岷县当归产量预报模型研究

目的:建立岷县当归药材产量预报模型,为相关部门和机构提供当归产量预报信息。方法:根据当归的生育期和生理特性,以1995～2009年岷县当归产量统计数据、成药期各旬气象资料作为研究基础,采用多项式预报法,建立岷县当归产量预报模型。结果:岷县当归产量预报模型的平均精度达97.2%,基本满足产量模拟预报的要求。结论:建立的当归药材气象预报模型有较高的准确度,可提供较为准确的当归产量预报信息,为我国药材生产过程中的产量预报提供方法学参考。     

海拔对当归中阿魏酸量的影响及关键因子分析

目的 在不同海拔进行当归Angelica sinensis生态适应性实验,探索影响当归阿魏酸积累的关键因子.方法 通过田间实验测定当归阿魏酸量的变化和生理生化指标、光合参数、生态因子.结果 当归根中阿魏酸量随海拔升高而增加,且海拔2780m处理比海拔2360m处理高14.5％,差异显著(P＜0.05).分析影响当归阿魏酸积累的关键因子表明,降雨量(r=0.8988)和温度(r=-0.7991)是关键生态因子,可溶性糖(r=-0.9749)和超氧化物歧化酶(SOD)(r=-0.8408)是关键生理生化因子,湿度(r=0.9699)和光合活性辐射(r=0.9467)是关键光合参数因子.结论 适当升高种植海拔,增加降雨量和湿度,降低温度和可溶性糖量均有利于当归中阿魏酸的转化积累.     

四倍体黄芩D20生理指标与产量间关系

目的:通过对四倍体黄芩D20新品系与普通二倍体黄芩生理生化指标、光合效能及产量间关系的分析研究,为进一步开发利用四倍体黄芩新品系D20提供理论依据。方法:采用常规方法进行相关酶活性及丙二醛(MDA),可溶性糖含量等生理生化指标的测定;使用LI-6400/XT型便携式光合测量系统测定光合指标;产量测定采用单因素完全随机区组设计,共设3次重复,小区面积6 m~2(3 m×2 m),各小区移栽10行,行距20 cm,株距5 cm。结果:四倍体黄芩叶片中超氧化物歧化酶(SOD),过氧化物酶(POD),过氧化氢酶(CAT)等酶活性均显著高于二倍体,分别高出28%,2%,17%,除POD以外,差异均达到显著水平(P0.05);可溶性糖含量则高出二倍体19%,MDA含量显著低于二倍体黄芩,说明四倍体黄芩有较高的抗氧化能力;田间试验表明四倍体黄芩及二倍体黄芩根长度并无显著差异,平均都可达34 cm,四倍体黄芩根粗亦不及二倍体,但其侧根数多于二倍体,最高可达8个,单根质量及总产量亦高于二倍体,增产量可达31.4%。结论:四倍体黄芩D20新品系由于染色体的加倍,使得植株生长势、抗逆性增强,保护植株少受病虫害侵害,从而间接影响药材最终产量的增加;四倍体黄芩光合能力的增强可增加植株干物质的积累,而植物干物质的积累直接影响其产量。这一特性对药用植物具有特殊的应用价值和较高的增产潜力。     

海拔梯度对药用植物品质形成影响的研究进展

药用植物品质的形成主要受基因资源、栽培技术和环境资源等要素的影响。而海拔梯度由于包含了多种环境资源要素的剧烈变化,因而成为研究植物生理生态和发育进程在环境资源梯度格局上变化的理想“天然试验场”。系统综述了海拔梯度对药用植物的形态结构、生理生态特征、生长发育和品质形成等的影响,分析了该领域的研究特点及其存在的问题,指出了未来研究的重点和方向。     

西藏当归同岷县当归挥发油、总黄酮含量及抗氧化活性对比研究

目的：考察西藏昌都、那曲当归根与道地药材岷县当归根挥发油、总黄酮含量和体外抗氧化活性,为当归资源的开发利用提供药源和理论依据。方法：以《中华人民共和国药典》2015版中挥发油测定法通则2204乙法为依据,提取各地产当归根中的挥发油并进行含量对比;采用乙醇浸提,结合加热回流提取各地当归根中的总黄酮;采用NaNO₂-AlCl₃比色法,以芦丁为对照品,对当归中总黄酮进行含量测定。采取浸泡、超声、过滤、烘干、溶解、浓缩得乙醇提取物,以总抗氧化能力及对DPPH自由基、超氧阴离子和羟基自由基的清除能力综合评价各地产当归的体外抗氧化活性。结果：与道地药材岷县当归根比较,西藏昌都、那曲当归根挥发油含量均较低(***P<0.001),且未达到“药典”标准要求;然而,西藏昌都、那曲当归根总黄酮含量分别为3.076 mg·g^-1、2.681 mg·g^-1,与岷县当归根中总黄酮含量1.715 mg·g^-1比较,含量显著高且差异具有统计学意义(***P<0.001)。与岷县当归根比,西藏昌都...     

海拔梯度对当归光合产物积累与分配格局的影响

目的:研究甘肃岷县不同海拔对当归光合产物积累和分配格局的影响,为扩大当归适宜生态区提供理论参考。方法:采用田间试验,研究2 300 m～2 800 m海拔范围内不同梯度下当归光合产物积累规律和分配格局。结果:9月25日前,光合产物积累总量随海拔升高而降低,依次为176 g/株、166 g/株和128 g/株,且低海拔和中海拔显著高于高海拔(P0.05),9月25日后,中海拔分别比低海拔和高海拔高13.9%和11.1%,差异显著(P0.05);当归光合产物积累速率也存在明显海拔效应,高海拔(46.7%)和中海拔(43.7%)间无显著差异,但均显著高于低海拔(33.1%);干物质向根中分配比例超过30%的时间不同,高海拔较其他2个海拔提前10 d,并且后期分配比例(约54%)高于其他2个海拔(49.8%～50.9%),这为采收期当归产量形成奠定基础;药材产量从高到底依次为:中海拔(28.4 g/plant)、高海拔(26.6 g/plant)和低海拔(21.8 g/plant),中海拔和高海拔分别比低海拔高30.2%和22.2%,差异显著(P0.05),这与光合产物积累速率结果一致。结论:海拔通过改变光合产物分配格局和干物质积累速率而影响产量形成,故适当升高种植海拔有利于光合产物向根分配,进而提高当归药材产量,这为产区扩大当归适宜生态区提供理论参考。     

AM真菌对滇重楼光合参数及生理指标的影响

通过室温盆栽接种试验与室内分析相结合的方法,观察灭菌土壤条件下接种28种丛枝菌根(AM)真菌对滇重楼光合参数和生理生化指标的影响。结果表明,滇重楼与AM真菌形成了良好的共生关系。AM真菌诱导处理后,不同AM真菌对滇重楼叶片的光合参数和生理生化指标的影响有所差异,AM真菌的施用能够提高滇重楼叶肉细胞的光合作用强度,提高滇重楼叶片可溶性蛋白和可溶性糖含量及保护酶活性,增强了滇重楼抗不利环境的能力,促进了滇重楼的生长,而滇重楼与AM真菌之间存在一定的相互选择性。从综合接种效应来看,瑚状盾巨囊霉Racocetra coralloidea、美丽盾巨孢囊霉Scutellospora calospora、近明球囊霉Claroideoglomus claroideum、透明盾巨孢囊霉S. pellucida和明球囊霉Rhizophagus clarus是最适宜滇重楼大田栽培时推广应用的优良备选菌株。     

不同海拔育苓对川芎出芽及生长参数的影响

目的 研究不同海拔育苓对川芎出芽率及生长参数的影响,为道地产区生产模式提供理论依据.方法 通过田间试验,统计分析了川芎的出芽率和生长参数.结果 高海拔育苓使川芎表现出较好的发芽和生长特点.来源于海拔1190m苓种的川芎出芽率最高,幼苗最高及其冠幅面积最大;同时,高海拔来源苓种川芎成株在生长前期株高较高、节间距较大、分株数和节盘数也较多;生长后期,除了单株根茎干重较重和二次茎叶发生时的主茎直径较小以外,不同海拔来源苓种的川芎其它生长参数之间差别不显著.结论 高海拔育苓有利于川芎出芽率的提高、幼苗建植及其坝上生长,进而增加川芎单株根茎重量.     

遮阴对濒危药用植物毛黄堇叶片生理特性的影响

目的:找到合理有效的光照条件,为毛黄堇人工种植提供参考。方法:以1年生毛黄堇为试验材料,设置自然光(CK)和25%、50%、75%遮阴4个处理,通过测定和分析不同处理条件下毛黄堇叶片生理特征、光合特征、叶片形态结构等指标,探讨遮阴对毛黄堇生长和光合作用产生的影响。结果:25%遮阴处理可显著提高毛黄堇的净光合速率(P<0.05),75%遮阴处理则起抑制作用;遮阴对毛黄堇光合色素含量有显著影响,光合色素含量均随遮阴度增加呈先升高后降低的趋势,在50%遮阴处理条件下达到最大值,而在全光照下含量最低;25%遮阴处理可显著增加毛黄堇叶片宽度、羽片宽及叶面积(P<0.05);药材单株产量以25%遮阴处理最高,较对照组增产56.34%。结论:毛黄堇具有一定的耐阴性,在25%遮阴的条件下生长较好,遮阴过度或无遮阴均会抑制该植物的生长。     

4种钩藤植物光合生理特性与药材产量相关性研究

以华钩藤(HGT)、毛钩藤(MGT)、剑河钩藤(JHGT)以及钩藤(GT)为研究对象,开展了不同钩藤生长旺盛期的光合生理生态特征以及与药材产量相关性研究。结果表明钩藤净光合速率(Pn)日变化呈单峰曲线,不存在"光合午休"现象,为典型的阳生植物,钩藤光合生理生态因子及药材产量之间都存在着不同程度的相关关系,Pn,Tl,Gs3种因子与药材产量M呈现极显著相关性,是影响钩藤生长的最主要因素。     

当归的形态变化特征与物质积累进程

目的 通过研究当归成药期的形态变化特征及物质积累进程,为当归的规范化种植提供参考。方法 以当归为材料进行田间试验,定期取样并测定茎叶性状,根部性状,根部浸出物、挥发油、有机酸、多糖、阿魏酸和Z-藁本内酯质量分数等。结果 株高、叶数和叶鲜/干质量在成药期呈先升高后降低的趋势,根长、根粗和根鲜/干质量在成药期呈升高的趋势,浸出物、挥发油、有机酸、多糖、阿魏酸和Z-藁本内酯的质量分数和总量在成药期均呈升高的趋势。结论 茎叶生物量的积累进程快于根部生物量,且浸出物、挥发油、有机酸、多糖、阿魏酸和Z-藁本内酯的积累进程从属于根部生物量。     

基于ISSR的甘肃不同产区栽培当归遗传多样性研究

目的研究甘肃不同产区栽培当归的遗传多样性。方法应用ISSR分子标记技术对甘肃省41个居群的栽培当归样本进行分析,利用Popgene 32软件分析Nei’s基因多样性指数(H)等遗传信息参数,应用Ntsys软件构建亲缘关系UPGMA聚类图。结果 8条引物共检测到154个位点,其中多态性位点119个,多态位点百分率(PPB)为77.27%。栽培当归居群间的H为0.222 9,Shannon’s多样性信息指数(I)为0.337 4,种群间基因分化系数(Gst)为0.683 9,基因流(Nm)为0.2311,遗传距离变化范围0.042 9~0.327 8。结论甘肃栽培当归遗传多样性在物种水平上较高;居群间遗传多样性水平明显高于居群内;居群间遗传分化程度大,且基本无基因交流。     

当归DXR基因保守区克隆和组织特异性表达分析

目的 克隆当归Angelica sinensis 1-脱氧-D-木酮糖-5-磷酸还原异构酶（DXR）编码基因部分保守区序列,分析DXR基因在当归根、茎、叶中的特异性表达。方法 根据已克隆的植物DXR保守序列设计一对简并引物,以当归叶片总RNA为模板,采用RT-PCR方法扩增出DXR片段并连接到pGEM-T Easy载体上,转化大肠杆菌菌株Escherichia coli DH5α,阳性克隆经PCR检测后测序。运用RT-qPCR方法,以当归肌动蛋白基因Actin为内参基因,检测DXR在当归不同组织中的表达量。结果 得到一段564 bp的DXR基因序列,并在GenBank注册（登录号：KJ000259）。序列分析表明,该片段编码187个氨基酸,与GenBank中注册的海岛棉Gossypium barbadense等6个物种的DXR核苷酸序列同源性和氨基酸序列同源性均在80%以上;DXR在叶中表达量最高,相对表达量分别是茎和根组织中的2.5倍和3.2倍（P<0.01）。结论 本研究首次从当归中克隆出了DXR部分保守区序列,并揭示了DXR在不同组织中的差异表达,为有效利用该基因奠定前期工作基础。     

基于一测多评法的当归药材质量控制研究

目的 建立一测多评法（quantitative analysis of multi-components by a single marker，QAMS）同时测定当归中阿魏酸、洋川芎内酯I、洋川芎内酯H、阿魏酸松柏酯、藁本内酯和丁烯基苯酞的含量。方法 采用Waters X-Select CSH色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），以0.085%磷酸-水溶液（A）-乙腈（B）为流动相，梯度洗脱，体积流量1.0 mL/min，柱温40 ℃，检测波长265 nm。结果 在线性范围内各成分线性良好（R²＞0.999）。以藁本内酯为内标，阿魏酸、洋川芎内酯I、洋川芎内酯H、阿魏酸松柏酯和丁烯基苯酞的相对校正因子分别为1.073 4、0.564 8、0.468 1、0.926 2、1.083 5；同时采用外标法测定这6个成分的含量，将2种方法进行分析比较，结果没有明显差异。结论 建立了当归药材中阿魏酸、洋川芎内酯I、洋川芎内酯H、阿魏酸松柏酯、藁本内酯和丁烯基苯酞6个成分的QAMS法，该法可用于当归的质量控制。     

当归肌动蛋白基因片段的克隆及序列分析

目的 对当归肌动蛋白(Actin)基因进行克隆及序列分析.方法 根据已经克隆的植物Actin基因的保守序列设计一对简并性引物,以当归根部总RNA为模板,采用RT-PCR方法扩增Actin基因片段并连接到pMD19-T载体上,阳性克隆经PCR检测后进行测序.结果 得到一段598 bp的序列,序列分析表明,该片段编码198个氨基酸,与高等植物Actin基因核苷酸序列同源性在83％以上,与其他肌动蛋白氨基酸序列同源性达94％以上.结论 首次从当归中克隆出了Actin基因,为有效利用该基因奠定了基础.     

UPLC指纹图谱结合化学计量学方法比较当归和欧当归药材的成分

目的 建立当归Angelica sinensis和欧当归Levisticum officinal药材的指纹图谱,结合化学计量学方法寻找二者的成分差异,从而为建立欧当归掺伪当归的鉴别方法提供依据。方法 采用UPLC法建立指纹图谱,色谱柱为Waters CortecsT3柱(100mm×2.1mm,1.6μm);流动相为0.1%甲酸乙腈溶液-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱;体积流量为0.4mL/min;柱温35℃;检测波长为210nm。采用相似度评价、主成分分析(principal component analysis,PCA)和层次聚类分析(hierarchical cluster analysis,HCA)对2种药材的指纹图谱进行评价,寻找2者的成分差异。采用UPLC-MS/MS及NMR波谱等技术对主要差异性成分进行鉴定。结果 从当归和欧当归指纹图谱中分别识别出23个和19个共有峰,与当归指纹图谱共有模式相比,当归样品组内有3批样品相似度较低,为0.59~0.80,其余样品相似度均大于0.99,而欧当归与之相比,相似度在0.53~0.94,且组内差异较大。PCA和HCA结果显示,当归和欧当归可明显分为2组,对区分贡献较大的色谱峰有6个,鉴定为色氨酸、阿魏酸、E-藁本内酯、欧当归内酯A异构体、绿原酸和法卡林二醇,其中后2种成分在欧当归中含量较高,其余成分在当归中含量较高。结论 建立的UPLC指纹图谱结合化学计量学评价方法,简便可行,可有效区分当归和欧当归并揭示其差异性成分,为当归的质量控制及掺伪欧当归鉴别方法<建立提供依据。同时首次从欧当归中分离得到法卡林二醇,该化合物为欧当归区别于当归的主要成分。     

当归咖啡酸-O-甲基转移酶基因克隆和序列分析

目的克隆当归Angelica sinensis咖啡酸-O-甲基转移酶(caffeic acid O-methyltransferases,COMT)编码基因全长c DNA,并对序列进行生物信息学分析。方法提取当归叶片总RNA为c DNA合成模板,利用同源克隆结合c DNA末端快速扩增(RACE)技术克隆当归COMT全长c DNA,并利用NCBI、Ex PASy网站上的Blast N、Blast P、ORF Finder、Compute PI/Mw、Prot Scale、PROSITE、SWISS-MODEL等序列在线分析工具和MEGA、DNAMAN生物信息学软件对序列进行分析。结果获得COMT全长c DNA序列,并在Gen Bank注册(登录号KP188587)。序列分析表明,克隆的c DNA全长为1 436 bp,其中包括5’-UTR(76 bp)和3’-UTR(362 bp),含有1个1 098 bp的完整开放阅读框(opening reading frame,ORF),编码365个氨基酸的多肽链;预测蛋白质相对分子质量为40 230,理论等电点(p I)为5.43;无信号肽,具有典型的II型氧甲基转移酶结构域SAM_OMT_II。结论首次克隆当归COMT基因全长c DNA,为当归COMT基因功能研究和当归阿魏酸生物合成与调控的机制研究奠定基础。     

基于生物量、活性物质积累和抗氧化能力的当归高海拔种植区域选择

目的以根茎生物量、活性物质含量以及抗氧化能力为指标,选择适宜提高当归品质的高海拔种植区域。方法在严格控制种质、水分和土壤养分的条件下,以不同海拔(2 100、2 500和2 900 m)2年生当归根茎为材料,分别对干质量、活性物质含量以及抗氧化能力进行测定与分析。结果高海拔虽不能促进当归根茎生物量,却显著提高了活性物质的积累量和抗氧化能力;以单株积累量计算,2 900 m未抽薹当归根茎中阿魏酸、可溶性糖、酚和黄酮类含量分别为2 100 m植株的2.06、1.13、1.34和1.15倍;体外抗氧化能力也随海拔升高逐渐增加。综合分析表明,在2 100～2 900 m海拔内,未抽薹当归根茎中活性物质的总积累量(干质量和单株)均随海拔升高逐渐增加。结论提升当归种植海拔高度可显著提高根茎活性物质量;活性物质生物合成与积累受到低温和光照的综合调控。该研究结果将为提高当归产量和品质以及大面积种植栽培提供理论基础与依据。     

甘肃产当归生态适宜性研究

目的研究甘肃省当归Angelica sinensis的生态适宜性,指导甘肃产当归的合理栽培。方法通过走访和实地调查,从甘肃当归栽培县区采集不同分布地点的样品共计1 545份,使用GPS获取每个采样点的经度、纬度、海拔等相关地理信息,结合全国生态环境因子数据,利用Maxent模型和ArcGIS软件的空间分析功能进行分析。结果当归分布适宜度较高的区域在甘肃省东南部。影响当归适宜性分布的主要生态因子为海拔高度、3月份降雨量、5月份降雨量、最湿月降雨量、12月份降雨量、土壤酸碱度。结论研究结果与当归多生长于海拔2 000～3 000 m的高寒山区及高原平坦牧场地带,喜气候凉爽,土壤水分适中,微酸性至中性肥沃疏松棕褐沙壤土基本一致,可为甘肃省当归栽培区域的合理分布提供科学依据。