JNK信号通路在异氟醚预处理和七氟醚预处理减轻大鼠海马脑片缺氧无糖损伤中的作用

目的 评价c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路在异氟醚预处理和七氟醚预处理减轻大鼠海马脑片缺氧无糖(OGD)损伤中的作用.方法雄性成年SD大鼠,体重270～290 g,断头处死,剥离海马,制备海马脑片.取大鼠海马脑片96张,采用随机数字表法,将其随机分为8组(n=12):对照组(C组)、OGD组、异氟醚预处理组(Iso组)、七氟醚预处理组(Sevo组)、SP600125+异氟醚预处理组(SP+Iso组)、SP600125+七氟醚预处理组(SP+Sevo组)、二甲基亚砜(DMSO)+异氟醚预处理组(DMSO+Iso组)和DMSO+七氟醚预处理组(DMSO+Sevo组).采用电生理技术,细胞外记录CA1区群锋电位(PS)波幅,计算PS恢复程度.采用碘化丙啶染色法,测定细胞活力.结果 与C组比较,其余各组PS恢复程度和细胞活力降低(P＜0.01);与OGD组比较,Iso组、Sevo组、SP+Iso.组、SP+Sevo组、DMSO+Iso组和DMSO+Sevo组PS恢复程度和细胞活力升高(P＜0.01);与180组比较,SP+Iso组PS恢复程度和细胞活力升高(P＜0.01),DMSO+Iso组PS恢复程度和细胞活力差异无统计学意义(P＞0.05);与Sevo组比较,SP+Sevo组PS恢复程度和细胞活力升高(P＜0.01),DMSO+Sevo组PS恢复程度和细胞活力差异无统计学意义(P＞0.05).结论 异氟醚预处理和七氟醚预处理可通过抑制JNK信号通路,减轻大鼠海马脑片缺氧无糖损伤.

Abstract：

Objective To evaluate the role of c-Jun N-terminal kinase (JNK) signaling pathway in the protective effect of isoflurane preconditioning and sevoflurane preconditioning against oxygen-glucose deprivation (OGD) injury in rat hippocampal slices. Methods Male adult SD rats weighing 270-290 g were anesthetized with ether and decapitated. The hippocampi were removed and sagittally sliced (400 μm thick) and placed in artificial cerebral spinal fluid aerated with 95% O2-5% CO2 . Ninety-six hippocampal slices were randomly divided into 8 groups (n = 12 each): control group (group C), OGD group, isoflurane preconditioning group (group Iso),sevoflurane preconditioning group (group Sevo) , SP600125 + isoflurane preconditioning group (group SP + Iso),SP600125 +sevoflurane preconditioning group (group SP + Sevo), DMSO + isoflurane preconditioning group (group DMSO + Iso) and DMSO + sevoflurane preconditioning group (group DMSO + Sevo). Electrophysiological technique was used to record the amplitude of population spike ( PS) in the stratum pyramidale of CA1 region and the degree of recovery of PS was calculated. The cell viability was determined by propidium iodide staining. Results Compared with group C, the degree of recovery of PS and cell viability were significantly decreased in the other groups ( P ＜ 0.01) . Compared with group OGD, the degree of recovery of PS and cell viability were significantly increased in groups Iso, Sevo, SP+Iso, SP+Sevo, DMSO+ Iso and DMSO + Sevo (P＜ 0.01). Compared with group Iso, the degree of recovery of PS and cell viability were significantly increased in group SP+Iso ( P ＜ 0.01) , while no significant change was found in group DMSO + Iso ( P ＞ 0.05) . Compared with group Sevo, the degree of recovery of PS and cell viability were significantly increased in group SP + Sevo ( P ＜ 0.01) , while no significant change was found in group DMSO + Sevo ( P ＞ 0.05). Conclusion Isoflurane preconditioning and sevoflurane preconditioning can attenuate the OGD injury to rat hippocampal slices through inhibiting JNK signaling pathway.     

异氟醚对大鼠海马脑片突触长时程增强的影响

目的 评价异氟醚对大鼠海马脑片突触长时程增强(LTP)的影响.方法 雄性SD大鼠,断头后取出海马组织,制备厚400 μm的海马脑片.采用细胞外微电极记录技术,记录海马脑片CA1区细胞外群体峰电位(PS).取28张脑片,随机分为4组(n=7):用正常的人工脑脊液(ACSF)灌流海马脑片,记录正常的PS,待其稳定后,对照组继续灌流ACSF,不同浓度异氟醚组分别用含异氟醚0.125 mmol/L(异氟醚0.125组)、0.25 mmol/L(异氟醚0.25组)、0.5 mmol/L(异氟醚0.5组)的ACSF灌流,记录PS幅值.另取70张脑片,随机分为10组(n=7):用正常ACSF灌流海马脑片,记录稳定正常的PS 30 min,LTP组继续灌流ACSF,其余各组分别用含异氟醚0.125 mmol/L(异氟醚LTP 0.125组)、0.25 mmol/L(异氟醚LTP 0.25组)、0.5 mmol/L(异氟醚LTP 0.5组)、印防己毒素0 μmol/L(印防己毒素组)、荷包牡丹碱10 μmol/L(荷包牡丹碱组)、CGP353485 μmol/L(CGP35348组)、印防己毒素50 μmol/L+异氟醚0.25 mmol/L(印防己毒素+异氟醚组)、荷包牡丹碱10 μmol/L+异氟醚0.25 mmol/L(荷包牡丹碱+异氟醚组)、CGP353485 μmol/L+异氟醚0.25 mmol/L(CGP353485+异氟醚组)的ACSF灌流,记录PS 30 min后,施以100 Hz的高频强直刺激(HFS),记录PS幅值.结果 与对照组比较,异氟醚0.125组给药后10～45 min PS幅值降低,异氟醚0.25组和异氟醚0.5组给药后5～45 min PS幅值降低(P＜0.05或0.01).LTP组HFS后5～60 min PS幅值增高,较刺激前增加了(52±12)%(P＜0.01).与HFS前比较,异氟醚LTP 0.125组、异氟醚LTP 0.25组和异氟醚LTP 0.5组给予HFS后PS幅值差异无统计学意义(P＞0.05);与LTP组比较,3组PS幅值降低(P＜0.01).与HFS前比较,印防己毒素组、荷包牡丹碱组和CGP 35348组HFS后PS幅值增加(P＜0.01);与LTP组比较,3组PS幅值差异无统计学意义(P＞0.05).与HFS前比较,印防己毒素+异氟醚组和荷包牡丹碱+异氟醚组HFS后PS幅值增加(P＜0.01),CGP 353485+异氟醚组HFS后PS幅值差异无统计学意义(P＞0.05);与LTP组比较,印防己毒素+异氟醚组和荷包牡丹碱+异氟醚组HFS后PS幅值差异无统计学意义(P＞0.05),CGP353485+异氟醚组HFS后PS幅值降低(P＜0.01);与异氟醚LTP 0.25组比较,印防己毒素+异氟醚组和荷包牡丹碱+异氟醚组HFS后PS幅值增加(P＜0.01),CGP 353485+异氟醚组HFS后PS幅值差异无统计学意义(P＞0.05).结论 异氟醚可通过激活大鼠海马GABAA受体,抑制LTP的形成,从而影响记忆功能.     

地氟醚、七氟醚和异氟醚预处理对缺氧/复氧心肌细胞损害的保护作用

目的　研究地氟醚、七氟醚和异氟醚预处理对心肌细胞缺氧／复氧损害的保护作用。方法　原代培养乳鼠心肌细胞，随机分为对照、单纯缺氧／复氧及 １．５ＭＡＣ地氟醚、七氟醚和异氟醚预处理５组。实验结束测定乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）和肌酸激酶（ＣＫ）活性、细胞存活和凋亡率。结果　与对照组比，单纯缺氧／复氧使ＬＤＨ、ＣＫ和细胞凋亡率升高及细胞存活率显著下降（Ｐ＜０．０１）；１．５ＭＡＣ地氟醚、七氟醚和异氟醚预处理显著减轻ＬＤＨ、ＣＫ和细胞凋亡率升高及细胞存活率下降，其中七氟醚减轻作用最强。结论　地氟醚、七氟醚和异氟醚预处理对心肌细胞缺氧／复氧损害有一定的保护作用，七氟醚的保护作用可能更强。     

七氟醚后处理对大鼠海马脑片氧糖剥夺损伤的保护作用

目的观察七氟醚后处理对大鼠海马脑片氧糖剥夺损伤(OGD)的保护作用。方法将符合标准的40片海马脑片随机均分为四组:2%七氟醚后处理组(2%Sev组)、4%七氟醚后处理组(4%Sev组)、6%七氟醚后处理组(6%Sev组)和氧糖剥夺损伤对照组(OGD组)。采用脑片灌注及电生理技术细胞外记录海马CA1区的顺向群锋电位(OPS)。利用2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色定量比色方法分析脑片损伤程度。结果 OGD组OPS恢复程度为(3.14±2.56)%,恢复率为10%,组织损伤率为0.63±0.05;2%Sev组OPS恢复程度为(46.24±29.34)%,OPS恢复率为40%,组织损伤率为0.51±0.06;4%Sev组OPS恢复程度为(62.40±34.93)%,OPS恢复率为60%,组织损伤率为0.41±0.07;6%Sev组OPS恢复程度为(75.92±45.31)%,OPS恢复率为70%,组织损伤率为0.37±0.06。与OGD组比较,2%Sev组、4%Sev组、6%Sev组的OPS恢复程度和OPS恢复率均明显升高,组织损伤率明显降低(P<0.01)。结论七氟醚后处理对大鼠海马脑片氧糖剥夺损伤具有一定的保护作用。     

不同浓度异氟醚对大鼠海马乙酰胆碱释放的影响

麻醉药可影响颅内神经递质的水平,如多巴胺、去甲肾上腺素和乙酰胆碱(Ach)。异氟醚对颅内神经递质的影响尚未完全阐明。本研究拟观察不同浓度异氟醚对大鼠海马Ach释放的影响。 材料和方法 微透析导引管植入 选择6只成年雄性SD大鼠,体重300-350 g。将SD大鼠置入充有异氟醚的密封罐中,待其意     

异氟醚预处理对大鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用

目的探讨异氟醚预处理能否诱导脑缺血耐受产生。方法30只雄性SD大鼠(350～400g)，随机分为三组对照组(n＝10)，动物不接受任何处理；Iso/5d／1h组(n＝10)，动物每天接受1h的异氟醚预处理(2％异氟醚，98％氧)，连续5d；O2／5d／1h组(n＝10)，动物每天接受1h的吸氧处理(98％氧，无异氟醚)，连续5d。所有动物均采用右侧颈动脉丝线栓塞大脑中动脉致局灶性脑缺血120min，观察再灌注后1，3，6，12，16，24h动物神经行为学改变及24h时脑梗死容积。结果术后各时间点神经行为学评分Iso／5d／1h组明显低于对照组和O     

异氟醚对老龄大鼠海马蛋白质组的影响

目的 探讨异氟醚对老龄大鼠海马蛋白质组的影响.方法 清洁级老龄雌性SD大鼠75只,22月龄,随机分为对照组(C组,n=35)和异氟醚组(I组,n=40).C组吸入含40%氧气的空气2 h,I组通过异氟醚挥发罐的调节使麻醉箱内异氟醚浓度为3%,待翻正反射消失后将异氟醚浓度降至1.2%,维持2 h.I组苏醒后24 h采用Y型迷宫实验检测认知功能,麻醉结束后24 h和72 h分别随机取5只大鼠,取海马行双向凝胶电泳和质谱分析.结果 与c组比较,I组麻醉结束后24 h和48 h正确反应次数和主动回避次数降低,全天总反应时间延长(P＜0.05);学习能力I组低于C组(P＜0.05).2组麻醉结束后24 h差异表达蛋白17种,其中6种蛋白质表达上调,11种蛋白质表达下调;2组麻醉结束后72 h差异表达蛋白16个,其中10种蛋白质表达上调,6种蛋白质表达下调.结论 异氟醚麻醉后早期老龄大鼠认知功能下降具有可逆性,这种现象可能与海马蛋白质组变化有关.     

地氟醚,七氟醚和异氟醚预处理对缺氧／复氧心肌细胞损害的保护作用

目的 研究地氟醚，七氟醚和异氟醚预处理对恼肌细胞缺氧／复氧损害的保护作用。方法 原代培养乳鼠心肌细胞，随机分为对照，单纯缺氧／复氧及１．５ＭＡＣ地氟醚，七氟醚和异氟醚预处理５组，实验结束测定乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）和肌酸激酶（ＣＫ）活性。细胞存活和凋亡率。结果 与对照组比，单纯缺氧／复氧使ＬＤＨ，ＣＫ和细胞凋亡率升高及细胞存活率显著下降（Ｐ〈０．０１），１．５ＭＡＣ地氟醚，七氟醚和异氟醚预处理显著减轻     

异氟醚预处理在大鼠皮层神经元缺氧损伤中的保护作用

目的探讨异氟醚预处理在大鼠皮层神经元缺氧无糖（OGD）损伤的保护作用及其可能机制。方法建立原代培养的大鼠皮层神经元OGD损伤模型,采用MTT法观察异氟醚预处理对大鼠皮层神经元OGD损伤的保护作用,Westernblot法检测磷酸化ERK（pERK）和低氧诱导因子（HIF）-1α的蛋白表达水平。结果 OGD组神经元存活率显著低于其它四组（P〈0.05）。IO组pERK、HIF-1α蛋白表达明显高于其它四组（P〈0.05）。结论异氟醚预处理对大鼠原代皮层神经元OGD损伤具有明显的保护作用。其机制可能与异氟醚增加pERK表达,进而调节HIF-1α的表达有关。     

异氟醚麻醉对大鼠海马蛋白质组的影响

目的 研究异氟醚麻醉后大鼠海马蛋白质组的变化.方法 将10只8月龄SD大鼠随机均分为异氟醚组(I组)和对照组(C组).1组大鼠以1.2%异氟醚吸入麻醉2 h,C组吸氧对照.于麻醉处理或吸氧对照结束后24 h取海马组织行双向凝胶电泳和质谱分析以鉴定差异蛋白点.结果 双向凝胶电泳结果显示I和C组差异蛋白质点共有17(4/13)个,MAL DI-TOF-MS分析后鉴定出12种蛋白质.结论 异氟醚麻醉可以引起大鼠海马蛋白质组变化,这些蛋白质变化可能具有一定的神经元保护作用.     

活性氧在七氟醚预处理减轻大鼠海马脑片氧糖缺失损伤中的作用

目的 评价活性氧(ROS)在七氟醚预处理减轻大鼠海马脑片氧糖缺失损伤中的作用.方法 雄性SD大鼠,体重80～100 g,断头处死,剥离海马,符合标准的40片海马脑片随机分为4组(n=10):氧糖缺失组(OGD组)、4%七氟醚预处理组(Sevo组)、ROS清除剂组(MPG组)和4%七氟醚预处理+ROS清除剂组(SM组),采用脑片灌流及电生理技术,细胞外记录海马CAI区缺氧期间和复氧1 h期间的顺向群锋电位(OPS);采用2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TYC)染色定量比色法分析脑片损伤程度.结果 与OGD组相比,Sevo组OPS消失时间缩短,OPS恢复程度、OPS恢复率均升高,组织损伤百分率降低(P<0.01);与Sevo组相比,MPG组和SM组OPS消失时间缩短,OPS恢复程度、OPS恢复率降低,组织损伤百分率升高(P相似文献   

异氟烷预处理对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨异氟烷预处理对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用。方法50只SD大鼠随机分为5组：对照组（C组）、缺血再灌注组（Ⅰ组）、0．5％、1．0％、2．0％异氟烷预处理组（P1、P2、P3组），每组10只。采用Langendorff离体心脏灌注模型，经主动脉用K-H液平衡灌注。除C组外，其余组均全心缺血30min再灌注60min。P1、P2、P3组在缺血前分别用含相应浓度异氟烷的KH液灌注15min，再用K-H液冲洗15min。记录平衡灌注末、缺血前即刻、再灌注30、60min时左室舒张末压（LVEDP）、左室收缩压（LVSP）、左室内压下降最大速率（dp／dtmin）、左室内压上升最大速率（dp，dtmax）、心率（HR）。再灌注60min时，计算心肌梗死面积百分比、线粒体和胞浆的细胞色素C水平。结果与C组比较，再灌注期间Ⅰ组LVEDP升高，LVSP、dp／dtmax、dp／dtmin降低，P1、P2、P3组LVEDP升高，I、P1组心肌梗死面积百分比升高，I、P1、P2组线粒体细胞色素C水平降低，胞浆细胞色素C水平增高；与Ⅰ组比较，P1、P2、P3组LVEDP及心肌梗死面积百分比降低，线粒体及胞浆细胞色素C水平增高，胞浆细胞色素C水平降低（P〈0．05或0．01）。P2组胞浆细胞色素C水平高于P1组；与P1、P2组比较，P3组线粒体细胞色素C水平增高，胞浆细胞色素C水平降低（P〈0．05）。结论通过抑制线粒体细胞色素C释放到胞浆。异氟烷预处理对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤有一定的保护作用。     

异氟烷预处理联合浅低温对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响

目的 评价异氟烷预处理联合浅低温对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响.方法 雄性SD大鼠50只,体重250～300 g,随机分为5组(n=10):正常对照组(C组)、缺血再灌注组(I/R组)、异氟烷预处理组(P组)、浅低温组(M组)和异氟烷预处理联合浅低温组(PM组).制备离体心脏Langendorff灌注模型,各组经主动脉灌注K-H液,平衡灌注20 min后,C组继续灌注K-H液120 min,其余各组制备缺血再灌注模型;I/R组和P组常温(37 ℃)缺血30 min时进行再灌注;M组和PM组浅低温(31 ℃)缺血30 min时进行再灌注.P组和PM组于缺血前用1.0%异氟烷预充饱和的K-H液灌注15 min,再用K-H液冲洗15 min.分别于平衡灌注20 min、缺血前即刻、再灌注30、60 min时记录左室舒张末期压、左心室收缩压、左室压最大上升速率、左室压最大下降速率和HR.再灌注60min时取心肌组织,测定心肌梗死体积、心肌细胞线粒体和胞浆的细胞色素C水平.电镜下观察心肌细胞线粒体形态.结果 与I/R组比较,P组、M组和PM组再灌注期间心功能改善,心肌梗死体积缩小,心肌细胞胞浆细胞色素C水平降低,心肌细胞线粒体细胞色素C水平升高(P＜0.05或0.01);与P组比较,PM组再灌注期间心功能改善,心肌梗死体积缩小,心肌细胞胞浆细胞色素C水平降低,心肌细胞线粒体胞色素C水平升高(P＜0.05);与M组比较,PM组心肌细胞胞浆细胞色素C水平降低,心肌细胞线粒体细胞色素C水平升高(P＜0.05或0.01).电镜下PM组线粒体损伤轻于I/R组、P组和M组.结论 异氟烷预处理联合浅低温减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤的效应强于异氟烷预处理或浅低温,其机制与减少心肌细胞线粒体细胞色素C的扩散,保护心肌细胞有关.     

Anoxic depolarization of rat hippocampal slices is prevented by thiopental but not by propofol or isoflurane

Background. There is strong evidence to suggest that anoxicdepolarization (AD) is an important factor in hypoxia/ischaemia-inducedneural damage. Treatments that prevent the occurrence of ADmay be useful in providing neuronal protection against hypoxia.The current study was designed to determine whether generalanaesthetics which have been suggested to ‘induce prophylaxis’against hypoxia can attenuate the incidence of AD. Methods. The effects of anoxia (3 min) on evoked extracellularlyrecorded field potentials of CA1 neurons in rat hippocampalslices were assessed in the absence and presence of the i.v.general anaesthetics thiopental and propofol and the volatileanaesthetic isoflurane. Results. In the absence of anaesthetics, AD occurred in 81%of the preparations tested. Thiopental (2x10^–4 M) significantlyreduced the incidence of AD (16%, P=0.0006). In comparison,propofol (2x10^–4 M) and isoflurane (1.5 vol%) were ineffective(69% and 60%, respectively). Furthermore, in the presence ofthiopental, the population spike amplitude recovered with andwithout AD (90% and 94% of pre-anoxic value, respectively) following3 min anoxia. Conclusion. The prophylactic effect of thiopental against hypoxiamight be induced, in part, by preventing the generation of AD.     

异氟醚预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨异氟醚预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响.方法 成年雄性SD大鼠24只,体重180～220 g,随机分为3组(n=8):假手术组(S组)吸人纯氧30 min,间隔30 min后仅开腹;肝脏缺血再灌注组(IR组)吸入纯氧30 min,间隔30 min后行肝脏缺血60 min,再灌注4 h;异氟醚预处理组(Iso组)吸入1.4%异氟醚30 min,间隔30 min后行肝脏缺血60 min,再灌注4 h.于再灌注4 h时处死大鼠,留取肝脏及腹主动脉血5ml.测定血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)浓度,血清及肝组织匀浆上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)的浓度,肝组织髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量,观察肝组织病理学改变.结果 与S组比较,IR组、Iso组血清ALT、AST和TNF-α水平明显升高,肝组织TNF-α含量升高,肝组织MPO活性升高,MDA含量升高,SOD活性降低(P＜0.05或0.01),肝组织病理损伤明显;与IR组比较,Iso组血清ALT、AST和TNF-α水平降低,肝组织TNF-α含量降低,肝组织MPO活性降低,MDA含量降低,SOD活性升高(P＜0.05或0.01),肝组织病理损伤程度减轻.结论 1.4%异氟醚预处理可明显减轻大鼠肝脏缺血再灌注损伤,其机制可能与抑制TNF-α的释放、减少中性粒细胞在肝组织的浸润有关.