大肠癌组织中基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶-9的表达

目的：探讨大肠癌组织中基质金属蛋白酶－2（MMP－2）和基质金属蛋白酶－9（MMP－9）的表达与临床病理参数之间的关系。方法：应用免疫组织化学S－P法检测87例大肠癌组织中MMP－2和MMP－9的表达情况。结果：87例大肠癌组织中MMP－2和MMP－9的表达阳性率分别为56．3％和55．2％。MMP－2和MMP－9在侵及肌层的阳性表达率明显低于侵及浆膜层，淋巴结转移阳性组高于淋巴结转移阴性组，差异均有显著性（P＜0．05）。Dukes分期中，C、D期中MMP－2和MMP－9的阳性表达率明显高于A、B期（P＜0．05），而与性别、年龄、肿瘤部位、组织学类型和分化程度均无关（P＞0．05）。结论：MMP－2和MMP－9可能在大肠癌浸润转移过程中发挥重要作用。     

基质金属蛋白酶-9及其组织抑制物-1在妊娠输卵管黏膜中的表达

目的:检测基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其组织抑制物-1(TIMP-1)在输卵管黏膜中的表达,探讨与输卵管妊娠的关系。方法:采用免疫组织化学显色技术和图像半定量分析法,检测MMP-9和TIMP-1在人妊娠输卵管黏膜、人正常输卵管黏膜及正常宫内早孕子宫蜕膜组织中的表达。结果:MMP-9和TIMP-1在正常宫内早孕组中表达最强,在输卵管妊娠组中的表达较强,在正常输卵管组中表达较弱。两两比较差异均有显著性。结论:MMP-9/TIMP-1参与了输卵管妊娠中胚胎着床过程,且与输卵管妊娠缺乏蜕膜化反应有关。     

基质金属蛋白酶-9、金属蛋白酶抑制因子-1及CD147在食管鳞状细胞癌组织中的表达

目的探讨基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、金属蛋白酶抑制因子-1（TIMP-1）及CD147在食管鳞状细胞癌（鳞癌）的表达及意义。方法选择2005年1月～2007年1月在新乡医学院第一附属医院胸心外科行食管癌根治术切除的标本52例，术后均经病理证实为食管鳞癌。采用免疫组织化学方法检测食管癌组织及癌旁正常食管组织中MMP-9、TIMP-1及CD147的表达。结果食管鳞癌组织中MMP-9、TIMP-1及CD147的阳性表达率分别为73．0％、44．2％和80．8％，与癌旁正常食管组织（23．1％、30．8％、19．2％）比较有显著性差异（P〈0．05）。鳞癌组织中MMP-9阳性表达率与TIMP-1无明显相关性（P〉0．05），与CD147成正相关（r=0．457，P〈0．05）。MMP-9阳性表达率与肿瘤浸润及淋巴结转移有关（P〈0．05）。结论食管鳞癌组织中MMP-9／TIMP—1失衡参与了其侵袭转移过程，CD147可能作为涛导剂促进了MMP-9的表达。     

红花多糖对荷瘤小鼠肿瘤组织基质金属蛋白酶-9、组织金属蛋白酶抑制剂-1mRNA表达影响的研究

目的 探讨红花多糖(safflower polysaccharide,SPS)对荷瘤小鼠肿瘤组织中基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMP)-9、组织金属蛋白酶抑制剂1(tissue inhibitors of metalloproteinase,TIMP-1)mRNA表达的影响.方法 BABL/c小鼠腋下接种S180肉瘤,腹腔注射SPS连续10 d,给药结束24 h后取肿瘤组织Real time-PCR法测MMP-9、TIMP-1 mRNA表达水平.结果 SPS低剂量组、中剂量组和高剂量组肿瘤组织中MMP-9的表达量分别是模型对照组的0.452、0.204、0.026倍,TIMP-1的表达量分别是模型对照组的3.4、5.2、10.0倍.结论 SPS能够抑制肿瘤组织中MMP-9基因的表达,促进TIMP-1基因的表达,具有抑制肿瘤及其转移的作用.     

基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶-9在胶质瘤侵袭和转移中的作用

胶质瘤是一种中枢神经系统恶性肿瘤,病死率高。胶质瘤细胞的侵袭和转移是其致死的重要原因之一,而基质金属蛋白酶通过溶解细胞外基质实现侵袭和转移。基质金属蛋白酶(mat r i x metalloproteinase,MMP)是锌离子依赖性蛋白水解酶,广泛分布于人体各组织和器官,参与细胞外基质的降解和重塑,调节细胞粘着,在肿瘤细胞的侵袭中起着重要作用。本文就基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶-9在胶质瘤中的侵袭作用及其机制进行综述。     

Ⅳ期压疮愈合过程中创面渗出液基质金属蛋白酶-9、基质金属蛋白酶抑制剂-1的表达水平变化的研究

目的探讨Ⅳ期压疮愈合过程中创面渗出液中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)的表达情况及其与压疮愈合的关系。 方法选择2017年7月至2018年4月在河北省人民医院就诊的Ⅳ期压疮患者39例,创面共59处,根据接诊时与治疗第4周末压疮愈合评估表(PUSH)评分差值进行分组,差值>2分为愈合良好组(n＝26),≤2分为愈合不良组(n＝13)。按照统一方法评估、清洗及清创后,选择合适的治疗方案进行换药,追踪4周,采集接诊时、治疗第1周末、第2周末、第3周末、第4周末创面渗出液,酶联免疫吸附测定法检测2组创面渗出液中MMP-9、TIMP-1表达水平及MMP-9/TIMP-1比值的变化情况。数据比较采用t检验。 结果接诊时及治疗第1周末2组MMP-9表达差异无统计学意义(t＝1.262、1.944,P值均大于0.05),而在治疗第2周末、第3周末、第4周末愈合不良组MMP-9表达水平分别为(189.27±90.15) ng/L、(176.95±75.47) ng/L、(149.30±63.08) ng/L,显著高于愈合良好组[(114.97±70.06) ng/L、(93.75±55.15) ng/L、(71.62±41.66) ng/L],差异有统计学意义(t＝2.835、3.921、4.608,P值均小于0.05);不同时间点愈合良好组与愈合不良组TIMP-1表达水平比较,差异均无统计学意义(t＝0.346、0.292、0.047、0.395、0.999,P值均大于0.05);接诊时及治疗第1周末2组MMP-9/TIMP-1比值差异均无统计学意义(t＝1.023、1.134, P值均大于0.05),而在治疗第2周末、第3周末、第4周末时愈合不良组MMP-9/TIMP-1比值分别为(38.42±9.25)、(33.74±9.58)、(29.53±8.04),显著高于愈合良好组的(30.04±10.67)、(25.35±10.18)、(21.54±9.29),差异均有统计学意义(t＝2.411、2.473、2.642,P值均小于0.05)。 结论创面渗出液中MMP-9表达水平及MMP-9/TIMP-1比值变化与压疮愈合有关,过高的MMP-9及MMP-9/TIMP-1不利于压疮的愈合。     

可溶性趋化因子对人单核细胞表达及基质金属蛋白酶-9的影响

目的观察趋化因子Fractalkine（CX3CL1,Fkn）对人单核细胞株U937细胞表达与分泌基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9）的影响。方法使用不同浓度的人重组Fkn干预U937细胞,RT-PCR法检测细胞MMP-9基因表达,明胶酶谱法检测细胞上清中MMP-9水平。结果不同浓度人重组Fkn干预U937细胞MMP-9基因表达及上清中MMP-9水平低于空白对照组。结论Fkn可抑制U937细胞表达与分泌MMP-9。     

基质金属蛋白酶-9及金属蛋白酶组织抑制因子-1在妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中的表达

目的通过研究基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）在正常妊娠和妊娠期高血压疾病患者胎盘中的表达,探讨其与妊娠期高血压疾病发病机制的关系。方法收集山西医科大学第一医院产科和山西中医学院中西医结合医院产科住院分娩的产妇胎盘标本共142例,正常妊娠胎盘组织标本40例为对照组,妊娠期高血压疾病患者胎盘组织标本102例为病例组,通过免疫组织化学二步法,对MMP-9和TIMP-1在胎盘组织中的表达进行检测。结果1.MMP-9及TIMP-1在胎盘组织中的表达部位。在正常妊娠胎盘组织的滋养细胞、蜕膜细胞、间质细胞和血管内皮细胞胞浆中均可见MMP-9、TIMP-1的阳性表达,多为中度阳性和强阳性表达,但在妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中,MMP-9未见间质细胞和血管内皮细胞有阳性表达,且表达者多为弱阳性。2.MMP-9在妊娠期高血压疾病患者中的阳性表达与正常妊娠组相比,差异有显著性（P〈0.05）,妊娠期高血压、子痫前期轻度、子痫前期重度组间比较差异有显著性（P〈0.05）。即妊娠期高血压疾病患者胎盘中MMP-9的表达显著低于正常妊娠,且随着妊娠期高血压疾病病情加重,MMP-9阳性表达呈明显减少趋势。3.TIMP-1在正常妊娠和妊娠期高血压疾病患者胎盘中的表达相比较,差异无显著性（P〉0.05）。结论MMP-9表达降低、MMP-9与TIMP-1的平衡状态改变可能与妊娠期高血压疾病发病有关,MMP-9及TIMP-1作为一对相互制约的因素在妊娠期高血压疾病发病中可能起重要作用,MMP-9有望成为妊娠期高血压疾病诊断及判断预后的新指标。     

急性心肌梗死患者PCI术前后血清基质金属蛋白酶-2与基质金属蛋白酶-9的相关性

目的: 探讨急性心肌梗死(AMI)患者在急诊经皮冠状动脉介入(PCI)术治疗前后血清基质金属蛋白酶-2 (MMP-2)和基质金属蛋白酶-9 (MMP-9)变化的相关性.方法: 应用酶图(SDS-PAGE zymograph)和Western blot的方法检测56例行PCI术治疗的AMI患者及20例冠状动脉造影正常者术前及术后第1~7 天血清中MMP-2和MMP-9的酶活性及蛋白表达水平,并分析MMP-2和MMP-9变化的相关性.结果: AMI患者PCI术前及术后血清MMP-2和MMP-9的酶活性及蛋白表达水平较对照组明显升高(P<0.01),PCI术患者在术后第1天血清MMP-2和MMP-9的酶活性及蛋白表达水平显著升高,并在术后第3天达高峰(P<0.01),第5天开始明显下降(P<0.05).经Spearman相关性分析表明,各组血清MMP-2的酶活性与MMP-9的酶活性呈正相关(P<0.01);各组血清MMP-2的表达水平与MMP-9的表达水平亦呈正相关(P<0.01).结论: 血清MMP-2和MMP-9酶活性及蛋白表达水平的增加可能是AMI患者心肌缺血再灌注损伤的机制之一.MMP-2和MMP-9是AMI病程进展中同样重要的炎性标志物.     

大鼠脑缺血再灌流后基质金属蛋白酶-2和9的表达

目的：探讨大鼠局灶性脑缺血再灌流后基质金属蛋白酶(MMP)-2和-9(MMP-9)表达的变化规律与脑水肿的关系。方法：用线栓法制作大鼠左侧大脑中动脉阻塞再灌流模型(MCAO),用免疫组化技术分别观察脑缺血再灌流不同时间点MMP-2和MMP-9的表达。结果：(1)脑缺血再灌流后24h可见MMP-2阳性细胞开始出现,3～7d时阳性细胞数达高峰,显色最深,至14d时仍有表达,略高于假手术组。(2)脑缺血再灌流后6h缺血区内MMP-9阳性细胞开始出现,12h明显增高,至2d达高峰,3d后阳性细胞数开始减少,至14d时恢复到基础水平,各相邻时间点比较差异显著。结论：脑缺血再灌流后,病变区MMP-2和MMP-9表达增加,二者在脑缺血再灌流后脑水肿方面起重要作用。     

熊果酸对单核细胞白血病细胞作用机制的初步研究

目的 探讨熊果酸在体外对单核细胞白血病细胞株THP-1（human acute monocytic leukemia cell line）的增殖抑制和杀伤机制。方法 采用MTT法和流式细胞术检测熊果酸对THP-1细胞的增殖抑制和杀伤效应．hoechst33258荧光染色观察DNA片段化。结果 熊果酸对THP-1细胞具有增殖抑制和杀伤效应，并呈浓度和时间依赖性。在熊果酸作用下THP-1细胞DNA受损，出现凋亡征象，G1期细胞数减少，细胞主要阻滞在S期。结论 熊果酸在体外能诱导THP-1细胞凋亡。     

熊果酸对THP-1细胞HMGB1表达和NF-kB活性的影响

目的 研究熊果酸(UA)对人单核细胞系THP-1细胞HMGB1表达和NF-kB活性的影响.方法 用不同浓度的UA(0、0.1、1、5和10 μmol/L)作用细胞后进行如下检测:1)MTr检测细胞增殖;2)RT-PCR法检测HMGB1和P65 mRNA表达;3)Western blot检测HMGB1和P65蛋白的表达;4)荧光素酶报告基因转染,质粒pNF-kB-luc瞬时转染THP-1细胞,转染40h后加1μmol/L UA作用,于转染48 h后进行荧光素酶活性测定.结果 1)随着UA浓度的增高,可明显抑制THP-1细胞的增殖;2)不同浓度的UA对THP-1细胞HMGBl mRNA和蛋白表达,呈现出一定的双向性,且以l μmol/L UA作用最强(P ＜0.05);3)UA可增强P65 mRNA和蛋白表达以及NF-kB活性.结论 UA可影响单核细胞HMGB1表达和NF-kB活性.     

活血化瘀中药对内毒素诱导THP-1细胞增殖及蛋白质组的影响

目的：通过内毒素诱导的炎症细胞模型,筛选抗炎活血化瘀中药单体,并探讨蛋白质表达谱.方法：用LPS诱导THP-1细胞株增殖和产生TNF-α,作为内毒素诱导的炎症细胞模型.以此筛选活血化瘀中药单体抗炎成分,用双向电泳技术,分析差异蛋白点.结果：通过筛选活血化瘀中药单体发现丹参酮ⅡA对内毒素诱导的炎症细胞模型有明显抑制作用,双向电泳图象分析筛选出差异性明显的蛋白质点26个.模型组有16个蛋白点增高,丹参酮ⅡA组能下调13个蛋白点（占50%）,有3个蛋白点进一步上调（占11.5%）;在模型组下调表达的10个蛋白点（占38.5%）,丹参酮ⅡA组均有不同程度上调趋势.结论：内毒素感染的细胞模型适合实验室小剂量中药单体的筛选,丹参酮ⅡA的抗炎作用与这些差异表达蛋白质有关,能够改善一些蛋白质的表达.     

基质金属蛋白酶-9预测胎儿宫内生长受限的意义

目的探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)与胎儿宫内生长受限(FGR)的关系及其预测FGR的意义。方法回顾性分析了自2006年9月至2008年10月在上海市第六人民医院分娩的部分孕妇,其中FGR组29例,正常组41例。于孕28周时抽取母体静脉血,分离血清后放置冰箱待用,于足月分娩时同时抽取母静脉血及脐静脉血,分离血清,用ELISA法测定血清中MMP-9浓度。结果FGR组脐血及母血MMP-9的浓度均低于正常组(分别为1.76±0.22*,1.50±0.20△+);而且,孕28周时母血的MMP-9高于足月分娩时母血中的MMP-9;脐血中MMP-9浓度明显高于母血中的浓度(P0.01),脐血与母血中MMP-9浓度无相关性(P0.05)。结论MMP-9与FGR有关,早期检测基质金属蛋白酶(MMP-9)有助于预测FGR;母体静脉血不能完全替代脐静脉血中MMP-9浓度的检测。     

血清基质金属蛋白酶-9诊断子宫内膜异位症术后复发的价值

目的:探讨血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)诊断子宫内膜异位症(EMs)术后复发的价值。方法:对69例曾行子宫内膜异位症手术治疗的患者在术后6~12个月采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清MMP-9含量,同时取25例正常妇女做对照。并用腹腔镜检查69例患者术后有无复发。结果:腹腔镜下诊断69例患者中有22例复发,47例未见复发。复发组血清MMP-9含量252·21±17·90ng/ml,明显高于未复发组(31·26±1·84ng/ml)和正常对照组(12·93±0·57ng/ml)。复发组与未复发组及正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0·01)。血清MMP-9对EMs复发的敏感性为91·6%,特异性为85·1%。结论:血清中MMP-9水平检测可作为诊断EMs术后复发一个较为敏感而特异的参考指标。     

自噬基因Beclin 1 shRNA表达质粒的构建及其下调凋亡因子caspase-9效应的研究

构建自噬基因Beclin 1的小发夹RNA(shRNA)真核表达质粒,脂质体包裹后体外转染人宫颈癌HeLa细胞株,通过荧光定量PCR(RT-PCR)和Western blot检测其对HeLa细胞自噬基因Beclin 1 mRNA及蛋白表达的影响,并检测细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡情况以及凋亡因子caspase-9 mRNA及蛋白表达的变化。结果表明shRNA真核表达载体可以使HeLa细胞中自噬基因Beclin 1的mRNA及其蛋白含量降低,转染后细胞生长增殖速度加快,凋亡率降低,并伴有caspase-9 mRNA及蛋白量的显著下调。因此,Beclin 1不仅与自噬调控通路有关,而且可以调控凋亡的发生,同时参与两种程序性细胞死亡的过程。     

NPM1基因突变表达对THP-1白血病细胞增殖和凋亡的作用探讨

 摘要：目的 探讨核仁磷酸蛋白（NPM1）基因突变对白血病细胞增殖潜能和凋亡发生的影响。方法 将携带NPM1 A型突变（NPM1 mA）的重组质粒载体pEGFPC1-NPM1 mA转染白血病THP-1细胞系,构建稳定表达NPM1 A型突变蛋白的白血病细胞株(THP-1 mA),同时设立未处理组（THP-1）和空载体转染组（THP-1 C1）作为对照。通过MTT试验观察细胞体外增殖能力,流式细胞术分析细胞周期分布及凋亡发生率的改变;采用RT-PCR和Western blot分别检测细胞凋亡相关蛋白（Bax和Bcl-2）mRNA及蛋白表达水平。结果 与未处理组和空载体转染组细胞相比较,携NPM1突变体的THP-1 mA细胞体外增殖能力明显增强,S期细胞比例明显增高,G1期细胞比例显著减低;而NPM1突变体转染后THP-1细胞的凋亡率没有显著变化,同时细胞凋亡相关蛋白Bax, Bcl-2的mRNA和蛋白表达以及Bax/Bcl-2比值亦未见明显改变。结论 NPM1突变基因能够促进白血病细胞的体外增殖能力,而对白血病细胞凋亡无显著影响,这为进一步阐明NPM1突变与AML的关系提供了新的科学依据。     

miR-146a对THP-1细胞靶基因AUF1调控及细胞因子表达的影响

目的探讨miR-146a对人急性单核白血病细胞系(THP-1)靶基因AU碱基富集区结合降解因子1(AUF1)表达的调控及细胞因子表达的影响。方法构建miR-146a过表达及抑制表达慢病毒载体并转染THP-1细胞,以正常培养的THP-1细胞为对照。用实时定量PCR法检测THP-1细胞AUF1 mRNA表达;蛋白质印迹法检测THP-1细胞AUF1蛋白的表达;酶联免疫吸附试验检测THP-1细胞培养基上清液白细胞介素-8(IL-8)及白细胞介素-35(IL-35)浓度。结果过表达miR-146a,可导致THP-1细胞AUF1 mRNA及蛋白表达下调(P0.01,P0.05);THP-1细胞上清液IL-8及IL-35浓度降低(P0.01,P0.05)。抑制miR-146a表达,导致THP-1细胞上清液IL-8及IL-35浓度明显增高(P0.01,P0.01)。结论 AUF1是miR-146a的靶基因。miR-146a可以调控THP-1细胞上清液IL-8、IL-35浓度。IL-8的改变引起相应IL-35的改变,一起参与炎性反应。