清开灵注射液对小鼠T细胞行为和DTH的影响

 【目的】 研究清开灵注射液(QKL)对小鼠T细胞体外活化&#65380;增殖&#65380;细胞周期和迟发型超敏反应(DTH)的影响,探讨其免疫调节作用及机制&#65377;【方法】 不同浓度的QKL作用于小鼠淋巴细胞4 h后,加入刀豆蛋白A (ConA)刺激,于不同时间点收获细胞,利用流式细胞仪检测T细胞的活化&#65380;增殖和细胞周期分布情况;将小鼠分为正常对照组&#65380;二硝基氟苯(DNFB)诱导的DTH模型组和QKL治疗组,通过分析小鼠脾脏指数和耳朵肿胀率评价QKL对DTH的影响&#65377;【结果】 ConA刺激12 h后,T细胞表面CD69表达率为63.1% ± 1.3%,QKL下调CD69的表达,加入浓度为1/1280&#65380;1/320和1/80的QKL后,CD69表达率依次降为56.2% ± 2.4%&#65380;51.9% ± 2.8%和39.1% ± 1.4%,与ConA对照相比,差异有统计学意义(P < 0.05);各浓度QKL明显降低ConA刺激的细胞增殖指数,且呈一定的浓度依赖性&#65377;对细胞周期分布的影响表现为:QKL增加ConA激活的细胞中处于S期和G2/M期的细胞数目,降低处于G0/G1期的细胞数目;体内应用QKL治疗小鼠DTH的结果为:QKL治疗组小鼠脾脏指数为4.96 ± 0.90,与模型组(脾脏指数为5.78 ± 0.85)相比, P < 0.05; 发病耳的肿胀率为28.4% ± 4.2%,与模型组(肿胀率为42.4% ± 4.6%)相比,P < 0.01&#65377;【结论】 QKL是一种有效的负向免疫调节剂,能抑制体内外的免疫反应,抑制T细胞的活化和增殖可能是其作用机制之一&#65377;     

小鼠BTLA基因重组慢病毒载体的构建及鉴定

目的 :构建小鼠B、T淋巴细胞衰减子(BTLA)基因重组慢病毒载体,探讨BTLA基因过表达对小鼠脾T淋巴细胞增殖及活化的影响。方法:以小鼠脾脏组织总RNA为模板,逆转录为c DNA,通过PCR技术扩增BTLA基因,构建p WPTS-m BTLA慢病毒载体,磷酸钙法感染人胚肾上皮细胞株293T细胞。RT-PCR及Western blot法检测BTLA m RNA和BTLA蛋白表达,50%组织培养感梁剂量(TCID50)法检测重组慢病毒滴度。通过感染p WPTS-m BTLA及p WPTS-GFP慢病毒载体的293T细胞与小鼠脾脏T淋巴细胞混合培养,初步研究BTLA基因过表达对小鼠脾T淋巴细胞活化与增殖的影响。结果:成功构建小鼠p WPTS-m BTLA慢病毒载体,并制备高滴度病毒颗粒(1.3×108pfu/ml)。通过对比实验组与对照组小鼠脾T淋巴细胞的增殖结果 ,发现4 d及8 d T细胞的增殖效应均明显受抑制,差异具有统计学意义(P<0.05),且这种抑制作用在0~8 d内具有时间依赖性。结论:过表达BTLA基因的293T细胞与小鼠脾T淋巴细胞混合培养后对其增殖及活化有抑制作用,提示成功构建具有生物学效应的小鼠BTLA基因重组慢病毒载体。     

黄芪糖蛋白对T淋巴细胞增殖活性的影响

目的：探讨黄芪糖蛋白（HQGP）对T淋巴细胞增殖与给药时间的关系、T淋巴细胞增殖与活化程度的关系,以及对双向混合淋巴反应的影响。方法：体外培养小鼠脾细胞,MTT法测定在不同时间给予一定浓度HQGP、给予相同浓度HQGP和不同浓度ConA刺激,双向混合淋巴反应对T细胞增殖的影响。结果：HQGP在不同时间对ConA刺激的T淋巴细胞增殖均有抑制作用,但培养12h给药的抑制作用最强;其抑制作用与T细胞的活化程度无相关性;能明显抑制双向混合淋巴反应,并呈剂量依赖性。结论：在体外实验中,HQGP对小鼠脾淋巴细胞增殖具有免疫抑制活性,且与活化程度无相关性。     

松子壳多糖对小鼠主要免疫细胞功能的影响

目的探讨松子壳多糖(pine nut shell polysaccharide,PSP)对小鼠主要免疫细胞的影响。方法应用MTT法测定PSP对小鼠脾淋巴细胞的毒性和对ConA或LPS诱生小鼠脾T、B淋巴细胞的转化,用中性红吞噬试验测定腹腔巨噬细胞的吞噬功能,应用乳酸脱氢酶释放法测定NK细胞的杀伤活性。结果 PSP对脾细胞毒性很低,各种浓度对小鼠脾淋巴细胞的增殖均有较强的促进作用(P0.01);PSP在浓度50～300μg/mL时,明显促进T淋巴细胞的转化(P0.01),但是当浓度达到300μg/mL时表现出一定的抑制作用(P0.05);PSP在25～200μg/mL时显著促进了小鼠脾B淋巴细胞的转化(P0.05),但是当浓度达到300μg/mL时,抑制作用极显著(P0.01);不同浓度均可以增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红的能力及其代谢功能,当浓度在100μg/mL时能显著的促进巨噬细胞吞噬中性红的能力(P0.01);PSP在浓度100～300μg/mL时,能极显著的促进NK细胞对Yac-1的杀伤作用(P0.01),当浓度达到400μg/mL,对NK细胞杀伤性的促进作用开始减弱。结论 PSP对小鼠脾淋巴细胞的毒性较低,能增强免疫细胞活性,有望成为新一代免疫调节剂。     

小鼠胸膜间皮细胞培养上清对脾细胞增殖反应的影响

目的研究小鼠胸膜间皮细胞培养上清(MPMS)对脾细胞生长与功能的影响。方法取BALB/c小鼠胸膜组织块直接培养和用胰蛋白酶消化后培养胸膜间皮细胞。于培养的不同时间,取MPMS对ConA刺激脾细胞的增殖,采用3H-TdR掺入法测定。结果直接培养法收集的MPMS-A分别以1∶1及1∶10的比例稀释时,对脾细胞自发掺入3H-TdR的增殖均具有明显地抑制作用,与对照组(培基 脾细胞,MS)相比较差异显著(P<0.05-0.001);用胰蛋白酶消化收集的培养3 d的MPMS-B,在1∶1稀释度时,对小鼠脾细胞的增殖具有促进作用(P<0.05-0.01)。而培养3 d收集的MPMS-B,作1:10的比例稀释时,其对ConA刺激的脾细胞增殖反应具有促进作用,与对照组(MS ConA)相比较差异显著(P<0.01)。结论胸膜细胞培养上清对脾细胞增殖呈双向作用影响,而抑制作用大于增强作用。可为研究中医藏像理论与免疫的关系提供基础研究依据。     

星形胶质细胞抑制T细胞增殖及机制探讨

目的初步探讨星形胶质细胞影响T细胞增殖作用及机制。方法利用分离培养小鼠原代星形胶质细胞,以LPS和IFNγ刺激细胞活化,用RTPCR方法检测非活化与活化状态的星形胶质细胞B7.2、B7.1、MHCⅡ和B7H1等免疫分子的表达情况;将不同状态的细胞分别与PHA刺激活化的小鼠T细胞进行共培养,观测其对T细胞增殖的影响,并分析可能的机制。结果小鼠原代星形胶质细胞在非活化状态下组成性表达B7.2和B7H1mRNA,在LPS和IFNγ刺激活化24h后B7H1的表达减少,而同时诱导表达MHCⅡ和B7.1mRNA,而TNFα作用不明显;非活化的星形胶质细胞对PHA刺激活化的T细胞增殖具有明显的抑制作用,而活化的星形胶质细胞的抑制作用减弱。结论小鼠星形胶质细胞在非活化及活化状态下对T细胞增殖具有不同的作用,其机制可能与其表达不同的免疫分子有关。     

藏药结血蒿水提物的免疫抑制作用研究

目的研究结血蒿水提取物（AV-ext）对小鼠免疫反应的抑制作用。方法运用淋巴细胞增殖反应、混合淋巴细胞反应观察AV-ext体外应用和口服给药对小鼠脾细胞增殖的影响;运用小鼠脾细胞增殖试验,观察AV-ext体外应用对小鼠活化脾细胞分泌IL-2的影响;用明胶酶谱法和粘附分析法,观察AV-ext对小鼠活化T淋巴细胞移动和粘附能力的影响。结果AV-ext在1μg／mL-100μg／mL剂量范围内对脾细胞无明显的细胞毒性,但对刀豆蛋白A（ConA）诱导的小鼠脾细胞增殖反应、混合淋巴细胞反应具有明显的抑制作用,对小鼠活化脾细胞分泌IL-2、小鼠活化T淋巴细胞分泌基质金属蛋白酶9（MMP-9）及粘附能力有显著的抑制作用;连续7d每日口服给予150mg／kg和300mg／kg的AV-ext,能明显抑制小鼠脾细胞增殖及活化脾细胞分泌MMP-9。结论AV-ext能显著抑制小鼠的细胞免疫反应。     

小胶质细胞(MG) TLR 4介导T细胞获得性免疫炎症反应的机制

 目的 探讨以小胶质细胞(microglia,MG)为中心Toll样受体 4 (toll like receptor 4,TLR 4) 介导的T细胞获得性免疫炎症损伤机制在早产儿脑白质损伤中的作用。方法 分别分离纯化C3H/HeJ(tlr4基因缺失)小鼠和C57B/L (野生型) 小鼠脾脏CD4＋T细胞和大脑MG细胞并制作交互共培养模型。各组分别加以细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)为刺激因素,流式细胞术和细胞化学染色观察MG变化,检测CD4＋ T细胞增殖变化和ELISA方法检测其分泌功能;通过上调(LPS刺激)或下调TLR 4(tlr4基因缺失)表达对MG活化和共同免疫刺激因子MCH Ⅱ的影响及对CD4＋T细胞增殖分化及Th1/Th2极化方向的影响,阐明TLR 4在T细胞获得性免疫中的关键作用。结果 显微镜下观察,LPS刺激后tlr4基因缺失小鼠MG细胞胞体较小,突起细长,仍处于静息状态;相反,野生型组LPS刺激后出现较明显的细胞体积变大、胞体变大显圆满,突起增加呈分支状。LPS活化的MG其TLR 4和MCH Ⅱ蛋白表达显著上调与tlr4基因缺失小鼠比较有显著性差异(P<0.01)。此外,LPS刺激活化的CD4+ T淋巴细胞增殖明显,且伴有Th1型细胞因子显著升高和Th2型细胞因子的显著下降,与tlr4基因缺失小鼠比较均有显著性差异(P< 0.01)。TLR-4表达与CD4＋T细胞Th1细胞因子浓度间具有显著相关性(P<0.01)。结论 TLR-4介导MG活化在固有免疫和获得性免疫中发挥桥梁作用,并由此提出由Th1/Th2偏移向TLR4、Th1偏移的新的早产儿脑白质损伤模式。     

苦参碱对宫颈癌HeLa细胞的作用

目的:观察不同浓度的苦参碱对宫颈癌HeLa细胞的作用。方法:浓度分别为0.5,1.0,1.5,2.0 g/L的苦参碱体外培养HeLa细胞24,48,72 h后,分别用MTT法观察苦参碱对HeLa细胞的生长抑制作用、AnnexinV-PI双标染色用流式细胞仪检测苦参碱对HeLa细胞凋亡的影响。结果:不同浓度(0.5,1.0,1.5,2.0 g/L)的苦参碱具有抑制宫颈癌HeLa细胞增殖的作用,呈明显的时间、剂量依赖性。各浓度和时间之间比较具有显著差异性(P<0.01)。FCM检测结果显示苦参碱作用后,细胞的凋亡率增加,呈现随时间和剂量依赖性。各浓度和时间之间比较也具有显著差异性(P<0.01)。结论:苦参碱对人宫颈癌HeLa细胞的增殖具有明显的抑制作用,能诱导细胞凋亡的凋亡。     

清开灵注射液对小鼠T细胞行为和DTH的影响

【目的】研究清开灵注射液（QKL）对小鼠T细胞体外活化、增殖、细胞周期和迟发型超敏反应（DTH）的影响,探讨其免疫调节作用及机制。【方法】不同浓度的QKL作用于小鼠淋巴细胞4h后,加入刀豆蛋白A（ConA）刺激,于不同时间点收获细胞,利用流式细胞仪检测T细胞的活化、增殖和细胞周期分布情况;将小鼠分为正常对照组、二硝基氟苯（DNFB）诱导的DTH模型组和QKL治疗组,通过分析小鼠脾脏指数和耳朵肿胀率评价QKL对DTH的影响。【结果】ConA刺激12h后,T细胞表面CD69表达率为63．1％&#177;1．3％,QKL下调CD69的表达．加入浓度为1／1280、1／320和1／80的QKL后．CD69表达率依次降为56．2％&#177;2．4％、51．9％&#177;2．8％和39．1％&#177;1．4％,与ConA对照相比,差异有统计学意义（P〈0．05）;各浓度QKL明显降低ConA刺激的细胞增殖指数,且呈一定的浓度依赖性。对细胞周期分布的影响表现为：QKL增加ConA激活的细胞中处于S期和G2／M期的细胞数目,降低处于G0／G1期的细胞数目;体内应用QKL治疗小鼠DTH的结果为：QKL治疗组小鼠脾脏指数为4．96&#177;0．90,与模型组（脾脏指数为5．78&#177;0．85）相比,P〈0．05;发病耳的肿胀率为28．4％&#177;4．2％,与模型组（肿胀率为42．4％&#177;4．6％）相比,P〈0．01。【结论】QKL是一种有效的负向免疫调节剂,能抑制体内外的免疫反应．抑制T细胞的活化和增殖可能是其作用机制之一。     

加温对小白鼠染色体影响的研究

加温是一种对放疗中射线抵抗性细胞增敏的有效方法。加温是否对机体有损伤目前很少有人探讨。本文利用微波辐射、恒温水浴为热源对小白鼠加温,观察细胞染色体的改变,判定热疗过程对机体的损伤。     

100例子宫肌瘤与子宫腺肌病的B超图像分析

目的 探讨子宫肌瘤与子宫腺肌病Ｂ超图像特征及其鉴别诊断。方法 常规Ｂ超检查,并将子宫肌瘤子宫腺肌病两组Ｂ超图像进行比较分析。结果 ４７例肌瘤（９４．０％）有假包膜或界限清楚,。２８例腺肌病（９３．３％）界限欠清;４１例肌瘤（８２．０％）探及栅栏样图像和后方回声衰减仅各有２例（６．６７％）、１８例（６０．０％）呈高回声,两者比较差异有显著性（Ｐ〈０．０１,〈０．０５）。结论：Ｂ超对子宫肌瘤和腺肌病的     

伤立效总提取物对小白鼠骨骼肌微循环障碍的影响

实验表明,伤立效对肾上腺素所致的小白鼠骨骼肌微循环障碍具有扩张微血管口径、加快微血管的血流速度、增加血流量的作用,实验组与对照组比较,各项指标差异均非常显著(P<0.01)。     

外阴部血管瘤21例治疗分析

目的：探讨女性外阴血管瘤的治疗方法及时机。方法：对1994-1999年收治的14例女性外阴部血管瘤和7例海绵状血管瘤，分别采用平阳霉素局部注射和手术切除治疗。结果：毛细血管瘤全部治愈，海绵状血管瘤复发率为28.6%(2/7)，1例出现部分皮拉坏死并发症。结论：女性外阴部毛细血管瘤不宜在观察中等其自然消退，应积极采用平阳霉素瘤内注射治疗，海绵状血管瘤单纯用平阳霉素注射治疗效果不佳，宜采用手术切除。     

鼻咽癌放疗后复发因素分析（附30例报告）

本文总结了1988－1993年30例鼻咽癌放疗后复发因素，包括剂量因素，边缘因素，病情估计不足及设野不合理等，其中病情估计不足造成的复发，占33．3％（10／30），克服病情估计不足，改进放疗设野布局，有进一步提高鼻咽癌的治愈率和降低复发率的可能，CT检查应列为鼻咽癌的常规检查。     

不同冷冻时间对兔角膜膨胀率的影响

对不同冷冻时间（２０ｓ和３ｍｉｎ）及不同方法保存的兔角膜膨胀率进行了测定。结果冷冻２０ｓ及３ｍｉｎ，新鲜角膜组膨胀率（％）分别为２９．４５±１．９，４９．７４±１．６（Ｐ＜０．０５）；冷冻保存组为３１．６５±０．８及５４．６７±２．７（Ｐ＜０．０５）；干燥保存组为７３．８２±７．７及８６．０９±１．３（Ｐ＜０．０５）。干燥保存组角膜膨胀率与新鲜组及冷冻保存组差异均有显著性（Ｐ＜０．０１）。提示在角膜组织镜片加工时，应考虑不同保存方法和不同冷冻时间所造成的不同膨胀率对其厚度的影响，从而减少镜片加工时的屈光度误差。     

手术治疗支气管类癌30例临床观察

目的分析支气管类癌的临床特征,探讨手术治疗的方法和影响预后的因素。方法进行回顾性分析经手术切除的30例支气管类癌病的影像学特征、临床表现及影响预后的因素。结果术后病理证实,21例为典型支气管类癌,9例为非典型支气管类癌;手术治疗后21例病人存活超过5年,其中10例超过10年;4例3年内死于肝脑转移,5例术后不足5年,仍健在。结论相对于其他类型的肺癌,支气管类癌具有良好的生物学特性及预后。手术是治疗支气管类癌的主要方法,远处转移是影响预后的主要因素。     

ANALYSIS OF 81 CASES OF NONUNION OF FOREARM FRACTURE

From 1957 t0 1979, 81 cases of nonunion of forearm fracture were treated. Among them 36 had ulnar, 24 radial and 21 radioulnar fractures. The average duration o.f injury was 17.1 months. The main factors causing nonunio.n were severe original fracture therapeutic faults and bone infections.. Treatment coinsisted of rigid internal fixation and grafting with sufficient cancellous bones. 96To of the cases were cured by one operation and 3 failed owing to infection. 50 cases weret fo.llo,wed up for an average of 12.7 monthSj, 78'70 0f them obtained excellent and good functional results. The recovery of supina- tion was better than that of pronation.     

手术治疗甲状腺机能亢进93例临床分析

目的：探讨我院所作甲状腺机能亢进的甲状腺次全切除术病例的经验教训。方法：将本院28年来外科施行的93例甲亢的甲状腺次全切除术病例资料进行回顾性分析。结果：男8例,女85例,发病年龄男15～56岁,平均36岁;女16～70岁,平均34岁。肿块大小为3～20厘米,16厘米以上占77.42%,病理诊断：弥漫性毒性甲状腺肿92例,双侧结节性毒性甲状腺肿1例。基础代谢率27%～73%,平均46.3%。心电图异常50例占53.76%。术后1例并发甲亢危象,1例并发甲低,房室传导阻滞,均痊愈出院。结论：甲亢的甲状腺次全切除术效果可靠,优于药物治疗,并发症少,术前准备要仔细充分,术中操作要细致,严防并发症的发生,特别是甲低、甲亢危象,旁腺和神经损伤的发生。     

胃去门静脉循环断流术犬模型的建立

目的设计胃去门静脉循环断流术的方法 ,并建立胃去门静脉循环断流术犬模型。方法应用缩窄门静脉主干1/2加丝线慢性栓塞术制作犬肝前型门静脉高压食管静脉曲张模型。然后,实施胃去门静脉循环断流术,即行脾切除后,保留贲门周围血管、食管曲张静脉及迷走神经,从根部离断胃冠状静脉等汇入门静脉系统的胃静脉血管,使胃的静脉血流经门奇间的交通支血管进入体循环。将已形成肝前型门静脉高压食管静脉曲张犬12只随机分为脾切除组、贲门周围血管离断术组、胃去门静脉循环断流术组。于开腹后、手术后即刻及术后3周末测量门静脉及食管曲张静脉压力。术前及术后3周末测定肝功能指标。结果犬模型均存活。手术后即刻及术后3周末与开腹后相比,胃去门静脉循环断流术组门静脉压力显著下降(F=7.386,q=3.503、3.121,P<0.05);食管曲张静脉压力亦显著下降(F=8.026,q=3.661、3.240,P<0.05)。手术前后肝功能指标变化不明显(t=0.268～1.325,P>0.05)。结论胃去门静脉循环断流术犬模型存活率高,制作方法简单易行,模型质量可靠,有助于研究胃去门静脉循环断流术对门静脉血流动力学参数的影响。