胃癌金属蛋白酶组织抑制因子-1基因表达增强

近来基质金属蛋白酶（ matrix metalloproteinases, MMPs）在肿瘤浸润、转移中的作用日益受到人们的关注。金属蛋白酶组织抑制因子（ tissue inhibitors of metalloproteinase, TIMPs）可抑制 MMPs的活性,它们有无抑制肿瘤转移的作用,对此我们采用逆转录共扩增定量 PCR方法研究了胃癌金属蛋白酶组织抑制因子— 1基因表达的情况,现报告如下。 　　一、资料和方法 　　1．研究对象：本组 30例胃癌患者中男 23例,女 7例;平均年龄（ 50± 6）岁。内镜下取胃癌组织,经病理检查确诊;所有患者均行手术治疗。另选 19例慢性胃炎患者作为…     

食管癌患者金属蛋白酶组织抑制因子-1基因表达的研究

目的：了解金属蛋白酶组织抑制因子－１在食管癌中的作用。方法：３６例食管癌患者术中取及正常食管组织;提取组织总ＲＡＮ：用逆转录共扩增定量ＰＣＲ方法测定金属蛋白酶组织抑制因子－１（ＴＩＭＰ１）基因表达水平,结果：食管癌组织ＴＩＭＰ１基因表达水平明显高于正常食管组织。食管癌患者ＴＩＭＰ１基因表达水平与肿瘤大小吾显著负相关,与肿瘤组织学类型无关。结论：ＴＩＭＰ１在阻止食管癌的浸润、转移中可能起重要作用。     

肝癌金属蛋白酶组织抑制因子-1基因表达增强

近来 ,基质金属蛋白酶 (ＭＭＰｓ)在肿瘤浸润、转移中的作用日益受到人们的关注。金属蛋白酶组织抑制因子 (ＴＩＭＰｓ)可抑制ＭＭＰｓ的活性 ,其有无阻止肿瘤转移的作用 ,对此报道尚少。我们采用逆转录定量ＰＣＲ方法研究了原发性肝癌患者中ＴＩＭＰ1基因表达的情况 ,现报道如下。一、对象和方法1.研究对象 :原发性肝癌患者 33例 ,男 2 6例 ,女 7例 ,平均年龄 (5 3± 6 )岁。所有患者均于术中取癌组织及癌旁组织 ,迅速投入液氮 ,在标本留取 1周内行ＲＮＡ提取。术后病理检查结果示 33例均为肝细胞癌。癌旁组织中 2 8例为肝硬化组织 ,5例为…     

重型肝炎患者肝组织基质金属蛋白酶-1及其抑制因子-1 mRNA的表达

目的：观察重型肝炎患者基质金属蛋白酶－1（MMP－1）和金属蛋白酶组织抑制因子－1（TIMP－1）mRNA的表达以及胶原蛋白的沉积情况，从胶原降解的角度探讨重型肝炎致肝纤维化的机制。方法：重型肝炎肝组织标本20例，非肝病患者肝组织6例，用原位杂交法检测肝组织MMP－1和TIMP－1 mRNA-1 的表达，并作I、Ⅳ型胶原的免疫组化以及天狼红胶原染色。结果：与对照组比较，重型肝炎组的MMP－1 mRNA和TIMP－1 mRNA表达显著增加，肝组织胶原蛋白总含量和I、Ⅳ型胶原蛋白含量亦显著增加。肝组织胶原蛋白总含量和I、Ⅳ型胶原蛋白含量与MMP－1 mRNA表达无明显相关性，与TIMP－1 mRNA表达呈正相关。结论：重型肝炎患者肝纤维化的发生与金属蛋白酶抑制因子增加、抑制金属蛋白酶的活性、降低间质胶原蛋白的分解有关。     

逆转录定量PCR检测实验性肝纤维化组织中金属蛋白酶抑制因子-1的表达

肝纤维化是Ⅰ,Ⅲ型胶原为主的细胞外基质（ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｍａｔｒｉｘ,ＥＣＭ）成分过度沉积导致的病理性疾病．基质金属蛋白酶（ｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ,ＭＭＰｓ）是一族依赖Ｚｎ离子降解ＥＣＭ成分的水解蛋白．目前为止该家族肝内发现８个成员,它们的抑制因子１（ｔｉｓｓｕｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｏｆｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ１,ＴＩＭＰ１）可以抑制其活化和活性,因此,ＴＩＭＰ１与肝纤维化的发生发展紧密相关．我们应用大鼠ＣＣｌ４肝纤维化模型,通过逆转录定量ＰＣ…     

金属蛋白酶组织抑制因子-1、-2在子宫内膜异位症中的表达

金属蛋白酶抑制因子(TIMPs)是体内基质金属蛋白酶(MMPs)的天然特异性组织抑制剂，通过抑制MMPs的活性及其产生，调控细胞外基质(ECM)的合成和降解，在妊娠分娩、伤口愈合、肿瘤浸润与转移等一系列生理病理过程中发挥重要作用。子宫内膜异位症(EMT)虽是一种良性妇科疾病，但却具有     

免疫性肝纤维化中肝组织基质金属蛋白酶-1及其抑制因子-1的表达

正常肝脏细胞外基质的合成和溶解维持着动态平衡 ,基质金属蛋白酶 1(ＭＭＰ 1)及金属蛋白酶抑制因子 1(ＴＩＭＰ 1)起着重要的调节作用 ,当二者比例失调时 ,Ⅰ、Ⅲ型胶原降解减少而沉积[1,2 ] ,形成肝纤维化。我们应用ＥＬＩＳＡ方法在大鼠免疫性肝纤维化形成的不同时期同步测定ＭＭＰ 1、ＴＩＭＰ 1的蛋白表达 ,旨在进一步了解二者的动态变化及其作用。一、材料和方法1.主要试剂 :2 0 %人白蛋白 (ＨＳＡ ,ＡｒｍｏｕｒＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉ ｃａｌＣｏｍｐａｎｙ ,ＵＳＡ) ;ＭＭＰ 1及ＴＩＭＰ 1测定 (ＥＬＩＳＡ)试剂盒 (ＴＰＩＩｎＣ…     

反义金属蛋白酶组织抑制因子-1表达质粒对实验性肝纤维化的影响

目的　观察反义金属蛋白酶组织抑制因子 1(TIMP 1)表达质粒对实验性肝纤维化的影响。方法　运用重组DNA技术构建反义TIMP 1真核细胞表达质粒 ,经与糖化多聚赖氨酸偶联后 ,尾静脉注射将其导入猪血清诱导的免疫性大鼠肝纤维化模型体内 ;通过Northern印迹法、RT PCR、Western印迹法检测外源导入基因的表达 ,并通过肝组织间质胶原酶活性和羟脯氨酸测定 ,以及肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原免疫组织化学与VanGieson染色观察反义TIMP 1质粒对大鼠肝纤维化的影响。结果　外源导入基因可在肝组织中获得确切表达 ,其表达可增加间质胶原酶的活性 (P <0 .0 1) ,减少羟脯氨酸含量 (P <0 .0 1) ,促进Ⅰ、Ⅲ型胶原的降解 (P <0 .0 1) ,并促进肝脏病理形态一定程度的改善 (P <0 .0 1)。结论　反义TIMP 1表达质粒对肝纤维化有较好的改善作用。     

反义金属蛋白酶组织抑制因子—1表达质粒对实验性大鼠肝纤维 …

观察反义金属蛋白酶组织抑制因子－１（ＴＩＭＰ－１）表达质粒对实验性大鼠肝纤维化的影响。方法运用逆转录巢式和重组ＤＮＡ技术,构建大鼠反义ＴＩＭＰ－１真核细胞表达质粒,经脂质体包埋后,利用腹腔注射将其导入免疫性大鼠肝纤维化模型体内;通过ＲＴ－ＰＣＲ,Ⅰ、Ⅲ型胶原的免疫组化及Ｍａｓｓｏｎ胶原染色观察反义ＴＩＭＰ－１表达质粒对大鼠肝纤维化的影响。结果反义原的免疫组化以及     

秋水仙碱对肝纤维化大鼠肝脏基质金属蛋白酶—1及其抑制因 …

目的 观察秋水仙碱对纤维化肝脏基质金属蛋白酶－１（ＭＭＰ－１）、基质金属蛋白酶组织抑制因子－１（ＴＩＭＰ－１）表达的影响。从胶原降解的角度探讨秋水仙碱对肝纤维化有无逆转作用及可能存在的机制。方法 制备免疫性大鼠肝纤维化模型,并给予秋水仙碱治疗;通过ＲＴ－ＰＣＲ检测ＭＭＰ－１、ＴＰＭＰ－１的表达,并作Ⅰ、Ⅲ型胶原的免疫组化以及Ｍａｓｓｏｎ胶原染色。结果 发现秋水仙碱对肝纤维化大鼠ＭＭＰ－１的表达无明     

慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞基质金属蛋白酶-1及其抑制因子基因的表达

目的 比较外周血单个核细胞(PBMC)及自身血清中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)表达水平,探讨MMP-1及TIMP-1基因表达对肝纤维化的诊断价值.方法 实时荧光定量反转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)方法分别检测37例慢性乙型肝炎患者及20例健康对照者PBMC中MMP-1及TIMP-1 mRNA的表达水平,双抗体央心酶联免疫吸附方法检测血清MMP-1及TIMI-1水平;慢性乙型肝炎患者均行肝组织穿刺活检,行纤维化程度分期(S).组间比较采用多个独立样本非参数检验,并作Spearman相关性分析.结果 健康对照组PBMC中MMP-1 mRNA及TIMP-1 mRNA呈低水平表达,慢性乙型肝炎患者PBMC中MMP-1mRNA表达水平与健康对照组比较差异无统计学意义,而TIMP-1 mRNA表达水平显著高于健康对照组的(0.48±0.80)lg拷贝/μL,血清TIMP-1也高于健康对照组的(158.29±58.58)μg/L.随着慢性乙型肝炎肝纤维化程度加重,各期之间MMP-1 mRNA的表达水平及血清MMP-1水平比较差异无统计学意义(χ~2=8.960,P=0.111;χ~2=7.898,P=0.211);从S1～S4,TIMP-1 mRNA表达水平依次为(1.67±0.84)、(3.48±2.08)、(5.86±3.47)及(8.14±6.48)lg拷贝/μL,血清TIMP-1水平依次为(233.73±64.84)、(262.10μ71.12)、(301.15μ62.74)及(381.15±152.75)μg/L,各期之间TIMP-1mRNA表达水平及血清TIMP-1水平比较差异均有统计学意义(χ~2=14.290,P=0.002;χ~2=12.209,P=0.007).PBMC中TIMI-1 mRNA、血清TIMP-1与肝纤维化呈正相关(r=0.752.P<0.01;r=0.530,P=0.008).结论 PBMC中TIMP-1 mRNA表达水平及血清TIMP-1水平与肝脏纤维化程度密切相关.PBMC中TIMP-1 mRNA及血清TIMP-1可以作为诊断肝纤维化的新指标,尤其PBMC中TIMP-1 mRNA诊断价值最大.     

辛伐他汀对兔粥样硬化髂动脉基质金属蛋白酶组织抑制物-1表达的影响

目的　研究辛伐他汀对动脉粥样硬化兔髂动脉基质金属蛋白酶组织抑制物 1(TIMP 1)表达的影响。方法　 18只家兔分为正常对照组 (正常饮食 ,5只 )、基础对照组 (球囊和高脂饮食 ,7只 )和辛伐他汀治疗组 (球囊、高脂饮食和辛伐他汀 ,6只 )。球囊损伤后 4周处死 ,取一侧病变髂动脉做病理切片 ,取另一侧病变髂动脉抽提总RNA和总蛋白 ,分别应用半定量逆转录多聚酶链式反应 (RT PCR)和Western蛋白印迹法 (Westernblot)测定TIMP 1mRNA和蛋白质的表达。结果　辛伐他汀可以显著降低家兔血浆总胆固醇 ,抑制动脉粥样硬化的形成 ;增加动脉粥样硬化兔髂动脉组织TIMP 1的表达 ,正常对照组、基础对照组、辛伐他汀治疗组动脉壁TIMP 1mRNA的相对值分别为 1 5 7± 0 11,2 72± 0 10 ,3 33± 0 2 8,相互间有统计学差异 (P <0 0 5 ) ;正常对照组、基础对照组、辛伐他汀治疗组Westernblot检测结果分别为 2 72± 1 16 ,7 5 1± 1 4 4 ,16 90± 1 4 5 ,相互间有显著性差异 (P <0 0 0 0 1) ;免疫组化观察结果也提示TIMP 1的表达增加。结论　辛伐他汀可以显著增加动脉粥样硬化兔血管组织TIMP 1的表达 ,抑制动脉粥样硬化的形成。     

基质金属蛋白酶及组织抑制剂在肝癌中的表达及与预后的关系

目的：探讨基质金属蛋白酶（MMPs)及其组织抑制剂（TIMPs）在肝癌中的表达及其意义。方法：应用免疫组化、Northern印迹杂交及图像分析技术对人肝细胞癌（HCC）、肝癌细胞株7721、全反式维甲酸处理的7721细胞（RA－7721）和正常人肝细胞株L－02作MMP－1、2、9和TIMP－2的表达分析。结果;肝癌细胞浆内可表达MMP－1、2和9,但癌内阴性组5年生存率明显高于相应的阳性组（P＜0．05）。体外MMP－9mRNA在7721细胞表达明显高于RA－7721以及L－02细胞,而TIMP－2mRNA的表达与MMP－9相反,MMP－2mRNA在7721细胞中的表达仅略高于L－02细胞。结论：HCC组织内MMP－1和9的表达与患者的预后密切相关;癌细胞高表达MMP－9、低表达TIMP－2,可能是肝癌细胞浸润、转移的主要基础,而MMP-2并无重要作用。     

肝炎、肝硬化、肝癌及胃癌患者血清MMP—1、TIMP—1以及MMP—1／TIMP—1复合物的检测

目的 检测血清基质金属蛋白酶－1（MMP－1）、组织金属蛋白酶抑制剂－1（TIMP－1）及两者复合物（MMP－1／TIMP－1 com-plex）含量并评价其变化意义。方法 采用双抗体夹心式酶联免疫吸附法（ELISA）对10例健康对照、15例急性肝炎患者、15例慢性活动性肝炎患者;15例晚期肝硬化患者、15例肝癌手术患者、15例晚期肝癌患者以及10例胃癌入院手术患者进行检测。结果 与健康对照组相比,慢性活动对肝炎、晚期肝硬化以及晚期肝癌患者血清TIMP－1水平显著提高;慢性活动性肝炎及肝癌手术患者组血清MMP－1及MMP－1／TIMP－1复合物水平显著下降;急性肝炎及胃癌手术患者血清MMP－1、TIMP－1及MMP－1／TIMP－1复合物含量无显著变化。结论 在慢性活动性肝炎、晚期肝硬化以及肝癌患者存在严重的MMP－1和TIMP－1的失平衡,这种失平衡是这些患者肝脏细胞外基质净沉积的重要原因。MMP－1和TIMP－1在急性肝炎和胃癌患者血清含量总体变化不显著。     

干扰素γ对肝星状细胞-T6细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原等基因表达的影响

目的观察干扰素γ(IFN γ)对肝星状细胞(HSC)-T6细胞Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅲ型胶原(colⅢ)、基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP1)基因表达的影响。方法浓度0.1、1、10、102、103、104、2.5×105、5×105U/ml IFN γ作用于HSC-T6细胞48 h,采用四甲基偶氮唑盐比色法观察其对HSC-T6细胞生长指数的影响;以1、102、104U/ml IFN γ作用于HSC-T6细胞48 h,采用逆转录聚合酶链反应方法测定其对HSC-T6细胞Col Ⅰ、ColⅢ、TIMP1基因表达的影响。结果空白对照组ColⅠ、ColⅢ、TIMP1基因表达水平分别为2.86±0.21、2.00±0.23、3.90±0.81;1U/m1、102U/ml、104U/ml IFNγ作用于HSC-T6细胞,ColⅠ基因表达水平依次为1.00±0.11、0.42±0.12、0.33±0.12,与空白对照组比较, 差异有统计学意义;ColⅢ基因表达水平依次为1.09±0.1 5、0.52±0.14、0.43±0.18,与空白对照组比较, 差异有统计学意义;TIMP1基因表达水平依次为3.81±0.37、3.50±0.51、3.41±0.31,与空白对照组比较,差异无统计学意义。结论IFNγ明显抑制HSC-T6细胞colⅠ、ColⅢ基因表达水平,而对TIMP1基因表达水平无明显影响,从而可抑制Ⅰ、Ⅲ型胶原的合成,这可能是其抗纤维化的作用机制之一。     

Tissue inhibitor of metalloproteinases levels in patients with chronic heart failure: an independent predictor of mortality

BACKGROUND: Matrix metalloproteinases (MMP) and their tissue inhibitors (TIMP) are involved in cardiac remodelling. The prognostic utility of TIMP is unknown in chronic heart failure (CHF). AIMS: We investigated the association of plasma levels of soluble MMP-9 and TIMP-1 with clinical, laboratory and echocardiographic parameters and estimated their prognostic value in the prediction of all-cause death. METHODS: MMP-9, TIMP-1, tumour necrosis factor-alpha, and amino-terminal pro-brain natriuretic peptide were measured in 249 consecutively enrolled CHF patients and 74 healthy individuals. RESULTS: After adjustment for age, sex and creatinine, levels of TIMP-1 (1640 vs. 735 ng/ml, P<0.001) but not MMP-9 were elevated in CHF patients compared to controls. During a median follow-up period of 2.5 years, 66 patients (27%) died. In multivariable Cox regression models TIMP-1 but not MMP-9 emerged as an independent predictor of all-cause death (hazard ratio per tertile, 3.5; 95% confidence interval [CI], 2.2-5.1). In addition to the full set of univariately predictive clinical and serological markers, information on TIMP-1 significantly increased the area under the receiver operating characteristic curve from 0.77 (95% CI, 0.71-0.84) to 0.87 (95% CI, 0.82-0.92). CONCLUSION: In stable CHF patients, TIMP-1 but not MMP-9 is of independent and incremental value regarding the prediction of all-cause death.     

活血化淤中药治疗对脂肪性肝炎患者肝组织TIMP-1和TIMP-2表达的影响

目的探索活血化淤中药对脂肪肝肝纤维化发生的干预作用,尤其是对肝组织TIMP-1和TIMP-2蛋白表达的影响。方法用免疫组化法分别测定15例脂肪性肝炎患者治疗前后肝组织TIMP-1和TIMP-2蛋白的表达。结果活血化淤药物治疗后TIMP-1和TIMP-2表达水平明显低于治疗前。对照组肝组织TIMP-1、TIMP-2表达水平无明显变化。结论TIMP-1、TIMP-2与肝纤维化形成密切相关,活血化淤中药治疗对脂肪肝患者肝内TIMP-1和TIMP-2蛋白的表达有一定的抑制作用。