肝再生磷酸酶-3在甲状腺乳头状癌中的表达及意义

目的:观察肝再生磷酸酶-3(phosphatase of regenerating liver 3,PRL-3)在甲状腺乳头状癌中的表达情况,并分析PRL-3的表达与各种临床病理特征的关系及意义?方法:应用real-time PCR及免疫组化SP法探索PRL-3 mRNA及蛋白在甲状腺乳头状癌原发灶?癌旁组织?淋巴结转移灶中的表达情况?结果:PRL-3 mRNA在原发灶及淋巴结转移灶中的表达均明显高于癌旁组织(P < 0.05),PRL-3蛋白的阳性率在原发灶及淋巴结转移灶高于癌旁组织 (P < 0.05)?原发灶组织中PRL-3的阳性率在有淋巴结转移组高于无淋巴结转移组 (P < 0.05),肿瘤直径>2 cm的阳性率高于肿瘤直径≤2 cm (P < 0.05)?结论:PRL-3与甲状腺乳头状癌的肿瘤大小及淋巴结转移密切相关?PRL-3在甲状腺乳头状癌中的高表达可以预测淋巴结转移,有望成为预测甲状腺乳头状癌淋巴结转移的分子标志物?     

肝再生磷酸酶-3与恶性肿瘤转移关系的研究进展

浸润和转移是恶性肿瘤重要的生物学特性之一,是导致肿瘤患者死亡的主要原因。目前已知转移的肿瘤细胞通常会发生一系列生理生化的改变,包括细胞骨架的重排、运动能力的提高等^[1]。但迄今为止,对于这种致命过程的内在机制还知之甚少,寻找和发现在肿瘤转移过程中起作用的可能分子机制及其信号通路成为肿瘤研究工作的一项重要内容。近年来,研究发现肝再生磷酸酶-3（phosphatase of regenerating liver3,PRL-3）对肿瘤转移有重要的作用,现就其研究进展综述如下。     

鼻腔鼻窦鳞状细胞癌细胞中PRL-3表达的临床意义

目的：探讨促肝细胞再生磷酸酶-3（PRL-3）在鼻腔鼻窦鳞状细胞癌（SNSCC）中表达的临床意义。方法采用免疫组织化学及逆转录 PCR（RT-PCR）方法检测62例 SNSCC 组织（SNSCC 组）中 PRL-3蛋白的表达水平,并对30例鼻息肉患者（NP 组）,以及25例正常鼻腔黏膜（对照组）做相同蛋白表达并进行对比。结果在蛋白水平和基因水平检测,均发现 SNSCC 组中 PRL-3的表达高于 NP 组及对照组,差异有统计学意义（P ＜0．05）。PRL-3的表达情况在不同的性别、年龄中差异无统计学意义（P ＞0．05）,而随着 TNM 分期的增高,分化程度的降低及合并淋巴结转移,PRL-3的表达明显增高（P ＜0．05）。结论 PRL-3的表达可以对SNSCC 的增殖活性作很好的参照,表达强度可明显反映 SNSCC 细胞增殖活性,PRL-3可能是 SNSCC 的一个独立预后指标,提示预后不良。     

肝再生磷酸酶3与肿瘤的研究进展

肝再生磷酸酶3(PRL-3)是新近发现的一种酪氨酸磷酸酶,被认为是一种肿瘤潜在的诊断标记和治疗的靶点。在多种肿瘤中的表达水平高于其相应的正常组织,特别是结肠癌肝转移的组织中,其表达水平远远高于无转移结肠肿瘤和正常的结肠上皮。现综述PRL-3的结构、功能以及其在肿瘤的发生、发展、侵袭可能的形成机制及临床诊治中的应用等方面的研究进展。     

PRL-3在喉癌组织中的表达及与MVD的相关性

目的探讨PRL-3在喉癌组织中的表达及与MVD的相关性。方法采用免疫组化法及高倍镜检测定65例喉鳞状细胞癌患者癌组织及癌旁组织PRL-3表达及MVD计数。结果喉癌组织和癌旁组织各65例,PRL-3阳性分别为44例和6例,阳性率分别为67．69％、9．23％,差异有高度统计学意义（P〈0．001）。不同分化程度、TNM分期及有无淋巴结转移组PRL-3阳性率及MVD计数之间差异有统计学意义（P〈0．05）。PRL-3阳性及MVD计数均与病理分化程度呈负相关（P〈0．05）。PRL-3表达与MVD计数呈正相关（P〈0．05）。结论PRL-3在喉鳞状细胞癌组织高表达并与恶性肿瘤浸润和转移有关,可作为新的肿瘤标志物监控喉鳞状细胞癌进展。     

促肝再生磷酸酶-3在胃癌患者组织中的表达及其对胃癌细胞生长的影响

目的 评价促肝再生磷酸酶-3(PRL-3)高表达对胃癌预后的影响及沉默PRL-3表达对SGC7901细胞增殖及移植瘤生长的影响.方法 免疫组化法检测137例胃癌标本中PRL-3的表达;Log-rank检验比较PRL-3高表达患者与非PRL-3高表达患者的总体生存率.构建表达人工PRL-3miRNA的慢病毒载体,转染SGC7901细胞并沉默其PRL-3表达,MTT试验评价对SGC7901细胞增殖的影响,移植瘤生长试验评估对胃癌生长的抑制作用.结果 137例原发灶组织中,85例(62%)为PRL-3高表达;26例(19%)为PRL-3中度表达;26例(19%)为PRL-3低表达.PRL-3高表达与胃癌肿瘤大小(P<0.01)、浸润深度(P<0.01)、淋巴结转移(P<0.01)、肝转移(P<0.01)、周围脏器侵犯(P<0.01)及临床TNM分期(P<0.01)显著相关.PRL-3高表达患者的总体生存率显著低于PRL-3中等度或低度表达的患者(P<0.01).与转染空载体组比较,转染PRL-3 miRNA的慢病毒载体可抑制SGC7901细胞的增殖.荷瘤动物实验表明,转染PRL-3组肿瘤大小为(1.92±0.18)cm3,转染空载体组肿瘤大小为(4.74±0.39)cm3(P<0.01).结论 PRL-3的高表达与胃癌恶性进展有关,沉默PRL-3表达可抑制胃癌SGC7901细胞的增殖,并抑制移植瘤的生长.PRL-3胃癌生长中起着关键作用,可作为胃癌潜在的治疗靶点.     

原发性肝癌微血管密度和血管内皮细胞生长因子表达及意义

目的 :探索原发性肝癌组织中微血管密度 (MVD)和血管内皮细胞生长因子 (VEGF)表达的临床意义。方法 :采用 S- P法检测 6 5例肝癌组织、癌旁组织 (1.5 cm)及正常肝组织中 MVD和 VEGF的表达。结果 :肝癌组织和癌旁组织 MVD计数分别为 14 .2 9± 3.74、11.13± 2 .89,VEGF表达分别为 84 .1%、75 .9% ,与正常肝组织中MVD、VEGF比较差异均有显著性 (P<0 .0 1)。 MVD高和 VEGF阳性者与肝癌分化程度、有无完整包膜及静脉癌栓密切相关 ,MVD高、VEGF阳性者预后明显较 MVD低、VEGF阴性者差 (P<0 .0 5 )。结论 :联合检测 MVD和 VEGF有助于临床评估病情、判断预后 ,并为进一步综合治疗提供依据。     

PRL-3和EGFR在鼻腔鼻窦鳞状细胞癌组织中的表达

目的 探讨再生肝磷酸酶-3(PRL-3)和表皮生长因子受体(EGFR)在鼻腔鼻窦鳞癌中表达及相关性.方法 采用免疫组化法对30例鼻腔鼻窦鳞癌组织行PRL-3和EGFR检测,并用20例鼻腔正常黏膜组织做对照.结果 PRL-3 和EGFR 在各级鼻腔鼻窦鳞癌组织中均有表达,与正常鼻黏膜比较差异有显著性(P＜0.05),均有...     

肝再生磷酸酶3对肾透明细胞癌细胞A-498的影响

[目的]研究肝再生磷酸酶3 (phosphatase of regenerating liver-3,PRL-3)对肾透明细胞癌(clear cell renal cell cancinoma.CCRCC)细胞A-498的影响.[方法]本实验以肾透明细胞癌细胞A-498为实验对象,采用siRNA干涉的方法下调A-498中PRL-3表达水平,以不做任何处理为空白对照组,脂质体加随机序列的siRNA为阴性对照组,脂质体加siRNA处理组为实验组,之后通过RT-PCR及Western blotting方法检测siRNA干涉效率,绘制细胞生长曲线、流式细胞仪检测细胞周期及凋亡以观察下调PRL-3对A-498细胞的影响.[结果]同阴性对照组相比,本实验所设计的siRNA能够下调PRL-3在A498细胞中的表达,其中siRNA2干涉效率更高,细胞生长曲线显示自siRNA转染60h开始,下调PRL-3能够抑制细胞的生长(P＜0.01),流式细胞仪检测发现转染72h后,下调PRL-3的表达可以促进A-498细胞G1期阻滞,S期减少,凋亡增加(P＜0.05).[结论]下调PRL-3能够明显抑制A498细胞的增殖,PRL-3很可能成为肾透明细胞癌基因治疗的新靶点.     

索拉非尼对MHCC97-H 肝癌细胞增殖、 侵袭以及PRL-3 蛋白表达的影响研究

目的 探讨索拉非尼对体外培养MHCC97-H 肝癌细胞中肝再生磷酸酶3（PRL-3）表达水 平的影响,以及对肝癌细胞侵袭力的作用。方法 在24、48 及72 h 测定经不同浓度梯度索拉非尼处理 MHCC97-H 肝癌细胞增殖抑制率以筛选合适的干预浓度和时间。采用MHCC97-H 肝癌细胞培养传代, 用索拉非尼干预处理,瑞氏吉姆萨法染色观察形态学变化,MTT 法检测其增殖抑制率,Western blot 法检测 PRL-3 蛋白表达水平,Transwell 实验检测癌细胞侵袭力。结果 该实验索拉非尼体外最佳干预实验浓度和时 间分别为16 μmol/L 和48 h ;索拉非尼能诱导肝癌细胞株MHCC97-H 的凋亡,肝癌细胞增殖抑制率与时间 和剂量呈正相关。经索拉非尼作用后PRL-3 蛋白也出现不同程度下降,肝癌细胞侵袭能力明显下降。结论 索拉非尼能降低MHCC97-H 肝癌细胞株中PRL-3 蛋白表达水平,降低肿瘤细胞侵袭力,从而诱导肝癌细胞 凋亡;索拉非尼降低癌细胞的侵袭可能是通过下调PRL-3 蛋白进行。     

肝再生磷酸酶-3小干扰RNA对异位子宫内膜间质细胞迁移的影响

目的 通过siRNA体外沉默肝再生磷酸酶-3(PRL-3),探讨其对异位子宫内膜间质细胞迁移的影响.方法 原代培养异位子宫内膜间质细胞,运用siRNA技术干扰沉默PRL-3基因,Western blot检测干扰后PRL-3蛋白表达变化,观察细胞板状伪足的形成,采用划痕实验、transwell细胞迁移实验观察并比较细胞迁移能力的改变.结果 经siRNA 干扰沉默后实验组PRL-3蛋白相对表达量较对照组明显下降(P<0.05),细胞形成的板状伪足与对照组相比明显减少,相同时间内发生定向迁移的实验组细胞数为0.87±0.21,空白对照组为1.75±0.28,阴性对照组为1.63±0.39,前者与后两者比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 PRL-3 siRNA能有效沉默PRL-3基因,并且使异位子宫内膜间质细胞的迁移能力下降.

Abstract：

Objective To evaluate the effects of PRL-3 siRNA (small interfering RNA) on the migration of endometriotic stromal cells.Methods Primary endometriotic stromal cells were cultured in vitro.Then PRL-3 (phosphatase of regenerating liver-3) siRNA was transfected to silence the PRL-3 gene.And the PRL-3 protein expression was analyzed by Western blot.The changes of cell migration were detected by cell pseudopod formation, scratch test and transwell cell migration test.Results The expression of PRL-3 protein significantly decreased in the experimental group versus two other control groups (P<0.05).The formation of cell pseudopod was much less in experimental group than that in control groups. Within the same time, the number of migration cells was 0.87±0.21 in experimental group.It was less than 1.75±0.28 in blank control group and 1.63±0.39 in negative control group(P<0.05).Conclusion PRL-3 siRNA can down-regulate the PRL-3 gene and decrease the migratory capacity of endometriotic stromal cells.And PRL-3 may be a promising target in the therapeutics of endometriosis.     

PRL-3在癌症淋巴结转移中的表达及临床意义

目的观察乳腺癌、胃癌和结直肠癌转移中患者的PRL-3的表达及临床意义。方法检测55例乳腺癌患者（25例无转移灶,30例有淋巴结转移）、60例胃癌患者（35例无转移灶,25例有淋巴结转移）以及60例结直肠癌患者（28例无转移灶,32例有淋巴结转移）外科手术切除标本中PRL-3的表达。结果①乳腺癌淋巴结转移组PRL-3阳性率（86．67％）明显高于无转移灶组（48．00％）,P〈0．01。②胃癌淋巴结转移组PRL-3阳性率（80．00％）明显高于无转移灶组（48．57％）,P〈0．05。③结直肠癌淋巴结转移组PRL-3阳性率（56．25％）明显高于无转移灶组（28．57％）,P〈0．05。结论PRL-3在肿瘤转移中的高表达表明其与肿瘤转移密切相关,但具体机制尚不十分清楚,仍有一些问题急需解决,而这些问题的解决将有利于揭示PRL-3的功能特性和它促进肿瘤转移的具体机制,从而使PRL-3有可能成为肿瘤治疗及判断肿瘤预后的重要指标及潜在的重要靶点。     

肝细胞癌血管生成及其成熟度的临床意义

目的 探讨肝细胞癌 (HCC)血管生成及其成熟度对其生物学行为的影响。方法 选取行手术切除并经病理证实的HCC病例31例,手术后分别在边缘和中心进行标本取材并综合分析。利用免疫组化技术检测VEGF、Flk-1、PCNA的表达情况,并对微血管和成熟血管的数目、平均面积、总面积、周长、直径、异型指数、血管间距、表达部位,以及动脉数、静脉数、动脉比、静脉比、血管成熟指数和平均灌注分数等进行计数。分析以上血管生成相关参数与病灶大小、Edmondson病理分级、包膜情况、肝硬化及侵袭转移的关系。结果 在小、中、大病灶之间,微血管总面积和成熟血管总面积均具有统计学差异(P<0.05);在EdmondsonⅠ～Ⅳ级之间,灌注分数逐渐增加,也存在统计学差异(F=3.452, P=0.049)。有包膜病灶的成熟血管平均面积、成熟血管周长、成熟血管平均直径及成熟血管管距明显大于无包膜的病灶(P<0.05);侵袭转移组的成熟血管异型指数也大于阴性组(t=2.260, P=0.039)。在有、无肝硬化组之间,所有血管相关参数未见统计学差异(P>0.05)。结论 HCC的一些生物学行为更多依赖肿瘤的成熟血管。     

没食子儿茶素没食子酸酯诱导人肝癌细胞凋亡

目的 探讨没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)诱导人肝癌细胞株凋亡的作用和机制.方法 以不同浓度EGCG处理人肝癌细胞株HepG2和SMMC-7721细胞24 h和48 h.四甲基偶氮唑蓝比色法和锥虫蓝染色细胞计数评价细胞生长情况;流式细胞术检测细胞凋亡和环氧合酶-2(COX-2)、Bcl-2蛋白;比色法测定天冬氨酸蛋白酶-9和caspase-3活性;RT-PCR检测COX-2和Bcl-2家族mRNA的表达.结果 EGCG(50、100、200、400μg/ml)处理48 h后,HepG2细胞活性下降至93.8%±2.8%,62.3%±5.4%,33.9%±2.5%和17.6%±3.2%,与对照组(100.0%±2.8%)比较差异均有统计学意义(均P＜0.05);SMMC-7721细胞活性下降至49.6%±3.5%,30.3%±3.8%,17.7%±2.2%和13.0%±2.5%,与对照组(100.0%±0.8%)比较差异均有统计学意义(均P＜0.05);100 μg/ml EGCG处理细胞24、48、72和96 h后,HepG2活细胞计数(×104)分别是8.0±1.5,22.0±3.1,37.0±5.4和61.0±8.7,与对照组(15.0±2.5,45.0±5.3,86.0±11.0和210.0±23.0)相比明显减少,差异均有统计学意义(均P＜0.05);SMMC-7721活细胞计数(×104)分别是7.0±2.2,13.0±2.5,20.0±3.7和31.0±4.0,与对照组(14.0±2.2,40.0±4.3,75.0±8.8和182.0±28.0)相比明显减少,差异均有统计学意义(均P＜0.05).EGGG(50、100、200μg/ml)处理细胞12 h后,HepG2细胞凋亡率分别是8.7%±0.4%,18.1%±1.1%和22.1%±1.8%;SMMC-7721细胞凋亡率分别是5.9%±0.3%,7.8%±0.6%和12.2%±0.8%,与对照组(3.3%±0.3%)和(3.7%±0.4%)比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);EGCG(100、200μg/ml)处理细胞12 h后,HepG2细胞caspase-9活性为1.8±0.4和2.5±0.4;caspase-3活性为2.0±0.4和2.8±0.5,两者与对照组(1.0±0.1和1.0±0.2)比较差异均有统计学意义(均P＜0.05);SMMC-7721细胞caspase-9活性为1.7±0.4和2.5±0.4,caspase-3活性为1.9±0.4和2.6±0.3,均显著高于对照组(1.0±0.1和1.0±0.2,P＜0.05).EGCG(200μg/ml)下调COX-2和Bcl-2的表达,而对Bcl-2家族其他成员表达无明显影响.结论 EGCG可能通过下调COX-2和Bcl-2的表达,激活caspase-9和caspase-3诱导肝癌细胞凋亡.     

血管生成素-2在人肝细性肝癌组织表达情况的研究

目的 :探讨血管生成素 2 (angiopoietin 2 ,Ang 2 )在肝细胞性肝癌 (hepatocellularcarcinoma ,HCC)血管生成中的作用。方法 :应用免疫组织化学方法检测Ang 2、CD 34在 34例人HCC及其癌旁组织的表达 ,并分析Ang 2、CD 34的表达水平与肿瘤生物学行为的相关性。 结果 :(1)CD 34在HCC表达明显 (P <0 0 1) ,而在癌旁组基本弱阳性表达 ;(2 )Ang 2在HCC组织明显表达 ,而在癌旁组织表达较少。 结论 :人HCC血管生成增加 ,Ang 2和肝癌的血管生成相关 ,可能参与肝癌的血管生成的调控     

miR-214通过靶向调控E2F3抑制肝癌细胞的增殖

目的探讨miR-214通过靶向调控E2F转录因子3(E2F3)抑制肝癌细胞的增殖。方法 RT-PCR法检测细胞株SMMC-7721、Hep G2、SK-Hep-1和Huh 7中miR-214的表达量,并利用脂质体转染miR-214 NC及miR-214 mimics。采用MTT法检测miR-214对肝癌细胞活力的影响;Hoechst染色试剂盒检测miR-214对细胞凋亡的影响,流式细胞术检测miR-214对细胞周期的影响;Western blot及RT-PCR法检测miR-214对肝癌细胞中E2F3蛋白及mRNA表达量的影响,并通过荧光素酶报告基因进行验证。结果 SMMC-7721、SK-Hep-1、Huh 7及Hep G2中miR-214的表达量分别为(0.83±0.08)、(0.32±0.03)、(0.33±0.03)、(0.08±0.01),其中Hep G2中miR-214表达量最低,因此选用Hep G2作为后续实验细胞株。Hep G2细胞转染miR-214 NC及miR-214 mimics、miR-214mimics组中miR-214表达量(0.65±0.06)明显高于miR-214 NC组(0.14±0.01),miR-214 mimics组细胞活力(0.35±0.03)明显低于miR-214 NC组(0.69±0.06),miR-214 mimics组细胞凋亡率(36.37±3.43)%明显高于miR-214 NC组(3.74±0.34)%,miR-214 mimics组G1期明(57.79±5.78)显长于miR-214 NC组(45.319±4.53),miR-214 mimics组中E2F3蛋白[(0.23±0.02)、(0.24±0.02)]及mRNA表达量明显低于miR-214 NC组[(0.98±0.09)、(0.99±0.10)],差异均具有统计学意义(P0.01)。结论 miR-214过表达能通过下调E2F3表达抑制肝癌细胞的增殖。     

AFP-L3在肝细胞癌早期诊断中的应用价值研究

目的探讨AFP异质体作为肝癌早期诊断标志物在临床上的应用价值。方法利用微量离心柱法分离得到AFP—L3,采用化学发光法分别检测总AFP与AFP—L3含量,进而计算AFP—L3与总AFP的比值。结果AFP—L3与总AFP比值大于10％时与HCC呈明显相关性（P＜0．01）。应用微量离心柱法检测甲胎蛋白异质体AFP—L3对肝癌的早期诊断、预后有重要临床应用价值。