姜黄素诱导结肠癌LoVo细胞凋亡的作用及机制研究

目的: 探讨姜黄素促人结肠癌LoVo细胞凋亡的生物学作用及其调控机制。 方法: 体外培养人结肠癌LoVo细胞,0~20 mg·L^-1不同浓度姜黄素处理后,采用MTT 比色法测定姜黄素对细胞的增殖抑制作用,利用透射电镜观察细胞的超微结构,采用PI单标流式细胞仪测定细胞周期分布,Annexin V-FITC/PI双标法检测细胞凋亡率; 采用 RT-PCR检测Bax,Bcl-2,Caspase-3,Bcl-xL mRNA表达水平。 结果: MTT检测显示姜黄素能显著抑制人结肠癌LoVo细胞的生长、増殖,呈现浓度和时间效应关系;透射电镜结果显示姜黄素能使LoVo细胞发生形态学改变,呈现典型凋亡细胞特征;流式细胞仪分析显示姜黄素能阻滞细胞周期于S期,诱导细胞发生凋亡。RT-PCR检测显示姜黄素可促进细胞中Bax,Caspase-3 mRNA 表达,抑制Bcl-2,Bcl-xL mRNA 表达。 结论: 姜黄素能显著抑制人结肠癌LoVo细胞的增殖并促进其凋亡,这种生物学效应可能与激活Bax表达、抑制Bcl-2和Bcl-xL表达而活化Caspase-3的信号通路有关。     

肠胃清煎剂对裸鼠大肠癌皮下移植瘤奥沙利铂治疗的增效作用

目的探讨肠胃清煎剂对奥沙利铂(L-OHP)治疗结肠癌耐药细胞皮下移植瘤的增效作用。方法采用皮下接种构建结肠癌耐药细胞HCT116/L-OHP及敏感细胞HCT116异位瘤模型,运用中药复方肠胃清煎剂及1/2最大耐受剂量的L-OHP干预后,观察L-OHP对移植瘤体积及裸鼠体重的影响、中药复方作用后L-OHP治疗效果的变化。结果肠胃清煎剂及肠胃清煎剂联合L-OHP组荷瘤鼠体重减轻影响均少于单纯L-OHP组(P<0.01)。肠胃清煎剂低、高剂量联合L-OHP组肿瘤体积分别为53.75%、48.32%,同单纯中药或L-OHP比较,减小明显(P<0.01)。结论肠胃清煎剂具有一定抑制肿瘤生长的能力,在联合化疗药物作用下,其抑制效果明显,在有效治疗剂量中,与肠胃清煎剂剂量成正比。     

大蒜素及联合CPT-11对人结肠癌LoVo细胞的杀伤作用

目的:探讨大蒜素对人结肠癌LoVo细胞增殖的影响及其与CPT-11联合使用时的化疗增敏作用.方法:不同浓度的大蒜素作用于体外培养的LoVo细胞,采用MTT法检测大蒜素对LoVo细胞增殖抑制能力;Annexin V-FITC标记流式细胞术检测大蒜素对LoVo细胞的凋亡抑制率;流式细胞术检测大蒜素对LoVo细胞周期影响;4.0,8.0 mg·L~(-1)大蒜素联合CPT-11使用,观察CPT-11抗肿瘤活性的改变.结果:大蒜素可抑制LoVo细胞增殖,具有明显量效和时间依赖性,24,48,72 h IC_(50)分别为32.23,10.74,6.58 mg·L~(-1),大蒜素能够诱导LoVo细胞凋亡,作用24 h细胞凋亡随着大蒜素浓度增高而增高,作用48h凋亡作用峰值质量浓度为8 mg·L~(-1),大蒜素作用LoVo细胞24 h,质量浓度低于4 mg·L~(-1)时细胞周期被阻滞于G_2/M;而高于4 mg·L~(-1)时细胞周期被阻滞于C_2/M和G_1期,4.0,8.0 mg·L~(-1)大蒜素预处理24 h后,CPT-11作用LoVo细胞24 h IC50分别由单独使用的47.5 mg·L~(-1)下降为7.4,7.2 mg·L~(-1),使CPT-11杀伤肿瘤效率分别提高6.4,6.6倍.结论:大蒜素能够诱导LoVo细胞凋亡,阻滞细胞周期,抑制细胞增殖;低剂量大蒜素与CPT-11联合使用具有协同抗肿瘤作用.     

参苓白术散协同奥沙利铂对人结肠癌细胞增殖及凋亡的作用

目的:探讨参苓白术散(Shenling Baizhu San,SBS)对人结肠癌HCT116细胞增殖及凋亡的影响。方法:以化疗药奥沙利铂(oxaliplatin,L-OHP)为阳性药,采用噻唑蓝[3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide,MTT]比色法检测SBS联用L-OHP前后对HCT116细胞生长的抑制情况,碘化丙啶(PI)染色分析细胞周期分布,Annexin VFITC试剂盒检测HCT116细胞凋亡,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测其对细胞内B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白的影响。结果:(1)MTT比色法结果显示,分别取0.002,0.004,0.008,0.016,0.032,0.064,0.128 g·L-1L-OHP联用5%SBS药物血清作用于HCT116细胞48 h,与联用前各组比较,联用后各组细胞抑制率均明显上升(P0.05),其中以0.064 g·L-1L-OHP联用5%SBS最高,达(94.95±0.90)%;(2)周期结果显示,与联用前L-OHP(0.002,0.004,0.008 g·L-1)组比较,分别联用5%SBS后,G2/M期HCT116细胞分布增多,均由G0/G1,S和G2/M期转至G2/M期,以L-OHP 0.008 g·L-1联用5%SBS组最为明显(P0.05);(3)凋亡结果显示,与联用前L-OHP(0.002,0.004,0.008 g·L-1)组比较,分别联用5%SBS后均能明显增加HCT116细胞凋亡率(P0.05),以高剂量联用组凋亡率最高,为(24.97±2.45)%;(4)蛋白检测显示,与5%空白血清组比较,L-OHP(0.002,0.004,0.008 g·L-1)分别联用5%SBS后,Bax蛋白表达量明显上调(P0.05),以L-OHP 0.008 g·L-1联用5%SBS组最高。分别与空白血清组、空白组比较,各用药组Bcl-2蛋白表达量均明显降低(P0.05),其中以L-OHP 0.008 g·L-1联用5%SBS组最低。结论:参苓白术散能协同L-OHP抑制人结肠癌HCT116细胞增殖及凋亡,其作用机制可能是通过促进HCT116细胞增殖、诱导细胞凋亡、改变细胞周期分布、上调Bax蛋白表达及下调Bcl-2蛋白表达来实现的。     

健脾解毒方对奥沙利铂抑制人结肠癌裸鼠原位移植瘤生长的增效作用

目的:观察健脾解毒方对奥沙利铂抑制人结肠癌裸鼠原位移植瘤生长的增效作用,并初步探讨其作用机理。方法:建立人结肠癌裸鼠原位移植瘤模型,随机分为4组:对照组、奥沙利铂组、健脾解毒方组、健脾解毒方联合奥沙利铂组(联合用药组),观察各组抑瘤率、裸鼠体重及生存期;采用MTT法检测治疗后移植瘤肿瘤细胞耐药性的变化。结果:(1)联合用药组的抑瘤率为53.6%,是单用奥沙利铂组的4.25倍。(2)治疗后,健脾解毒方组和联合用药组体重较对照组增加(P0.05)。(3)健脾解毒方组和联合用药组中位生存期长于对照组和奥沙利铂组(P0.05)。(4)奥沙利铂组对L-OHP、5-Fu、HCPT和THP的耐药指数分别为7.59、4.28、5.78和4.50;联合用药组对L-OHP、5-Fu、HCPT和THP的逆转指数分别为6.57、2.61、4.97和3.10。结论:健脾解毒方对奥沙利铂抑制人结肠癌裸鼠原位移植瘤生长有增效作用,其增效作用可能与健脾解毒方部分逆转移植瘤对奥沙利铂的耐药性有关。     

姜黄素逆转人结肠癌耐奥沙利铂细胞株HCT-116/L-OHP的耐药性

目的:构建人结肠癌奥沙利铂(oxaliplatin,L-OHP)耐药细胞株HCT-116/L-OHP,观察姜黄素(curcumin,Cur)对其耐药的逆转作用,并探讨其可能的耐药机制。方法:采用浓度梯度递增法,逐步提高作用于亲代人结肠癌细胞HCT-116的L-OHP浓度,建立耐L-OHP的细胞株HCT-116/L-OHP;通过cell counting kit-8(CCK-8)法检测L-OHP和Cur对HCT-116以及HCT-116/L-OHP细胞的细胞毒性,观察Cur能否逆转耐药;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测耐药相关蛋白的表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测相关mRNA的改变。结果:成功建立了耐L-OHP的人结肠癌耐药细胞株并命名为HCT-116/L-OHP,其耐药指数为12. 6。与HCT-116细胞株比较,HCT-116/L-OHP细胞株中切除修复交叉互补基因1(ERCC1)蛋白及mRNA表达水平显著上升(P 0. 01),B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2),谷胱甘肽-巯基-转移酶-π(glutathione-s-transferase-π,GST-π),多药耐药相关蛋白(multidrug resistance-associated protein, MRP),P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp),凋亡抑制基因(Survivin)的表达亦显著上升(P 0. 01);不同浓度姜黄素(5,10,20,30,40μmol·L-1)作用后,ERCC1表达下降(P 0. 01),Bcl-2,GST-π,MRP,P-gp,Survivin表达也有不同程度下降(P 0. 05)。结论:HCT-116/L-OHP细胞株具有稳定的耐药性,其耐药机制可能为ERCC1的表达上调,而导致Bcl-2,GST-π,MRP,P-gp,Survivin等相关蛋白表达上调,使肿瘤细胞获得耐药性。姜黄素对HCT-116/L-OHP的耐药性具有逆转作用,其作用机制可能是通过降低ERCC1的表达,从而下调Bcl-2,GST-π,MRP,P-gp,Survivin等耐药相关mRNA及蛋白的表达,增加肿瘤对L-OHP的敏感性,从而逆转肿瘤细胞的耐药。     

丹参酮ⅡA联合奥沙利铂对人肝癌细胞SMMC-7721作用的实验研究

 目的探讨丹参酮ⅡA对人肝癌细胞系SMMC-7721生长活性及对奥沙利铂敏感性的影响和机制。方法不同浓度的丹参酮ⅡA和奥沙利铂单独或联合作用人肝癌细胞系SMMC-7721 72 h后,采用噻唑蓝(MTT)法检测该细胞系的生长活性,分析丹参酮ⅡA与奥沙利铂在抑制肝癌细胞增殖中的相互作用。流式细胞术分析丹参酮ⅡA单独及联合应用奥沙利铂对肝癌细胞凋亡的影响。结果实验所选各种浓度丹参酮ⅡA对SMMC-7721均表现出一定程度的生长抑制作用,并呈剂量依赖性;当丹参酮ⅡA质量浓度为1.0,2.0,5.0,10.0 mg·L^-1时,合用质量浓度为1.0,2.0,5.0 mg·L^-1的奥沙利铂能显著抑制SMMC-7721细胞的增殖,并显示出两种药物的协同作用(q>1.15)。流式细胞术分析发现两种药物均可有效诱导SMMC-7721细胞的凋亡,且在上述浓度联合应用时具协同效应。结论丹参酮ⅡA可以显著抑制肝癌细胞系SMMC7721细胞增殖,并能增强该细胞系对奥沙利铂的敏感性,其作用机制可能与丹参酮ⅡA和奥沙利铂协同诱导细胞凋亡有关。     

寨卡提取物体外对人结肠癌细胞凋亡的诱导作用及其作用机制研究

目的 研究寨卡提取物诱导人结肠癌LoVo细胞凋亡的作用,并对其可能的作用机制进行探讨.方法 以寨卡提取物作用于人结肠癌LoVo细胞,采用MTT法分析寨卡提取物对LoVo肿瘤细胞的抑制生长作用;采用Annexin V-FITC荧光染色实验,考察细胞在药物作用下的质膜变化,对提取物诱导LoVo细胞凋亡进行检测;采用比色法测定寨卡提取物对人大肠癌LoVo肿瘤细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)的耗竭作用和对谷胱甘肽-S转移酶(GST)的诱导作用;同时利用DCFH-DA探针,检测LoVo肿瘤细胞给药后的活性氧水平;应用Western蛋白印迹法检测Caspase-3和Caspase-9蛋白的表达.结果 寨卡提取物具有明显的体外抗肿瘤活性,并呈剂量依赖关系,IC50为550μg·ml-1.该药物可通过改变细胞质膜,耗竭细胞内谷胱甘肽含量,增加谷胱甘肽-S转移酶含量,上调肿瘤细胞内活性氧水平等途径,提高Caspase-3和Caspase-9蛋白的表达,诱导LoVo细胞发生凋亡.结论 寨卡提取物可诱导LoVo细胞凋亡,其作用机制可能通过耗竭细胞内GSH 的含量,以ROS为介导直接作用于细胞线粒体,诱导凋亡的产生.寨卡提取物对LoVo细胞凋亡的诱导作用还可能与其增加Caspase-3和Caspase-9蛋白表达有关.     

“肠胃清”对结肠癌皮下移植瘤奥沙利铂治疗的增敏作用及对肿瘤组织坏死凋亡的影响研究

目的:研究肠胃清对裸鼠结肠癌皮下移植瘤奥沙利铂(L-OHP)治疗的增敏作用及对肿瘤组织坏死凋亡的影响。方法:构建裸鼠结肠癌细胞HCT-116皮下移植瘤模型,将造模成功的裸鼠随机分为模型组、L-OHP组、肠胃清组和肠胃清联合L-OHP组(联合组),分别给药或生理盐水3周后,观察各组裸鼠肿瘤体积,计算抑瘤率,苏木精-伊红染色法(HE)观察肿瘤组织病理形态学变化,DNA断裂的原位末端标记法(TUNEL染色法)检测肿瘤组织细胞凋亡情况。结果:各给药组给药后瘤体体积明显小于模型组(P0.01),联合组瘤体体积明显小于L-OHP组和肠胃清组(P0.01)。各组抑瘤率比较,联合组明显高于L-OHP组和肠胃清组(P0.01)。各给药组肿瘤组织坏死面积百分比和肿瘤细胞凋亡指数均高于模型组(P0.01),联合组明显高于L-OHP组和肠胃清组(P0.05或P0.01)。结论:肠胃清对裸鼠结肠癌皮下移植瘤L-OHP治疗有增敏作用,并可促进肿瘤细胞坏死及凋亡。     

姜黄素联合氟尿嘧啶对结肠癌细胞增殖凋亡迁移作用

目的:探索姜黄素调控上皮细胞间质转化(EMT)增敏5-FU的抗肿瘤作用。方法:采用姜黄素、5-FU不同给药浓度诱导结肠癌细胞株HCT8的凋亡,MTT法及克隆形成实验检测细胞增殖;划痕实验检测细胞迁移能力;Compusyn软件分析姜黄素的增敏效力;流式细胞术检测细胞凋亡情况;WesternBlot检测E-Cadherin、N-Cadherin、vimentin、cleaved-Caspase3、snail、β-catenin蛋白的表达量。结果:姜黄素能抑制HCT8细胞的增殖;6μmol/L姜黄素显著促进8μmol/L 5-FU对HCT8细胞的生长抑制和凋亡作用,联合药物指数(CI)值=0.7576;联合用药后降低HCT8细胞迁移能力,上调cleaved-Caspase3、E-Cadherin蛋白表达,同时抑制N-Cadherin、snail、β-catenin、vimentin蛋白表达。结论:姜黄素增加5-FU对HCT8细胞的敏感性,其机制可能与抑制EMT、诱导细胞凋亡有关。     

肠复康诱导人结肠癌HT-29裸小鼠移植瘤细胞凋亡的机制

目的探讨肠复康诱导人结肠癌HT-29裸小鼠移植瘤细胞凋亡的机制。方法建立人结肠癌HT-29癌细胞株裸小鼠皮下移植瘤模型,用电子天平测量移植瘤的质量,苏木精伊红(HE)染色计数凋亡细胞数,免疫组化染色结合图像分析系统半定量检测移植瘤细胞诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、抗凋亡蛋白Bcl-2、促凋亡蛋白Bax、半胱天冬酶3(caspase-3)的积分光密度(IOD),同时计算Bcl-2/Bax IOD比值,并使用逐步引入剔出模型进行单因素和多因素线性回归分析。结果与模型组比,肠复康组和西药组均使移植瘤瘤体质量量明显减轻(P<0.05或0.01),凋亡细胞数明显增多(P均<0.01),同时能显著增高瘤细胞iNOS、Bax及caspase-3蛋白的含量(P<0.05或0.01),显著降低瘤细胞Bcl-2/Bax比值(P<0.05或0.01);单因素回归分析显示,瘤细胞iNOS、Bcl-2、Bax及caspase-3含量和Bcl-2/Bax比值与移植瘤凋亡细胞数有关;多因素回归分析显示,移植瘤凋亡细胞数与瘤体质量呈明显负相关(r=-0.775,P<0.01),瘤细胞iNOS及Bax蛋白含量与移植瘤凋亡细胞数呈明显正相关(r=0.771,P<0.01,r=0.763,P<0.01)。结论肠复康能诱导人结肠癌HT-29裸小鼠移植瘤细胞凋亡,其机制之一可能是促进NO的生成,通过线粒体凋亡途径激活caspase-3,导致瘤细胞凋亡。     

人肝癌组织裸鼠移植瘤模型建立及其应用

目的 建立人肝癌组织裸鼠移植瘤模型,对其特性进行鉴定,并应用于抗肿瘤药物制剂疗效的观察。方法 将人原发肝癌手术新鲜组织移植于BALB/c裸鼠皮下,建立人肝癌组织裸鼠移植瘤动物模型;于同体移植后第15 天连续ig给予长科制剂（CKBM）,通过观察动物日常状况、接种部位出现肿块时间,测定瘤体体积和质量、抑瘤率以及进行组织病理学观察,初步评价CKBM的抗肿瘤疗效。结果 人肝癌组织裸鼠移植瘤保持了人肝癌组织特性,并能通过同体移植传代;观察发现CKBM对人肝癌荷瘤裸鼠的抑瘤率达45.71%,对癌细胞生长有一定的抑制作用。结论 在成功建立人肝癌组织裸鼠移植瘤模型基础上,观察发现CKBM具有一定的抗肿瘤疗效。     

肠胃清粗提物协同奥沙利铂抑制人结肠癌HCT116细胞及其作用机制研究

目的 探讨中药复方肠胃清(黄芪、党参、白术、八月札、薏苡仁、野葡萄藤、大血藤、猪苓)粗提物与奥沙利铂联合应用抑制人结肠癌HCTll6细胞的协同增效作用及机理.方法 奥沙利铂、肠胃清提取物分别单独以及联合作用于人结肠癌HCTll6细胞,采用MTT法检测半数抑制质量浓度(IC50),通过TransweⅡ实验检测侵袭转移抑制作用,并利用Western Blotting技术检测侵袭转移与凋亡相关蛋白的表达变化.结果 肠胃清提取物、奥沙利铂以及联合肠胃清提取物(0.15 mg/mL)时奥沙利铂对人结肠癌HCTll6细胞的半数抑制质量浓度分别为(3.24±0.06) mg/mL、(15.74±0.53)μg/mL及(10.32±0.37)μg/mL,联合用药组半数抑制质量浓度降低,侵袭抑制率提高,ADAM-17、MMP-2、MMP-9、BCL-2蛋白表达下调(P＜0.05),P53蛋白表达升高(P＜0.01).结论 中药复方肠胃清粗提物具有一定的抗人结肠癌细胞HCTll6作用,在与奥沙利铂联用时表现出明显的协同作用,其机制可能与降低ADAM-17、M MP-2、MMP-9、BCL-2蛋白以及提高P53蛋白的表达有关.     

姜黄素抗结肠癌作用机制的研究进展

姜黄素是提取于姜科姜黄属植物姜黄Curcuma longa、温郁金C.wenyujin等根茎中的多酚类化合物,具有抗炎、抗肿瘤等药理作用。研究表明姜黄素对结肠癌发生、发展的多个阶段具有预防作用和显著的治疗作用。姜黄素可通过抑制结肠炎症、抑制结肠癌细胞增殖、诱导凋亡、抑制侵袭转移和化疗耐药性等发挥抗结肠癌的作用。主要综述了姜黄素对炎性驱动结肠癌的早期预防作用、结肠癌细胞的治疗作用和相关信号通路的调控作用,为姜黄素的进一步开发和临床应用提供参考。     

乙酰紫草素联合奥沙利铂对人结肠癌HT29细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨乙酰紫草素联合奥沙利铂对人结肠癌HT29细胞增殖及凋亡的影响。方法将人结肠癌HT29细胞分为空白组、乙酰紫草素组(10μmol/L)、奥沙利铂组(1μmol/L)和联合给药组(10μmol/L乙酰紫草素+1μmol/L奥沙利铂),MTT法检测HT29细胞增殖抑制率,流式细胞术检测HT29细胞凋亡率、qRT-PCR法检测HT29细胞Ki-67、Bcl-2及Bax mRNA表达,Western blot法检测磷酸化磷脂酰肌醇-3-羟激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B (p-Akt)蛋白表达。结果人结肠癌HT29细胞经乙酰紫草素、奥沙利铂和联合给药处理24、48、72 h后,细胞增殖抑制率均增加,其中联合给药组细胞增殖抑制率最高(P<0. 05)。药物处理HT29细胞48 h后,与空白组比较,乙酰紫草素组、奥沙利铂组和联合给药组凋亡率、Bax mRNA表达增加(P<0. 05),而Ki-67、Bcl-2 mRNA表达及p-PI3K、p-Akt蛋白表达降低(P<0. 05);联合给药组的细胞凋亡率、Bax mRNA表达均高于乙酰紫草素组和奥沙利铂组,Ki-67、Bcl-2 mRNA表达及p-PI3K、p-Akt蛋白表达低于乙酰紫草素组和奥沙利铂组。结论乙酰紫草素和奥沙利铂对人结肠癌HT29细胞均具有抑制增殖及诱导凋亡作用,可能与调控PI3K/Akt信号通路有关,且两者联用时效果更好。     

神经酰胺在儿茶素诱导LoVo细胞凋亡中的作用

 目的 探讨神经酰胺在表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、表没食子儿茶素(EGC)和表儿茶素(EC)诱导大肠癌LoVo细胞凋亡及其差异性中的作用。方法 EGCG,EGC和EC以及C_2-和C_6-神经酰胺处理LoVo细胞后,用琼脂糖凝胶电泳,Heochst染色、流式细胞术定性和定量检测LoVo细胞凋亡相关的形态学和生化方面的改变;用二酰基甘油激酶法测定3种儿茶素处理LoVo细胞后其神经酰胺含量的变化。结果 EGCG和EGC处理LoVo细胞后,可引起LoVo细胞的凋亡,C_2-和C_6-神经酰胺也可引起相似的改变,但EC则无此作用。EGCG或EGC处理LoVo细胞后细胞内神经酰胺含量先一短暂的升高后逐渐回到基线水平,而EC则先引起短暂的下降再逐渐回升至基线水平。结论 3种儿茶素在诱导LoVo细胞凋亡时呈现出差异性,这种差异性与它们引起LoVo细胞内神经酰胺含量变化的差异性有关。     

槐耳联合DC-CIK对荷结肠癌HT29干细胞瘤裸鼠的体内杀伤实验研究

为了比较不同治疗方法对荷结肠癌HT29细胞干细胞瘤裸鼠的治疗效果。建立了Bal B/C裸鼠结肠癌干细胞模型,随机分为以下4组,每组8只裸鼠：空白对照组、DC-CIK组、槐耳组、槐耳联合DC-CIK组（联合治疗组）。其中DC-CIK组、联合治疗组裸鼠在肿瘤干细胞接种4 d后通过尾静脉注射1×10^6个DC-CIK细胞给予治疗,每周2次共3周;槐耳组和联合治疗组,按每60 kg体质量20 g给药,每天1次灌胃0.2 mL,共3周;对照组以等体积生理盐水代替。各组裸鼠在治疗3周期间每2d测量瘤体大小及裸鼠体重,治疗结束后处死裸鼠取出瘤体称重,观察对荷结肠癌HT29干细胞裸鼠的治疗后影响,RT-PCR法检测信号通路关键基因的表达水平。各组治疗结束后,槐耳组、DC-CIK组、联合治疗组荷结肠癌HT29干细胞裸鼠的瘤质量明显低于对照组,联合治疗组又明显低于槐耳组和DC-CIK组,其中,联合治疗组抑瘤率可达46.77%。在信号通路关键基因的表达水平变化方面,联合治疗组与DC-CIK组、槐耳组相比,PI3K/Akt通路中关键基因PI3KR1和Akt,Wnt/β-catenin通路中关键基因Wnt1,CTTNB1,Notch通路中关键基因Notch1,Notch2,Notch3的mRNA表达均有所下调。不同治疗方法对结肠癌HT29细胞干细胞瘤裸鼠治疗效果中,槐耳联合DC-CIK组效果最佳,为临床治疗结肠癌提供了新思路。     

南蛇藤提取物对人胃癌SGC-7901裸鼠移植瘤生长及凋亡相关蛋白表达的影响

目的探讨南蛇藤茎醋酸乙酯提取物(COE)对人胃癌细胞SGC-7901裸鼠移植瘤生长及凋亡相关蛋白表达的影响。方法建立人胃癌裸鼠移植瘤模型,随机分为模型组,COE低、中、高剂量(10、20、40 mg/kg)组和希罗达(267 mg/kg)组,每组7只,各组ig给药,给药3周后检测裸鼠体质量、肿瘤体积、瘤质量等,绘制肿瘤生长曲线,并计算抑瘤率。应用TUNEL法检测COE处理后各组移植瘤组织中的细胞凋亡情况;免疫组织化学法和Western blotting技术分别检测各组移植瘤组织和SGC-7901肿瘤细胞中p53、Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果 COE能够较好地抑制胃癌裸鼠移植瘤的生长,能明显缩小肿瘤体积,且呈剂量依赖性。COE低、中、高剂量组的抑瘤率分别为33.3%、46.8%、57.7%。TUNEL法显示COE处理后肿瘤细胞凋亡较模型组明显增多。免疫组化结果显示COE处理后移植瘤组织中p53和Bax蛋白表达有升高的趋势,而Bcl-2蛋白表达有降低的趋势。其中与模型组相比,COE高剂量组中p53和Bax蛋白表达显著升高(P0.001),而Bcl-2蛋白表达显著降低(P0.001)。Western blotting结果显示与免疫组化有大致相同的变化趋势。结论 COE对人胃癌细胞SGC-7901裸鼠移植瘤具有明显的抑制作用,其机制可能与上调p53和Bax的表达,下调Bcl-2的表达,诱导胃癌细胞凋亡有关。     

肠胃清含药血清对人结肠癌HCT116/L-OHP耐药细胞凋亡作用的影响

目的探讨中药复方肠胃清(CWQ)逆转人结肠癌HCT116/L-OHP细胞耐药的分子机制。方法提取肠胃清含药血清,设置不同浓度,采用MTT法确定肠胃清的最大无毒剂量和逆转指数(RI);采用彗星实验法检测肠胃清联合奥沙利铂(L-OHP)对耐药细胞DNA损伤的影响,流式细胞术观察肠胃清联合奥沙利铂(L-OHP)对耐药细胞凋亡的影响。结果肠胃清含药血清可以逆转人结肠癌HCT116/L-OHP耐药细胞对L-OHP的耐药性,逆转指数(RI)为2.63倍。肠胃清联合L-OHP能促进耐药细胞发生DNA损伤(P0.001)及凋亡(P0.01)。结论肠胃清能够逆转人结肠癌铂类化疗耐药,其机制与促进肿瘤细胞DNA损伤、诱导凋亡有关。