程序化细胞死亡分子5及其他凋亡调控蛋白在线粒体病患者骨骼肌中的表达

目的 检测程序化细胞死亡分子5(PDCD5)、半胱氨酸蛋白水解酶(Caspase-3)、Bax和Bcl-2蛋白在线粒体脑肌病伴随乳酸血症和卒中样发作(MELAS)、肢带型线粒体肌病(LGMM)及慢性进行性眼外肌瘫痪(CPEO)患者骨骼肌中的表达情况,探讨细胞凋亡与线粒体病发病机制之间的关系.方法 选择经临床、病理及基因检查诊断的3例MELAS、2例LGMM和6例CPEO患者,对骨骼肌进行PDCD5、Caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白免疫组织化学染色,以11例非骨骼肌疾病患者的肌肉标本进行对照.结果 PDCD5和Caspase-3在个别破碎红纤维(RRF)膜下和少数毛细血管高表达,在对照无表达;Bcl-2在病例组和对照组的许多小血管中表达,在病例组的许多RRF和毛细血管表达增强;Bax在正常对照和患者组的肌纤维和毛细血管未见表达.结论 线粒体病患者的骨骼肌内存在细胞凋亡过程的异常调节,PDCD5、Caspase-3、Bcl-2和Bax参与其中.     

显微修复肌内神经对断裂股直肌恢复的作用

目的:探讨显微修复肌内神经对损伤骨骼肌恢复的影响.方法:30只新西兰大白兔随机分为A、B 2组.2组均选取实验动物右侧股直肌作为实验侧,左侧股直肌作为空白对照侧.A组切断一侧股直肌后修复肌肉残端及肌内神经,B组仅修复肌肉.术后28周,测量股直肌湿重及力量,通过HE染色、Masson三色染色、肌球蛋白三磷酸腺苷酶(mATPase)染色及还原型辅酶Ⅰ四唑氮还原酶(NADH-TR)染色观测股直肌的形态学指标,通过t检验、ANOVA分析比较A、B2组自身及组间在各指标上的差异情况,从而判断显微修复肌内神经对损伤骨骼肌恢复的影响效果.结果:术后28周,与对照侧相比,肌内神经断伤组实验侧股直肌湿重、等长收缩力下降(P＜0.05),Ⅰ型、Ⅱa型、Ⅱb型肌纤维横断面面积均恢复较差(P＜0.05),肌肉萎缩、脂肪浸润及纤维变性明显,肌纤维再生状况欠佳,肌纤维直径变异较大.肌内神经修复组除Ⅱb型肌纤维恢复较差(P＜0.05),其余各项指标基本恢复正常.结论:通过显微技术修复肌内神经,能够促进损伤骨骼肌的肌纤维再生,减轻肌肉萎缩及纤维变性,恢复肌纤维的正常形态及组成方式,促进损伤骨骼肌的恢复.     

May-Hegglin异常患者中性粒细胞包涵体的免疫荧光定位和非肌性肌球蛋白重链A鉴定

目的 研究非肌性肌球蛋白重链A(NMMHC-A)在May-Hegglin异常患者中性粒细胞胞浆中的定位及表达,以确定包涵体的本质。方法 用间接免疫荧光结合碘化内啶染色技术,对患者正常对照者的外周血白细胞进行非肌性肌球蛋白亚细胞定位;用Western印迹技术揭示患者及正常对照中性粒细胞NMMHC-A表达的差异。结果 患者中性粒细胞胞浆中荧光分布显示了“梭形”包涵体的形态和轮廓,与Wright-Giemsa氏染色显示的包涵体形状、大小基本一致,但更为清晰;Western印迹结果显示患者NMMHC-A表达量(60．9)强于正常对照(29．2)。结论 建立了一种对May-Hegglin异常的中性粒细胞包涵体“展示”的新方法。May-Hegglin异常患者中性粒细胞包涵体的主要成分是非肌性肌球蛋白突变体。NMMHC-A在患者中性粒细胞中表达强于正常对照。     

假肥大型肌营养不良患者骨骼肌纤维再生病理特点研究

目的研究假肥大型肌营养不良患者骨骼肌纤维再生病理特点。方法收集25例假肥大型肌营养不良患者活检骨骼肌标本,其中杜兴型肌营养不良（DMD）18例,贝克型肌营养不良（BMD）7例,冷冻连续切片,采用组织化学及免疫组织化学染色,光镜下观察再生肌纤维特点,同时应用形态计量学方法分析肌纤维再生的活跃程度。结果 HE染色下见再生肌纤维深染,胞质嗜碱性,细胞核大,同源观察NCAM染色,再生肌NCAM呈阳性表达,伴随肌纤维的成熟NCAM表达逐渐减弱,成熟肌纤维无表达。DMD患者再生肌纤维直径及横截面积明显小于BMD患者再生肌纤维,再生肌纤维数量较多。结论假肥大型肌营养不良患者骨骼肌纤维再生与年龄有相关性。     

增生性肌炎免疫组织化学研究

目的提高增生性肌炎的诊治水平。方法收集2例增生性肌炎进行临床病理及免疫组织化学分析。结果免疫组织化学，Actin、Vimentin标记增生细胞阳性，Desmin、AACT、CK、EMA、Myoglobin和S-100标记阴性。组织化学：Masson染色增生细胞胞浆呈红色。结论增生性肌炎属于肌纤维母细胞瘤样增生性病变。     

人体失神经支配骨骼肌1Na,K-ATP酶、Ca-ATP酶及糖原的变化

目的　探讨失神经支配人体骨骼肌酶和糖原改变。方法　 16例不同时间人体失神经骨骼肌与 3例正常骨骼肌标本 ,用组织化学方法测定Na,K ATP酶和Ca ATP酶含量 ,电镜和PAS染色观察糖原分布改变并测定糖原含量。结果　人体骨骼肌随失神经支配时间延长 ,Na ,K ATP酶和糖原含量呈进行性下降趋势 ;而Ca ATP酶在失神经 2个月内下降约 1/ 3,3个月后一直维持在正常值的 30 %～ 4 0 %。PAS染色显示人体骨骼肌失神经后出现PAS染色阴性细胞 ,其数量在 3～ 6个月时达到高峰 ,随后逐渐下降 ;在PAS染色切片中 ,居中肌细胞核主要在阴性肌纤维中出现。结论　Ca ATP酶活性变化规律说明失神经支配后肌肉收缩的生理基础长期存在 ,PAS染色阴性细胞可作为反映人体骨骼肌失神经支配后肌再生状态的一个指标     

系统性红斑狼疮患者抗中性粒细胞胞浆抗体的临床相关性及其意义

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)实验室检测的临床意义。方法采用间接免疫荧光技术(IIF)检测抗核抗体(ANA)、双链脱氧核糖核酸(dsDNA)、ANCA。并回顾性分析70例SLE患者血清ANCA阳性率及荧光免疫模型。结果 ANCA阳性19例,全部是核周型(pANCA)。ANCA阳性组在dsDNA阳性,补体C3、C4降低,血沉增高,肾脏损害等方面与ANCA阴性组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 SLE患者ANCA阳性,与疾病的活动性及肾脏损伤有关。     

成肌调节因子MyoD和Myf-5在人体失神经骨骼肌中的表达及其临床意义

目的　研究人体骨骼肌失神经支配后成肌调节因子MyoD和Myf 5蛋白的表达变化 ,了解骨骼肌的再生状态。方法　 2 0例不同时间人体失神经骨骼肌与 3例正常骨骼肌标本 ,HE染色和透射电镜观察肌卫星细胞形态变化 ;抗MyoD和Myf 5多克隆抗体免疫组织化学染色 (ABC法 ) ,统计阳性染色细胞核数。 结果　抗MyoD和Myf 5抗体阳性染色细胞核数在人体骨骼肌失神经 1～ 2月时的肌卫星细胞中最多 ;3个月后急剧下降 ,并维持在一低水平 ;1年后几乎无表达。结论　人体骨骼肌失神经支配后早期肌卫星细胞通过MyoD和 (或 )Myf 5途径激活、开始增殖分化并被耗竭     

抗PUF60抗体在炎性肌病患者中的分布特点及临床意义

目的:检测抗PUF60抗体在中国特发性炎性肌病(IIM)患者中的阳性率,并分析其相关的临床意义。方法:本研究共纳入388例IIM患者[275例皮肌炎(DM)、76例多发性肌炎(PM)及37例肌炎-重叠综合征]和167例健康对照(HCs)。酶联免疫吸附测定(ELISA)测定入组患者及健康对照的抗体滴度,并联合免疫印迹实验验证ELISA结果的可靠性。结果:抗PUF60抗体可见于各IIM亚组,阳性率均高于健康对照组,包括11.3%(P<0.01)的DM、7.9%(P<0.05)的PM和21.6%(P<0.01)的肌炎重叠综合征患者。在经典DM中,该抗体常见于肌炎抗体阴性的患者(P<0.05),并与技工手发生相关;且该抗体在无肌病性皮肌炎中阳性率较高,与皮肤溃疡的发生相关。结论:抗PUF60抗体在中国肌炎患者中普遍存在,且不同亚型的临床相关性各异,提示抗PUF60抗体或其靶抗原PUF60可能在不同亚型的肌炎中参与了不同的致病过程。     

肌形成蛋白在人体失神经骨骼肌表达的形态学

目的　研究肌形成蛋白在人体失神经骨骼肌中的表达规律。　方法　成人骨骼肌 1 8例 ,正常骨骼肌 3例 ,失神经时间 1 2个月内骨骼肌 9例 ,1 3～ 2 4个月 6例。免疫组织化学染色方法 (ABC法 )研究肌形成蛋白在骨骼肌内的表达。　结果　正常骨骼肌未见肌形成蛋白表达 ,失神经人体骨骼肌内肌形成蛋白蛋白表达在肌纤维细胞核与肌卫星细胞细胞核 ;失神经 1年内可见到肌形成蛋白阳性染色细胞核 ,之后阳性肌细胞核明显减少 ,具有统计学意义 (P<0 .0 5 )。　结论　人体骨骼肌失神经 1年后再生反应明显降低 ,提示人体骨骼肌失神经后应该尽早修复。     

家兔半膜肌各亚部肌球蛋白重链表达差异的实验研究

目的利用家兔半膜肌各亚部肌纤维类型的分布特征,观察骨骼肌两型肌纤维肌球蛋白重链（MHC）的构成特点,为进一步探讨两型肌纤维的区别以及两型肌纤维转化机制奠定基础。方法取成年家兔半膜肌,通过改良肌球蛋白ATP酶染色法观察半膜肌四个亚部肌纤维类型的构成,应用RT-PCR方法检测各亚部4种MHC亚型mRNA的表达情况。结果固有半膜肌只含有慢肌（Ⅰ型）肌纤维,表达MHCⅠ型和少量MHCⅡa型基因。副半膜肌腹侧亚部除含有少量Ⅰ型肌纤维外,主要含有快肌（Ⅱ型）肌纤维,表达少量MHCⅠ型基因以及MHCⅡa、MHCⅡb和MHCⅡx型基因等四种类型;而副半膜肌背侧和外侧亚部只含有Ⅱ型肌纤维,仅表达MHCⅡa、MHCⅡb和MHCⅡx型基因。结论家兔半膜肌各亚部肌纤维类型几乎均呈单一类型分布。固有半膜肌亚部主要表达MHCⅠ型基因;副半膜肌各亚部主要表达MHCⅡa、MHCⅡb和MHCⅡx型基因,以MHCⅡx型基因为主,各亚部之间存在细微差别。     

应用间接免疫荧光法和免疫酶法检测宫颈脱落细胞中单纯疱疹病毒二型特异性抗原

<正> 宫颈癌是妇科常见的恶性肿瘤,由于其病因不明在早期诊断和治疗上处于被动状态。很多年来,国外学者从血清流行病学调查有关病毒病因作了大量的工作。亦有国内外学者用免疫荧光技术检测宫颈脱落细胞的病毒抗原,这些资料有可能对宫颈癌的发生、发展和早期诊断提供依据。随着免疫荧光技术的发展和应用,免疫酶技术也不断地被应用于医学研究的各个领域。有人认为免疫酶比免疫荧光更为敏感。本文就     

类风湿关节炎患者瓜氨酸化Ⅱ型胶原的T细胞增殖反应和抗体生成

目的 研究类风湿关节炎(RA)患者对瓜氨酸化Ⅱ型胶原(Cit-CⅡ)的T细胞增殖反应和抗体生成,探讨Cit-CⅡ在RA发病机制中的作用.方法 体外用肽基精氨酸脱亚胺酶(PAD)催化牛CⅡ中的精氨酸转变为瓜氨酸,生成Cit-CⅡ,用3H掺入法检测34例RA患者和18例对照者(包括6例骨关节炎患者和12名健康志愿者)的外周血单个核细胞(PBMC)对CⅡ和Cit-CⅡ的增殖反应,用酶联免疫吸附试验测定患者和对照者血清抗CⅡ抗体及抗Cit-CⅡ抗体水平.结果 RA患者的PBMC对CⅡ和Cit-CⅡ的增殖反应阳性率分别为35.3%(12/34)和32.4%(11/34),均分别高于对照组11.1%和0(均P<0.05).RA患者的PBMC对Cit-CⅡ增殖反应阳性率与对CⅡ增殖反应阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05).RA患者抗Cit-CⅡ抗体阳性率(52.9%,18/34)高于抗CⅡ抗体阳性率(32.4%,11/34).CⅡ增殖反应阳性组抗CⅡ抗体的阳性率(58.3%,7/12)高于增殖反应阴性组(18.2%,4/22),Cit-CⅡ增殖反应阳性组抗Cit-CⅡ抗体的阳性率(72.7%,8/11)高于增殖反应阴性组(43.5%,10/23),差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 抗Cit-CⅡ抗体在RA中有很高的特异性;RA患者抗CⅡ抗体的生成可能与CⅡ特异性T细胞介导的B细胞活化有关.但是Cit-CⅡ并没有比原型CⅡ引起RA患者更强的外周血T细胞增殖反应,Cit-CⅡ在RA细胞免疫发病中的作用仍需进一步研究.     

女性生殖道沙眼衣原体感染分析

作者采用单克隆萤光抗体染色法检测５１６例妇科门诊患者宫颈沙眼衣原体（ＣＴ）感染状况，阳性者７０例，阳性率１３．６％；且发现ＣＴ感染随着年龄的增长而下降。ＣＴ感染的特征有阴道分泌物增多呈粘液及脓性、搔痒，腹痛及不孕等。ＣＴ沿宫颈管粘膜上行感染引起输卵管粘膜的损伤可能是引起不孕，异位妊娠的主要原因。选用可同时抗多种病原体的复合药灭菌灵阴道栓对６６例ＣＴ感染阳性的患者进行局部用药及配偶治疗；疗效满意。早期诊断及治疗可预防ＣＴ上行性感染，降低女性盆腔炎性疾病的发生。     

Type IIB human skeletal muscle fibers positively correlate with bone mineral density irrespective to age

Background Age-associated decrease in type ⅡA/B human skeletal muscle fibers was detected in human biopsies in our previous study. The relationship between change in muscle fiber typing and bone mineral density （BMD） is, however,unknown either cross-sectionally or longitudinally. We therefore conducted a cross-sectional study to investigate their correlation using human muscle biopsies.Methods Forty human subjects aged （53.4±20.2） years were recruited. Histomorphometric parameters of their muscle biopsies were measured by ATPase staining and image analysis, including average area percentage, fiber number percentage, mean fiber area, and area percentage of connective tissues. Hip and spine BMD was measured by dual-energy X-ray absorptiometry. Partial correlation with adjusting age was performed.Results Type ⅡB muscle fiber was found positively correlated with hip BMD irrespective to age and demonstrated significantly stronger relationship with BMD among all fiber types, in terms of its cross-sectional area （r=0.380, P=0.029）and size （r=0.389, P=0.025）. Type ⅡA muscle fibers associated with hip BMD in mean fiber area only （r=0.420, P=0.015）.Conclusions Type ⅡB muscle fiber may play an important role in maintaining bone quality. This may also be a relatively more sensitive fiber type of sarcopenia and osteoporosis. These findings further consolidate the muscle-bone relationship.     

注射性坐骨神经损伤后针刺对家兔腓肠肌内NADH-TR和胶原纤维的影响

目的探索注射性坐骨神经损伤后针刺腧穴改善肌萎缩的机制。方法成年家兔42只,随机分为7组：正常组;青霉素注射坐骨神经2周和4周组;青霉素注射坐骨神经加针刺腧穴4周和8周组;青霉素注射坐骨神经加针刺尾部对照4周和8周组。取腓肠肌外侧头横切片作烟酰胺腺嘌呤二核苷酸四唑氧化还原酶染色与VG染色。结果青霉素注射2周时,腓肠肌外侧头内烟酰胺腺嘌呤二核苷酸四唑氧化还原酶染色加深,光密度值增大,肌纤维横切面积减小,肌重减轻,胶原纤维增多。Ⅰ型和Ⅱ纤维的比例不变,ⅡA型纤维比例增加,ⅡB型纤维相应减少。4周时上述变化更重。坐骨神经注射性损伤4周后,针刺穴位治疗4周,上述变化明显恢复。8周时,进一步好转。尾部针刺对照组无恢复迹象。结论针刺腧穴改善注射性坐骨神经损伤所致的肌萎缩可通过降低肌内烟酰胺腺嘌呤二核苷酸四唑氧化还原酶活性和减少胶原纤维增生实现。     

皮肌炎的微血管免疫病理改变

目的 探讨皮肌炎患者骨骼肌内微血管的免疫病理改变规律。方法 对12例皮肌炎患者进行肌肉活检。选择10例非皮肌炎患者作为对照,进行常规组织学和酶组织化学和针对血管的免疫组织化学染色,第一抗体包括抗血管性血友病因子（vWF）抗体、抗血栓调节蛋白（TM）抗体和抗内皮细胞一氧化氮合酶（eNOS）抗体。结果 所有患者出现束周分布的肌纤维变性和肌束衣内小血管周围不同程度的炎细胞浸润,非特异性酯酶染色显示肌纤维间毛细血管深染。免疫组化染色显示毛细血管的vWF、TM和eNOS在束周区域分布显著减少,肌束衣处的微小动脉和静脉的TM和eNOS也减少。结论 皮肌炎的血管内皮细胞损害除毛细血管外,可以出现在其他微血管。TM以及eNOS在血管内皮细胞减少提示血管的抗凝和舒张功能下降。皮肌炎是一种弥漫性炎性血管内皮细胞病。     

脑膜瘤与AR以及MMP-2表达的相关性研究

目的：研究脑膜瘤与雄激素受体(AR)及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达的相关性。方法统计分析该院病理科2014年1月—2016年1月收集的50例脑膜瘤手术S mi psonⅠ~Ⅱ切除患者的石蜡标本的资料,对AR和MMP-2在良恶性脑膜瘤中的表达进行统计分析。结果恶性、复发、未复发、良性患者的AR阳性率分别为80.0%、85.7%、27.3%、35.0%,MMP-2阳性率分别为80.0%、85.7%、24.2%、32.5%。恶性患者的AR阳性表达率和染色强度均明显比良性高(P<0.05);恶性和良性、良性复发的AR蛋白表达之间的差异有统计学意义(P<0.05);恶性患者的MMP-2阳性表达率和染色强度均明显比良性高(P<0.05);良性复发和良性未复发患者的MMP-2表达之间的差异有统计学意义(P<0.05)。结论 AR和MMP-2表达与脑膜瘤有一定的相关性,可以作为对脑膜瘤良恶性进行鉴别的有效辅助诊断指标。     

α-突触核蛋白在大鼠脊髓的表达

目的研究α-突触核蛋白(α-Synuclein,α-Syn)在正常大鼠脊髓中的表达。方法利用2种抗α-Syn单抗3D5和2E3进行免疫组化染色,观察α-Syn在脊髓的表达和分布;用免疫荧光双标方法观察α-Syn与神经肽Y(NPY)共存的情况。用Luxol fast blue染色鉴别有髓与无髓神经纤维。结果α-Syn主要存在于脊髓灰质神经元核及灰质无髓神经纤维中。富含α-Syn的神经纤维主要分布在脊髓灰质的第Ⅰ、Ⅱ层,而α-Syn核阳性神经元主要分布在第Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅹ层;后根第Ⅰ、Ⅱ层一小部分α-Syn阳性纤维与NPY共存;前角细胞核呈α-Syn阳性神经元胞质中存在NPY,而其他部位的α-Syn核阳性神经元胞质中无NPY。结论α-Syn存在于大鼠脊髓灰质的神经元核及无髓神经纤维中,部分阳性神经纤维和神经元胞体呈NPY免疫阳性反应。     

雌雄激素受体在良性前列腺增生组织中的表达

目的研究雌激素受体(ER)和雄激素受体(AR)在良性前列腺增生组织的表达,探讨雌雄激素受体与良性前列腺增生(BPH)的关系。方法采用免疫组织化学法检测80例良性前列腺增生患者(60-80岁)和40例正常前列腺对照组中ER和AR表达。结果 60-70岁组前列腺组织中ER和AR表达阳性率显著高于对照组(ER:P=0.010,AR:P<0.000 1),70-80岁组前列腺组织中ER表达阳性率显著高于对照组(P=0.022),而AR表达阳性率与对照组比较没有统计学差异(P=0.108)。ER和AR表达阳性率两组间比较无统计学差异(ER:P=0.745,AR:P=0.055)。结论 ER和AR在BPH组织中高表达可能促进了BPH的发生。