血管内皮细胞生长因子及其受体与白血病(续完)

(上接第4期) 张金巧[11]等应用免疫组化的方法检测28例初治的急性髓性白血病(AML)患者的骨髓活检标本治疗前后血管内皮生长因子(VEGF)及其受体Flt-1、KDR、微血管密度(MVD)的变化,并与对照组进行比较,发现初治AML患者骨髓病理组织中KDR、VEGF和MVD的表达高于对照组,VEGF及KDR与MVD呈正相关;化疗后完全缓解组骨髓组织的VEGF、KDR阳性率及MVD明显下降,治疗后未完全缓解组的VEGF、KDR阳性率及MVD与治疗前无显著性下降;并运用Kaplan-Meier分析发现治疗前VEGF阴性组的生存时间大于VEGF阳性组.认为VEGF/KDR信号传导通路在急性白血病血管新生中起主要作用,VEGF的表达与AML的预后有关.     

血管内皮细胞生长因子及其受体KDR、Flt1在急性髓系白血病中的表达及其意义

目的　分析血管内皮生长因子 (VEGF)及其受体KDR、Flt1在急性髓系白血病 (AML)中的表达和意义。方法　用RT PCR方法检测VEGF及其受体KDR、Flt1mRNA表达 ,ELISA法检测血浆中VEGF水平。结果　 13个髓系白血病细胞系VEGF、KDR及Flt1mRNA表达阳性率分别为 10 0 %、5 3 8%和 92 .3 %;39例治疗前AML患者有 32例检测了骨髓单个核细胞 (BMMNC)VEGF、KDR及Flt1mRNA的表达 ,其阳性例数分别为 2 1例 ( 6 5 .6 %)、1例 ( 3.1%)和 17例 ( 5 3 .1%) ,3名健康献髓者BMMNC及 2名健康人骨髓CD34 +细胞均不表达VEGF及其受体。 39例治疗前AML患者血浆VEGF水平为 ( 135 .3±87.9)ng/L ,较 15例治疗后获完全缓解 (CR)的AML患者 [( 80 .6± 36 .9)ng/L]及 12名正常对照 [( 80 .6± 33 .1)ng/L]明显升高 (P =0 .0 2 8,0 .0 0 7)。 39例患者中有 35例接受常规化疗 ,2个疗程后未达CR的15例患者血浆VEGF水平为 ( 188.2± 118.6 )ng/L ,明显高于 2个疗程内获CR的 2 0例患者血浆VEGF水平 [( 10 4.2± 30 .9)ng/L](P =0 .0 0 4)。结论　AML白血病细胞不同程度表达VEGF及其受体mRNA ,AML患者血浆VEGF水平升高 ,VEGF水平影响患者化疗的疗效。     

血管内皮细胞生长因子及其受体与白血病（续完）

(上接第4期)张金巧[11]等应用免疫组化的方法检测28例初治的急性髓性白血病(AML)患者的骨髓活检标本治疗前后血管内皮生长因子(VEGF)及其受体Flt-l、KDR、微血管密度(MVD)的变化,并与对照组进行比较,发现初治AML患者骨髓病理组织中KDR、VEGF和MVD的表达高于对照组,VEGF及KDR与M     

血管内皮细胞生长因子及其受体在正常核型急性髓系白血病中的表达及其意义

目的 分析血管内皮生长因子(VEGF)及其受体KDR、Flt1在正常核型急性髓系白血病(NC-AML)中的表达和意义.方法 用RT-PCR方法检测VEGF及其受体KDR、Flt1 mRNA表达,荧光定量PCR分析细胞中VEGF及其受体表达丰度.结果 45例NC-AML患者骨髓单核细胞(BMMNC)中,表达VEGF、KDR及Flt1 mRNA阳性的例数分别为42例(93.3%)、34例(75.6%)和37例(82.2%),而10名健康对照者经RT-PCR未检测到VEGF及其受体表达.筛选符合要求的标本进行荧光定量PCR检测,发现化疗前后细胞VEGF的表达存在显著性差异(P<0.05),化疗后获完全缓解的患者细胞VEGF表达水平仍较10名健康对照者升高(P<0.05),但其受体表达量与对照组比较未见显著性差异.结论 NC-AML白血病细胞不同程度表达VEGF及其受体,其中VEGF表达水平明显升高,通过对细胞VEGF表达水平的检测,对评估NC-AML白血病的进展、预测患者预后以及对微量残留白血病细胞的监测具有重要意义.     

急性髓系白血病患者血管内皮生长因子及其受体的表达

目的：探讨血管内皮生长因子（VEGF）及其受体KDR、FIt-1在急性髓系白血病（acute myeloid leukemia,AML）中的表达水平及与临床的关系。方法：采用ELISA法检测AML患者骨髓单个核细胞（BMMNC）培养上清液及血清VEGF的表达水平,免疫组化技术检测骨髓活检标本VEGF及受体KDR、FIt-1的表达。结果：（1）治疗前AML患者骨髓细胞VEGF的分泌量及血清VEGF表达水平大于对照组（P〈0.01）;治疗后完全缓解的患者血清VEGF含量低于治疗前（P〈0.01）。（2）AML患者BMMNC的VEGF、KDR、FIt-1的表达阳性率分别为75.0%、62.5%和20.8%,对照组MMNC不表达VEGF及其受体。结论：VEGF及其受体在AM L发病中起主要作用,VEGF的表达水平对AML的预后有一定的临床意义。     

白血病患者血管新生及相关因素研究

目的　观察白血病患者骨髓血管新生情况,分析血管新生相关因素内皮抑素(ES)、血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(VEGFR)在急、慢性白血病患者中的表达及意义。方法　应用血管性血友病因子(vWF)抗体标记免疫组化法观察骨髓血管新生情况,ELISA法测定血浆ES和VEGF水平,流式细胞术(FCM)分析新鲜分离的白血病细胞表面VEGFR表达。结果　26例初诊的急性白血病(AL)和 5例慢性粒细胞白血病(CML)患者骨髓微血管密度 (MVD)分别为 (20. 78±7. 75) /高倍镜视野(HP)和(28. 67±7. 32) /HP,较对照组 [ (9. 29±3. 53) /HP]明显增高 (P<0. 01),治疗后获缓解者骨髓MVD[AL缓解患者为(11. 33±5. 66) /HP,CML缓解患者为(17. 00±8. 04) /HP]较治疗前明显降低(P<0. 05和<0. 01),AL缓解组与对照组比较差异无统计学意义(P>0. 05)。AL和CML患者血浆ES、VEGF明显高于对照组(P值均<0. 05),化疗后获完全缓解(CR)的AL患者血浆ES和VEGF含量和CML CR患者的ES水平均降低至正常水平 (与对照组相比,P值均 >0. 05),但CML患者的VEGF水平仍高于正常对照(P<0. 01)。AL患者骨髓单个核细胞表面VEGFR均有不同程度的高表达,而 3例CML和 5例正常对照骨髓均为VEGFR低表达。结论　初诊白血病患者存在骨髓血管新生及血浆ES、VEGF水平增高,AL细胞不同程     

内皮细胞生长因子在急性髓性白血病诊断中的意义

目的 探讨血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达水平在急性髓性白血病(AML)患者诊疗中的临床意义.方法 采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测了50例AML患者血清VEGF水平.结果 检测结果显示,VEGF水平分别为对照组:(103.41±22.59)ng/L;初诊组:(504.62±221.55)ng/L;完全缓解组:(127.06±55.43)ng/L;在AML各型表达为,M1:(401.44±94.56)ng/L;M2:(422.51±112.44)ng/L;M3:(364.56±100.12)ng/L;M4 :(599.40±226.57)ng/L;M5:(616.58±301.41)ng/L.结论 VEGF在AML的发病中起重要作用,研究血液系统肿瘤的血管新生能有效指导临床治疗,抑制VEGF表达可能成为血液肿瘤治疗的一项新措施.     

节律性化疗对多发性骨髓瘤患者血管生成的影响

目的 探讨低剂量环磷酰胺联合泼尼松节律性化疗对多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓组织微血管密度(MVD)和外周血中血管内皮生长因子(VEGF)、血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)表达的影响.方法 54例难治或复发性MM患者给予低剂量环磷酰胺(50 mg/d) 联合泼尼松(15 mg/d)(CP方案) 持续口服.在治疗前和治疗后2、4、6个月分别取患者骨髓组织及外周血,应用免疫组织化学法分析患者的骨髓组织MVD,ELISA法检测外周血中VEGF和PDGF-BB表达水平.结果 在可评估的37例患者中,30例患者有效,有效率为81.08%.其余17例患者随访未达6个月或未能获得血清检测标本或失访.低剂量环磷酰胺联合泼尼松节律性化疗2、4、6个月后,有效组30例患者MVD计数分别为33.1±4.8/高倍视野(HP)、24.8±3.7/HP、19.7±2.1/HP;外周血VEGF水平分别为(394±57)、(268±32)、(217±20) ng/L;PDGF-BB水平分别为(304±31)、(274±31)、(196±22) ng/L.与治疗前相比,患者骨髓MVD和外周血VEGF、PDGF-BB表达水平显著降低(P\%值均<0.01).而无效组7例患者在化疗后2个月MVD为32.5±4.7/HP,外周血VEGF水平为(512±39) ng/L,PDGF-BB水平为(452±39) ng/L,与治疗前相比差异无统计学意义(P\%值均>0.05).结论 低剂量环磷酰胺联合泼尼松节律性化疗可明显降低MM患者骨髓组织MVD和血清VEGF、PDGF-BB表达水平.其在MM中的作用机制可能与抑制新生血管的生成有关.     

血液疾患骨髓微血管密度的研究

为了探讨血液系统疾病骨髓血管新生的状态及意义，采用改良的乙二醇-甲基丙烯酸酯(GMA)塑料包埋骨髓病理切片和免疫组织化学染色检测贫血、急性髓细胞白血病(AML)、急性淋巴细胞白血病(ALL)、慢性髓细胞白血病(CML)患者的骨髓微血管密度(MVD)。结果显示，初诊的恶性血液病患者在治疗前骨髓MVD明显增加；急性白血病化疗完全缓解后骨髓MVD降至正常水平，未缓解者下降程度小，复发者再次升高至化疗前水平；贫血患者骨髓MVD也比对照组明显增高，但远不如急性白血病骨髓MVD增高的幅度大。结论：骨髓血管新生在急性白血病发生过程中有着重要的作用，抗血管新生治疗可能成为治疗白血病的新策略。     

肝细胞生长因子和血管内皮生长因子在急性髓系白血病中的表达以及与血管新生的关系

目的 探讨肝细胞生长因子(HGF)和血管内皮生长因子(VEGF)在急性髓系白血病(AML)中的表达及与AML血管新生的关系.方法 应用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定AML 25例初发未治、17例完全缓解、16例未缓解、12例复发患者血清中HGF和VEGF的浓度,并与正常对照组比较.结果 血清HGF的浓度:AML初发未治组[(1357.29±358.64) ng/L]、未缓解组[(1175.93±306.71)ng/L]、复发组[(1261.21±340.83) ng/L]患者均明显高于正常对照组[(232.62±99.13) ng/L]和缓解组[ (256.65 ±94.32) ng/L](F=78.35,P＜0.01);血清VEGF的浓度:AML初发未治组[(253.84±49.14) ng/L]、未缓解组[(245.87±54.68) ng/L]、复发组[(264.75 ±62.52) ng/L]患者均明显高于正常对照组[ (97.61±16.19) ng/L]和缓解组[(99.76±15.93) ng/L](F=68.65,P＜0.01);缓解组患者血清HGF和VEGF的浓度与正常对照组比较,差异均无统计学意义(P均＞0.05).HGF和VEGF在AML中呈正相关(r=0.49,P＜0.05).结论 HGF和VEGF与AML的发生、发展密切相关,通过阻抗HGF治疗白血病有望成为新的治疗方法.     

血管内皮生长因子与不同类型急性白血病的关系及其意义

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)在不同类型和不同病期急性白血病(AL)患者发病过程中的作用及其意义。方法采用半定量RTPCR方法检测69例AL患者骨髓单个核细胞(MNC)VEGFmRNA表达,ELISA法检测培养上清MNCVEGF的含量,MTT比色法检测骨髓MNC培养上清对人脐静脉内皮细胞株huECV304细胞增殖的影响。结果骨髓MNCVEGF相对中位表达量(VEGF与βactin相对灰度比值),初发未治组(0.86)高于缓解组(0.41)和正常对照组(0.39)(P值均<0.01),复发组(1.02)与初发未治组之间差异无统计学意义(P>0.05);初发未治急性髓系白血病(AML)组(1.03)高于急性淋巴细胞白血病(ALL)组(0.61)(P<0.05)。初发未治AL组骨髓MNC72h培养上清液VEGF水平为91.48ng/L,高于缓解组(31.91ng/L)和正常对照组(28.71ng/L)(P值均<0.01);AML组(173.49ng/L)高于ALL组(32.76ng/L)(P<0.01)。AML患者骨髓MNC72h培养上清可促进huECV304细胞增殖,明显高于条件上清加VEGF抗体阻断组(P<0.01);而ALL患者骨髓MNC培养上清液对huECV304细胞增殖的影响与单抗阻滞组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论AML患者MNCVEGFmRNA表达强度和分泌水平高于ALL患者;参与ALL和AML血管新生反应的调控因子可能不同。     

Prognostic significance of hepatocyte growth factor and microvessel bone marrow density in patients with chronic myeloid leukaemia

Objective. The aims of the study were: (1) to perform a complex angiogenic assessment in chronic myeloid leukaemia (CML) patients using multiple parameters: bone marrow microvessel density (MVD), bone marrow immunohistochemical cellular expressions of vascular endothelial growth factor (VEGF) and its receptor KDR, as well as hepatocyte growth factor (HGF) and its receptor MET, and the plasma VEGF and HGF; and (2) to determine the clinical significance of these factors for patients with CML. Material and methods. The VEGF and HGF plasma levels were analysed by ELISA in 38 newly diagnosed CML patients. Immunohistochemical methods were used to visualize the MVD as well as the cellular VEGF/KDR and HGF/MET expression. Results. We found an increased MVD, cellular VEGF/KDR and HGF/MET expression and elevated plasma VEGF and HGF in CML patients. The plasma HGF, cellular HGF and MET expression correlated with the CML phase. The plasma HGF correlated with all markers reflecting the tumour burden (leucocytes, blast percentage, splenomegaly and LDH) as well as with the phase of CML and overall survival of the patients. Cox regression analysis determined the prognostic relevance of HGF and MVD parameters, but not for the plasma VEGF and cellular VEGF and KDR. Conclusions. Using a complex angiogenic assessment we determined an increased angiogenesis in CML patients. No prognostic relevance was found for VEGF plasma levels or VEGF/KDR cellular bone marrow expression. The increased cellular HGF and MET expressions could be considered high‐risk factors for these patients. Plasma HGF and MVD were shown to be independent prognostic parameters for patients' survival.     

环氧化酶-2在白血病患者骨髓细胞中表达及与血管新生的关系

本研究探讨环氧化酶-2（COX-2）在白血病骨髓血管新生中的作用。取初发白血病患者（51例）和正常对照组（18例）骨髓液及骨髓活检组织,采用免疫组织化学方法测定骨髓微血管密度（MVD）,ELISA法测定骨髓血清血管内皮生长因子（VEGF）含量,流式细胞术（FCM）检测骨髓细胞内COX-2的表达。结果表明：白血病患者骨髓MVD、VEGF含量、骨髓细胞COX-2阳性率与对照组相比均明显增高,p〈0．05。MVD、VEGF、COX-2阳性率三者相关系数分别为0．614,0．423,0．577（P〈0．05）。结论：白血病可能同实体瘤一样也是一种血管新生依赖性恶性肿瘤,COX-2可能与VEGF协同促进白血病骨髓血管新生     

急慢性白血病患者骨髓微血管密度变化及临床意义

目的探讨急慢性白血病患者骨髓血管新生情况与临床病情的关系。方法应用免疫组化染色(SP二步法)检测32例初诊白血病患者治疗前后骨髓活检标本微血管密度(MVD)变化。结果初诊急慢性白血病患者骨髓MVD[(21.48±8.50)/hpf]明显高于对照组[(9.29±3.53)/hpf](P<0.01);化疗后缓解者骨髓MVD[(13.09±6.84)/hpf]较治疗前明显降低(P<0.01),与对照组相比无显著差异(P=0.067)。结论初诊白血病患者骨髓存在血管新生,骨髓MVD变化与临床病情有关,观察骨髓MVD有助于判断疗效和评估预后。     

再生障碍性贫血患者骨髓微血管密度及血管内皮生长因子表达的意义

目的研究再生障碍性贫血（AA）患者骨髓微血管密度（MVD）及血管内皮生长因子（VEGF）的表达，探讨作为骨髓造血微环境重要组成成分的微血管以及调节因子VEGF在AA是否存在异常及其临床意义。方法应用免疫组化方法，以抗Ⅷ因子相关抗原及VEGF单克隆抗体标记骨髓活检组织切片，检测51例初诊AA患者及10例对照者骨髓MVD及VEGF表达，比较AA患者与对照者以及AA患者免疫抑制治疗后MVD及VEGF表达变化。结果AA患者骨髓MVD为5．5±3．5，明显低于对照组（8．7±3．4，P〈0．05）。非重型AA（NSAA）与重型AA（SAA）患者的MVD分别为7．4±2．9和4．3±3．4，差异有统计学意义（P〈0．01）。AA患者骨髓VEGF阳性细胞百分率明显低于对照组[分别为（6．7±8．4）％和（14．7±6．1）％，P〈0．01]，但NSAA与SAA患者的骨髓VEGF阳性细胞百分率差异无统计学意义（P〉0．05）。22例经免疫抑制治疗后获得治疗反应的患者骨髓MVD及VEGF阳性细胞百分率均较治疗前明显增加。结论AA患者骨髓MVD减少及VEGF表达减低，可能是AA骨髓造血衰竭的病理生理机制之一。促进血管生成以及改善骨髓血液循环的药物在免疫抑制治疗的基础上或可加快造血恢复。     

多发性骨髓瘤MRI骨髓浸润模式与血管生成关系的研究

目的探讨多发性骨髓瘤（MM）MRI骨髓浸润模式与血管生成的相关性。方法以25例初诊MM患者为研究对象,进行传统影像学、血清肌酐、血清蛋白、β2微球蛋白、乳酸脱氢酶等检测,并根据Durie—Salmon分期系统进行分期。对骨髓瘤患者在初诊及治疗之前行脊柱T1WI、STIR和常规的T1WI增强扫描,分析骨髓瘤细胞在骨髓内的浸润模式。对照组包括非恶性血液病患者10例,其骨髓涂片及活检检查均证实为正常骨髓象。对研究组和对照组患者均进行骨髓活检及病理检查,免疫组化测定微血管密度（MVD）,以CD34单抗标记微血管内皮细胞。另外,采集骨髓后分离上层血浆,采用ELISA法测定VEGF蛋白浓度,对结果进行统计学分析。结果初治MM患者骨髓上清血管内皮生长因子（VGEF）水平及MVD高于健康对照组（P〈0．05）。MRI骨髓弥漫性浸润的MM患者骨髓上清VGEF水平及MVD高于MRI骨髓成像正常或局灶性浸润的患者（P〈0．05）。结论MRI骨髓弥漫性浸润模式与血管生成密切相关。