌蛋白，NF－κB p65对VEGF表达可能有正向调节作用，并影响胶质瘤肿瘤血管的生成。     

MMP-9、CD133蛋白在复发人脑胶质瘤中的表达及意义

背景与目的：肿瘤干细胞在胶质瘤复发中的作用备受关注,然而其获得侵袭力的具体机制尚不清楚。本课题旨在研究基质金属蛋白酶一9（MMP．9）、肿瘤干细胞标志物CDl33蛋白在复发人脑胶质瘤中的表达及可能作用。方法：采用免疫组织化学方法检测24例脑胶质瘤患者原发、复发两次手术组织标本及15例正常脑组织标本中MMP．9、CDl33蛋白的表达情况,并行相关性分析。结果：正常脑组织标本中未检测到MMP．9、CD133蛋白表达。24例脑胶质瘤患者两次手术标本中．CDl33和MMP-9蛋白表达强度均随着胶质瘤病理级别的增加而增高（氏0．01）。胶质瘤原发、复发两次手术组织标本中CDl33和MMP．9蛋白表达强度差异有统计学意SL（P〈0．05）：复发胶质瘤病理级别有增高趋势（P〈0．01）。CDl33和MMP-9蛋白表达呈正相关（P〈0．01）。结论：MMP．9、CDl33蛋白的表达与脑胶质瘤的恶性程度密切相关．可能在脑胶质瘤的复发过程中起协同作用。     

VEGF和MMP-9在食管癌中的表达及低氧调节

目的 研究血管内皮生长因子（VEGF）和基质金属蛋白酶－9（MMP－9）的表达与食管癌血管形成和临床的关系,以及低氧对其的调节作用。方法 用逆转录－聚合酶链式反应（RT－PCR）检测了42例食管癌手术标本（包括18例癌旁组织）中VEGF和MMP－9mRNA的表达,用免疫组化染色的方法检测了56例食管癌标本中VEGF蛋白的表达和平均血管密度（MVD）,同时用酶联免疫吸附试验（ELISA）的方法定量测定了低氧对食管癌细胞系中VEGF和MMP－9表达的影响。结果 食管癌中VEGF的表达显著高于癌旁组织,与肿瘤内平均MVD密切正相关,VEGF表达和肿瘤中MVD计数与食管癌的分期、淋巴结转移密切相关。食管癌中MMP－9的表达也显著高于癌旁组织,但MMP－9的表达与食管癌中的MVD计数和临床病理特征无关。低氧可以显著增加食管癌细胞系中VEGF的表达,但对MMP－9的表达无明显影响。结果 VEGF的表达可能在食管癌血管形成和转移中起重要作用,并受低氧调节,有可能作为反映食管癌进展的生物学指标和抗血管治疗的靶点。     

结直肠癌VEGF和MMP-9基因的表达

目的：探讨血管内皮细胞生长因子（VEGF）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）基因在结直肠癌组织的表达，以明确其在结直肠癌浸润和转移过程中的变化规律。方法：采用定量逆转录聚合酶链式反应方法，检测30例结直肠癌手术切除标本之肿瘤及切端结肠组织中VEGF、MMP-9 mRNA转录水平，采用免疫组织化学方法检测VEGF、MMP-9蛋白表达水平；并结合临床病理指标进行分析。结果：肿瘤组织VEGF、MMP-9的mRNA转录水平显著高于切端结肠组织（P〈0．01），肿瘤组织VEGF、MMP-9的mRNA转录水平分别在不同的浸润深度、有无淋巴结转移及Dukes分期之间具有统计学意义（P〈0．01或P〈0．05）；肿瘤组织VEGF、MMP-9的蛋白表达阳性率分别为56．67％（17／30）、73．33％（22／30），显著高于切端结肠组织（P〈0．01）．肿瘤组织VEGF、MMP-9的蛋白表达水平分别在不同的浸润深度、有无淋巴结转移及Duke＇s分期之间具有统计学意义（P〈0．01或P〈0．05）；无论是在mRNA转录水平，还是在蛋白表达水平，肿瘤组织VEGF与MMP-9两基因之间均具有相关性（P〈0．01）。结论：VEGF和MMP-9在结直肠癌的恶性生物学行为中起重要作用，其高表达者肿瘤易于侵袭、转移，可作为判断肿瘤恶性进程和浸润转移的生物学指标。     

跨膜糖蛋白和肺耐药相关蛋白在人脑胶质瘤中的表达

目的：探讨人脑胶质瘤组织中跨膜糖蛋白（P-gp)和肺耐药相关蛋白（LRP）的表达及其与胶质瘤临床病理因素及多药耐药（MDR）之间的关系。方法：应用免疫荧光标记的单克隆抗体，通过流式细胞术方法，检测30例新鲜人脑胶质瘤中P－gp和LRP表达情况。结果：P－gp和LRP在人脑胶质瘤中有过度表达。二者表达程度与胶质瘤恶性程度有关，在低度与中、高度恶性胶质瘤之间P－gp和LRP表达阳性率差异均有显著性（P＜0．05）；P－gp和LRP在人脑胶质瘤中有共同表达。结论：P－gp和LRP可作为人脑胶质瘤的化疗敏感性及预后的判断指标，二者联合检测对胶质瘤患者预后判断有更大价值。     

水通道蛋白、血管内皮生长因子在人脑胶质瘤中的表达及意义

背景与目的：人脑胶质瘤几乎都伴有瘤周水肿，本研究检测水通道蛋白（aquapofins，AQP 1、4）和血管内皮生长因子（vast、ular enclothelial growth fotor，VEGF）在人脑胶质瘤的肿瘤组织、瘤周水肿组织及正常脑组织中的表达，初步探讨其与人脑胶质瘤水肿的关系。方法：应用免疫组织化学和原位杂交技术检测VEGF、AQPI和AQP4的蛋白质和mRNA的表达；测定并计算水肿指数。结果：VEGF、AQPI和AQP4的蛋白质和mRNA程度不同地表达于人脑胶质瘤肿瘤组织、瘤周水肿组织及正常组织中。结论：在人脑胶质瘤肿瘤及其瘤周水肿组织巾．VEGF、AQP1、AQP4表达增强。VEGF与肿瘤的病理级别及血管性水肿相关；AQP4广泛分布和高表达．是基础性水通道；AQP1较窄分布和低表达，在某些位置和细胞毒性水肿中起重要作用。瘤周水肿的程度与肿瘤的恶性程度密切相关。AQP1、AQP4、VEGF等多细胞因子表达发生变化，从而引起人脑胶质瘤瘤周细胞毒性和血管源性水肿。     

抑制MTAl对雌二醇调控ER阳性乳腺癌细胞MMP-9、TIMP-1表达的影响

目的：观察转移相关蛋白1（ Metastasis associated protein 1,MTA1）在雌激素调控雌激素受体（Estrogen Recepto,ER）阳性乳腺癌细胞基质金属蛋白酶－9（Matrix metalloproteinase －9,MMP－9）、基质金属蛋白酶组织抑制因子（ Tissue inhibitor of metalprotease －1,TIMP－1）中的可能作用。方法采用慢病毒转染MTA1－shRNA的方法建立特异性抑制MTA1表达的MCF－7模式细胞株。采用10 nM雌二醇（17β－estradiol,E2）处理细胞48 h,Real－time PCR、Western blot分别检测MMP－9、TIMP－1 mRNA与蛋白表达。结果 MTA1－shRNA最大抑制效率为84．9％,提示成功建立了抑制MTA1表达的MCF－7模式细胞株（MCF－7MTA1－shRNA）。 MCF－7野生株（MCF－7WT）在E2处理后MMP－9 mRNA和蛋白表达水平分别上升了46％（P＜0．05）和37％（P＜0．05）,TIMP－1 mRNA和蛋白表达水平分别降低了32．3％（P＜0．05）和18．2％（P＜0．05）;相对MCF－7WT,MCF－7MTA1－shRNA MMP－9 mRNA和蛋白表达水平分别降低了42．9％（P＜0．05）和36．7％（P＜0．05）,TIMP－1 mRNA和蛋白表达水平未见显著变化;采用E2处理MCF－7MTA1－shRNA后,MMP－9 mRNA和蛋白表达水平未见明显变化,TIMP－1 mRNA和蛋白表达水平分别降低了25．4％（P＜0．05）和32．2％（P＜0．05）。结论 MTA1在雌激素上调ER阳性乳腺癌细胞MMP－9表达的信号转导通路中可能发挥重要作用,但未参与雌激素调控ER阳性乳腺癌细胞TIMP－1表达的信号转导通路。     

基质金属蛋白酶及其组织抑制物在卵巢肿瘤中的表达

背景与目的：有研究表明,基质金属蛋白酶（metalloproteinases,MMPs）与肿瘤的发生发展,尤其是肿瘤细胞的侵袭和转移密切相关。本研究探讨基质金属蛋白酶MMP－2、MMP－9及其组织抑制物（tissue inbibitor of metalloproteinases-2,TIMP-2）与卵巢癌侵袭及卵巢癌生物学行为的关系。方法：采用免疫组化S－P法对128例卵巢肿瘤组织MMP－2、MMP－9及TIMP－2蛋白表达进行检测,并用Χ^2检验进行统计学分析。结果：免疫组化结果表明,MMP－2、MMP－9及TIMP－2在卵巢癌组织中阳性表达率明显高于卵巢囊腺瘤（P＜0．01）。MMP－2及MMP－9在卵巢癌临床分期Ⅲ-Ⅳ期病例中的阳性表达率明显高于I－Ⅱ期者,病理学分级3级病例中的表达率明显高于1－2级者（P＜0．01）,有淋巴结转移病例中的表达率明显高于无淋巴结转移者（P＜0．01）。而TIMP－2的阳性表达与MMP－2及MMP－9相反。结论：MMP－2、MMP－9及TIMP－2的表达与卵巢癌的临床分期、病理分级及淋巴结转移有关,MMP－2及MMP－9蛋白的高表达可作为判断卵巢部具有转移倾向的临床参考指标。     

胶质瘤促血管生存素2基因表达与血管生成的关系

背景与目的：血管生成与肿瘤的生物学行为密切相关，本研究探讨胶质瘤促血管生存素2（angiopoietin2，Ang2）表达与血管生成的关系。方法：采用RT-PCR检测52例人脑胶质瘤和8例正常脑组织中Ang2基因表达；CD34单克隆抗体组织化学染色显示微血管，用微血管计数micro-vessel-counting，MVC）测定肿瘤血管生成。结果：50例脑胶质瘤和8例正常脑组织均可表达Ang2 mRNA片段。Ang2 mRNA表达与脑胶质瘤的血管生成呈显著正相关（r=0．821，P〈0．01）；高度恶性胶质瘤Ang2 mRNA表达、MVC分别显著高于低度恶性胶质瘤（P〈0．01）；低度恶性胶质瘤Ang2 mRNA表达、MVC均显著高于正常脑组织（P〈0．05）。结论：Ang2可能通过参与胶质瘤血管生成，对胶质瘤的恶性演进起促进作用。     

IGF －1R 阻断剂抑制人肝癌细胞 MHCC97－H 增殖转移的研究

目的：探讨 IGF －1R 阻断剂在人肝癌细胞 MHCC97－H 增殖转移中的作用。方法：培养人肝癌细胞株 MHCC97－H,预先给予 IGF －1R 阻断剂鬼臼苦素（picropodophyllin,PPP）10μmol／L 干预1h,然后给予 IGF－II 50ng／ml 作用48h,观察各组细胞形态变化,噻唑兰（MTT）法分析细胞生长情况,Brdu 法检测细胞增殖潜能,平板克隆实验观察并计算细胞克隆形成率,Real －time PCR 及 Western blot 法观察细胞增殖核抗原（PC-NA）、基质金属蛋白酶－9、－2（MMP －9、MMP －2）mRNA 及蛋白表达情况,进一步分析细胞增殖转移情况。结果：IGF －1R 阻断剂 PPP 可使 MHCC97－H 细胞形态发生明显改变;IGF －1R 阻断剂 PPP 显著抑制 MH-CC97－H 细胞存活率、细胞增殖及克隆形成（P ＜0．05）;与对照组相比,IGF －II 组 MHCC97－H 细胞中 PC-NA、MMP －9及 MMP －2的 mRNA 和蛋白表达显著升高（P ＜0．05）,而与 IGF －II 组相比,IGF －1R 阻断剂PPP 可明显抑制 MHCC97－H 细胞中 PCNA、MMP －9及 MMP －2的 mRNA 和蛋白表达（P ＜0．05）。结论：IGF －1R 阻断剂通过抑制人肝癌细胞 MHCC97－H 生长增殖,下调 PCNA、MMP －9及 MMP －2的表达,发挥阻碍人肝癌细胞 MHCC97－H 增殖转移的功效。     

MMP-7和MMP-9在妊娠滋养细胞疾病中的表达

[目的]探讨基质金属蛋白酶-7、9（MMP-7、MMP-9）在妊娠滋养细胞疾病中的表达水平。[方法]采用免疫组织化学PV-6000法测定49例葡萄胎（其中8例发生恶变,列为葡萄胎恶变组）,8例恶性滋养细胞肿瘤（其中6例侵蚀性葡萄胎,2例绒毛膜癌）和18例正常早孕绒毛组织MMP-7、MMP-9的蛋白表达量：用RT—PCR法测定其中的35例葡萄胎（其中6例发生恶变,列为葡萄胎恶变组）和18例正常早孕绒毛组织的MMP-7、MMP．9mRNA表达量。[结果]MMP-7、MMP-9的蛋白表达量在恶性滋养细胞肿瘤及葡萄胎恶变组中的表达分别高于正常绒毛和葡萄胎未恶变组（P〈0．05）;MMP-7、MMP-9mRNA表达量在三组中的表达无显著性差异（P〉0．05）。[结论]MMP．7和MMP．9可能通过降解细胞外基质参与妊娠滋养细胞疾病的发生和发展。     

人脑胶质瘤MMP2、MMP9和Ki-67的表达及其相关性的探讨

目的:探讨人脑胶质瘤基质金属蛋白酶MMP2、MMP9和Ki-67的表达及其相关性.方法:应用MMP2、MMP9表达水平代表胶质瘤的侵袭活性,应用Ki-67标记指数代表胶质瘤的增殖活性;用免疫组化方法观察了6例正常脑组织、50例胶质瘤标本和2例恶性胶质瘤体外细胞系的MMP2、MMP9和Ki-67表达,并分析其相关性.结果:在胶质瘤中MMP2、MMP9的阳性表达率和Ki-67 LI均随肿瘤恶性程度增加而增加并与胶质瘤分级呈正相关;相关分析发现,MMP2、MMP9和Ki-67LI的表达两两相关.结论:增殖和侵袭在恶性胶质瘤的分子生物学演进过程中相互协同、共同促进肿瘤细胞的恶性进展.     

EMMPRIN、MT1-MMP及MMP2在人脑胶质瘤中的表达及意义

目的:探讨基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)、膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)及基质金属蛋白酶2(MMP2)在人脑胶质瘤中的表达及基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)的表达与肿瘤生物学行为和预后的关系.方法:用免疫组织化学S-P法检测48例人脑胶质瘤组织和10例正常人脑组织中EMMPRIN、MT1-MMP和MMP2的表达.结果:高度恶性胶质瘤组织(Ⅲ-Ⅳ级)中EMMPRIN、MT1-MMP和MMP2的阳性表达率显著高于低度恶性胶质瘤组织(Ⅰ-Ⅱ级)和正常脑组织;EMMPRIN、MT1-MMP及MMP2在人脑胶质瘤中共同表达,EMMPRIN的表达与MT1-MMP及MMP2的表达呈显著正相关;在单因素生存分析中,EMMPRIN的表达可能与患者预后不良有关.结论: EMMPRIN在恶性胶质瘤组织中高表达,与胶质瘤的进展和侵袭密切相关,可作为胶质瘤恶性表型的有用指标;EMMPRIN在胶质瘤中的阳性表达可能与患者的预后不良有关;EMMPRIN、MT1-MMP及MMP2三者协同作用,可能共同促进脑胶质瘤的侵袭性发展.     

锌指蛋白Zfx在人脑胶质瘤中的表达与意义

背景与目的：X染色体耦联锌指蛋白（Zfx）是锌指蛋白超家族中的一员,是胚胎干细胞和成体干细胞自我更新的共同分子基础。本研究探讨Zfx在人脑胶质瘤中的表达及其与脑胶质瘤的发生和恶性程度的关系有待探讨。方法：收集52例经病理证实的脑胶质瘤肿瘤标本和8例正常脑组织标本,根据病理结果对脑胶质瘤标本进行分组,通过实时定量PCR、免疫组织化学和Westemblot等方法对标本中zfx的mRNA和蛋白表达进行检测,应用统计学方法对正常脑组织和不同恶性程度脑胶质瘤中Zfx的表达进行分析。结果：免疫组化染色结果显示,ZfX主要表达于细胞核。脑胶质瘤中Zfx的mRNA和蛋白表达均高于其在正常脑组织中的表达．在不同病理分级的脑胶质瘤中Zfx的表达水平有差异,Zfx的表达水平随脑胶质瘤的恶性程度增高而增高。结论：Zfx的mRNA和蛋白在脑胶质瘤中高表达,与脑胶质瘤的恶性程度呈正相关．它有可能是脑胶质瘤抗凋亡、恶性增殖的一个关键性的调控因子。     

VEGF 与MMP-9 在胃癌组织中的表达及相互关系的研究

 目的　探讨血管内皮生长因子 (VEGF)和基质金属蛋白酶 9(MMP 9)在胃癌组织中的表达与胃癌预后的关系。方法　免疫组化染色法检测了 4 0例胃癌术后标本中VEGF及以原位杂交技术检测MMP 9mRNA的表达。结果　VEGF、MMP 9mRNA在胃癌组织中的阳性表达率分别为 5 5 %、6 0 % ;VEGF蛋白表达与TNM分期、淋巴结转移关系密切 ;MMP 9mRNA的表达与胃癌的浸润程度、TNM分期、分化程度、淋巴结转移有关 (P <0 .0 5 ) ,而与性别、肿瘤大小、部位无关。结论　MMP 9、VEGF在肿瘤侵蚀转移中起重要作用 ;其共位表达有助于判断胃癌预后。     

脑胶质瘤TGF-β2蛋白表达与增殖活性和预后的研究

目的：探讨脑胶质瘤中转化生长因子β2（TGF-β2）蛋白的表达与PCNA标记指数（PCNALI）及预后的关系。方法：根据WHO分类标准进行分类，应用免疫组化方法（En Vision System二步法）对58例胶质瘤和9例正常脑组织石蜡标本进行TGF-β2和PCNA蛋白的检测并随访，比较患者1年生存率。结果：TGF-β2蛋白和PCNA在胶质瘤细胞中有不同程度的表达，表达强度跟肿瘤的恶性程度相关。TGF-β2蛋白表达强弱和PCNALI高低反映患者的预后。结论：胶质瘤能够不同程度地表达PCNA和TGF-β2，胶质瘤的恶性程度不但体现在其高度增殖的生物学状态中，并可表现在其生物学行为中。     

脑胶质瘤中bcl-2 基因表达水平及临床意义

 目的 探讨bcl-2基因在胶质瘤细胞中的表达水平与肿瘤恶性程度和临床预后的关系. 方法 用免疫组化染色和原位杂交检测61例人胶质瘤组织和20例正常人脑组织中bcl-2蛋白和bcl-2 mRNA的表达. 结果 免疫组化染色55例（87.0%）表达bcl-2蛋白,原位杂交显示58例（92.8%）表达bcl-2 mRNA,两者的表达水平呈正相关,bcl-2在转录水平的表达明显高于蛋白质水平,且bcl-2表达水平与胶质瘤病理分级呈显著正相关系,而20例正常人脑组织中仅4例表达bcl-2蛋白,6例表达bcl-2 mRNA（均P〈0.01）. 结论 恶性胶质瘤细胞中普遍存在bcl-2基因的高表达,表达水平与胶质瘤的恶性程度、临床预后存在密切关系,bcl-2基因可能成为恶性胶质瘤基因治疗的靶点.     

RNA干扰技术下调CEACAMl基因表达对胶质瘤血管生成的影响

目的：利用RNA干扰技术下调胶质瘤细胞中癌胚抗原相关细胞黏附分子1（ CEACAM1）基因的表达情况,探讨胶质瘤细胞CEACAM1表达变化后其培养上清液诱导人脐静脉内皮细胞（ HUVEC）增殖、血管生成的情况及其可能机制。方法设计并化学合成针对CEACAM1的3对siRNA,脂质体法瞬时转染SHG44细胞,收集细胞培养上清液作为条件培养基。分别采用RT－PCR检测RNA干扰后细胞中CEACAM1及血管内皮生长因子（ VEGF） mRNA表达的变化情况,ELISA法检测上清液中VEGF蛋白的含量。 MTT比色法及Transwell侵袭实验检测共培养刺激后HUVEC增殖及迁移能力的变化,体外血管生成实验检测体外血管生成能力。结果与正常对照组和阴性对照组相比,转染CEACAM1－siRNA后胶质瘤细胞中CEACAM1 mRNA的表达水平下调（P＜0．01）,以CEACAM1－siRNA3组最为显著。 RNA干扰后SHG44细胞VEGF mRNA及上清液中的VEGF蛋白含量均减少,HUVEC的增殖受到抑制,迁移及体外血管生成能力下降。结论 CEACAM1－siRNA能够下调SHG44细胞中CEACAM1 mRNA的表达,并通过减少VEGF分泌,从而影响HUVEC的增殖、迁移和体外血管生成能力。