脂联素对高糖环境下RPE细胞氧化应激及凋亡的影响

目的 通过高糖环境下培养人RPE细胞建立RPE细胞的氧化应激模型,观察脂联素对RPE细胞各氧化应激指标及凋亡的影响,从而揭示脂联素对RPE细胞可能的保护机制.方法 将体外培养的人RPE细胞分为3组:正常对照组、高糖组、高糖+脂联素组,分别干预24、48、72 h.在倒置显微镜下观察RPE细胞形态变化,采用硫代巴比妥酸法测定MDA含量,用黄嘌呤氧化酶法检测SOD含量和活性,用荧光定量RT-PCR法测定p66Shc、Ho-1在各个时间点上的表达,通过流式细胞术检测RPE细胞的凋亡率.结果 与正常对照组相比,高糖组MDA含量显著上升,SOD含量显著下降(P<0.05),与高糖组相比,脂联素组MDA含量显著下降,SOD含量显著上升(P<0.05),并且呈时间依赖性.与正常对照组相比,高糖组Ho-1 mRNA表达增高;脂联素组较高糖组表达亦增高(P<0.05).与正常对照组相比,高糖组p66Shc mRNA表达增高;脂联素组较高糖组表达降低(P<0.05),呈时间依赖性.流式细胞术RPE细胞凋亡高糖组细胞凋亡率较正常对照组明显增加,而脂联素组细胞凋亡率较高糖组显著下降.结论 脂联素可通过减少p66Shc表达,从而减少线粒体ROS产生、增加Ho-1表达,增加抗氧化能力,减少氧化应激反应,减少细胞凋亡,对糖尿病RPE细胞起保护作用.     

抗氧化肽SS-31对高糖诱导的小鼠肾小球系膜细胞凋亡的影响

目的观察抗氧化肽SS-31对高糖诱导小鼠肾小球系膜细胞凋亡的影响。方法将体外培养小鼠肾小球系膜细胞分为正常糖组、正常糖+甘露醇组、高糖组及高糖+SS-31组。采用原位末端转移酶标记技术(TUNEL)及流式细胞术检测细胞凋亡;流式细胞术检测细胞ROS水平;Western blot检测caspase-3、cleaved caspase-3、Bax、Bcl-2、p38 MAPK、p-p38 MAPK及细胞色素C的表达。结果与正常糖组相比,高糖组系膜细胞ROS产生和细胞凋亡明显增加,cleavedcaspase-3和p-p38 MAPK表达增高,Bax/Bcl-2比率明显升高以及细胞色素C易位。SS-31干预能够明显抑制高糖诱导的系膜细胞凋亡和ROS产生,下调cleaved caspase-3和p-p38 MAPK的表达,减少Bax/Bcl-2比率和细胞色素C易位。结论 SS-31能够抑制高糖诱导的系膜细胞凋亡可能是通过减少ROS产生,保护线粒体功能,抑制p38MAPK信号通路激活而实现的。     

槲皮素对胃癌MGC-803细胞生长及凋亡作用的研究

目的研究槲皮素对人胃癌MGC-803细胞增殖的影响及诱导凋亡作用。方法用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测不同浓度槲皮素对MGC-803细胞的增殖活性的效应;原位末端核苷标记(TUNEL)法检测槲皮素诱导细胞凋亡的凋亡指数(AI)。结果槲皮素浓度为40~100μmol/L时对MGC-803细胞增殖有显著的抑制效应,且呈剂量依赖性;细胞加入槲皮素诱导48h后AI明显高于未加入组(P<0.05)。结论槲皮素在一定浓度范围内能显著抑制MGC-803细胞的增殖并能诱导其凋亡,其作用呈浓度依赖性。     

槲皮素对缺氧缺糖诱导血管内皮细胞损伤的保护作用

大量资料表明 :不同源性的内皮细胞缺氧后均有活性氧的大量产生[1 ] ,而自由基、活性氧、脂质过氧化物等均可引起内皮细胞损伤。在缺血性脑血管疾病中血管内皮细胞因缺氧致功能受损直接参与疾病的发生发展[2 ] 。槲皮素(quercetin ,Que)属于黄酮类化合物 ,具有多种药理作用 ,对超氧阴离子、羟自由基和单线态氧均有良好的清除作用[3] 。实验研究发现 ,槲皮素对心肌和脑缺血再灌注损伤也有保护作用[3] 。本文利用体外细胞培养的方法 ,研究槲皮素对缺氧缺糖后内皮细胞变化、功能的影响及保护作用。1　材料与方法1 .1　材料　槲皮素和四氮唑蓝 …     

金宁方中β-谷甾醇增进槲皮素诱导肺癌A549细胞凋亡作用

目的 探讨β-谷甾醇联合槲皮素对A549细胞抑制作用以及机制。方法 将A549细胞分为对照组、槲皮素组、槲皮素+β-谷甾醇组、雌二醇组、雌二醇+槲皮素组以及雌二醇+槲皮素+β-谷甾醇组。采用细胞存活率检测A549细胞的抑制作用。采用流式细胞技术和免疫荧光法检测肺癌细胞的促凋亡情况。应用免疫印迹法检测磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路的调控作用。结果 槲皮素可抑制A549细胞生存率且具量效关系(P <0.05);雌二醇可促进A549细胞生长;与槲皮素组或槲皮素+β-谷甾醇比较,雌二醇+槲皮素+β-谷甾醇组更抑制A549细胞增殖,提高细胞凋亡比例及caspase-3的表达水平(P <0.05);促进mTOR和Akt磷酸化,减少PI3K磷酸化。结论 在雌二醇干预下,β-谷甾醇联合槲皮素对A549细胞有抑制作用,其机制可能通过PI3K/Akt/mTOR通路对细胞凋亡起促进作用。     

槲皮素的降压作用及其机制研究

槲皮素是一种天然多酚黄酮类化合物,富含于苹果、洋葱、浆果等食物中,与心血管疾病负相关。最近动物和人类试验均表明,槲皮可以降低高血压个体的血压,机制可能涉及抗氧化应激、抑制血管紧张素转化酶(ACE)活性,以内皮依赖性和非依赖性方式改善血管内皮功能等。本综述将系统阐述槲皮素的降压作用及其相关机制。     

槲皮素对糖尿病大鼠视网膜病变的抗氧化作用及其机制

目的 探讨槲皮素(QUE)对糖尿病大鼠视网膜病变的影响及其机制.方法 雄性SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病模型,随机分为模型组、QUE低剂量组和高剂量组,正常大鼠做对照组.末次给药后处死大鼠,苏木精-伊红(HE)染色观察视网膜结构变化,用黄嘌呤氧化酶法检测视网膜组织SOD和MDA水平,用WB法测定Bcl-2,Bax...     

槲皮素诱导人结肠癌细胞HT-29凋亡的机制研究

目的 探讨槲皮素在体外对人结肠癌HT-29细胞凋亡的影响,并对其诱导机制进行研究。方法 体外常规培养HT-29细胞,随机设定对照组和高、中、低剂量（32,16,8 μg·mL^-1）槲皮素组,药物干预24 h后,采用CCK-8试剂盒检测槲皮素对HT-29细胞增殖的影响,倒置显微镜观察细胞形态变化,蛋白免疫印迹法检测MKK3/6/p38信号通路蛋白表达,并同时检测凋亡相关蛋白Caspase 8、Caspase 3、Bax及Bcl-2的表达水平。结果 槲皮素干扰HT-29细胞24 h后,CCK-8实验发现槲皮素可明显抑制细胞的增殖;形态学观察发现细胞密度明显减小、细胞体积变小;免疫印迹实验发现槲皮素可诱导MKK3/6及p38的磷酸化,进而促进促凋亡蛋白Caspase8、Caspase3及Bax的表达,抑制了抗凋亡蛋白Bcl-2的表达。结论 槲皮素可诱导人结肠癌HT-29细胞凋亡,其作用机制可能与激活MKK3/6/p38信号通路有关。     

槲皮素及其衍生物治疗慢性肾脏病的作用机制研究进展

慢性肾脏病一直以来是世界范围内的公共卫生问题,一旦错过早期干预期,进入终末期肾脏病只能行肾脏替代治疗来维持生存。槲皮素是一种植物类黄酮,槲皮素及其衍生物具有抗氧化、抗炎、抗菌、抗凋亡、抗纤维化等作用。槲皮素及其衍生物槲皮素3-O-葡萄糖苷酸、二氢槲皮素能够抑制氧化应激、抑制炎症反应、抑制纤维化、抑制细胞凋亡、调节肠道菌群、预防造影剂肾病,在保护肾脏方面发挥重要作用。对槲皮素及其衍生物治疗慢性肾脏病的作用机制进行综述,希望为临床用药提供参考。     

一氧化氮诱导PC12细胞凋亡及芍药苷的保护作用

目的:探讨一氧化氮诱导PC12细胞凋亡及芍药苷保护作用的可能机制.方法:MTT和乳酸脱氢酶活性测定细胞存活率,DNA凝胶电泳观察DNA的断裂情况,流式细胞仪测定细胞凋亡率、检测线粒体跨膜电位.结果:500 μmol·L-1 硝普钠(SNP)可诱导PC12细胞凋亡,细胞线粒体跨膜电位明显下降.预先经过 0.1、1和10 μmol·L-1 等浓度芍药苷处理后, SNP诱导的PC12细胞凋亡明显减少,同时明显减弱一氧化氮对线粒体跨膜电位的影响.结论:芍药苷可抑制一氧化氮诱导PC12细胞凋亡,其作用机制可能与其稳定细胞线粒体跨膜电位有关.     

槲皮素诱导人白血病HL-60细胞凋亡(英文)

目的:研究槲皮素是否能诱导人白血病HL-60细胞凋亡.方法:应用琼脂糖凝胶电泳法观察DNA碎片;采用流式细胞仪检测DNA断裂;电镜技术观察凋亡的形态学改变,用MTT测定法测定细胞增殖.结果:槲皮素15-120 μmol·L~(-1)诱导HL-60细胞凋亡,电镜观察到典型的形态学改变,电泳显示梯状条带,槲皮素能剂量依赖性地触发DNA降解及抑制细胞增生(IG_(50)和95％可信区间分别为43(30-61)μmol·L~(-1).结论:槲皮素诱导人白血病HL-60细胞凋亡.     

淫羊藿苷对高糖诱导H9c2心肌细胞凋亡的抑制作用

目的 研究淫羊藿苷(ICA)对高糖诱导大鼠心肌细胞H9c2凋亡的抑制作用及其机制。方法 H9c2细胞分为细胞对照组、高糖模型组、高糖+ICA 2.5,5.0,10.0,20.0和40.0μmol·L^-1组,ICA培养1 h后更换含葡萄糖33 mmol·L^-1的培养基培养3 d。CCK-8法检测H9c2细胞存活率,Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞术检测细胞凋亡率,生物化学法测定细胞培养基葡萄糖消耗量和乳酸水平,DCFH-DA荧光探针法测定细胞内活性氧(ROS)含量,Mito-Tracker Red CMXRos荧光探针法测定线粒体膜电位,Western印迹法检测动力素相关蛋白1(DRP1)、线粒体分裂蛋白1(FIS1)、线粒体融合蛋白2(MFN2)、视神经萎缩症蛋白1(OPA1)和活化胱天蛋白酶3/6/7蛋白表达水平。结果 与细胞对照组比较,高糖模型组H9c2细胞存活率、线粒体膜电位、MFN2和OPA1蛋白表达水平显著降低(P<0.01),细胞凋亡率、培养基葡萄糖消耗量和乳酸水平及细胞内ROS含量、DRP1、FIS1和活化...     

槲皮素对人食管癌Eca-109细胞的分化诱导作用

目的探讨槲皮素对人食管癌Eca-109细胞的分化诱导作用。方法将培养的Eca-109细胞分为两组:①加槲皮素组(Q组);②不加药物对照组(C组)。同时培养48h,收集各组细胞制备成细胞硝酸纤维素膜(NCM)标本及提取RNA制备RNA硝酸纤维素膜标本。分别对细胞硝酸纤维素膜(NCM)标本进行PCNA,VEGF的免疫斑点印迹阵列;对RNA硝酸纤维素膜标本EGFR,c-myc及wtp53的RNA斑点印迹阵列。印迹阵列皆用岛津薄层色谱扫描仪(TLC)进行波长523nm的扫描数值比较。结果①免疫斑点印迹显示:Q组的PCNA-IR,VEGF-IR的TLC扫描数值分别比C组低5.5倍,3.5倍;②RNA斑点印迹阵列显示,与C组相比:Q组的EGFR,c-myc的RNA斑点TLC扫描数值分别下调了7倍,2.2倍。而wtp53的RNA斑点TLC扫描数值则上调了2.2倍。结论槲皮素可下调作为肿瘤细胞恶性程度生物学指标的PCNA,EGFR,VEGF,c-myc等的表达,上调抑癌基因wtp53的表达,表明对人食管癌Eca-109细胞具有一定的诱导分化效应。     

五甲基槲皮素预处理对大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤保护作用的机制研究

目的 探讨五甲基槲皮素（PMQ）预处理对大鼠心肌细胞缺氧/复氧（A/R）损伤的保护作用及其线粒体功能的影响。方法 原代培养SD大鼠乳鼠心肌细胞,经终浓度分别为10,30,100 μmol·L-1 PMQ预处理24 h后,制作A/R损伤,检测培养液中乳酸脱氢酶（LDH） 活性、四唑盐（MTT）比色法检测细胞存活率、流式细胞法检测线粒体膜电位和细胞凋亡情况、线粒体肿胀法检测各组心肌细胞线粒体mPTP开放情况。结果 不同剂量PMQ（10, 30,100 μmol·L-1）预处理24 h后可剂量依赖性的降低LDH活性、增加细胞存活率、减少细胞凋亡（P 〈0.05或P 〈0.01）;30, 100 μmol·L-1 PMQ预处理24 h后,线粒体膜电位更为稳定、mPTP开放减少（P 〈0.05或P 〈0.01）。结论 PMQ预处理24 h后,可产生药理性延迟保护作用,机制与其稳定线粒体膜电位、抑制mPTP开放,进而减少细胞凋亡有关。     

槐米中槲皮素提纯、鉴定以及诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡作用

目的:研究从槐米中槲皮素(Quercetin,Que)提取、鉴定和对人乳腺癌MCF-7细胞生长的抑制以及诱导凋亡作用.方法:采用碱溶解酸沉淀法提纯槐米中槲皮素,并进行红外光谱分析;采用体外培养人乳腺癌MCF-7细胞,用不同浓度槲皮素处理;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定细胞生长抑制率;采用细胞凋亡DNA Lad　der和FITC-Annexin V/PI荧光标记流式细胞仪检测,槲皮素作用后MCF-7细胞凋亡情况.结果:不同浓度槲皮素对人乳腺癌MCF 7细胞有生长抑制作用,并呈浓度和时间依赖性(P＜0.05);10.0 mmol/L槲皮素作用MCF-7细胞2d,DNA电泳出现特征性的凋亡条带;10.0 mmol/L槲皮素处理MCF-7细胞1d、2d和3d,细胞凋亡率分别为(9.2±1.5)％、(30.0±11.8)％和(60.8±10.6)％.结论:用碱溶解酸沉淀法可从槐米中提纯槲皮素,提取的槲皮素对人乳腺癌MCF-7细胞有生长抑制和诱导凋亡作用.     

西格列汀对高糖诱导内皮细胞凋亡的改善作用及机制研究

目的研究西格列汀对高糖诱导内皮细胞凋亡的改善作用及机制。方法培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs)并分组,对照组用含有 5.5 mmol/L葡萄糖的 DMEM处理,高糖组用含有 33.3 mmol/L葡萄糖的 DMEM处理,西格列汀组用含有 33.3 mmol/L葡萄糖及 20 μmol/L西格列汀的 DMEM处理,西格列汀 +LY组用含有 33.3 mmol/L葡萄糖、 20 μmol/L西格列汀、 10 μmol/L LY294002的 DMEM处理。检测各组细胞凋亡率及细胞中凋亡基因、人磷酸化磷酸肌醇 3激酶(p?PI3K)、磷酸化蛋白激酶 B(p?AKT)的表达量。结果高糖组的细胞凋亡率及 Cleaved?caspase?9［0.91(0.71,1.12)比 0.43(0.34,0.59)］、 Cleaved?cas? pase?3［0.75(0.67,0.93)比 0.45(0.36,0.58)］的蛋白表达量明显高于对照组, B细胞淋巴瘤 /白血病 ?2(Bcl?2)［0.23(0.17,0.36)比 0.60(0.45,0.72)］、 p?PI3K［0.40(0.22,0.61)比 0.94(0.78,1.21)］、 p?AKT［0.27(0.13,0.34)比 0.66(0.40,0.79)］的蛋白表达量明显低于对照组;西格列汀组的细胞凋亡率及 Cleaved?caspase?9［0.32(0.26,0.43)比 0.91(0.71,1.12)］、 Cleaved?caspase?3［0.34(0.24,0.48)比 0.75(0.67,0.93)］的蛋白表达量明显低于高糖组, Bcl?2［0.69(0.58,0.83)比 0.23(0.17,0.36)］、 p?PI3K［0.87(0.67,0.99)比 0.40(0.22,0.61)］、 p?AKT［0.65(0.48,0.73)比 0.27(0.13,0.34)］的蛋白表达量明显高于高糖组;西格列汀 +LY组的细胞凋亡率及 Cleaved?caspase?9［0.72(0.58,0.86)比 0.32(0.26,0.43)］、 Cleaved?caspase?3［0.68(0.54,0.73)比 0.34(0.24,0.48)］的蛋白表达量明显高于西格列汀组, Bcl?2［0.37(0.29,0.45)比 0.69(0.58,0.83)］、 p?PI3K［0.49(0.34,0.58)比 0.87(0.67,0.99)］、 p?AKT［0.32(0.24,0.38)比 0.65(0.48,0.73)］的蛋白表达量明显低于西格列汀组。结论西格列汀能够抑制高糖诱导的内皮细胞凋亡且该作用与激活 PI3K/AKT通路有关。     

manumycin诱导舌鳞癌Tca8113细胞凋亡的作用及机制

目的研究manumycin抑制Tca8113细胞的生长和诱导细胞凋亡的作用及机制。方法细胞毒作用以MTT法测定;凋亡细胞形态以Hoechst33258染色后荧光显微镜观察;凋亡率的检测以AnnexinV染色,流式细胞仪检测;细胞内活性氧(ROS)和线粒体跨膜电位(ΔΨm)分别用DCFH-DA和DiOC6荧光探针标记,流式细胞仪检测;蛋白质定量检测以Westernblot法。结果manumycin浓度依赖性抑制Tca8113细胞的生长,IC50为(11.33±0.63)μmol.L-1;manumycin可浓度和时间依赖性诱导Tca8113细胞的凋亡,过氧化物清除剂N-乙酰半胱氨酸能清除manumycin介导的细胞活性氧的增加,抑制线粒体跨膜电位降低及细胞凋亡。结论manumycin体外显著抑制舌鳞癌Tca8113的生长及诱导细胞凋亡,其机制可能通过激活线粒体依赖性凋亡通路有关。     

槲皮素对阿霉素致小鼠心肌损伤的保护作用及其机制

观察槲皮素对阿霉素致小鼠心肌损伤的保护作用并初步探讨其机制。腹腔注射阿霉素(20 mg·kg^-1)复制小鼠心肌损伤模型，检测心电图、心肌超微结构，血清NO含量和iNOS活性，心肌组织LDH、SOD、MDA的水平和p53蛋白表达。并观察槲皮素(50，100及200 mg·kg^-1)对上述指标的影响。阿霉素可导致小鼠心律失常和心肌超微结构损伤；使NO、iNOS、MDA和LDH的水平升高，SOD的水平降低；p53蛋白表达增强。槲皮素(50，100及200 mg·kg^-1)可拮抗阿霉素所致的上述变化。槲皮素对阿霉素性小鼠心肌损伤具有保护作用，其机制与增强SOD活力、降低iNOS活性、抑制p53蛋白表达等有关。