HIF-1α基因转染人胃腺癌SGC7901细胞对裸鼠移植瘤的影响及机制

目的 探讨低氧诱导因子(HIF)-1α基因转染人胃腺癌SGC7901对裸鼠移植瘤血管生成及EphA2表达的影响及其可能机制.方法 采用HIF-1α基因重组质粒pGCsi-shHIF-1α,转染胃腺癌SGC7901细胞并接种裸鼠(SGC7901/shRNA,实验组),建立裸鼠皮下人胃腺癌移植瘤模型,动态观测裸鼠肿瘤体积和质量;设SGC7901(未转染组)、转染空质粒的SGC7901(SGC7901/Neo,空载体组)为对照.观察移植瘤生长情况,8周后,获取移植瘤模型瘤组织,称取湿重,免疫组化SP法检测移植瘤组织的微血管密度,Western blot检测上皮细胞激酶A2(EphA2)表达.结果 与未转染组比较,空载体组瘤体积、质量改变不明显,HIF-1α转染的实验组的瘤体积、质量明显降低;HIF-1α转染的实验组诱导血管增生、形成血管生成拟态和EphA2蛋白表达较未转染组组、空载体组明显降低(P<0.05,P<0.01).结论 HIF-1α基因转染可明显抑制裸鼠人胃腺癌移植瘤的生长,该作用可能与其抑制肿瘤血管新生、形成血管拟态及EphA2蛋白表达有关.     

乳腺癌转移抑制基因BRMS1与肿瘤

乳腺癌转移抑制基因1(BRMS1)是2000年在乳腺癌细胞中发现的肿瘤转移抑制基因,研究发现其在多种恶性肿瘤中具有抑制肿瘤细胞转移的能力,可明显减少转移灶的发生,但其具体作用机制仍不清楚。对BRMS1基因的深入研究必将有助于对肿瘤转移的早期诊断及治疗,本文就BRMS1的基因结构、蛋白功能及其与肿瘤的关系、作用机制等予以综述。     

转移抑制基因BRMS1对卵巢癌细胞侵袭能力的影响

目的研究转移抑制基因BRMS1对高转移性人卵巢上皮癌细胞(HO-8910PM)侵袭能力的影响。方法脂质体介导将重组真核表达质粒pcDNA3.0-BRMS1转染HO-8910PM细胞;RT-PCR检测转染前后细胞中BRMS1mRNA的表达;Boyden小室法检测细胞侵袭能力。结果与未转染细胞(HO-8910PM)和pcDNA30空质粒转染细胞(HO-8910PM-vect)相比,BRMS1基因转染细胞(BRMS1.c2)侵袭穿透Matrigel基质膜的细胞数降低70.6%(P<0.001)。结论BRMS1基因能抑制卵巢癌细胞HO-8910PM的侵袭能力,为进行卵巢癌基因治疗提供了实验依据。     

KAI1基因对宫颈癌细胞增殖和侵袭能力的影响

目的 探讨肿瘤转移抑制基因KAI1对宫颈癌CaSki细胞体外增殖和侵袭能力的影响.方法 通过脂质体转染技术,将真核表达质粒pCMV-KAI1导入低表达的宫颈癌CaSki细胞,免疫组化及实时荧光定量RT-PCR法检测转染前后细胞内KAI1蛋白和mRNA的表达,通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法及Transwell侵袭力小室测定KAI1基因对细胞增殖能力及侵袭能力的影响.结果 转染目的基因的CaSki细胞中KAI1 mRNA水平及蛋白表达明显增强(P<0.05),细胞体外增殖能力明显弱于未转染组和转染空载体组(P<0.05),细胞穿膜数量明显少于未转染组和转染空载体组(P<0.05).结论 肿瘤转移抑制基因KAI1对宫颈癌细胞体外增殖及侵袭能力有一定抑制作用.     

裸鼠脾脏移植瘤模型在NGX6抗结肠癌转移作用研究中的应用

目的:建立结肠癌肝转移模型,为抑瘤基因NGX6功能研究提供体内试验平台.方法:将低分化结肠癌细胞系HT-29组(HT-29)、空白质粒转染组[pcDNA3.1( )/HT-29]、NGX6转染组[(pcDNA3.1( )/NGX6/HT-29)]细胞分别接种于裸鼠脾脏下极包膜内,每天称量裸鼠体质量并观察裸鼠摄食、活动及精神情况,45 d后处死裸鼠,分别从大体水平以及镜下观察肝、脾、肺、肾、脑等器官肿瘤转移情况.结果:pcDNA3.1( )/NGX6/HT-29组裸鼠较其他两组裸鼠肝脏转移灶数目明显减少、脾脏上种植瘤形成明显减少.结论:抑瘤基因NGX6抑制结肠癌HT-29细胞的转移,裸鼠脾内种植转移模型可作为新基因体内功能研究的理想模型.     

转移抑制基因BRMS1对卵巢癌细胞侵袭能力的影响

目的研究转移抑制基因BRMS1对高转移性人卵巢上皮癌细胞(HO-8910PM)侵袭能力的影响.方法脂质体介导将重组真核表达质粒pcDNA3.0-BRMS1转染HO-8910PM细胞;RT-PCR检测转染前后细胞中BRMS1mRNA的表达;Boyden小室法检测细胞侵袭能力.结果与未转染细胞(HO-8910PM)和pcDNA3.0空质粒转染细胞(HO-8910PM-vect)相比,BRMS1基因转染细胞(BRMS1.c2)侵袭穿透Matrigel基质膜的细胞数降低70.6%(P<0.001).结论BRMS1基因能抑制卵巢癌细胞HO-8910PM的侵袭能力,为进行卵巢癌基因治疗提供了实验依据.     

BRMS1通过抑制PI3K/AKT-mTOR信号通路活性发挥抗肾细胞癌作用

目的:探究乳腺癌转移抑制基因1(breast cancer metastasis suppressor 1,BRMS1)抗肾细胞癌作用的具体机制。方法:构建BRMS1过表达以及表达敲低的稳定转染细胞系,检测BRMS1过表达以及表达敲低后对769-P细胞生存率的影响。通过Western blotting方法检测各组细胞中磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B-哺乳动物类雷帕霉素靶蛋白-核因子-κB (phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B-mammalian target of rapamycin-nuclear factor-κB,PI3K/AKT-mTOR-NF-κB)信号通路的活化状态,以及各组细胞中细胞凋亡相关蛋白、DNA损伤修复相关蛋白以及血管生成相关蛋白的表达量。结果:BRMS1过表达后769-P细胞存活率明显降低(P<0.05),而BRMS1敲低后769-P细胞存活率明显增加(P<0.05),且肿瘤细胞的侵袭能力受到明显抑制(P<0.05)。BRMS1过表达后,769-P细胞内PI3K/AKT-mTOR-NFκB信号通路活性受到明显的抑制,促凋亡蛋白BCL-2相关蛋白X(BCL-2 Associated X,BAX)表达量明显增加(P<0.05),而抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤基因2(B cell lymphoma gene 2,Bcl-2)表达量则明显降低(P<0.05);此外,DNA修复相关分子的表达量在BRMS1过表达后表达量受到明显的抑制(P<0.05),血管生成和细胞基质降解相关蛋白的表达也受到明显的抑制(P<0.05)。结论:BRMS1通过抑制PI3K/AKT-mTOR-NFκB信号通路的活化,增加促凋亡蛋白的表达同时抑制抗凋亡蛋白的表达,抑制DNA损伤修复相关蛋白的表达以及抑制血管生成和细胞基质降解相关蛋白的表达,诱导肾癌细胞凋亡,发挥抗肿瘤作用。     

BRMS1 mRNA在乳腺癌中的表达与腋淋巴结转移的关系

目的:探讨乳腺癌组织中乳腺癌转移抑制基因(breastcancermetastasis-suppressor1,BRMS1)mRNA表达水平与腋淋巴结转移之间的关系。方法:根据腋淋巴结转移状况,将58例乳腺癌标本分为转移组(31例)和非转移组(27例);以β-actin为内参照,用半定量RT-PCR方法检测58例乳腺癌组织中BRMS1mRNA的表达。结果:BRMS1mRNA在乳腺癌组织中的表达为0.397±0.023;BRMS1mRNA在乳腺癌腋淋巴结转移组和非转移组中的表达分别为0.327±0.038、0.475±0.041,转移组BRMS1mRNA的表达水平显著低于非转移组(P<0.05)。结论:BRMS1mRNA在乳腺癌组织中的表达水平与腋淋巴结转移呈负相关,而与病理类型、肿瘤大小无相关性,BRMS1mRNA成为判断乳腺癌患者腋淋巴结转移的指标。     

鼻咽癌细胞株中乳腺癌转移抑制基因表达的研究

目的:检测乳腺癌转移抑制(BRMS1)基因在不同转移习性的人鼻咽癌细胞株中的表达情况。方法:应用免疫组织化学法和逆转录聚合酶链式反应法在mRNA和蛋白2方面检测人鼻咽癌细胞株高分化磷癌、低分化磷癌、低分化细胞株、高成瘤高转移性细胞株、低成瘤低转移性细胞株中BRMS1的表达。结果:5种细胞株中BRMS1的蛋白表达皆为阳性,在不同转移习性的细胞株中其表达强度明显不同。4种细胞株中扩增出BRMS1 mRNA,而BRMS1 mRNA在高转移性细胞株中未扩增出,高分化鳞癌、低分化鳞癌、低分化细胞株BRMS1mRNA表达水平均显著高于低成瘤低转移性细胞株(P<0.01)。结论:BRMS1的表达与细胞株的转移能力有明显相关性,表明BRMS1可能作为鼻咽癌细胞转移的重要指标。     

结直肠癌组织中BRMS1 mRNA的表达及意义

目的:探讨乳腺癌转移抑制基因1（BRMS1）mRNA在结直肠癌组织中的表达及临床意义。方法:采用RT-PCR法分别检测40例结直肠癌组织和20例正常结直肠组织中BRMS1 mRNA的表达,并分析其与各临床病理特征之间的关系。结果:BRMS1 mRNA在结直肠癌组织中低表达0.420±0.133,在正常结直肠组织中高表达0.836±0.102,差异有统计学意义（P<0.01）。结直肠癌组织中BRMS1 mRNA的表达水平与病人年龄、性别、肿瘤部位、肿瘤分化程度及浸润深度无关（P>0.05）,而与淋巴结转移呈负相关关系（P<0.01）。结论:BRMS1 mRNA在结直肠癌组织中呈低表达,并有可能成为反映结直肠癌转移潜能的参考指标之一。     

E-cad在低位直肠癌淋巴结转移裸鼠模型血清及移植瘤中的表达及其意义

目的探讨裸鼠低位直肠癌淋巴结转移模型血清及移植瘤组织中E-钙黏蛋白(E-cad)的表达情况,分析其在直肠癌淋巴结转移过程中的作用。方法取对数生长期的人大肠癌细胞株SW480接种于裸鼠直肠黏膜下,建立裸鼠低位直肠癌淋巴结转移模型。120只裸鼠随机分为3组,每组40只,A组(直肠癌模型组)采用二甲基肼注射+SW480种植,B组(二甲基肼对照组)采用二甲基肼注射,C组(空白对照组)不作任何处理。采用ELISA检测血清E-cad的含量,采用Western blot法、RT-PCR法检测种植瘤组织中E-cad蛋白及mRNA表达水平。结果A组裸鼠的血清E-Cad含量为(19.48±1.25)mg/L,明显高于B组裸鼠和C组裸鼠的血清E-Cad含量(2.36±0.18mg/L和2.15±0.12 mg/L)(t=8.28,9.01,P0.05)。发现侧方淋巴结转移的裸鼠血清E-Cad含量,明显高于未发现侧方淋巴结转移的裸鼠,差异有显著性(t=10.28,P0.05)。A组裸鼠移植瘤组织中E-Cad蛋白的表达强度弱于B组和C组(t=9.81,7.69,P0.05)。A组中,有侧方淋巴结转移发生的裸鼠移植瘤组织中E-Cad蛋白表达强度较未有侧方淋巴结转移发生的裸鼠移植瘤组织中表达明显减弱,差异有显著性(t=9.36,P0.05)。A组裸鼠移植瘤组织中E-Cad mRNA表达明显下调,与B组和C组比较,有明显的差异(P0.05)。A组中发现侧方淋巴结转移的裸鼠移植瘤组织中E-Cad mRNA表达强度明显下调,与未发现侧方淋巴结转移的裸鼠比较,差异有显著性(t=7.85,P0.05)。结论血清E-cad的表达水平可能与直肠癌淋巴转移密切相关,同时直肠癌组织中E-Cad蛋白和mRNA表达减弱或缺失,导致癌细胞间粘附性降低,促进癌细胞获得侵袭和转移的能力。     

健脾复方对人大肠癌移植瘤裸小鼠肿瘤生长转移的影响

目的：研究健脾复方对人大肠癌移植瘤裸小鼠生长转移的影响。方法：对60只BALB/C裸小鼠建立人大肠癌原位移植瘤模型,并按1：1：1：1：1随机分入健脾复方＋5-Fu组、健脾复方组、塞来昔布组、5-Fu组和模型对照组,分组治疗8周。观察瘤质重、瘤体积以及肿瘤转移情况,并对肝转移的预测因素进行分析。结果：健脾复方＋5-Fu组的瘤质重、瘤体积及肿瘤转移数量低于部分其他组别,差异有统计学显著性。不同的治疗方案是肝转移唯一的显著性相关因素（P=0.0022）。结论：健脾复方联合5-Fu治疗可降低大肠癌瘤质重、瘤体积和肿瘤转移数量,并且与降低肝转移显著相关。     

姑息性肝切除术后残癌转移潜能及其基因功能网络变化的实验观察

目的 观察姑息性肝切除对肝脏残癌转移潜能的影响及其转移相关基因功能网络的变化.方法 以高转移人肝癌细胞(MHCC97H)建立裸鼠原位移植瘤模型,14 d后将36只成模裸鼠随机分成3组:姑息性肝切除组(获取肝癌标本A、B)、对照组1(假手术组,获取肝癌标本C1)、对照组2(无干预组,获取肝癌标本C2).姑息术后14 d每组随机处死6只裸鼠,采用肿瘤转移相关芯片检测肝癌基因表达,使用综合型GEArray分析配套软件分析芯片数据.差异基因显著性分析、分组关联度分析及支持向量机用于筛选肿瘤转移相关标志基因;应用基于特征性致病基因的基因聚类和多维量表构建基因功能网络,比较网络密度、凝聚度以及枢纽基因的变化特点;Real-time PCR用于检测mRNA表达.姑息术后35 d处死剩余裸鼠,检测肺转移.SAS 8.2软件包用于统计分析.结果 组间存在显著性差异基因表达,姑息组基因网络密度(B,0.0670)较对照组(A,0.0145;C1,0.0210;C2,0.0146)上调;残癌基因网络凝聚度(B,0.1940)明显高于自身对照组(A,0.0098).编码转移消失蛋白B(MIM-B)的人源性转移抑制基因1(MTSS1)处于残癌基因功能网络核心位置,残癌MIM-B mRNA相对表达水平(B,0.283±0.023)较对照组上调(A,0.142±0.018;C1,0.177±0.054;C2,0.156±0.017,P＜0.05).术后35 d,姑息组肺转移结节数目(14.3±4.7)多于假手术组(8.7±3.6,P＜0.01).结论 姑息性肝切除增强残癌肺转移潜能,MIM-B蛋白可能是肝癌患者重要的干预靶点之一.     

BRMS1 mRNA在直肠癌中的表达及其临床意义

目的探讨乳腺癌转移抑制基因1(BRMS1)mRNA在直肠癌组织中的表达及其临床意义。方法应用RT-PCR法检测80例直肠癌组织及其40例癌旁正常黏膜组织中BRMS1 mRNA的表达。结果 BRMS1 mRNA在直肠癌中低表达(0.467±0.045),在癌旁组织中呈高表达(0.991±0.054),两者相比较差异均具有统计学意义(P<0.01)。直肠癌组织中BRMS1 mRNA的表达水平与直肠癌患者年龄、性别无关(P>0.05),与直肠癌患者的组织分化、淋巴结转移和临床分期有关(P<0.05)。结论BRMS1 mRNA在直肠癌中低表达,且其低表达可能与直肠癌的临床分期、病理分化以及淋巴结转移有关。     

抗黏附药物对人结肠癌细胞裸鼠肝转移模型sICAM-1表达的影响

目的　探讨术后早期给予抗黏附药物丹参、蛇毒对人结肠癌细胞裸鼠肝转移模型sICAM 1表达的影响。方法　采用Balbc/c裸鼠 2 4只 ,用保脾法建立人结肠癌细胞裸鼠肝转移模型 ,随机分为 4组 ,分别自腹腔注射生理盐水 (A组 ) ,丹参 0 .7ml/只 (B组 )、蛇毒 3.12 5× 10 2 单位 /只 (C组 )、丹参 0 .7ml和蛇毒 3.12 5× 10 2 单位 /只 (D组 )。 5周时处死小鼠 ,观察原位移植瘤生长情况、肝转移情况 ,计数各肝脏表面转移结节数 ,并经病理组织学证实。测定血清和腹水中sICAM 1的含量。肝脏表面转移结节数采用秩和检验、sICAM 1的含量采用t检验。结果　实验各组均有脾内原位移植瘤生长 ,生理盐水组、丹参加蛇毒组各有 5只裸鼠发生肝转移 (5 / 6 )、丹参、蛇毒组各有 4只裸鼠发生肝转移 (4/ 6 )。对照组血清和腹水中sICAM 1的含量均高于丹参组 (P <0 .0 1)、蛇毒组 (P <0 .0 1)及丹参加蛇毒组 (P <0 .0 1)。结论　抗黏附药物可降低血清和腹水中sICAM 1的含量 ,抗黏附治疗可能是治疗恶性肿瘤转移的一个新方向。     

溶血磷脂酸诱导人卵巢上皮癌裸鼠腹腔移植瘤生长研究

目的 观察溶血磷脂酸(LPA)对卵巢上皮性癌裸鼠腹腔移植瘤生长及转移的作用.方法 建立人卵巢上皮性癌腹腔移植瘤模型,16只裸鼠随机分为2组即对照组和LPA处理组,将6×106个未经处理的卵巢上皮癌细胞株SKOV3和用LPA刺激后的SKOV3细胞分别注入2组裸鼠腹腔,待裸鼠自然死亡后,观察移植瘤大小、重量、腹腔转移灶的数目及腹腔脏器转移情况.结果 两组成瘤率均为100%,但LPA组移植瘤生长速度、重量和腹腔转移灶数目均高于对照组(P＜0.01).结论 LPA具有促进卵巢癌细胞在腹腔内增生和浸润转移的作用.     

乳腺癌转移抑制因子1的研究进展

乳腺癌转移抑制因子1（BRMSl）能抑制肿瘤转移并与肿瘤预后密切相关。BRMSl的卷曲螺旋结构能与分选连接蛋白6（SNX6）富含AT的结构域一起形成六聚体,而核定位信号2（NLS2）帮助BRMSl发挥转移抑制作用。BRMSl作为mSin3：组蛋白去乙酰化酶复合体（mSin3：HDAC）中的一员,能抑制核转录因子-κB（NF-κB）及其下游的尿激酶型纤溶酶原激活剂（uPA）、骨桥蛋白（OPN）和表皮生长因子受体（EGFR）等信号通路,恢复同型间细胞连接蛋白的表达,促进或抑制肿瘤转移相关的miRNA表达,从而对卵巢癌、黑色素瘤、非小细胞肺癌等多种肿瘤的转移起到抑制作用。该文对有关BRMSl介导的抑制肿瘤转移及其主要机制作一综述。     

IL-24抑制宫颈癌裸鼠移植瘤生长的初步研究

目的探讨基因重组质粒pDC316-hIL-24对裸鼠人宫颈癌移植瘤生长和浸润转移的抑制作用,以及其与nm23H1表达变化的关系。方法将18只造模成功的人宫颈癌Hela细胞裸鼠模型随机分为3组,每组6只：BPS缓冲液对照Ⅰ组,空质粒Ⅱ组,IL-24重组质粒Ⅲ组。观察各组裸鼠饮食、体重等一般状况,记录各组裸鼠移植瘤体积、绘制生长曲线。观察裸鼠肿瘤附近淋巴结转移情况,实验结束后根据瘤体重量计算肿瘤抑制率。应用RT-PCR法检测移植瘤IL-24的表达,并用免疫组化法nm23H1蛋白表达变化。结果基因重组质粒pDC316-hIL-24在裸鼠体内转染成功,且有明显的抑瘤效果,抑瘤率为42.9%,与对照组、空质粒组差异有统计学意义（P〈0.05）。IL-24重组质粒组肿瘤淋巴结转移较其他组少,差异有显著性（P〈0.05）。免疫组化结果显示,IL-24组的转移抑制基因nm23H1蛋白表达明显增多,与其余2组比较差异有统计学意义（P〈0.001）。结论重组质粒pDC316-hIL-24能明显抑制宫颈癌裸鼠肿瘤模型的生长,并可能通过上调nm23H1的表达发挥抗肿瘤生长和浸润转移的作用。     

复方斑蝥制剂对直肠癌微淋巴管生成影响的实验研究

目的 通过建立未分化人直肠癌HR8348原位移植裸鼠模型,应用复方斑蝥制剂治疗,观察其对裸鼠原位移植入直肠癌微淋巴管生成的影响.方法 建立人直肠癌HR8348原位种植BALB/C裸鼠模型80只,随机分为两组,每组40只,分别腹腔内注射0.9%氯化钠溶液、复方斑蝥制剂8 mg/kg,2次／周.8周后处死裸鼠,采用定量免疫...