大鼠慢性移植肾肾病模型的建立

目的:建立一种简易、实用的大鼠肾移植慢性移植.肾肾病(Chronic allograft nephropathy,CAN)模型,为研究肾移植术后慢性排斥反应的发病机理、治疗和预防提供平台.方法:F344近交系大鼠和Lewis近交系大鼠作为供、受体,取供体的左肾作为供肾,在裸眼直视下行供体的下腔静脉与受体肾静脉的端端吻合.供体腹主动脉与受体腹主动脉行端侧吻合,进行原位异体肾移植.术后10mg/(kg·d)×10d环孢素口服液灌胃,于4周后分别观察各受体移植.肾组织病理变化情况.结果:手术于2.5h内完成,成功率达97.50%.移植术后4周开始出现移植肾CAN的病理改变,12周可见典型慢性排斥反应病变.结论:该方法手术操作简单、直观,简化了显微外科技术的设备要求,建立了大鼠慢性移植肾肾病模型.     

内撑法间断吻合肾静脉建立大鼠肾移植慢性排斥模型

目的 用简便可靠、成功率高的大鼠静脉吻合术建立肾移植慢性排斥模型。 方法 以近交系F344大鼠为供体、近交系Lewis大鼠为受体,从腹主动脉原位灌注,移植时供体肾静脉与受体肾静脉采用内撑法行端端间断吻合,供、受体肾动脉端端吻合,供、受体输尿管端端吻合。 结果 共施行大鼠肾脏移植100例,存活率为95%,24周存活率为92.6%。 结论 用肾动、静脉及输尿管端端吻合能明显提高手术成功率,其中采用内撑法行端端间断吻合原路取回内撑管是肾静脉重建可靠方法。     

大鼠双侧供肾移植模型的建立

目的：首创了一种可以同时取供体的双肾作供肾的大鼠肾移植模型。方法：以近交系Brown-Norway大鼠和近交系Lewis大鼠作为供、受体,取供体的双肾作为供肾,借助静脉支架管,行供体的静脉与受体肾静脉的端端吻合,肾动脉与腹主动脉行端侧吻合。结果：手术均于60min内完成。所有的受体均存活超过7天,围手术期死亡数为0。结论：首创双侧供肾大鼠肾移植模型是一种节省、可靠、实用的大鼠肾移植模型。     

大鼠肾移植急性排斥反应模型的构建

目的构建大鼠肾移植急性排斥反应模型,为探索其实验室诊断提供良好的技术平台。方法近交系Brown-Norway(BN)大鼠作为供体,Lewis大鼠作为受体,采用原位低温灌洗,左侧供肾,行腹部肾移植模型,供体肾动脉与受体腹主动脉端侧吻合、供体肾静脉与受体下腔静脉端侧吻合,输尿管采用带部分膀胱瓣与受体膀胱吻合。结果共构建大鼠肾移植模型58例次,成功49例,手术成功率为84.5%,受体死亡原因主要为输尿管吻合口漏尿致弥漫性腹膜炎、动脉血栓形成、麻醉意外等。肾移植术后第1、2、3、5及7天均有急性排斥反应发生。结论 BN-Lewis大鼠肾移植模型可作为大鼠肾移植后急性排斥反应模型,对肾移植术后急性排斥反应的相关研究具有应用价值。     

大鼠肾移植慢性排斥反应模型的建立

目的 建立稳定而可靠的大鼠肾移植慢性排斥反应模型.方法 选用30只Wistar大鼠为供体,30只SD大鼠为受体.取供体左肾,采用HC-A离体肾保存液原位灌注,将供肾动、静脉分别与受体腹主动脉、下腔静脉行端侧吻合,以输尿管膀胱植入法行尿路重建,建立大鼠同种异体肾移植模型.分别于术后3、6、9周取移植肾观察大体和组织形态学变化,观察术后并发症及排斥反应情况.结果 移植肾脏大体和组织形态学呈渐进性变化,至术后9周可出现明显的慢性排斥反应病理改变.移植肾脏可顺利存活,部分出现肾积水并发症,但不影响排斥反应病理变化.结论 本方法可建立稳定、可靠的肾移植慢性排斥反应模型,是研究慢性排斥反应的理想模型.     

大鼠肾移植慢性排斥反应模型的建立

目的 建立一种稳定的大鼠原位肾移植慢性排斥反应模型.方法 供体为近交系F344大鼠,受体为Lewis大鼠,供肾采用左肾,在体修整,原位灌注.肾静脉用硬膜外导管做为临时内支架管端-端、六针法吻合,腹主动脉端-侧连续缝合,输尿管带膀胱瓣与膀胱吻合.受体术前3d开始环抱素A灌胃至术后30 d(5 mg/kg·d),以预防急性排斥反应.结果 手术时间120～180 min;手术成功率90.9% (40P44) ;受体均存活60 d.并发症有吻合口出血、静脉血栓形成、急性排斥反应等.结论 供肾原位灌注,在体修整是简单可靠的方法.静脉内支架管端端吻合,腹主动脉端侧吻合能够达到稳定的成功率,值得推广.熟练的外科操作技能和血管吻合技术是手术成功的关键.     

大鼠同种异体原位肾移植动物模型的建立

目的建立稳定的大鼠原位同种异体肾移植动物模型,为开展器官移植的实验研究提供依据。方法使用SD大鼠作为供受体,取供体左侧肾脏于灌注修整后,原位的移植至受体左侧肾窝,肾动脉采用端端吻合法,静脉则采用简化的端端吻合方式,输尿管则采用带部分膀胱瓣于受体膀胱吻合,受体右肾使用体外延迟结扎,从而复制出大鼠肾移植的动物模型。结果共行大鼠肾移植45对,模型成功率85%,整个手术时间平均(140±28)min,其中肾动脉吻合平均(10±3)min,供肾热缺血时间约3min。简化的肾静脉吻合平均(21±3)min,与传统吻合方法比较明显缩短了吻合时间(t=4.43,P<0.05)。结论该法有效地建立起大鼠原位肾移植模型,且并发症发生少,动物成活率高,简单实用。简化的静脉吻合方法有效的减少了静脉吻合时间。     

152例大鼠原位全小肠移植的外科技术总结

目的:总结大鼠原位全小肠移植的外科手术方法.方法:雄性F344和Lewis大鼠分别为供体和受体.供肠切取范围包括全小肠、门静脉及肠系膜上动脉.供肠肠系膜上动脉与受体肾下腹主动脉端侧吻合采用连续外翻锁边缝合方法,供体的门静脉与受体的左肾静脉端端吻合采用Cuff套管方法,切除受体自体小肠,断端与供体肠吻合重建消化道.供、受体术中均补液4～6 ml.结果:共进行152次移植手术,其中正式实验120次,供体手术时间(60±10) min,受体手术时间(100±15) min,移植肠热缺血时间(30±5) min,78.3%大鼠术后存活超过2周,病理检查证实移植肠病变符合排斥反应特点.结论:供肠获取、血管吻合术、术中血容量维持、保温是大鼠原位全小肠移植术的关键.     

血管端端吻合法建立双侧供肾大鼠肾移植模型

目的:采用血管端端吻合法建立一种无需阻断主动脉和后腔静脉血流的双侧供肾大鼠肾移植模型.方法:取供体双侧肾脏,受体左侧肾窝单肾移植,生理盐水中血管端端吻合,输尿管膀胱瓣-膀胱外隧道式吻合行尿路重建.结果:40例移植肾肾动、静脉即时通畅率分别为85%(34/40)、90%(36/40),吻合血管无扭曲.模型并发症有吻合口出血、动静脉血栓形成、排斥反应等,不使用免疫抑制剂的情况下,90%受体存活时间超过7 d.结论:生理盐水中行血管端端吻合,可解决动脉吻合需阻断主动脉血流、静脉吻合需支架支撑、静脉粘贴缝合困难等问题,是一种简单、经济、省时的模型方法,一般实验室均可开展.     

改良型小鼠肾移植动物模型的建立

目的：建立一种操作简便、手术时间短、效果确切的小鼠肾移植模型。方法：静脉采用套扎式吻合,将供肾下腔静脉穿过导管,外翻套扎于导管,将其插入受体肾静脉内,套扎受体肾静脉于腔静脉外,完成静脉端端吻合;动脉采用供体腹主动脉与受体腹主动脉端侧吻合,供体膀胱瓣与受体膀胱吻合。结果：开放血管后供肾颜色正常,动脉搏动正常,静脉充盈好,成功建立小鼠肾移植模型,静脉吻合（10±5） min,动脉吻合（10±5） min,膀胱瓣吻合2~5 min,总手术时间40~60 min。结论：采用改良的套扎式原位静脉吻合和膀胱瓣吻合,可以降低手术难度,缩短手术时间,成功建立小鼠肾移植模型。     

对DA－Lewis大鼠肝移植模型建立的探讨

[摘要]目的 探讨近交系大鼠肝移植的手术技巧,建立稳定的急性排斥模型。方法 DA大鼠做为供体,雄性Lewis大鼠做为受体,采用改良后的Kamada“二袖套管法”,建立大鼠原位肝移植模型。观察术后存活情况,并对其生存时间进行统计分析。结果 60例大鼠肝移植手术中,供体手术时间(30±8)min,修肝时间(15±2)min,受体手术时间（60±7）min,无肝期时间（21±3）min,手术成功率88.3％。术后4至5天开始出现黄疸,精神差,睁眼困难,反应迟钝,并于术后11天内全部死亡。结论 根据近交系大鼠自身结构特点,对大鼠原位肝移植模型建立方法进行了改进,取得了一定的成效。DA-Lewis为稳定、可靠的大鼠肝移植急性排斥模型,是研究肝移植排斥反应及免疫耐受的理想动物模型。     

不阻断腹主动脉和下腔静脉的 Fish-Lewis大鼠原位肾移植慢性排斥模型的建立

[目的] 建立大鼠原位肾移植研究肾移植慢性排斥的模型. [方法] 自 1998年 8月至 2003年 1月,以 Fisher大鼠作为供体, Lewis大鼠为受体.模拟活体供肾肾移植中供受体同步手术的顺序,采用显微外科技术,进行不阻断腹主动脉和下腔静脉的大鼠原位肾移植,共完成 650例. [结果] 此模型并发症少,移植肾术后成活率达 98.2%.术后第 14天; 1个月; 2个月; 3个月; 4个月; 5个月和 6个月成活率分别为 96.8%; 95.8%; 95.4%; 95.4%; 94%; 94%和 92.5%.术后 10～ 12周,开始出现蛋白尿,血肌酐升高的典型慢性排斥反应. [结论] 此模型具有手术简单、成功率高、影响肾功能因素少、结果稳定等优点.适应于研究肾移植慢性排斥反应.     

夫妻间供肾移植10例报告

 目的 总结夫妻间供肾移植的临床经验。方法 回顾性总结了我院2004年4月至2006年4月10例夫妻间供肾移植的临床资料。供者男5例,女5例。年龄32～62岁（42.0±10.0）岁。5例行手助腹腔镜取肾,5例行小切口开放取肾。受者年龄32～61岁（43. 3±9.13）岁,术后采用三联免疫抑制方案：环抱素A/FK506+骁悉/硫唑嘌呤+泼尼松预防徘斥反应。10例患者随访3～40月。结果 手术成功率100%,供受者无一例发生手术相关并发症。10例供者术后1周内血肌酐较术前升高15%～25%,但均维持正常水平。随访超过1年的7例供者,肾功能均维持正常。受者术后发生急性徘斥反应1例,主要归因于未遵医嘱服用免疫抑制剂,术后3月并发肺部感染死亡。发生移植肾功能延迟恢复1例,治疗2周后肾功能恢复正常。其余8例患者肾功能完全恢复正常的平均时间为3.61天。10例受者术后血肌酐恢复正常的时间、急性徘斥和移植肾功能延迟恢复的发生率与同期的亲属肾移植组相比均无显著性差异。结论 夫妻间供肾移植安全可行,效果良好。     

一种改良大鼠异体肾移植模型的建立

目的：为开展器官移植的实验研究，建立大鼠异体肾移植模型。方法：用SD大鼠作为供体和受体，采用原位低温灌注，原位修剪，移植肾放置左侧，血管直接吻合，输尿管带膀胱瓣与膀胱吻合。结果：经过60次的实验，克服了移植物灌注、血管吻合、膀胱吻合等技术难关，建立了稳定实用的肾移植动物模型。手术成功率为80％左右。结论：此模型可以在一般的实验室条件下开展。有较高的成功率，符合肾移植实验研究的需要。     

活体肾移植术对供受者的影响

目的 评价活体肾移植术对供受者健康的影响。方法 对6组活体肾移植术供受者进行随访,动态观察供受者术后并发症及肾功能情况。结果 6名供者,肾切除术后无并发症,术后肾功能正常。6名受者,其中1名PRAl00％,但患者和家属坚决要求手术,尸体肾移植术失败后再行活体肾移植术后发生超排,维持性透析状态。5名均予三联免疫抑制治疗,术后无其他不良并发症,肾功能均恢复至正常范围,其中1名术后发生急性排异,予甲基强的松龙(MP)冲击及抗淋巴细胞球蛋白(ATG)治疗后肾功能恢复正常,另1名发生临界排异,予MP冲击5天缓解。结论 活体肾移植术效果肯定,可延长受者及移植物存活时间,对供者健康影响较小,可以在有一定条件的单位开展,并应重视对供受双方的术前健康评价和术后随访。     

PRA配型技术在致敏受者肾移植术中的应用研究

目的 探讨群体反应性抗体(PRA)配型技术在致敏受者肾移植中的临床效果.方法 应用抗原板(LAT),采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测肾移植受者术前的PRA;采用PRA配型技术进行术前配型.结果 12例致敏受者组采用PRA配型技术,肾移植术后肾功能恢复正常,无1例发生超急性排斥反应,术后1个月内急性排斥反应的发生率为25%;同期43例非致敏受者组,术后1个月内急性排斥反应的发生率为18.6%,虽较致敏受者组低,但两组之间差异无统计学意义.结论 PRA配型技术对减少致敏受者肾移植排斥反应,提高移植物存活率具有重要意义.     

外周血淋巴细胞LFA-1水平与肝移植急性排斥的关系

【目的】探讨大鼠原位肝脏移植(OLTx)后外周血淋巴细胞表面淋巴细胞功能相关抗原-1（LFA-1）与急性排斥的关系。【方法】实验动物分为两组,非排斥对照组供体、受体均为SD大鼠,各20只,排斥组供体为Wistar大鼠,受体为SD大鼠,各20只。受体大鼠分别于原位肝移植术前1天及术后第1、3、5、7天从尾静脉采血,经免疫荧光抗体-流式细胞术检测淋巴细胞表面LFA-1的表达。【结果】原位肝移植术后,受体大鼠外周血淋巴细胞LFA-1呈低水平表达,与术前相比差异具显著性意义（P<0.01）;受体大鼠发生急性排斥反应时,外周血淋巴细胞LFA-1水平显著增高,与对照组相比差异具显著性意义（P<0.01）。【结论】检测外周血淋巴细胞LFA-1表达水平有助于移植肝脏急性排斥的诊断。     

趋化因子RANTES和受体CCR5在心脏移植慢性排斥反应中的表达

目的探讨调节活化正常T细胞表达和分泌因子(RANTES)及其受体CCR5在心脏移植慢性排斥反应中的表达及意义。方法健康近交系Sprague-Dawley(SD)大鼠为受者,Wistar大鼠为供者,采用"套管连接技术"建立颈部心脏移植的实验模型。将SD大鼠随机分为3组:A组(n=12)供、受者均未采用任何治疗;B组(n=12)移植手术后使用环孢素A(CsA)10 mg.kg-1治疗受者,术后2～3个月采集移植心脏;C组(n=24)使用供者脾细胞(SPC)及环磷酰胺(CP)预处理受者,其中12只在术后15～60 d采集移植心脏(C1组),另外12只术后至少观察半年(C2组)。采用H-E染色观察移植心脏组织排斥反应病理改变程度,Van Gieson染色观察移植心脏血管病变(CAV)的血管狭窄程度,免疫组化检测RANTES和CCR5的表达水平。结果 SPC和CP预处理后,移植心脏的存活时间明显延长,RANTES和CCR5在冠状血管和心肌组织中呈低水平表达,移植心脏血管病和心肌纤维化明显减轻;而在急性排斥反应和CsA治疗的移植心脏组织中,RANTES和CCR5的表达水平明显增强,差异有统计学意义(P<0.05)。结论移植心脏组织中RANTES和CCR5的表达水平与移植排斥反应的程度密切相关。     

活体部分肝移植12例次临床报告

目的：探讨总结活体原位部分肝移植技术的临床应用。方法：通过回顾性临床分析,总结12例次（11例）活体原位部分肝移植的手术技术和体会。围手术期主要处理经验和并发症诊疗。并对活体肝移植的适应证,手术时机,外科并发症,以及感染,排斥,优点等相关临床问题进行探讨。结果：本组资料中,11例供体术后顺利康复,均未出现严重并发症;第1例受体死亡,10例肝豆状核变性受体获得长期健康生存,现已分别存活58周,51周,48周,38周,37周,22周,18周,10周,和7周,目前,所有存活受体未发现明确免疫排斥;其肝功能,铜氧化酶水平均已恢复正常,其中,6例受体已经康复上学;2例康复出院,其余2例在顺利康复中,术后主要并发症以血管并发症,胆道并发症,细菌及病毒感染和肺部并发症为主。结论：活体原位部分肝移植手术过程复杂,涉及供,受体双方安全,技术要求高,难度大,该技术具有供肝来源广泛,供肝质量高和费用相对较低等优点,有广阔的临床应用前景。     

同种异体肾移植患者B型钠尿肽水平的临床观察

目的：探讨同种异体肾移植患者和发生急性排斥反应时血浆B型钠尿肽（BNP）水平及其临床意义。方法：采用免疫夹心化学发光法检测17例首次肾移植患者术前1d、术后第1天、第2天、第3天、1周、2周和3个月血BNP浓度。17例健康体检者作对照。结果：肾移植患者术前1d血BNP浓度显著高于健康对照组（P〈0．01）。肾移植术后血BNP浓度呈下降趋势（χ^2=14．25，P=0．027）。13例没有发生急性排斥反应的患者血BNP浓度术后1周和3个月与肾移植术前比较差异有显著性（P〈0．05）；4例发生急性排斥反应患者，发生急性排斥反应当天的血BNP浓度显著增高，加强抗排斥治疗后很快下降。结论：肾移植成功后可以降低血BNP水平，但发生急性排斥反应时血BNP浓度显著增高。因此，血BNP浓度可作为早期诊断移植肾急性排斥反应发生的敏感指标。