β-细辛醚的药代及药理作用研究进展

天南星科植物石菖蒲（Acorus tatarinowii Sehott）气味芳香,具有开窍豁痰、醒神益智、化湿和胃等功效,临床上多用于湿浊或痰浊蒙蔽心窍之神昏谵语。β-细辛醚是石菖蒲的主要活性成分之一,是石菖蒲挥发油中的六个特征成分之一,近些年来有关β-细辛醚的研究报道很多,本文对其药代动力学、药理学等方面的研究综述如下。     

罗哌卡因对骨关节炎疼痛大鼠炎症反应及PKA/CREB通路的影响

目的：探讨罗哌卡因对骨关节炎（OA）疼痛大鼠炎症反应及蛋白激酶A(PKA)/cAMP反应元件结合蛋白（CREB）通路的影响。方法：大鼠随机分为假手术组、OA组（建模）及罗哌卡因低、中、高剂量组（建模+腹腔注射0.5、1、2mg/kg罗哌卡因）,每组16只,切断前交叉韧带建模2周后进行给药,给药两周。测定模型复制前、模型复制2周、给药2周时大鼠的压痛阈值,酶联免疫（ELISA）法检测血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平,实时荧光定量PCR法测定软骨组织IL-1β、IL-6、TNF-α、PKA、CREB mRNA表达水平,Western Blot法测定软骨组织p-PKA/PKA、p-CREB/CREB水平,苏木精-伊红染色观察软骨组织病变。结果：给药2周,与假手术组相比,OA组大鼠压痛阈值显著降低（P<0.05）,血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平及软骨组织中IL-1β、IL-6、TNF-α、PKA、CREB mRNA表达水平、p-PKA/PKA、p-CREB/CREB蛋白表达水平显著升高（P<0.05）,软骨组织出现明显的病变现象;与OA组相比,罗哌卡因低、中、高剂...     

石菖蒲有效部位中α-细辛醚、β-细辛醚的含量测定

目的建立石菖蒲有效部位中α-细辛醚、β-细辛醚的含量测定方法。方法HPLC法:采用翡纳米科技kromasil ODS C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μL),流动相为甲醇-水(56:44),流速: 1.0 mL／min,检测波长:257 nm。结果β-细辛醚平均回收率为98.57％,RSD=0.35％;α-细辛醚平均回收率为99.75％,RSD=1.30％。结论所建立的方法简便、准确,可作为石菖蒲有效部位的质量控制方法。     

高效液相色谱法测定通塞益脑口服液中α-细辛醚和β-细辛醚的含量

目的：建立通塞益脑口服液中α-细辛醚和β-细辛醚的含量测定方法,为生产质量提供保障。方法采用高效液相色谱法测定,色谱柱为Lichrospher-C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为甲醇-0.05%磷酸溶液（54：46）,流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,检测波长为257 nm。结果α-细辛醚在1.248~6.240μg/mL范围内有良好的线性关系,Y =85526X-1.0581（r=0.9999）,β-细辛醚在2.632~13.159 mg/mL范围内有良好的线性关系,Y =41727X-0.0433（r=0.9999）,平均回收率分别为99.07%、101.94%,RSD分别为2.15%、2.83%（n=6）。结论该方法准确易行,便于通塞盖脑口服液的质量控制。     

β-细辛醚对APPswe/PS1dE9双转基因小鼠脑组织中差异蛋白表达的影响

目的 观察β-细辛醚对APPswe/ PS1dE9双转基因小鼠脑组织中差异蛋白表达的调节作用,探讨其对阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)的治疗作用机制.方法 实验动物分为正常对照组(C57BL/6J小鼠)、模型组(APPswe/ PS1dE9小鼠)和β-细辛醚治疗组(APPswe/PS1dE9小鼠),每组10只.β-细辛醚治疗组用灌胃方法给药,正常对照组和模型组给予等量生理盐水,历时90 d.用Morris水迷宫行为学方法测试小鼠学习记忆能力,用免疫组织化学方法检测小鼠脑组织中β-淀粉样前体蛋白(APP)的表达.用同J位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)技术对小鼠脑组织进行蛋白质组学分析,用蛋白质印迹法鉴定差异蛋白H2A、H2B的表达.结果 与模型组小鼠比较,经β-细辛醚治疗后,小鼠的逃避潜伏期和第1次穿越平台时间缩短(P＜0.05),平台穿越次数增多(P＜0.05),APP的表达减少(P＜0.05),差异蛋白组蛋白H2A 1-H、H2B 2-E和H2B 1-F/J/L的表达水平下降(P＜0.05).结论 β-细辛醚能够介入到组蛋白的修饰过程而起到治疗作用,这可能是其改善β-淀粉样肽毒性所致学习记忆能力下降的机制之一.     

海马神经元无镁致痫性损伤对CREB磷酸化水平的影响

目的：观察原代培养的海马神经元经无镁人工脑脊液诱发癫痫样放电后,cAMP反应元件结合蛋白（cAMP response-element binding protein,CREB）磷酸化表达水平的变化。方法：将所培养的神经元随机分成癫痫组和对照组,癫痫组中的神经元培养至第10天时,经无镁人工脑脊液（artificial cerebrospinal fluid,ACSF）处理3 h建立癫痫样放电模型,对照组中的神经元培养至第10天时,使用正常人工脑脊液处理3 h。使用Western blot检测p-CREB和β-actin的表达,免疫荧光双重标记磷酸化CREB（p-CREB）和神经元核抗原（neuronal nuclei,NeuN）的表达。结果：Western blot显示p-CREB水平在癫痫样放电后2 h即较对照组增强且在6 h达到高峰,在12 h和24 h都维持在增强水平,差异皆有统计学意义（P＜0.01）。取癫痫样放电后6 h的神经元行免疫荧光检测,其荧光强度绝对值较对照组明显增强,差异有统计学意义（P＜0.01）。结论：p-CREB水平在海马神经元无镁致痫性损伤后增强,可能在癫痫样放电中起到重要作用。     

β-细辛醚及石菖蒲挥发油中β-细辛醚在家兔体内的药代动力学

目的:研究β-细辛醚及石菖蒲挥发油中β-细辛醚的药物代谢动力学.方法:采用气相色谱法测定β-细辛醚的血药浓度,色谱柱:HP-35毛细管气相色谱柱;程序升温:起始温度为30℃,6℃/min升至220℃,保持5 min;进样口温度250℃;检测器温度320℃;进样量2.0 μL;无分流进样;溶剂:甲醇;载气:氦气;柱头压:5.5×104 Pa;内标物:α-萘酚.结果:建立了用气相色谱法测定β-细辛醚血药浓度的方法,线性方程:Y=0.01889ρ 1.755×10-3(n=6,r=0.9999),线性范围:0.04～40.00mg/L.兔全血中最低检测浓度为:0.04mg/L. β-细辛醚灌胃ig后,在兔体内符合一级吸收二室模型,T1/2(α)为7.5 min,T1/2(β)为69.6 min.家兔灌胃石菖蒲挥发油后,β-细辛醚在体内的药时过程为线性动力学过程,同样符合一级吸收二室模型,T1/2(α)为18.3 min,T1/2(β)为114.5 min.结论:本实验的研究结果为中药石菖蒲的合理用药以及进一步开发石菖蒲新制剂提供了参考依据,同时,也为中药材中挥发油类有效成分的药代动力学研究提供了可供借鉴的方法.     

α-细辛醚、β-细辛醚改善Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤及机制

目的：探究α-细辛醚、β-细辛醚对β淀粉样蛋白活性片段Aβ_25-35诱导的PC12细胞损伤模型的保护作用及相关作用机制。方法：采用Aβ_25-35诱导PC12细胞建立Aβ毒性损伤细胞模型。将PC12细胞分为空白对照组、模型对照组、α-细辛醚组（0.5、1.0、1.5?μg/mL）、β-细辛醚组（6.3、12.5、25.0?μg/mL）、血管活性肠肽（VIP）组,并设VIP拮抗剂对照。采用细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡率;酶联免疫吸附试验检测炎症因子白介素（IL）-1、IL-10、肿瘤坏死因子（TNF）-α,氧化因子诱生型一氧化氮合酶（iNOS）、一氧化氮（NO）和凋亡因子caspase-3、p53水平;蛋白质印迹法检测细胞c-Jun氨基端激酶（JNK）、p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）蛋白表达。结果：与模型对照组比较,α-细辛醚组、β-细辛醚组和VIP组细胞存活率增加,细胞凋亡率下降,凋亡因子caspase-3、p53和炎症因子IL-1、TNF-α水平下降,IL-10水平升高,氧化因子iNOS和NO水平下降,c-Jun氨基端激酶（JNK）、p38MAPK蛋白表达减少（均P<0.05）。VIP拮抗剂干预后,β-细辛醚组细胞存活率下降,细胞凋亡率增加,凋亡因子caspase-3、p53和炎症因子IL-1、TNF-α水平升高,IL-10水平下降,氧化因子iNOS和NO水平升高,JNK、p38MAPK蛋白表达增加（均P<0.05）;α-细辛醚组无显著变化（均P>0.05）。结论：α-细辛醚、β-细辛醚对Aβ_25-35诱导的PC12细胞损伤模型具有保护作用,β-细辛醚可通过促进VIP的分泌,调控JNK/MAPK通路从而抑制炎症因子、氧化因子水平,改善PC12细胞凋亡;α-细辛醚作用机制与VIP分泌水平无明显联系。     

CREB信号通路在神经系统疾病中的调控作用及机制

神经系统疾病由于其发病机制的复杂性已成为威胁人类健康的主要原因之一，给社会和患者家庭带来了沉重的经济负担。至今，人们对绝大部分神经系统疾病的病因及发病机制尚未得以完全阐述清楚。因此，神经系统疾病相关蛋白分子的研究对疾病的诊断和治疗就显得尤为重要。cAMP应答元件结合蛋白(cAMP response element binding protein,CREB)是细胞内cAMP变化的转录转导因子，其主要功能是调节基因的转录和蛋白质的合成。CREB作为一种重要的细胞核内调控因子，通过自身的磷酸化和去磷酸化作用实现调节转录的功能。目前，已有大量的研究表明CREB在神经系统如突触的可塑性、学习与记忆及早期脑损伤等方面都具有重要的调节作用。CREB在神经系统中的作用是作为许多信号通路的终止与交汇点，其调控的上下有信号分子及其靶基因和CREB一起参与了神经干细胞的增殖、细胞周期调控、神经元诱导分化、学习记忆等正常生理活动。这使得CREB信号通路相关的分子成为较受关注的神经系统疾病潜在的药物干预靶点。本文概述了CREB结构及其转录因子家族、CREB相关信号通路在神经系统中的调节机制及CREB在记忆障碍、癫痫发作、脑缺血再灌注损伤、出血性脑血管病、酒精成瘾、帕金森病等多种神经系统疾病中的调节作用，以期为理解神经系统疾病的发病机制和临床治疗靶点的选择提供新的思路。      

定志小丸有效成分中人参皂苷Rb3联合β-细辛醚对血管性痴呆模型小鼠作用研究

目的 研究定志小丸有效成分中人参皂苷Rb3联合β-细辛醚对血管性痴呆模型小鼠的作用.方法 采用四血管阻断法建立血管性痴呆小鼠模型后,随机分为模型组、人参皂苷Rb3组(10 mg/kg)、β-细辛醚组(10 mg/kg)、人参皂苷Rb3联合β-细辛醚组(10 mg/kg +10 mg/kg)、盐酸多奈哌齐组(1 mg/k...     

石菖蒲中α、β-细辛醚含量的测定

Grass leaved Sweetflag (Shi chang pu),a traditional Chinese drug, is dried rhizome of Acorus tatarinowii Schott. and the main active components are αand β asarone.In order to control the interior quality of the Grass leaved Sweetflag, the HPLC method was built to determine the Contents ofαand β asarone in Grass leaved Sweetflag. The method was superior to the GS/MS method.     

石菖蒲挥发油β-细辛醚对支气管哮喘的影响

【目的】观察石菖蒲挥发油β-细辛醚喷雾给药对支气管哮喘模型豚鼠的影响。【方法】豚鼠30只,随机分为模型组、氨茶碱组和β-细辛醚组,各组豚鼠喷雾给药7 d后,以组织胺(His)和乙酰胆碱(Ach)喷雾复制哮喘模型,观察药物对模型豚鼠引喘潜伏期和跌倒潜伏期的影响;取豚鼠气管,置克—亨氏液浴槽内,观察药物对His和Ach造模后,离体气管平滑肌张力的影响;豚鼠30只,分组同前,先以40 g/L卵蛋白(OVA)和Al(OH)3致敏,连续喷雾给药7 d后,再以OVA喷雾引喘,观察各药物对模型豚鼠支气管和肺组织中肥大细胞脱颗粒数的影响。【结果】β-细辛醚可延长His和Ach引喘的模型豚鼠的哮喘发作潜伏期和跌倒潜伏期;拮抗因His和Ach所致的离体支气管平滑肌痉挛;抑制由OVA和Al(OH)3引喘的模型豚鼠的肥大细胞脱颗粒,与模型组比较均有显著性差异(P<0.05或P<0.01或P<0.001),与氨茶碱的作用相仿。【结论】β-细辛醚具有一定的平喘和抗过敏作用。     

β-细辛醚对抑郁模型大鼠海马CA3区超微结构的改变及脑组织ERK蛋白表达的影响

目的：探讨β-细辛醚对抑郁模型大鼠海马CA3区超微结构及脑组织ERK蛋白表达的影响及干预作用。方法：选取60只4~5月龄SD雄性大鼠随机分为正常对照组、模型组、氟西汀组和β-细辛醚组,每组15只。采用慢性轻度不可预见性应激制作大鼠抑郁模型,造模第2天开始,氟西汀组和β-细辛醚组给予氟西汀和石菖蒲干预,于实验第1、7、14、21天,分别进行体重、糖水偏爱度检测和敞箱实验,对大鼠行为学改变进行评定。采用电镜技术观察大鼠大脑组织海马CA3区超微结构的改变,采用免疫组织化学染色和计算机图像分析技术测定检测ERK蛋白阳性目标积分光密度及其表达的变化。结果：电镜观察结果显示：模型组大鼠海马神经元凋亡增加,β-细辛醚能改善大鼠海马病理改变;免疫组化结果显示：与模型组比较,氟西汀组和β-细辛醚组大鼠行为学指标显著改善,海马区ERK蛋白表达增强,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：β-细辛醚可显著改善抑郁模型大鼠的抑郁症状,其作用机制可能与增强ERK蛋白表达有关。     

β-细辛醚对阿尔茨海默病大鼠海马神经元突触可塑性的影响

目的 探讨石菖蒲挥发油主要成分β-细辛醚对阿尔茨海默病(AD)大鼠海马神经元突触可塑性的影响.方法 以雄性Sprague-Dawley大鼠为研究对象,建立AD动物模型,用不同剂量β-细辛醚[12.5、25、50 mg/(kg·d)](分别为β-细辛醚低、中、高剂量组),连续灌胃4周;生理盐水组予等量生理盐水灌胃,正常对照组不予任何造模处理.Morris水迷宫检测动物的空间记忆能力;JC-1法检测海马组织线粒体膜电位;利用透射电镜观察海马CA1区突触数量及结构的变化;实时定量PCR比较各组生长相关蛋白43(GAP-43)、突触素(SYP)、突触后致密蛋白95(PSD-95) mRNA表达水平的差异.结果 水迷宫结果显示β-细辛醚高剂量组大鼠逃避潜伏期明显比生理盐水组要短.AD大鼠海马线粒体膜电位较正常对照组明显降低;而β-细辛醚处理组大鼠海马线粒体膜电位均增加,β-细辛醚高剂量组增加最明显.透射电镜结果证实β-细辛醚处理组大鼠海马CA1区突触数量增多,尤其是β-细辛醚高剂量组.PCR结果表明,与生理盐水组相比,β-细辛醚中、高剂量组中SYP mRNA表达量明显增加;而β-细辛醚处理组GAP-43和PSD-95 mRNA表达量明显降低,尤其是β-细辛醚高剂量组.结论 β-细辛醚通过影响海马神经元的突触可塑性,从而改善Aβ1-42导致的大鼠认知功能障碍.     

β-细辛醚对抑郁模型大鼠海马组织及Bax、Bcl-2的影响

目的:探讨β-细辛醚对抑郁模型大鼠海马组织及Bax、Bcl-2蛋白表达的影响。方法:经过敞箱实验选取得分相近的2~3个月龄SD大鼠80只,按随机数字表法分为四组,每组20只,结合孤养并给予慢性轻度不可预见刺激,复制抑郁模型,于造模成功第2天开始,分别给予氟西汀组和β-细辛醚组1.2 mg/(kg·d)氟西汀和25 mg/(kg·d)β-细辛醚灌胃,模型组与正常组给予等体积生理盐水。于第21天对大鼠处死取脑,免疫组织化学法检测Bax、Bcl-2蛋白相对含量。结果:模型组大鼠海马组织神经元数目减少,散在排列,细胞核发生固缩变形,CA1区,CA3区变化显著。与模型组比较,β-细辛醚组、氟西汀组Bax蛋白表达均显著降低(P0.01)。结论:β-细辛醚可以降低大鼠海马组织Bax蛋白表达,促进Bcl-2蛋白表达。     

复方地黄对快速老化痴呆小鼠脑组织凋亡机制的实验研究

目的研究复方地黄汤对快速老化痴呆小鼠大脑组织的PKA、CREB酶的改变影响,以及电镜下神经元形态变化,进一步探讨复方地黄汤对老年痴呆的作用途径,分析探讨其疗效作用。方法将快速老化小鼠随机分为3组:地黄组,治疗组,模型组。地黄组给予复方地黄混浊液2m l/d灌胃,治疗组给予脑复康水溶液2m l/d,500mg/kg体重(75片/300毫升纯净水),正常对照组采用健康昆明种小鼠,和模型组用生理盐水2m l/d灌胃,以上均为每天分次给药,灌胃3周,每隔3天休息1天。3周后,各组小鼠进行行为学测试,检测脑组织PKA、CREB酶的改变及电子显微镜观察神经元细胞形态的变化。结果地黄组和治疗组潜伏期明显缩短、在原平台停留时间延长,与模型组相比具有差异(P<0.05),说明治疗有效。PKA、CREB活性均明显增高与模型组比较(P<0.05),治疗组与实验组比较无显著差异(P>0.05)。超微结构复方地黄组海马神经元损伤轻微,大部分核膜清楚完整,细胞核染色质基本呈正常分布,核周间隙清晰可见。大部分细胞器清晰可见,神经纤维较丰富、排列有序,突触膜清晰,突触间隙不清,突触小泡较多。结论复方地黄能够提高快速老化小鼠的学习和记忆能力,并能改善PKA/CREB信号转导通路,促进突触结构发生,在形态结构上能减少脑组织神经元的损伤,维护突触的健全和完整。表明复方地黄汤能增强改善快速老化痴呆小鼠的PKA/CREB信号通路,具有治疗作用。     

β-细辛醚抗动脉硬化的体外作用观察

[目的]观察β-细辛醚对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导人脐静脉血管内皮细胞株ECV304损伤的保护作用及其对损伤条件培养基作用下的血管壁平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响.[方法]取生长稳定的ECV304细胞随机分成5组:正常对照组,模型组,β-细辛醚高、中、低剂量组.除正常组外,其他各组均加入25 μg/mL ox-LDL诱导损伤,给药组同时分别加入30、15、7.5 μg/mL的β-细辛醚.采用流式细胞术(FCM)测定ECV304细胞凋亡率、线粒体膜电位(MMP)及VSMC细胞周期各时相的DNA含量、增殖指数.[结果]ox-LDL损伤模型组ECV304细胞凋亡率显著增高,MMP降低,损伤条件培养基可促进VSMC增殖,与正常对照组比较有显著性差异(P<0.01或P<0.001).β-细辛醚能降低细胞凋亡率, 稳定MMP,抑制VSMC增殖,与模型组比较差异有显著性意叉(P<0.05或P<0.01或P<0.001).[结论]石菖蒲主要成分β-细辛醚的抗动脉硬化作用可能与其能有效抑制ox-LDL对ECV304的损伤作用,稳定MMP,减少细胞凋亡,抑制VSMC增殖有关.     

β-细辛醚对氧糖剥夺/复糖复氧诱导星形胶质细胞损伤的保护作用及机制研究

目的 探讨石菖蒲有效成分β-细辛醚对氧糖剥夺/复糖复氧损伤星形胶质细胞的保护作用及机制。方法 将星形胶质细胞分为5组：对照组、模型组、β-细辛醚(50μg/mL)组、核因子-E2相关因子2(Nrf2)抑制剂(ML385,5μmol/L)组、β-细辛醚(50μg/mL)+ML385(5μmol/L)组。CCK-8检测细胞存活率,流式细胞术测定细胞凋亡水平,以DCFH-DA法检测细胞内活性氧(ROS)水平,试剂盒检测细胞氧化应激因子[谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)]及炎症因子[核因子-κB亚基p65(NF-κB p65)、白细胞介素(IL)-1β和IL-18]的水平,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测Nrf2、血红素氧化酶-1(HO-1) mRNA的表达水平,Western blot检测Nrf2、醌氧化还原酶-1(NQO-1)、HO-1蛋白表达。结果 与对照组比较,模型组、ML385组及β-细辛醚+ML385组细胞凋亡率、LDH、ROS、MDA、NF-κB p56、IL-1β和IL-18水平明显升高,细胞存活率、N...     

海马CaMKⅣ/CREB信号通路在老龄大鼠围术期神经认知障碍中的作用

目的 探讨海马CaM KⅣ/CREB信号通路在老龄大鼠围术期神经认知障碍(perioperative neu-rocognitive disorders,PND)发生中的作用.方法 健康雄性SPF级SD大鼠30只,18～20月龄,体重600～750 g,采用随机数字表法将SD大鼠分为两组(n=15):对照组(C组)和实...     

cAMP/PKA/CREB信号通路及相关调控蛋白PDE-4和ERK对学习记忆的影响

近年来在动物身上进行了大量的学习记忆实验,均提示cAMP/PKA/CREB信号通路中的各蛋白均与学习记忆过程有关。环磷酸腺苷(cAMP)激活蛋白激酶A磷酸化并激活cAMP反应单元结合蛋白(CREB),后者是一种重要的核蛋白,其调节启动子中具有cAMP反应单元(CRE)的基因转录,这种核转录因子具有调节包括学习记忆在内的广泛的生物学功能。已有研究证实,PDE4和ERK为cAMP/PKA/CREB信号通路的调节蛋白。现对cAMP/PKA/CREB信号通路中的各蛋白及其调控蛋白PDE-4和ERK进行研究,阐述着三者之间的关系,并探讨其对学习记忆的影响。