实验性急性中耳细菌感染诱发的热休克反应

目的 探讨细菌抗原和内耳抗原之间的联系及热休克反应对其抗原的影响。方法 用抗哺乳类热休克蛋白（ｂｅａｔ ｓｈｏｃｋ ｐｒｏｔｅｉｎ，ｈｓｐ）７０抗体识别绿脓杆菌、变形杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和肺炎克雷白杆菌抗原，进行免疫转印分析，测试正常豚鼠膜迷路中ｈｓｐ７０的表达水平。用肺炎克雷白杆菌制作急性中耳感染动物模型，观察细菌的内耳与哺乳类ｈｓｐ７０家族，正常豚鼠膜迷路表达ｈｓｐ７０水平极低。肺炎     

中耳细菌感染对内耳及机体免疫功能长期影响的实验观察

目的　探讨中耳细菌感染后内耳热休克反应是否会长期存在 ,及其对内耳功能的潜在影响。方法　 6 0只BALB/c鼠随机分为肺炎克雷白杆菌、金黄色葡萄球菌 (简称金葡菌 )、绿脓杆菌、大肠杆菌、变形杆菌和生理盐水对照 6个组 ,每组 10只。中耳注射致病菌 135d后测试畸变产物耳声发射并取材进行光镜与电镜观察 ,检测内耳热休克蛋白 (heatshockprotein ,HSP) 70相关表位分子的表达 ,行单个核细胞核因子κBp6 5和抗肺炎克雷白杆菌抗体、抗膜迷路蛋白抗体的测试。结果　所有标本核因子κBp6 5未发生明显核内转移。金葡菌感染组 3只、肺炎克雷白杆菌组和变形杆菌组 2只、绿脓杆菌组 3只以及对照组 1只动物的抗肺炎克雷白杆菌抗体阳性。经外加电场固定液相分子快速斑点免疫分析筛选 ,金葡菌感染组 2只、肺炎克雷白杆菌组 2只、绿脓杆菌组和生理盐水对照组各 1只抗膜迷路蛋白抗体阳性 ,其中金葡菌组和肺炎克雷白杆菌组抗膜迷路蛋白和抗肺炎克雷白杆菌双阳性。经免疫转印分析 ,其阳性条带除 1例相对分子质量为 6 80 0 0以外 ,其余均为小分子 ,以 2 6 0 0 0～ 30 0 0 0为主 ,380 0 0～ 410 0 0次之 ,46 0 0 0～ 5 0 0 0 0有微弱反应。除变形杆菌组右耳和绿脓杆菌组左耳 16 2 5Hz畸变产物耳声发射检测显著异常外 ,其余     

中耳细菌感染诱导的急性期HSP—70相关反应的免疫组织化学研究

探讨中耳细菌感染急性期时,哺乳动物中、内耳热休克反应的部位,以及中耳细菌感染诱生的热休克蛋白是否可能引发内耳自身免疫损伤。运用中耳注射肺炎克雷伯杆菌制成豚鼠中耳急性感染动物模型,分别于接种后第1、3、5、7天处死动物取材。应用免疫组化技术,研究了中耳粘膜和耳蜗表达热休克蛋白70（HSP－70）的部位。结果表明：正常状态下,中耳粘膜表层的上皮细胞和内耳膜迷路血管纹、螺旋韧带、Corti氏器均有弱的阳性反应,感染应激后,上述同样部位均有强的阳性显色。不同取材时段显示的阳性位置无差异。说明在中耳急性细菌感染期,中耳粘膜和内耳组织均表达了同源HSP－70蛋白分子,这些同源HSP－70为引发内耳自身免疫损伤提供了物质基础。     

中耳细菌感染诱导的急性期HSP-70相关反应的免疫组织化学研究

探讨中耳细菌感染急性期时 ,哺乳动物中、内耳热休克反应的部位 ,以及中耳细菌感染诱生的热休克蛋白是否可能引发内耳自身免疫损伤。运用中耳注射肺炎克雷伯杆菌制成豚鼠中耳急性感染动物模型 ,分别于接种后第 1、3、5、7天处死动物取材。应用免疫组化技术 ,研究了中耳粘膜和耳蜗表达热休克蛋白 70 (HSP- 70 )的部位。结果表明 :正常状态下 ,中耳粘膜表层的上皮细胞和内耳膜迷路血管纹、螺旋韧带、Corti氏器均有弱的阳性反应 ,感染应激后 ,上述同样部位均有强的阳性显色。不同取材时段显示的阳性位置无差异。说明在中耳急性细菌感染期 ,中耳粘膜和内耳组织均表达了同源 HSP- 70蛋白分子 ,这些同源 HSP- 70为引发内耳自身免疫损伤提供了物质基础。     

自身免疫性感音神经性聋血清抗膜迷路蛋白抗体的检测

采用改良免疫转印法分析了拟诊为自身免疫性感音神经性听力减退患者休内抗膜迷路蛋白抗体，并将该法与常规法比较，发现用该法在患者血清中最多可检出５条强阳性（含６８０００），阳性率为７２％（１８／２５），显著高于常规法（４０％）。还在部分患者体内检出了抗肺炎克雷白杆菌膜蛋白抗体（７／９）。     

自身免疫性感音神经性聋血清抗膜迷路蛋白抗体的检测

采用改良免疫转印法分析了拟诊为自身免疫性感音神经性听力减退患者体内抗膜迷路蛋白抗体，并将该法与常规法比较，发现用该法在患者血清中最多可检出５条强阳性带（含６８０００），阳性率为７２％（１８／２５），显著高于常规法（４０％）。还在部分患者体内检出了抗肺炎克雷白杆菌膜蛋白抗体（７／９）。     

实验性急性化脓性中耳炎中耳粘膜热休克蛋白的表达

目的 :探讨急性化脓性中耳炎时中耳粘膜发生的热休克反应。方法 :向豚鼠中耳注射肺炎克雷伯杆菌 ,制成中耳急性感染动物模型 ,分别于接种后第 1、3、5、7天处死动物取材。应用免疫转印技术动态分析中耳粘膜热休克蛋白 ( HSP)的表达。结果 :正常非应激状态下 ,豚鼠中耳粘膜仅有很弱的 HSP70的表达 ;中耳炎急性期 ,中耳粘膜 HSP70的表达明显升高 ,以第 3天为最强 ,第 3天开始表达 31k D分子 ,出现两条带 ;第 5天最强 ,至第 7天消失。 17k D处第 1～ 5天均有两条带 ,第 3天最高 ,第 7天减弱。结论 :观察发现 ,肺炎克雷伯杆菌感染豚鼠中耳后 ,中耳粘膜出现热休克反应 ,表达 HSP70及与之有相关表位的 HSP31k D和 HSP17k D分子     

五种抗生素对中耳局部应用致耳蜗毒性的研究（摘要）

五种抗生素对中耳局部应用致耳蜗毒性的研究（摘要）赵兰，邱际平，顾之燕，刘志连采用全耳蜗铺片术，借助相差显微镜和光学显微镜对豚鼠中耳局部应用卡那霉素、链霉素、多粘菌素Ｂ、庆大霉素、氯霉素后观察内耳柯替器毛细胞的变化。１材料与方法：将实验组中３０只豚鼠分...     

外周免疫活性淋巴细胞对致敏内耳的识别

目的 了解外周免疫活性淋巴细胞在内耳免疫反应中的作用。方法 提取全身致敏加双侧内耳致敏（Ａ组）、全身致敏（Ｂ组）和对照组（Ｃ组）等３组供者动物（豚鼠）的外周淋巴细胞，并在体外行＾５１Ｃｒ核素标记。将标记的淋巴细胞分别转移到具有相同免疫史的（即全身致敏加右侧内耳致敏）受体豚鼠内，按不同的供者来源，受体动物亦分为Ａ组（１５只）、Ｂ组（１０只）、Ｃ组（１０只）。２０￣２４小时后取出受体动物双侧颞骨，称重     

从中缝背核向内耳的多巴胺能投射

目的 探讨中缝背核至内耳的传出神经通路。方法 选择耳廓反射灵敏，体重2～3kg没有中耳疾病的健康猫11只，分为实验组（8只）和对照组（3只）。经内耳注射逆行示踪剂霍乱毒素亚型B，7d后处死，脑干连续切片，免疫荧光染色，获得中缝背核区内逆行荧光标记后，将组织分成4组，分别用兔抗-酪氨酸羟化酶、兔抗-5-羟色胺、兔抗-γ-氨基丁酸和兔抗-多巴胺-β-羟化酶对中缝背核区内神经细胞进行免疫荧光标记研究。结果 ①沿着脑桥的尾端（耳蜗核水平）向中脑的嘴侧观察连续切片，可见霍乱毒素亚型B红色荧光标记细胞主要分布在脑干中线周围的背侧区域即中缝背核区域；②将上述组织切片用抗酪氨酸羟化酶、5-羟色胺、1-氨基丁酸和多巴胺-β-羟化酶4种荧光抗体进行第2次标记后，发现在中缝背核区域内均分布有上述4种神经元，其中酪氨酸羟化酶标记神经元和经内耳至中缝背核区的逆行标记全部为双标记荧光细胞，5-羟色胺、γ-氨基丁酸和多巴胺-β-羟化酶均为单标记。由此提示，中缝背核向内耳传出投射与酪氨酸羟化酶标记神经元有关。结论 中缝背核和内耳之间存在传出神经联系；这一投射可能主要是多巴胺能投射。     

中耳淋巴上皮样癌中存在EB病毒

中耳或外耳道淋巴上皮瘤或与ＥＢ病毒（ＥＢＶ）相关的癌ＥＢ病毒从未报道过，故而作者对此进行研究。研究材料为经病理组织切片证实的中耳非角化性鳞癌５例及未分化癌２例。所有病例均排除了鼻咽癌，临床表现中耳炎及耳息肉５例，听力损害及面神经麻痹１例，耳后肿块累及乳突１例。用毛地黄毒苷标记的探针完成ＥＢＶ编码ＲＮＡＳ（ＥＢＥＲ）原位杂交，用３５Ｓ－标记的抗敏感探针完成对照杂交，用标准抗生蛋白链菌素──生物素过氧化酶法完成ＥＢＶ潜膜蛋白－１（ＬＭＰ－１）和ＥＢＮＡ２的免疫组化染色。结果。５例非角化性鳞癌及２例未…     

应用PCR技术检测分泌性中耳炎病人中耳积液病毒原因

目的：评价分泌性中耳炎中耳积液中多种病毒，支原体，衣原体及细菌的感染率。方法：应用ＰＣＲ技术检测４８例（５５耳）中耳积液中腺病毒（ＡＤＶ），ＥＢ病毒（ＥＢＶ），呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ），肺炎支原体（ＭＰ）及沙眼衣原体（ＣＴ）基因，并对中耳积液行常规细菌培养。     

透明质酸圆窗灌注对豚鼠内耳功能和形态学的影响

为探索透明质酸中耳应用对内耳的影响，以２６只健康豚鼠于左耳用２％透明质酸圆窗灌注前和灌注后５、１４、２８天检测前庭和听觉功能，并行基底膜铺片及颞骨火棉胶包埋连续切片。发现２％透明质酸圆窗灌注后５天，滤波短声０．２５～１０ｋＨｚ诱发的听神经动作电位（ＡＰ）阈值均提高（Ｐ＜０．０５），术后１４天在１、２、４ｋＨｚＡＰ阈值明显改善（Ｐ＜０．０５），术后２８天均恢复至术前水平（Ｐ＞０．０５），灌注前后ＥＮＧ眼震时间无明显变化（Ｐ＞０．０５）。耳蜗Ｃｏｒｔｉ器和前庭终器组织学检查无明显损害。结论：２％透明质酸圆窗灌注对内耳听觉功能有暂时性影响，未见内耳组织学改变，透明质酸具有缓慢渗透脱水作用，可作为药物缓释体用于中耳及内耳手术。     

外周免疫活性淋巴细胞对致敏内耳的识别

目的了解外周免疫活性淋巴细胞在内耳免疫反应中的作用。方法提取全身致敏加双侧内耳致敏（Ａ组）、全身致敏（Ｂ组）和对照组（Ｃ组）等３组供者动物（豚鼠）的外周淋巴细胞，并在体外行５１Ｃｒ核素标记。将标记的淋巴细胞分别转移到具有相同免疫史的（即全身致敏加右侧内耳致敏）受体豚鼠内，按不同的供者来源，受体动物亦分为Ａ组（１５只）、Ｂ组（１０只）、Ｃ组（１０只）。２０～２４小时后取出受体动物双侧颞骨，称重，用γ计数器测定其放射性含量（ＣＰＭ／ｇ）。结果ＣＰＭ／ｇ平均值Ａ、Ｂ两组致敏耳（右耳７７７．３４和６９８．３５）明显高于非致敏耳（左耳６００．３２和５５３．４２）（Ｐ值均＜０．０５），Ｃ组两耳间差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。Ａ组致敏内耳与非致敏内耳ＣＰＭ／ｇ的比率为１．３４，明显高于Ｂ组（１．１２）和Ｃ组（１．０２），差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。结论内耳在抗原刺激下产生免疫反应受外周循环系统的免疫监控。     

抗热休克蛋白70抗体水平升高不能影响小鼠的耳蜗功能

近来，许多作者利用免疫转印技术发现海尼埃病和不明原因感音神经性聋的某些患者体内存在抗一68～70kD蛋白抗体。用免疫转印技术分析上述患者的血清和其他组织如脑、肠、肝、肾和肌肉等的免疫反应，发现这些组织内存在相同分子量的蛋白抗原。这个蛋白被假定为热休克蛋白70（HSP7。）。目前，已有文献报道HSP，。在内耳中确实存在且应激后直线上升。此外，在其他的相关研究中也证实，已经形成的抗感染细菌的热休克蛋白抗体会反过来识别宿主（人类）的热休克蛋白且造成宿主的自身免疫损害。据此，可以得出这样一种假设机制：抗外界HSP；0…     

卵圆窗缺如处理的研讨

１９８３年３月～１９９１年６月为严重传导性耳聋患者施行中耳探查术中发现卵圆窗缺如１０例（１２耳），遂行前庭开窗术和听骨链重建术，对术中发现面神经水平段下垂或移位遮住卵圆窗龛，或前庭开窗术后听力下降再次新窗骨性封闭行水平半规管开窗术，前庭开窗（１０耳）术后语言区频率平均提高１０～３０ｄＢ以上者７耳，４例手术后３个月听力下降，其中２耳行内耳开窗术，内耳开窗（４耳）术后语言区频率平均提高２０～４５ｄＢ。     

内耳疾病中牛热休克蛋白70优势抗原决定簇的检测

热休克蛋白７０（ＨＳＰ７０）是高度保守的蛋白，具有免疫原性，能诱导特异性免疫反应。免疫反应主要发生于其碳末端的抗原决定簇，而不同物种间此段的蛋白质序列差异也最大。在某些内耳疾病如特发性进行性双侧感音神经性耳聋（ＩＰＢＳＮＨＬ）和梅尼埃病中，ＨＳＰ７０...     

急性中耳炎时中耳对绿脓杆菌感染的易感性

为研究慢性化脓性中耳炎的发病机理，把中耳正常的粟鼠随机分成三组，各18只。二个组双中耳接种7F型肺炎链球菌，诱发肺炎链球菌性中耳炎（POM），其中一组在肺炎链球菌接种后三天，一耳接种绿脓杆菌，并每天肌注普鲁卡因青霉素50000u共5天，该组称为“早接种组”。另一组在肺炎链球菌接种后三天先青霉素治疗5天（量同），于第7天一耳接种绿脓杆菌，称为“晚接种组”。第三组作对照，仅一耳接种绿脓杆菌，未诱发肺炎链球菌性中耳炎，亦不给青霉素治疗。结果：36只接种脑炎链球菌动物的中耳液标本，接种后三天肺炎链球菌培养均阳性，用青霉…     

卵圆窗缺如处理的研讨

１９８３年３月～１９９１年６月为严重传导性耳聋患者施行中耳探查术中发现卵圆窗缺如１０例（１２耳），遂行前庭开窗术和听骨链重建术。对术中发现面神经水平段下垂或移位遮住卵圆窗龛，或前庭开窗术后听力下降再次新窗骨性封闭者行水平半规管开窗术。前庭开窗（１０耳）术后语言区频率平均提高１０～３０ｄＢ以上者７耳，４例手术后３个月听力下降，其中２耳行内耳开窗术；内耳开窗（４耳）术后语言区频率平均提高２０～４５ｄＢ。介绍了手术处理经验。     

碳纤维在中耳手术的应用

报告在３１耳中耳手术中应用碳纤维支撑移植吸骨或鼓膜，术后听力提高３０ｄＢ和２０ｄＢ各１５耳，１０ｄＢ１耳。随访０．５－－４年，听力未下降２６耳（８４％）。下降５耳（１６％），表明碳纤维有较好的临床应用价值。