脑源性神经营养因子对小鼠结肠平滑肌细胞的作用及其机制

目的 探讨脑源性神经营养因子(BDNF)对小鼠结肠平滑肌细胞(SMC)钙离子浓度及α-平滑肌激动蛋白(α-SMA)的影响及其相关调节机制。方法 Western blotting法检测BDNF基因敲除(BDNF^+/-)小鼠与正常野生型(BDNF^+/+)小鼠α-SMA表达水平的差异。培养原代小鼠结肠SMC,免疫荧光法检测SMC中酪氨酸激酶B(TrkB)受体的表达。同时以BDNF、TrkB受体阻滞剂(K252a)干预SMC,Western blotting法检测α-SMA和TrkB-PLC-Ca²⁺信号通路蛋白表达水平的变化,钙离子成像法检测SMC内钙离子浓度的变化。结果 与BDNF^+/+小鼠相比,BDNF^+/-小鼠结肠α-SMA表达水平明显降低。SMC表达TrkB受体,在BDNF作用下,SMC中α-SMA、TrkB-PLC-Ca²⁺信号通路蛋白表达量和细胞内钙离子浓度增加,且加入K252a可阻断以上变化。结论 BDNF可能通过TrkB-PLC-Ca²⁺信号通路作用于SMC,影响细胞内钙离子浓度及α-SMA的表达水平,进而影响肠道动力。     

氯胺酮对小鼠十二指肠及回肠平滑肌自主收缩活动的影响

目的 探讨氯胺酮对小鼠十二指肠及回肠纵行肌条收缩活动的影响.方法 取小鼠十二指肠及回肠纵行肌条,放人盛满Kreb's液的灌流肌槽中,加入药物,记录其收缩活动的变化.结果 不同浓度氯胺酮(1×10-6,3×10-6,1×10-3,3×10-5,1×10-4,3×10-4,1×10-3 mol/L)对十二指肠肌条收缩幅度变化百分率分别为-8.61±1.21,-15.08±2.13,-36.53±4.82,-60.74±9.42,-77.06±7.68,-89.65±14.24,-93.34±10.85;对回肠肌条收缩幅度变化百分率分别为-2.31±1.04,-2.43±2.01,-5.23±1.47,-8.75±1.16,-50.76±2.37,-85.43±10.52,-94.25±8.12.结论 氯胺酮可抑制离体十二指肠及回肠肌条的自主收缩活动,且对回肠的抑制效应比对十二指肠更加明显.     

牛磺酸对妊娠期小鼠子宫平滑肌收缩的抑制作用

目的 探讨牛磺酸对缩宫素预收缩的妊娠小鼠离体子宫平滑肌收缩作用的影响.方法 建立小鼠离体子宫平滑肌收缩模型,观察累积加入不同水平的牛磺酸对缩宫素诱导的小鼠离体子宫平滑肌收缩的影响.高效液相色谱法检测妊娠期、足月临产小鼠子宫平滑肌中牛磺酸水平变化.结果 牛磺酸(5×10-3～4×10-2 mol/L)对缩宫素(0.005 U/L)诱导的妊娠期小鼠离体子宫平滑肌的收缩有浓度依赖性的抑制作用,其平均最大抑制效应(Emax)值为(40.72±3.69)％;牛磺酸选择性转运抑制剂β-丙氨酸(7×10-2 mol/L)竞争性拮抗牛磺酸对妊娠期小鼠子宫平滑肌收缩的抑制作用.牛磺酸(5×10-3～4×10-3 mol/L)对未孕小鼠离体子宫平滑肌的收缩也具有浓度依赖性的抑制作用,其抑制作用弱于妊娠组,Emax值为(26.63±3.58)％.妊娠期小鼠子宫平滑肌中牛磺酸水平自中孕期开始显著降低,晚孕期后则逐渐回升.结论 牛磺酸可能通过抑制电压依赖性钙通道介导的胞外Ca2+内流对孕鼠离体子宫平滑肌的收缩有浓度依赖性抑制作用.     

槟榔提取物F57对大鼠结肠平滑肌运动的影响

目的:观察从中药槟榔中分离出的F57对离体大鼠结肠平滑肌运动的影响。方法:制备大鼠结肠平滑肌肌条,以0.9%氯化钠溶液(NS)和乙酰胆碱(Ach)作对照,观察不同浓度的F57对离体大鼠平滑肌肌条的收缩效应。结果:与NS组比较,不同浓度的F57对离体大鼠结肠平滑肌均有不同程度的促进作用,差异具有统计学意义(P﹤0.05)。以Ach标化实验数据,0.1 g/L的F57组与1×10-4 mol/L的Ach对离体大鼠结肠平滑肌的收缩效应无明显差异;当F57的浓度增大到1 g/L时候,肌条收缩效应基本达到峰值,收缩不再随着浓度的增大而增加。结论:从槟榔中分离出的F57对大鼠结肠平滑肌有明显促进收缩的作用,且收缩的效应与剂量呈正相关,可以进一步对F57进行分离单体的研究。     

不同静脉麻醉药对大鼠结肠纵形肌收缩活动的影响

目的研究咪达唑仑、丙泊酚、依托咪酯和氯胺酮对大鼠离体结肠远端纵形肌肌条收缩活动的影响及其可能的影响机制。方法制备大鼠离体结肠纵形肌肌条,随机分为对照组、非TTX组和TTX组,对照组加入二甲亚砜(DMSO)5μL;非TTX组直接加入不同累积浓度的咪达唑仑、丙泊酚、依托咪酯或氯胺酮;TTX组加入电压门控Na+通道阻滞剂河豚毒(TTX)10μmol/L阻断结肠内神经元动作电位的产生和传导后,再分别加入不同累积浓度的静脉麻醉药,加药方式同非TTX组。以平均肌张力变化为指标,记录三组肌条收缩活动的变化。结果对照组:DMSO对结肠肌条收缩张力无明显影响。非TTX组:咪达唑仑、丙泊酚、依托咪酯和氯胺酮分别在药物累积浓度达到1×10-5、1×10-5、1×10-6和3×10-6mol/L时降低结肠远端纵形肌收缩幅度(P<0.05～0.01),肌条张力降低幅度随药物浓度升高而加大。依托咪酯虽然在低浓度(1×10-6mol/L)时即可降低肌条自主收缩幅度,但当浓度累积至1×10-4mol/L时,与等浓度的咪达唑仑和丙泊酚相比,其降低幅度却较小(P<0.05)。TTX组:用电压门控Na+通道阻滞剂TTX预处理后,咪达唑仑、丙泊酚和依托咪酯仍降低大鼠结肠远端纵形肌肌条收缩张力,且与非TTX组相比,降低幅度明显增大(P<0.05～0.01);而氯胺酮非但不降低肌条收缩张力,反而增高收缩张力。结论咪达唑仑、丙泊酚、依托咪酯和氯胺酮均抑制大鼠结肠远端纵形肌自主收缩,其机制可能与肠道平滑肌细胞收缩和肠神经系统活动有关。     

陈皮提取物对小鼠胃排空、肠推进及家兔离体回肠平滑肌的影响

目的研究陈皮提取物对在体小鼠胃排空、肠推进的影响及对家兔离体回肠平滑肌肌条收缩活动的影响。方法将48只昆明小鼠随机分为陈皮提取物高剂量(10mL/kg)、中剂量(5mL/kg)、低剂量(2.5mL/kg)及空白对照(蒸馏水)4个组,每组12只,以胃肠内标记物墨汁在小鼠胃内色素相对残留率及肠推进比为指标,观察提取物对在体小鼠胃排空及肠推进的影响;在离体条件下,以家兔回肠平滑肌肌条的张力和频率为指标,通过不同浓度的陈皮提取物作用于家兔离体回肠平滑肌,观察提取物对离体回肠平滑肌收缩活动的影响。结果陈皮提取物在2.5、5、10mL/kg剂量下都能够提高小鼠胃排空率和促进小肠的推进作用,与对照组相比,差异具有显著性;在离体条件下,陈皮提取物在0.1g/L时能显著降低家兔离体回肠平滑肌的张力和收缩频率;在0.05g/L时也可明显降低平滑肌张力;在0.025g/L时,家兔离体回肠平滑肌的张力、收缩频率无显著性变化。结论陈皮提取物对在体动物胃肠动力具有促进作用,并存在一定的剂量—效应关系,而对离体肠管有一定的抑制作用,其抑制效应可能由胆碱能M受体介导。     

莱菔子含药血清对大鼠离体结肠平滑肌肌条的作用

目的观察不同浓度莱菔子含药血清对大鼠离体结肠平滑肌肌条收缩活动的影响。方法采用通法制备含药血清,分为空白血清组、10%浓度血清组、50%浓度血清组、100%浓度血清组4组,制备大鼠结肠纵肌和横肌肌条,观察不同血清组及阳性对照组（1×10-3mol/L乙酰胆碱）对离体结肠肌条收缩活性的效应。结果不同浓度的莱菔子含药血清对大鼠离体结肠平滑肌肌条的收缩活动均有不同程度的影响。结论莱菔子含药血清具有明显的促结肠动力作用。     

芬太尼和舒芬太尼对兔离体子宫平滑肌自发性收缩的影响

目的 观察芬太尼和舒芬太尼对兔离体子宫平滑肌自发性收缩的影响.方法 将30条(30只兔)已建立自发性规律收缩的离体兔子宫平滑肌肉条随机分为对照组(C组)、芬太尼组(F组)和舒芬太尼组(S组),每组10条.记录不同浓度的芬太尼和舒芬太尼对兔离体子宫平滑肌自发性收缩强度、频率和时程的影响.结果 芬太尼浓度为1×10-8 mol/L时,对兔离体子宫平滑肌的自发性收缩无影响.当芬太尼浓度达到3×10-8 mol/L及以上时子宫平滑肌的收缩强度明显下降(P＜0.05),当浓度≥3×10-7 mol/L时,可抑制子宫平滑肌的收缩强度、频率和时程均达50％以上(P＜0.05).舒芬太尼浓度≥1×10-7 mol/L时,可抑制子宫平滑肌收缩时程达50％以上(P＜0.05).与舒芬太尼组比较,当芬太尼浓度≥3×10-8 mol/L时,子宫平滑肌白发性收缩强度差异有统计学意义(P＜0.05);当浓度≥3×10-7 mol/L时,子宫平滑肌自发性收缩频率差异有统计学意义(P＜0.05);当浓度为1×10-7和1×10-5 mol/L时,子宫平滑肌自发性收缩时程差异有统计学意义(P＜0.05).结论 芬太尼呈浓度依赖性抑制兔离体子宫平滑肌的自发性规律收缩.高浓度舒芬太尼可导致离体兔子宫平滑肌的自发性规律收缩的时程缩短,但对子宫平滑肌的自发性规律收缩的强度和频率无影响.     

妇血宁药理作用初探（Ⅱ）

妇血宁3mg/ml有兴奋大鼠离体子宫平滑肌作用,生物效价测定表明1mg妇血宁收缩大鼠和小鼠子宫肌的作用强度与5×10~(-5)u和1.8×10~(-5)u的垂体后叶素相当。2mg/ml妇血宁松弛豚鼠气管条和家兔回肠平滑肌,对蟾蜍心脏有兴奋作用。猫静脉注射妇血宁500mg/kg血压先升后降,心率加快,未见其致敏作用。     

BDNF及其受体TrkB在慢性应激大鼠结肠动力紊乱中的调节作用及其机制

目的 观察脑源性神经营养因子(BDNF)及其受体酪氨酸激酶B(TrkB)在慢性应激大鼠结肠动力紊乱中的作用及其机制.方法 将20只Wistar雄性大鼠称重后按完全随机方法分成两组,避水应激组(WAS组)和假避水应激组(SWAS组),每组10只.记录两组在慢性避水应激模型造模期间粪便粒数;酶联免疫吸附试验(ELISA)、实时定量PCR、Western印迹和免疫组化法检测BDNF和TrkB在大鼠血清及结肠肌层的表达.分别用河豚毒素(TTX)、BDNF和TrkB抑制剂K252a、BDNF孵育各组近端结肠肌条,记录近端结肠环形肌条肌张力的变化.结果 WAS组大鼠造模期间粪便粒数明显多于SWAS组(P＜0.05).WAS组大鼠血清BNDF水平高于SWAS组[(158.30±9.82)比(84.68 ±7.80) pg/ml]、结肠肌层TrkB蛋白表达水平高于SWAS组(0.44±0.03比0.30±0.02)(均P＜0.05),而肌层BDNF mRNA表达两组差异无统计学意义(P＞0.05).TrkB主要在肌层神经元的细胞核表达,且WAS组表达明显强.WAS组近端结肠环形肌条收缩幅度明显高于SWAS组[(0.35±0.02)比(0.22±0.03)g,P＜0.05];加入TTX阻断肠神经作用后,WAS组环形肌条收缩幅度仍大于SWAS组[(0.89±0.07)比(0.53 ±0.06)g,P＜0.05];用BDNF孵育肌条,记录不同时间点的标准化率(R值),其中孵育6、12 min时两组肌条R值差异有统计学意义(均P＜0.05),BDNF能诱导收缩波峰;用K252a孵育环形肌条30 min后加入BDNF,导致BDNF引起的峰值延后且降低.结论 BDNF通过作用于TrkB受体在慢性应激大鼠结肠动力紊乱中发挥一定的调节作用.     

生长抑素对猕猴小肠环形肌收缩的影响及机制探讨

目的 探讨生长抑素(SST)对猕猴小肠环形肌自主收缩的直接作用及分子靶点.方法 通过开腹手术获得成年猕猴的小肠环形肌条,应用张力换能器将信号输入生理记录仪,记录小肠环形肌条在不同SST浓度作用时的自主收缩幅度和频率;通过免疫组织化学方法 观察SST在小肠组织内的分布,利用原位杂交检测SST受体2(SSTR2)的表达.结果 SST低浓度组(1×10~(-7) mol/L)小肠环形肌收缩频率[(8.33±1.53)次/min]较对照组明显增加[(2.67±0.58次/min),P＜0.05].在1×10~(-7) mol/L～1×10~(-4) mol/L SST浓度范围内,小肠环形肌收缩频率呈剂量依赖性提高(r=0.984,P＜0.05);小肠环形肌收缩幅度仅在SST浓度(1×10~(-7) mol/L～1×10~(-5) mol/L)范围内呈剂量相关性增加(r=0.991,P＜0.05).在猕猴小肠纵行和环行肌间可见散在分布的SST及SSTR2的阳性神经丛,小肠平滑肌细胞上未见SSTR2.结论 SST经小肠平滑肌间神经丛上的SSTR2介导,发挥对小肠环形肌自主收缩的兴奋作用.     

胆囊收缩素对豚鼠结肠平滑肌及其细胞膜L-型钙电流和膜电位的影响

目的 探讨胆囊收缩素8肽(CCK-8S)对豚鼠近端结肠平滑肌及细胞膜L-型钙电流和膜电位的电生理作用及其机制.方法 (1)采用RM6240多道生理信号采集处理系统记录CCK-8S对豚鼠近端结肠平滑肌肌条收缩的影响;(2)检测Fluo-2/AM标记的近端结肠平滑肌细胞膜内钙离子浓度([Ca2+]i)变化;(3)用EPC-10膜片钳放大器测量全细胞模式下CCK-8S对近端结肠平滑肌细胞膜静息电位(RP)、动作电位(AP)和L-型钙通道电流(ICa-L)的影响.结果 CCK-8S(10-1mol/L)作用后:(1)豚鼠近端结肠平滑肌肌条收缩幅值和频率分别为对照组的(149±12)%和(132±13)%(均P＜0.05);(2)近端结肠平滑肌细胞膜的[Ca2+]i为对照组的(738±24)%(P＜0.05);(3)RP、AP峰值及AP快速复极时间分别为对照组的(52±9)%、(140±4)%和(61±13)%(均P＜0.05),该效应可被预先加入的CCK1受体拮抗剂地伐西匹和(或)L-型钙通道阻断剂尼非地平阻断(n=8,均P＜0.05),而预先向灌流液中加入CCK2受体拮抗剂CI 988后,CCK-8S对RP、AP峰值及AP快速复极时间的作用仍存在;(4)从-60 mV去极化至+10 mV,ICa-L为对照组的(138±7)%(P＜0.05),但分别可被相应拮抗剂抑制;当向电极内液加入肝素(10-6 mol/L)或向细胞外液加入staurosporine(10-6 mol/L)后,CCK-8S对Ica-L均没有影响(2.9%±2.6%和1.9%±2.3%,均P＞0.05).结论 CCK-8S通过CCK1受体促进近端结肠平滑肌自发性收缩频率和强度;其机制与激活1,4,5-三磷酸肌醇介导的蛋白激酶C途径进而促进L-型钙通道开放有关.

Abstract：

Objective To investigate the effects and mechanism of cholecystokinin octapeptide (CCK-8S) on the contractile activity of smooth muscles,L-type calcium current and membrane potentials of proximal colon myocytes in guinea pig.Methods ( 1 ) Strips of proximal colon were obtained from adult guinea pigs.The contraction of these stripes was measured by a RM6240 multi-channel physiological signal system.(2) Suspension of single smooth muscle cells (SMCs) were obtained from proximal colon and isolated by enzymatic digestion.The effect of CCK-8S on intracellular calcium concentration ( [Ca2+] i) of SMCs was examined by fura-2-1oaded miscrofluorimetric measurement.(3) Resting potential ( RP),action potential (AP) and L-type calcium current (ICa-L ) were recorded by patch-clamp technique.Results ( 1 )The contractile amplitude and frequency of muscle stripes enhanced by CCK-8S ( 10 -7 mol/L) were ( 149 ±12)% and (132 ± 13 )% respectively of those of control group (all P ＜ 0.05 ).They were significantly attenuated by pretreating strips with CCK1 receptor antagonist devazepide ( 10-7 mol/L),L-type calcium channel blocker nifedipine ( 10 -5 mol/L),Ca2+ -ATPase inhibitor TG (thapsigargin) ( 10-5 mol/L) and BA (boric acid) (10-5 mol/L) respectively.(2) [Ca2+]i of SMCs intensified by CCK-8S was (738 ±24)% of that of control group.And it was inhibited by pretreating SMCs with devazepide(all P ＜0.05).(3) After the superfusion of CCK-8S,RP depolarized to (52 ±9)%,the exogenously stimulated peak values of AP rose to (140±4)% and fast repolarization time of AP decreased to (61 ± 13)% (all P ＜0.05).They were significantly inhibited when these cells were pretreated with devazepide and/or nifedipine (n = 8,P ＜0.05 for each group) whereas CI 988 had little effect.(4) The CCK-8S-evoked ICa-L of SMCs at the voltage of + 10 mV was boosted to ( 138 ± 7 )%.Such an effect was suppressed by a pretreatment with nifedipine,devazepide,TG and BA respectively.In the presence of an inhibitor of inositol 1 ,4,5-trisphosphate (IP3 ) receptors,heparin (10-6 mol/L) and an protein kinase C (PKC) inhibitor,saurosporine (10-6 mol/L),CCK-8S did not significantly intensify ICa-L (all P ＞ 0.05 ).Conclusion CCK-8S promotes proximal colon contraction by CCK1 receptors through the activation of IP3-mediated PKC pathway.     

生姜对NK_1受体介导的豚鼠离体回肠收缩影响

目的 :观察生姜及其主要辛辣成分对NK_1受体介导的豚鼠离体肠管收缩的影响,从NK_1受体角度初步探讨生姜的止吐机制。方法:以豚鼠离体回肠为实验材料,利用恒温组织浴槽,在高中低三个浓度生姜汁(50μL、100μL、200μL)、6-姜酚(3×10-5mol·L~(-1)、1×10-5mol·L~(-1)、3×10-6mol·L~(-1))、6-姜烯酚(3×10-5mol·L~(-1)、1×10-5mol·L~(-1)、3×10-6mol·L~(-1))存在和不存在情况下,分别建立P物质(SP)和选择性NK_1受体激动剂GR73632的量效曲线,观察对肠管收缩和量效曲线的影响。结果:生姜汁、6-姜酚、6-姜烯酚均能剂量依赖性地抑制SP激发的离体肠管收缩增强,降低其平均张力(P<0.05,P<0.01或P<0.001);均可剂量依赖性地使SP的最大效应降低(P<0.001);除低浓度6-姜酚外,3个剂量的生姜汁、高中浓度的6-姜酚、3个浓度的6-姜烯酚对SP最大效应的抑制作用均显著强于SR140333(3×10-7mol·L~(-1)),与SR140333比较差异有统计学意义(P<0.001)。6-姜酚、6-姜烯酚均能剂量依赖性地抑制GR73632激发的离体肠管收缩增强,降低其平均张力(P<0.05或P<0.001);均可剂量依赖性地使GR73632的最大效应降低(P<0.001);高浓度6-姜酚和高浓度6-姜烯酚,对GR73632最大效应的抑制作用与阳性药SR140333(3×10-7mol·L~(-1))存在时比较均有增强趋势,但差异没有统计学意义(与SR140333比较,P>0.05)。生姜汁、6-姜酚、6-姜烯酚均可使SP的量效曲线非平行右移,并使最大效应显著降低;6-姜酚、6-姜烯酚均可使GR73632的量效曲线右移,并使最大效应显著降低。结论:生姜及其主要辛辣成分可以非竞争性阻断NK_1受体,这可能是生姜止吐作用的重要机制。     

The role of potassium channels in the nitric oxide-induced relaxation of human airway smooth muscle of passively sensitization by serum from allergic asthmatic patients

INTRODUCTIONNitric Oxide (NO), the major endothelium-de-rived relaxing factor (EDRF), can relax thesmooth muscle of airway, vascular and gastroin-testinal. Clinically, nitric oxide (NO) is widely usedas a pulmonary vaso-and bronchodilator agent. Inprevious study, we found that NO relaxed the con-traction of airway smooth muscle partly via potassi-um channel (most of BKca channel) opening inrats [1]. Another animal studies indicated the same re-sults [2] , But there is scarce evidence…     

4-羟基他莫昔芬对体外培养前列腺平滑肌细胞的作用

目的 研究4-羟基他莫昔芬(OHT)对原代培养的前列腺平滑肌细胞增殖与凋亡以及雌、雄激素受体表达的影响.方法 以不同浓度的雌二醇(E2)、乙烯雌酚(DES)和OHT分别作用于原代培养的前列腺平滑肌细胞,采用流式细胞术检测增殖和凋亡,免疫细胞化学检测雌、雄激素受体表达.结果 DES和E2在一定浓度范围内起促增殖作用(均P<0.05),但未发现明显的浓度相关性(DES:r=-0.101,P=0.328;E2:r=-0.115,P=0.188).OHT浓度在1×10-8moL/L时,前列腺平滑肌细胞增殖率为5.04%±0.65%,随着浓度由1×10-6mol/L升高为1×10-5mol/L,细胞增殖率由2 79%±0 54%下降为0.93%±0.40%.在更高浓度下显示与浓度相关的促凋亡作用(5.83%±0.78%、13.70%±0.71%、19.53%±0.90%),以上作用不能被相同甚至更高浓度的E2所逆转.OHT对雌、雄激素受体表达的影响与雌激素相近.结论 OHT在一定浓度范围内对原代培养的前列腺平滑肌细胞具有明显的抑制增殖和促凋亡作用,且该作用可能不依赖于雌激素受体途径.口服他莫昔芬后OHT血药浓度较低和OHT上调雄激素受体表达可能是他莫昔芬治疗前列腺增生效果不佳的原因.     

干酪菌发酵液对豚鼠离体回肠的动力作用

[目的]观察干酪菌发酵产物对豚鼠离体回肠平滑肌的作用。[方法]采用豚鼠离体回肠平滑肌标本,观察加入干酪菌发酵产物前后肌紧张和收缩幅度的变化。给药浓度分别为ZPL 1.5×103mg/L、3.0×103mg/L、6.0×103mg/L、12.0×103mg/L、18.0×103mg/L、24.0×103mg/L。[结果]干酪菌发酵产物3.0×103mg/L、6.0×103mg/L、12.0×103mg/L豚鼠离体回肠平滑肌肌紧张分别为123%、132%、138%,组间比较差异有显著性意义(P<0.01);6.0×103mg/L、12.0×103mg/L、18.0×103mg/L豚鼠离体回肠平滑肌收缩幅度分别为171%、316%、354%,组间比较差异有显著性意义(P<0.01)。[结论]干酪菌发酵产物能提高豚鼠离体回肠平滑肌肌紧张和收缩幅度,且呈剂量-效应依赖关系。     

N-乙酰半胱氨酸对甲基乙二醛诱导的大鼠海马神经元毒性损伤的保护作用

目的 探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对甲基乙二醛(MG)诱导的海马神经元损伤的保护作用及可能机制.方法 取新生24 h SD大鼠的海马神经元原代培养至第7天,予MG和(或)NAC干预24 h,异硫氰酸荧光素标记的膜联蛋白V(Annexin V-FITC)联合碘化丙啶(PI)法检测海马神经元的凋亡率,以2,7-二氢二氯荧光素(DCFH)染色,流式细胞仪测定细胞内活性氧(ROS)水平;采用实时RT-PCR法及Western印迹法检测脑源性神经营养因子(BDNF)及其受体酪氨酸蛋白激酶(TrkB)mRNA和蛋白的表达水平.结果 MG组海马神经元凋亡率(8.80±0.31)%高于对照组(1.60±0.15)%及MG+NAC组(4.83±0.31)%;ROS水平(10 229±946)高于NAC组(2118±320)、对照组(4265±82)、MG+NAC组(3886±415)及预处理(pre)NAC+MG组(2997±606).与对照组相比,MG组海马神经元BDNF mRNA及蛋白表达水平明显增加,而TrkB mRNA及蛋白表达水平显著下降.与MG组相比,MG+NAC组、pre NAC+MG组海马神经元BDNF mRNA及蛋白表达水平明显降低,而TrkB mRNA及蛋白表达水平明显增加.上述差异均具有统计学意义.结论 MG可能部分通过诱导细胞内ROS产生,导致神经元氧化应激损伤,同时通过抑制TrkB的表达,阻断BDNF-TrkB信号通路.NAC可能通过抗氧化及抗凋亡,且部分通过激活BDNF/TrkB通路发挥神经保护作用.