太白贝母祛痰实验研究

目的：研究太白贝母的祛痰作用,并与暗紫贝母和梭砂贝母进行比较。方法：采用小鼠气管苯酚红排泌法考察太白贝母、暗紫贝母和梭砂贝母的祛痰作用。结果：太白贝母、暗紫贝母和梭砂贝母均能显著促进小鼠气管酚红的排泌量。太白贝母与梭砂贝母促进小鼠气管酚红排泌的作用相近,但均比暗紫贝母弱。结论：太白贝母、暗紫贝母和梭砂贝母均具有良好的祛痰作用,暗紫贝母的祛痰作用最强,太白贝母与梭砂贝母祛痰作用相近,是一种值得开发利用的川贝母。     

不同品种川贝母生物碱镇咳、抗炎作用比较研究

目的比较太白贝母(野生、栽培)与松贝、青贝、炉贝生物碱大孔树脂纯化物的镇咳、抗炎药效学差异,为其临床应用和进一步开发利用提供依据。方法通过回流法提取,大孔吸附树脂纯化不同品种川贝母总生物碱;紫外分光光度法测定川贝母总生物碱含量。比较5种不同品种川贝母生物碱(2.3 mg·kg-1)对氨水致小鼠咳嗽及二甲苯致小鼠耳肿胀的镇咳、抗炎药效学差异。对不同品种川贝母生物碱镇咳、抗炎实验结果进行聚类分析。结果经大孔吸附树脂纯化后,各川贝母样品生物碱含量在51.93%~68.38%之间。太白贝母(野生)、太白贝母(栽培)、松贝、青贝、炉贝生物碱均可明显延长小鼠咳嗽潜伏期;太白贝母(野生)、松贝、青贝、炉贝生物碱可明显降低小鼠2 min咳嗽次数。青贝、炉贝生物碱可使二甲苯致小鼠耳肿胀率明显降低,而太白贝母(野生、栽培)抗炎效果不明显。聚类分析表明,松贝、青贝、炉贝数据聚为一类,再与太白贝母(野生)聚集,而与太白贝母(栽培)分离。结论太白贝母与松贝、青贝、炉贝生物碱一样具有镇咳作用,但抗炎效果不明显,其生物碱组成可能与松贝、青贝、炉贝有一定差异。     

太白贝母与暗紫贝母镇咳祛痰药理作用比较研究

目的:以镇咳、祛痰为药效学指标对比太白贝母和暗紫贝母的药理作用,为太白贝母的品质评价提供依据。方法:通过浓氨水诱咳法建立小鼠咳嗽模型观察两种贝母的镇咳作用,采用酚红祛痰法观察祛痰作用。结果:太白贝母低剂量组对小鼠咳嗽反应潜伏期有延长趋势,并能显著减少小鼠的咳嗽反应(P0.05);太白贝母高、低剂量组增加小鼠呼吸道酚红排泌量作用显著(P0.01),暗紫贝母高剂量组祛痰作用明显(P0.05)。结论:在相同剂量下比较,太白贝母的祛痰作用优于暗紫贝母,镇咳作用无显著差异,但太白贝母减少小鼠咳嗽反应次数的作用相对为优。     

暗紫贝母、栽培瓦布贝母及浙贝母药效学比较

目的:比较暗紫贝母、栽培瓦布贝母及浙贝母镇咳、祛痰及平喘作用,明确栽培瓦布贝母作为野生川贝母替代资源的可行性.方法:采用小鼠氨水引咳及豚鼠枸橼酸引咳法比较3种贝母的镇咳作用.小鼠酚红排痰法及大鼠毛细管排痰实验法比较3种贝母的祛痰作用;整体动物引喘实验法比较3种贝母的平喘作用.每个实验均分为5个组,分别为阴性对照组,阳性对照组,暗紫贝母组,栽培瓦布贝母组及浙贝母组.阴性组采用蒸馏水或生理盐水灌胃5d.镇咳实验中3种贝母的剂量分别为2.5g·kg-1·d-1(小鼠),1.5g·kg-1·d-1(豚鼠);祛痰实验中3种贝母的剂量分别为2 g·kg-1·d-1(小鼠),1 g·kg-1·d-1(大鼠),平喘实验中3种贝母的剂量为1.5 g·kg-1·d-1.结果:栽培瓦布贝母祛痰作用与暗紫贝母相当,小鼠酚红排泌量与阴性对照组比较,P＜0.01,大鼠毛细管排泌量与阴性对照组比较P＜0.05,栽培瓦布贝母平喘作用与暗紫贝母相当,哮喘潜伏期与阴性对照组比较,P＜0.05,暗紫贝母与栽培瓦布贝母作用差异无统计学意义;栽培瓦布贝母镇咳作用与暗紫贝母及浙贝母相当,减少枸橼酸引咳后5 min内咳嗽次数与阴性组比较,差异有统计学意义.结论:栽培瓦布贝母可作为野生川贝母的替代资源推广种植与应用.     

暗紫贝母及浙贝母镇咳作用的化学刺激引咳法比较

目的 通过经典的化学刺激引咳实验法比较暗紫贝母及浙贝母的镇咳作用差异,暗紫贝母研粉物与醇提物、水提物、醇水提取混合物、浙贝母醇水提取物混合物镇咳效应差异.方法 小鼠氨水引咳及豚鼠枸橼酸引咳法比较两种贝母的镇咳作用;实验分组除均设立阴性及阳性对照组外,第一部分实验中两种贝母均以研粉物直接灌胃给药,剂量为:1.5g·kg-1(豚鼠)、2.5g· kg-1(小鼠).第二部分实验中受试药物分为暗紫贝母研粉物组、暗紫贝母醇提物、暗紫贝母水提物组、暗紫贝母醇水混合物及涉贝母醇水混合物组,剂量为:1.5 g·kg-1(豚鼠)、5g· kg-1(小鼠).结果 两种贝母2.5g·kg-1剂量灌胃小鼠均未表现出镇咳效应,但延长EDT50暗紫贝母较浙贝母明显;两种贝母微粉(过300目筛)延长EDT50效应强于贝母细粉(过200目筛);5 g·kg-1剂量灌胃小鼠,暗紫贝母研粉物及暗紫贝母醇提物均显示出镇咳作用,且研粉物作用略强于醇提取物;豚鼠枸橼酸引咳实验中两种贝母研粉物及暗紫贝母醇提取物部分1.5g·kg-1剂量灌胃豚鼠均显示出镇咳作用.结论 对于化学刺激引发的咳嗽,暗紫贝母镇咳作用较浙贝母好;中医临床川贝母微粉入药,其有效成分能较好被机体吸收;暗紫贝母中镇咳有效成分主要存在于醇提取部分.     

引种栽培瓦布贝母、浓蜜贝母与野生川松贝母的药理作用比较研究

栽培川贝母（瓦布贝母、浓蜜贝母）在小鼠镇咳、大鼠祛痰、小鼠常压耐缺氧、小鼠离体肺脏支气管灌流的药理作用及小鼠口服毒性方面与野生暗紫贝母完全相同，而在升高小鼠肺脏ｃＡＭＰ水平及豚鼠平喘作用方面，栽培瓦布贝母的作用明显优于野生暗紫贝母。     

川贝母正品及伪品混淆品的鉴别

川贝母为百合科植物川贝母、暗紫贝母、甘肃贝母、梭砂贝母、太白贝母或瓦布贝母的干燥鳞茎.按性状不同分别习称"松贝"、"青贝"、"炉贝"和"栽培品"[1],其中以松贝质量最好,价格高.川贝母为常用名贵中药,始载于《神农本草经》,具有清热润肺,化痰止咳,散结消痈等功效,临床应用广泛.由于川贝母疗效显著,需求量大,又多系野生,货源长期紧缺,不法分子为谋取高额利润,经常掺入伪品,致使川贝母质量严重下降.本文将介绍川贝母正品及其常见的伪品、混淆品的鉴别.     

松贝品质与土壤生态的相关性研究

运用计算机对暗紫贝母生长区的土壤元素进行主分量分析(PCA排序),将暗紫贝母生长区的土壤初步确定为若尔盖高原土壤区和茂汶土壤区.研究表明,土壤元素K、Mn、Zn、P的含量差异是产生松贝(川贝母)品质差异的重要因子.文中指出若尔盖高原土壤区所产松贝为最优的商品规格.     

暗紫贝母及浙贝母醇水提取物镇咳、祛痰及平喘作用比较研究

目的:比较暗紫贝母粉末、暗紫贝母醇提取物、暗紫贝母水提取物、暗紫贝母醇提及水提混合物、浙贝母醇提及水提混合物的镇咳、祛痰及平喘作用及作用的差异程度。方法:小鼠氨水引咳及豚鼠枸橼酸引咳法比较其镇咳作用;小鼠酚红排痰及大鼠毛细管排痰法比较其祛痰作用;整体动物引喘实验法比较其平喘作用。每个实验均分为7组,分别为阴性对照组,阳性对照组,暗紫贝母粉末组,暗紫贝母醇提物组,暗紫贝母水提取物组,暗紫贝母醇提及水提混合物,浙贝母醇提及水提混合物组,阴性组采用蒸馏水或生理盐水ig 5 d,镇咳实验中5个贝母组的剂量分别为:5.0 g.kg-1(小鼠)、1.5 g.kg-1(豚鼠),阳性对照药为磷酸可待因,剂量分别为:25 mg.kg-1(小鼠)、20 mg.kg-1(豚鼠),祛痰实验中5个贝母组的剂量分别为:1 g.kg-1(大鼠),2 g.kg-1(小鼠),阳性对照药为氯化铵,剂量为1 g.kg-1,平喘实验中5个贝母组的剂量为1.5 g.kg-1,阳性对照药为硫酸沙丁胺醇,剂量为4.5 mg.kg-1,均为ig 5 d。结果:暗紫贝母粉末镇咳、祛痰及平喘作用明显,与阴性组比较差异均有统计学意义,相同剂量下,浙贝母醇提水提混合物组与阴性组比较差异均无统计学意义,未表现出镇咳、祛痰及平喘作用,氨水引咳模型中暗紫贝母醇提物组R为143.21%,枸橼酸引咳模型中5 min内咳嗽次数与阴性组比较,P<0.05;暗紫贝母水提物祛痰作用与阴性组比较,P<0.05;暗紫贝母醇提及水提混合物祛痰作用与阴性组比较,P<0.05,其余作用与浙贝母醇提及水提混合物相当,与阴性组比较,差异无统计学意义。结论:暗紫贝母全粉给药能充分发挥其镇咳、祛痰及平喘作用;暗紫贝母镇咳有效成分可能主要集中在醇提物中,暗紫贝母祛痰有效成分可能主要集中在其水提物中;50%乙醇提取,药渣水煎可能会造成暗紫贝母部分有效成分损失;现有剂量条件下,浙贝母不能发挥其镇咳、祛痰及平喘作用。     

浅谈川贝母的易混品

川贝母为百合科植物川贝母、暗紫贝母、甘肃贝母或梭砂贝母的干燥鳞茎. 川贝母:正品有松贝、青贝、炉贝.①松贝:呈圆锥形,表面类白色.外层鳞叶两瓣,大小悬殊,大瓣紧抱小瓣,未抱部分呈新月形,习称"怀中抱月";顶部闭合.     

椪柑柠檬苦素-UDP-葡萄糖基转移酶基因的克隆、分析及表达

目的克隆中药橘核主要来源品种椪柑Citrus reticulata的柠檬苦素-UDP-葡萄糖基转移酶(limonoid-UDP-glucosyl transferase gene,LGT)基因,并进行生物信息学及表达分析为橘核有效成分合成及调控机制研究提供基础。方法克隆获得LGT序列,通过生物信息学对该基因蛋白的特征进行分析,构建LGT与相关物种LGT的系统进化树,利用RT-PCR分析橘皮、橘肉以及橘核中LGT基因表达量,并进行分析和比较。结果测序所得椪柑LGT序列全长为1 530 bp,具有1 509 bp的完整开放阅读框,编码502个氨基酸。并对其蛋白二级、三级结构进行了分析和预测。基因表达分析结果发现椪柑LGT基因在橘核中表达量最低,其次为橘皮,表达量最高为橘肉。结论成功克隆、分析并表达了椪柑LGT基因,为橘核中柠檬苦素类物质合成及调控机制研究提供基础。     

千金子制霜前后提取物对大鼠肠道菌群的影响

目的研究千金子制霜前后提取物对正常大鼠肠道菌群的影响,为进一步阐明千金子制霜减毒机制提供参考。方法大鼠ig高、中、低剂量的千金子生品和霜品提取物,采用平板菌落计数法考察千金子制霜前后大鼠粪便中4类代表性肠道菌群双歧杆菌、乳酸杆菌、大肠杆菌、肠球菌的数量变化。结果平板菌落计数实验结果表明,ig千金子生品与霜品提取物后大鼠出现菌群失调现象,且千金子霜品较生品引起的菌群紊乱程度低,在低剂量给药时可使条件致病菌肠球菌和大肠杆菌的数量减少。结论千金子制霜前后提取物均会影响肠道菌群的生物多样性,影响肠道菌群平衡,且千金子制霜后对4类肠道菌群的作用减弱,引起肠道菌群紊乱程度减小,这与千金子霜品泻下作用缓和的研究结果相一致,表明从肠道微生态角度考察千金子制霜前后对肠道菌群的干预作用,可揭示制霜与肠道菌群数量变化可能存在相关性。     

不同比例甘草配伍祖师麻抗大鼠佐剂性关节炎的实验研究

目的 观察不同比例甘草配伍祖师麻对大鼠佐剂性关节炎（AA）模型的治疗作用,筛选两者配伍比例,探讨其配伍意义。方法 采用足跖皮内注射弗氏完全佐剂制备AA模型,将140只模型大鼠随机分成14组：模型组,雷公藤多苷片组,祖师麻低、中、高剂量组,甘草低、中、高剂量组,祖师麻-甘草（3：1）低、中、高剂量组,祖师麻-甘草（3：2）低、中、高剂量组,另取10只正常大鼠为对照组,给药组大鼠造模前2 d开始ig给药,连续给药31 d,观察各组大鼠体质量变化,计算足肿胀度、关节炎指数（AI）,采用ELISA法检测大鼠血清炎症细胞因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-1β（IL-1β）的水平,观察大鼠膝关节组织病理变化,通过免疫组化法测定大鼠膝关节滑膜组织中血管内皮生长因子（VEGF）、巨噬细胞游走抑制因子（MIF）的表达。结果 与模型组比较,祖师麻组、祖师麻甘草配伍组能够明显抑制AA大鼠体质量减轻的趋势,对抗AA大鼠足肿胀度及AI的增加,降低异常升高的血清TNF-α、IL-1β水平,改善关节病理组织变化,减少滑膜组织VEGF、MIF的表达,其中以祖师麻-甘草（3：2）配伍组效果最优。结论 祖师麻甘草配伍后,对AA大鼠各项指标改善作用显著,作用优于单用祖师麻,其最佳配伍比例为祖师麻-甘草（3：2）。调节血清炎症细胞因子TNF-α、IL-1β及滑膜组织VEGF、MIF的表达,可能是祖师麻甘草配伍治疗类风湿性关节炎机制之一。     

胡黄连2-C-甲基-D-赤藓糖-4-磷酸胞苷转移酶基因的生物信息学分析

目的研究胡黄连Picrorhiza kurrooa 2-C-甲基-D-赤藓糖-4-磷酸胞苷转移酶(MCT)基因特征并预测MCT结构与功能位点。方法以胡黄连MCT基因为研究对象,利用NCBI网站及生物信息学软件对其碱基分布、氨基酸组成、亲疏水性、保守区及二级结构和三级结构进行预测和分析;并对9个物种的MCT基因进行多重比对与进化分析。结果胡黄连MCT基因的mRNA序列长为1 216 bp(GenBank JQ991625.1),编码由399个氨基酸组成的蛋白质,该蛋白质相对分子质量为44 448.5,其中量最高的为Ser(10.0%);整个多肽中疏水性氨基酸占59.5%,平均疏水值为0.050;与丹参Salvia miltiorrhiza MCT氨基酸序列对比同源性最高,达99%。结论胡黄连MCT基因处于稳定状态,编码的蛋白为疏水性蛋白,在进化过程中是相对保守的,获得的保守区段序列信息为其他物种MCT基因的克隆奠定了基础。     

娑罗子基原物种的DNA条形码鉴定研究

目的 筛选出适用于鉴定七叶树属药用植物的条形码序列。方法 考察了七叶树属10个物种42份样品的核ITS、ITS2与叶绿体psbA-trnH、rbcL、matK序列的PCR扩增和测序效率、种内及种间变异、鉴定效率,对初筛后的序列进行barcoding gap检验及NJ树聚类分析。结果 psbA-trnH序列的PCR扩增和测序效率均为100%,种间最小变异大于其种内最大变异,且鉴定效率为候选序列中最高,barcoding gap检验结果表明该序列在种间、种内变异重合比例较小,且NJ树聚类分析结果也表明psbA-trnH序列能够提供充分的辨析效果。结论 psbA-trnH序列能准确鉴定七叶树属药用植物,可作为七叶树属药用植物条形码序列。     

地骨皮化学成分研究

目的研究地骨皮Lycii Cortex(root bark of Lycium chinense)的化学成分。方法采用硅胶、Sephadex LH-20、ODS等多种色谱学方法分离纯化,根据理化性质和波谱数据进行结构鉴定。结果从地骨皮95%乙醇提取物的醋酸乙酯部位中分离得到12个化合物,分别鉴定为反式-N-对羟基香豆酰酪胺(1)、反式-N-阿魏酰酪胺(2)、二氢咖啡酰酪胺(3)、芹菜素(4)、阿魏酸(5)、对羟基香豆酸(6)、3-羟基-1-(4-羟基苯基)-丙基-1-酮(7)、3,4-二羟基苯丙酸(8)、3,4-二羟基苯丙酸甲酯(9)、对羟基苯甲酸(10)、4-甲氧基水杨酸(11)、烟酸(12)。结论化合物8和9为新的天然产物,化合物1、6、11及12为从该植物中首次分离得到。     

基于psbA-trnH序列的辽宁省黄精药材DNA条形码研究

目的 基于psbA-trnH序列,运用DNA条形码技术对辽宁省12个地区及省外2个地区黄精药材样本进行鉴别分析,为辽宁省黄精药材的鉴别和遗传多样性分析提供参考。方法 利用DNA试剂盒提取法,从38个黄精样本的药用部位中提取DNA,对psbA-trnH部分进行聚合酶链式反应（PCR）扩增及双向测序,并从GenBank下载药用植物黄精的不同来源和外群序列,运用SeqMan软件对测序结果进行拼接,使用MEGA软件对数据进行分析比对,计算K2P（Kimura 2-parameter）遗传距离,并采用邻接法（NJ）建立系统发育树进行分析。结果 根据NJ系统发育树结果可知,不同来源的所有黄精样品聚为一大支,外群猪牙花聚为一支,区别较明显;辽宁省、湖北省及贵州省黄精与美国国家生物技术信息中心（NCBI）所下载的黄精聚为一支,并且结合变异位点与遗传距离可知,辽宁省、湖北省及贵州省的黄精物种为黄精Polygonatum sibiricum Red.,种间差异较小,辽宁省所收集的黄精有4个样品出现了变异位点,其余样本碱基序列均相同。结论 使用psbA-trnH序列DNA条形码技术能够对黄精药材不同的基原植物进行区分鉴别且成功率较高,可用于对黄精属物种进行种内和种间鉴别,为保障辽宁省黄精药材来源的准确鉴定提供参考。     

酸碱药对甘草-马钱子配伍汤液沉积相态释放特性研究

目的 探讨甘草-马钱子配伍汤液沉积相态的释放行为,为甘草-马钱子配伍减毒提供科学参考。方法 建立沉积相态释放测定HPLC法,通过体外释放实验,追踪沉积相态在蒸馏水、人工胃液、人工肠液等不同介质中主成分的释放行为,并对其释放结果进行拟合研究分析。结果 甘草酸、马钱子碱以及士的宁在人工肠液中的释放量较大,且马钱子碱>甘草酸>士的宁。马钱子碱和甘草酸均与一级动力学模型拟合结果最佳,士的宁与Higuchi模型拟合结果最佳。结论 甘草-马钱子沉积相态主要毒效成分呈现出难溶性骨架材料缓释制剂的释放特性,毒(效)成分士的宁可能以沉积共聚体形式存在,在体释放呈缓释行为而减毒;同时,甘草酸的释放对减毒增效起到协同作用。     

肉豆蔻、麸煨肉豆蔻中总木脂素的含量测定

目的:建立肉豆蔻、麸煨肉豆蔻中总木脂素的含量方法.方法:采用紫外分光光度法,以去氢二异丁香酚为对照品,测定波长275 nm.结果:去氢二异丁香酚质量浓度在1.5～9.0 mg·L-1与吸光度呈良好线性关系,r=0.999 8,平均回收率97.6％(n=6),RSD 1.2％.结论:建立的方法简便、快速、重复性好.     

HPLC法测定不同产地不同品种马勃药材中麦角甾醇

目的以麦角甾醇为测定指标,建立马勃Lasiosphaera seu Calvatia质量评价的HPLC方法,对42批不同商品马勃中麦角甾醇的量进行比较研究。方法运用HPLC对多个不同产地和品种的马勃中麦角甾醇进行测定,色谱条件为BDS HYPERSIL C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);体积流量1.0 m L/min;检测波长282 nm;柱温30℃;进样量20μL;以乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B)为流动相进行梯度洗脱:0~15 min,95%A,15~50 min,100%A。结果建立了马勃中麦角甾醇的提取方法和HPLC测定方法。不同品种和产地的马勃中麦角甾醇范围为0.009 9%~0.150 3%。结论不同商品马勃中麦角甾醇量差异明显,说明目前市售马勃药材品质不均一。因此,对于马勃药材的质量控制尚需进一步规范化和标准化。