绿脓杆菌耐药性及β—内酰胺酶基因的研究

对７２株临床分离的绿脓杆菌进行了药敏试验，其中４２株检测了β－内酰胺酶及几种β－内酰胺酶基因同源序列在总ＤＮＡ和质粒中的情况，并探讨了绿脓杆菌总ＤＮＡ中不同β－内胺酶基因同源序列与不同β－内酰胺类抗生素耐药性的关系。     

耐氨苄西林流感嗜血杆菌产β-内酰胺酶机制研究

目的：探讨耐氨苄西林的流感嗜血杆菌产生β－内酰胺酶的机制。方法：对临床分离的１１２株流感嗜血杆菌耐药菌用纸片法作β－内酰胺酶测定，用ＰＣＲ法检测产酶流感嗜血杆菌中的β－内酰胺酶基因的存在。结果：纸片法测得产酶菌株３２株，产酶率２８．６％ （３２／１１２）；３２株产酶菌中ＰＣＲ法测β－内酰胺酶基因阳性菌株２９株，阳性率为９０．６％ （２９／３２），其中质粒ＤＮＡ 模板组阳性为２５株，基因组ＤＮＡ模板组阳性为４例。结论：（１）流感嗜血杆菌耐氨苄西林主要由质粒介导产生β－内酰胺酶所造成。（２）ＰＣＲ法是研究流感嗜血杆菌是否携带β－内酰胺酶基因及该基因所在位置的简便而有效的方法。     

儿科临床分离铜绿假单胞菌对β-内酰胺类耐药相关基因的研究

目的 研究儿科临床分离对β-内酰胺类抗生素耐药铜绿假单胞菌的耐药性及其对β-内酰胺类耐药相关基因的检出情况.方法 收集2004年1月至2006年12月北京儿童医院住院患儿中分离出的146株对β-内酰胺类抗生素耐药铜绿假单胞菌.使用琼脂稀释法进行药敏试验,测定抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC)值,按照临床实验室标准化研究所(CLSI)推荐标准判断结果 ,再使用PCR方法 进行β-内酰胺类耐药相关基因的检测.采用WHONET 5.3软件进行数据分析.结果 146株对β-内酰胺类抗生素耐药铜绿假单胞菌多呈现多重耐药现象.产金属β-内酰胺酶的共46株(31.5%),IMP基因阳性38株(82.6%),VIM基因阳性8株(17.4%).外膜孔蛋白OprD2缺失的114株,占78.1%.对超广谱β-内酰胺酶TEM、SHV、OXA、PER、GES、CTX.M和质粒型AmpC酶DHA、MIR及FOX基因的检测均为阴性.结论 目前儿科临床分离对β-内酰胺类抗生素耐药铜绿假单胞菌,产生金属酶及外膜孔蛋白OprD2缺失是其耐药的主要原因,并且外膜孔蛋白OprD2缺失现象更为严重.     

AmpC酶的研究进展

近年来 ,由于第三代头孢菌素的广泛应用选择性出现革兰阴性杆菌对 β内酰胺类抗生素的耐药 ,使细菌耐药趋势日趋严峻 ,成为医学界备受关注的问题。革兰阴性肝菌中 ,β内酰胺类抗生素的耐药性主要由临床上最重要的两类 β内酰胺酶引起 ,即高水平表达的染色体编码的ＡｍｐＣβ内酰胺酶和质粒编码的ＴＥＭ或ＳＨＶ类 β内酰胺酶 ,前者以肠杆菌科、铜绿假单胞菌中存在的染色体编码的ＡｍｐＣ酶为代表 ,后者以存在于大肠埃希菌 ,肺炎克雷白菌中的超广谱 β内酰胺酶 (ＥＳ ＢＬｓ)为代表。但近年来的研究发现ＡｍｐＣ酶不仅由染色体介导也由质粒介…     

产ＥＳＢＬｓ大肠埃希氏菌肺部感染的药敏分析

大肠埃希氏菌是临床最常见的病原菌之一，属肠杆菌科细菌，常见的感染部位为泌尿生殖道、胆道、呼吸道等。近年来其对β—内酰胺类抗生素的耐药性不断升高，细菌对抗生素虽有多种耐药机制，但对β—内酰胺类抗生素８０％左右的耐药是通过产生β—内酰胺酶来实现的。β—内酰胺酶种类繁多，已经报道的就有２００余种，其分类也比较复杂，超广谱β—内酰胺酶（ＥＳＢＬｓ）是其中之一。ＥＳＢＬｓ是一类由质粒介导的β—内酰胺酶，能水解氧亚氨基β—内酰胺类抗生素，被β—内酰胺酶抑制剂如克拉维酸（ＣＡ）所抑制。ＥＳＢＬｓ主要由肺炎克雷伯杆菌产生，也可由其他如大肠埃希氏菌、拘椽酸杆菌属、变形杆菌属、沙门菌同等细菌产生。产ＥＳＢＬｓ的大肠埃希氏菌株给临床治疗带来很大的难度，是医院感染的重要耐药菌之一。本文分析了本院呼吸科ＣＯＰＤ患者留取的痰液中，产ＥＳＢＬｓ大肠埃希氏菌的药敏情况。     

院内获得性肺炎绿脓杆菌对13种抗生素敏感性的研究

目的 研究院内获得性肺炎痰标本中,绿脓杆菌对目前常用１３种抗生素的耐药性和产β－ 内酰胺酶菌析的首选治疗药物。方法标本获得纯培养后用法国bioＭerieux公司的Ｖitek微 生物自动分析仪鉴定到种,药物敏感试验采用Ｋ－Ｂ纸片法按ＮＣＣＬＳ规定的标准进行。结果引起院内获得性肺炎的１０２株绿脓杆菌对１３种常用抗生素的平均耐药率为４２．９％,对β－内酰胺酶类抗生素耐药率在１２．５％以下,对氨基糖甙类耐药率在３４．６以     

HIV—1 SF2env重组克隆近PL启动子序列的测定

确定ＨＩＶ－１ ＳＦ２ｅｎｖ重组克隆的近启动子ＤＮＡ序列及其读码框架。方法。使用ＡＢＩ公司的３７３Ａ自动测序仪，对插入有ＨＩＶ－１ ＳＦ２株ｅｎｖ基因的原核表达质粒ｐＳＦ２ｅｎｖ近启动子ＤＮＡ序列进行了序列测定。结果 该质粒的近启动子ＤＮＡ序列读码框架正确，重组表达质粒ｐＳＦ２ｅｎｖ构建成功。     

大肠埃希菌ESBLs检测及其耐药性分析

目的探讨本地区大肠埃希菌分离株中超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的阳性率及产酶株对β-内酰胺类抗生素的耐药性。方法采用双纸片协同法检测菌株的ESBLs，并用Kirby-Bauer法检测了415株产ESBLs的大肠埃希菌对16种β-内酰胺类抗生素的耐药性，并对其标本来源和病区分布进行了分析。结果ESBLs总检出率为50．8％，其中ESBLs检出率较高的科室为普外科、脑外科、肾内科、骨科、呼吸内科。所有大肠埃希菌分离株均对Imipenem和Meropenem敏感。产ESBLs株对其他14种β-内酰胺类抗生素的耐药性均高于非产酶株。结论本地区ESBLs检出率较高，分布科室有特殊性，产ESBLs株对抗生素的耐药性高于非产酶株。     

LHScDNA的部分克隆及其表达对肝癌细胞行为的影响

目的：克隆在肝癌组织中低表达的差异显示片段Ｌ２的基因ｃＤＮＡ序列,并初步探讨其在肝癌发生、发展过程中的作用。方法：将Ｌ２在ＧｅｎＢａｎｋ中拼接后,分析其序列结构,并构建正义真核表达质粒,转染ＢＥＬ－７４０２肝癌细胞后,对转染细胞增殖、粘附、迁移和侵袭等指标进行测定。结果：克隆得到一条１００５ｂｐ的ｃＤＮＡ,其５’端７１２ｂｐ与人Ｌｉｐｒｉｎβ１ｃＤＮＡ５’端调控序列和外显子１,２,３序列同源（１００％）,而３’端２９３ｂｐ与Ｌｉｐｒｉｎβ１基因内含子４同源（１００％）。其间有一个５１０ｂｐ开放阅读框架,起始密码位置与Ｌｉｐｒｉｎβ１基因相同,推断的蛋白产物除Ｃ端１３个氨基酸残基外,其余均与Ｌｉｐｒｉｎβ１同源。此ｃＤＮＡ暂命名为ＬＨＳ（Ｌｉｐｒｉｎβ１－ｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓ ｓｅｑｕｅｎｃｅ）。ＬＨＳ ｃＤＮＡ     

鲍曼不动杆菌β-内酰胺酶耐药基因研究

目的了解鲍曼不动杆菌(A.baumannii,AB)β-内酰胺酶耐药基因表达和传播情况。方法应用PCR技术对我院血液标本分离的17株AB菌进行β-内酰胺酶基因测定,应用K-B法进行抗菌药物敏感性试验。结果17株AB菌有10株为泛耐药株。对头孢菌素类抗生素高度耐药,对哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南及美洛培南等也有较高耐药率,以头孢哌酮/舒巴坦敏感性最高。17株中TEM阳性13株,OXA-23群阳性10株,ADC阳性12株,其余基因均阴性。13株检出β-内酰胺酶基因,10株TEM OXA-23群 ADC 3种β-内酰胺酶基因阳性。结论我院AB菌不仅具有多重耐药性,而且TEM、OX-A-23群及ADC等β-内酰胺酶基因携带率高。OXA-23群基因的获得和传播与β-内酰胺类药物的滥用有关。