75例广东籍汉族人蛋白磷酸酶2A-B56γ亚基基因5'-侧翼区多态性分析

目的 探讨蛋白磷酸酶2A(pp2A)-B56γ亚基基因(PPP2R5C)启动子区的多态性和人群分布.方法 随机选取广东汉族健康人群的全基因组DNA,聚合酶链反应(PCR)获得PPP2R5C基因5'-侧翼区的目的 片段产物直接再测序,序列比对并确证遗传变异位点,采用HaploView软件进行等位基因型人群分布的分析、并与国际单体型图谱计划(Hap-Map)数据进行比较.结果 成功测序75例健康人(150条染色体)PPP2R5C基因-1933nt+241nt的目的 片段,发现该人群中存在5个遗传变异位点且各等位基因型在年龄组和性别之间分布差异无统计学意义(P>0.05),最小等位基因频率(MAF)分别为-1447C>T(0.67%)、-1430G>A(19.33%)、-1274T>C(19.33%)、-563G>C(19.33%)和-526T>C(0.67%);与HapMap的中国北京人群和其他国外人群MAF和分布数据略为不同,但差异无统计学意义(P>0.05).结论 筛查出和首次报道PPP2R5C基因5'-侧翼区在中国南方广东汉族健康人群中的多态性位点及其等位基因型的分布.     

广东人群PP2A-B亚基基因5'-侧翼区多态性连锁不平衡和单体型分析

目的 探讨蛋白磷酸酶2A(PP2A)的调节B/PR5δ亚基基因5'-侧翼区多态性的连锁不平衡和人群单体型分布特征.方法 选取经体检排除急慢性疾病的50例广东汉族健康人群为调查对象,以人PPP2R2D基因5'-侧翼区中-1684 A>G(rs11146169)、-1196 C>T(rs9419202)、-462 G>A(...     

广东人群PP2A—B亚基基因5’-侧翼区多态性连锁不平衡和单体型分析

目的探讨蛋白磷酸酶2A（PP2A）的调节B／PR558亚基基因5’-侧翼区多态性的连锁不平衡和人群单体型分布特征。方法选取经体检排除急慢性疾病的50例广东汉族健康人群为调查对象,以人胱舵D基因5’-侧翼区中-1684A〉G（rslll46169）、-1196C〉T（rs9419202）、-462G〉A（rs7074421）和-1610A〉T为4个纳入的多态性位点,采用HaploView软件分析遗传特征、连锁不平衡（LD）和单体型分布,进行人群分布的x2检验。结果50例广东汉族人群中各多态性位点基因型频率均符合Hardy—Weinberg平衡（P〉0．05）;杂合度（π）分别为-1684A〉G（0．020）、-1610A〉T（0．132）、-1196C〉T（0．059）和-462G〉A（0．059）,且均不存在变异纯合型,其中在-1196C〉T和-462G〉A位点明显低于HapMap人群（P〈0．05）;-1196C〉T和-462G〉A位点之间呈完全LD,但其他位点间未见LD关系;构建了该人群的3种单体型（HI～H3）,频率分布主要是野生单体型（H1,89．0％）,其余2种变异单体型分别为H2（7．0％）和H3（3．0％）;筛选出的3个标签SNP为-1684A〉G、-1610A〉T和-462G〉A。结论确定并报道中国南方广东汉族人群PPP2R2D基因5’-侧翼区中相对保守的标签SNP和单体型分布,为进行该基因启动子区的功能分析提供依据。     

广东人群PP2A-Aα亚基基因5′-侧翼区单体型分析

目的探讨蛋白磷酸酶2A(PP2A)-Aα亚基基因启动子区多态性的人群单体型分布特征。方法采用Haploview软件分析部分广东汉族人群PPP2R1A基因5′-侧翼区筛查到的7个多态性位点的遗传学特征、连锁不平衡(LD)、标签(tag)SNP和单体型(域)分布。结果各多态性位点基因型频率均符合H-W平衡(P>0.05);各位点在该人群的杂合度(π)不同,且在-568G>A和+87T>C与HapMap中的不同人群存在明显差异(P<0.05);-1039G>T(+Ins)与+87T>C和+108A>G、-568G>A与-241-/G位点之间呈强LD,+87T>C与+108A>G之间为完全LD;构建该人群中的5种单体型(H1～H5),频率分布为野生单体型(H1)53%、其余4种变异单体型(H2～H5)为44%;得到两个单体型域,筛选出-1039G>T(+Ins)、-512G>A、-241-/G、+107-/C为4个tag SNP,并确定了2个单体型域内标签SNPs(htSNP)及其分别代表的单体型。结论首次确定并报道中国广东汉族健康人群PPP2R1A基因5′-侧翼区的标签SNP和单体型(域)分布。     

核因子I-B高表达对肝L02细胞中蛋白磷酸酶2A-B55δ靶向调控研究

目的 构建核因子I-B基因(NFIB)真核表达重组质粒,应用于其高表达调控肝细胞中蛋白磷酸酶2A(PP2A)的B亚基基因转录的功能学验证.方法 逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)获得人NFIB mRNA片段,克隆入真核绿色荧光蛋白表达载体(pEGFP-N1),构建pEGFP-NFIB重组质粒后,分别给予250、500、1 000 ng转染永生化人正常肝L02细胞建立NFIB高表达细胞模型(相应设为250、500和1 000 ng剂量组),对照组为250 ng pEGFP-N1转染的L02细胞,荧光定量聚合酶链反应检测NFIB mRNA,激光共聚焦和免疫印迹法(WB)检测核因子-1(NF-1)蛋白水平.电泳迁移率实验分析与NF-1相结合的DNA序列的特异性,荧光素酶报告基因检测PP2A-B55δ亚基基因(PPP2R2D)启动子区的转录活力,RT-PCR和WB检测细胞内PPP2R2D mRNA和PP2A-B55δ蛋白水平.结果 双向测序证实pEGFP-NFIB重组表达质粒构建成功.与对照组比较,各剂量组L02细胞中NFIB mRNA相对水平增高(P＜0.01),增强型绿色荧光蛋白、NFI-B蛋白表达水平均升高(P＜0.05).NF-1可与PPP2R2D基因启动子区(2R2Dp)-462G＞A不同多态性序列结合,NFIB高表达使L02细胞中2R2Dp-462G启动子活力下降(P＜0.05),PPP2R2D mRNA和PP2A-B55δ蛋白水平均升高(P＜0.05).结论 成功构建人NFIB真核表达重组质粒,应用于人肝细胞中证实NF-1靶向PPP2R2D的功能学调控作用.     

汉族人群ApoA5基因多态性与冠心病关联Meta分析

载脂蛋白A5(apolipoprotein A5,ApoA5)是Pennacchio等于2001年在劳伦斯伯克利国家实验室发现的载脂蛋白家族新成员^[1]。有动物实验表明,带载脂蛋白A 5腺病毒载体小鼠的血浆甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)浓度分别降低了70%和40%^[2],而血浆TG的代谢异常可引起多种心血管疾病。     

广东汉族人群GLUT4基因多态性与冠心病关系

目的 探讨中国广东汉族人群葡萄糖转运蛋白-4(GLUT4)基因多态性与冠心病易感性之间的关系。方法 采用多重单核苷酸多态性(SNP)分型试剂盒,对筛选的2个tagSNP位点(rs16956647、rs5435)在1044例冠心病患者和1349例非冠心病患者为对照进行基因分型;采用遗传分析软件Plink和统计分析软件SPSS 17.0分析SNP位点与冠心病的关联性。结果 SNP rs5435未满足Hardy-Weinberg平衡条件,予以剔除。校正性别、年龄、高血压、糖尿病、吸烟史、总胆固醇、甘油三酯、心率和体质指数后,rs16956647基因型与冠心病存在明显关联[加性模型:P=0.016,OR=0.80(95%CI=0.67~0.96);显性模型:P=0.002,OR=0.71(95%CI=0.57~0.89)]。进一步按是否患糖尿病分层后进行基因型关联分析,结果显示仅在糖尿病组rs16956647位点与冠心病呈显著关联[加性模型:P=0.048,OR=0.82(95%CI=0.67~0.99);显性模型:P=0.007,OR=0.72(95%CI=0.56~0.91)]。结论 在中国广东汉族人群中,GLUT4基因多态性与冠心病易感性之间的关联可能与患者胰岛素抵抗有关。     

载脂蛋白A5 c.553G>T基因多态性与新疆汉族人群冠心病相关性研究

目的 研究新疆汉族人群载脂蛋白A5(ApoA5)c.553G＞T多态性与冠心病及血脂水平的相关性.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法,检测486例冠心病患者和501例对照的ApoA5 c.553G＞T多态性,同时测定血脂水平.结果 ApoA5 c.553G＞T的不同基因型在冠心病组和对照组分布频率的差异具有统计学意义(x2=8.757,P=0.013).通过非条件logistic回归校正年龄、性别、吸烟史、血脂、高血压和糖尿病史等影响因素后,T等位基因携带者(TT+GT基因型)的个体患冠心病的风险是GG型的1.753倍(OR=1.753,95%CI:1.030～2.983,P＜0.05).冠心病组和对照组c.553G＞T基因型亚组间甘油三酯(TG)水平的差异有统计学意义(t=-5.242,P＜0.01;t=-3.499,P=0.001),T等位基因携带者较GG型有更高的TG水平;冠心病组T等位基因携带者较GG型有更高的胆固醇(TC)水平(t=-2.465,P=0.014).结论 ApoA5c.553G＞T多态性对新疆汉族人群血清TG、TC水平有影响,且与冠心病的发生有一定相关性,T等位基因可能是冠心病的一个危险因素.

Abstract：

Objective The aim is to investigate the association between coronary heart disease (CHD) and c.553G＞T polymorphism of apolipoprotein A5 (ApoA5) gene and the influence of serum lipid level in the Hah ethnic population of Xinjiang. Methods The polymorphism of ApoA5 gene in 486 patients with CHD and 501 controls was analyzed by methods of polymerase chain reaction and restriction fragment length polymorphism analysis. Level of serum lipid in each patient was detected at the same time. Results There was significant difference in the distribution of genotypes between CHD group and controls group ( x2 = 8.757, P= 0.013 ). Non-conditioned logistic regression analyses, after adjusted for age, gender, smoking, total serum cholesterol, presence of hypertension and diabetes, revealed that individuals who carried T allele (TT + GT genotype) had an increased risk of CHD, compared to GG genotype (OR= 1.753,95%CI: 1.030-2.983, P＜0.05 ). There was also a remarkable difference noticed in the level of serum triglyceride by genotypes in CHD group and control group (t=5.242, P＜0.01; t=-3.499, P=0.001 ). Individuals in the two groups who carried T allele had higher level of serum triglyceride than those carried GG genotype. Individuals in CHD group who carried T allele had higher level of serum total cholesterol than those carried GG genotype (t=-2.465, P=0.014). Conclusion It seemed that the c.553G＞T polymorphism of ApoA5 gene had influenced on the level of serum triglyceride and the total cholesterol among Han population in Xinjiang. c.553G＞T polymorphism was associated with the development of CHD, while T allele might be an influencing risk factor on CHD.     

中国汉族胆固醇调节元件结合蛋白-2基因多态性与高脂血症的关系

目的　了解胆固醇调节元件结合蛋白 2 (SREBP 2 )基因 1784G >C位点多态性在中国汉族人群中的分布情况及其与高脂血症的关系。方法　选取北京市西城区 32 2名高脂血症患者作为病例组 ,同时选择16 4名血脂正常者作为对照组 ,对所有对象均进行血脂谱项目测定及SREBP 2基因 1784G >C位点多态性检测 (PCR RFLP方法 )。结果　高脂血症组和正常对照组 1784位点C等位基因频率分别为 19 6 %和 2 0 1% ,差异无显著性 ,GG、GC和CC三种基因型构成两组间差异亦无显著性 (P >0 0 5 )。各组GG基因型和GC CC基因型间血脂水平差异无显著性 (P >0 0 5 )。按血清TC和TG水平将高脂血症分为高TC血症、高TG血症和混合型高脂血症三个亚组后比较不同基因型血脂水平时发现 ,高TC血症组 1784C等位基因携带者血清TC和LDL C水平明显高于无 1784C等位基因者 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。结论　提示SREBP 2基因 1784G>C位点多态性可能主要影响高胆固醇血症患者血清TC和LDL C水平 ,与血清TG无关 ;C等位基因可能是高胆固醇血症和动脉粥样硬化的危险因素。     

镉对蛋白磷酸酶2A-B55δ高表达L02细胞周期和核因子-κB活化影响

目的探讨镉对蛋白磷酸酶2A(PP2A)的B55δ亚基高表达和不同多态性单体型调控高表达的肝细胞周期的影响及其与核因子-kappaB(NF-κB)活化的关系。方法选择永生化人正常肝L02细胞,采用B55δ编码基因PPP2R2D序列构建高表达的L02-2R2Dc细胞、与不同启动子区单体型调控高表达的L02-2R2D-PC1和L02-2R2D-PC3细胞株,以导入空载体的L02-pBabe为对照细胞。各细胞给予5～80μmol/L的氯化镉(CdCl2)处理建立细胞模型。噻唑蓝法检测各细胞生长的抑制作用;流式细胞术检测细胞周期;蛋白免疫印迹(Western blotting)检测细胞核内NF-κBp65蛋白的活化情况;荧光定量聚合酶链反应(QRT-PCR)检测环氧合酶-2(COX-2)基因mRNA水平的改变。结果与对照组比较,CdCl2组各细胞的增殖抑制率随镉水平增高呈剂量依赖性增高(Pearson’s r均P<0.05);与CdCl2组比较,冈田酸+CdCl2组各细胞的增殖抑制率明显增加(P<0.05);与对照组比较,CdCl2组细胞G1期比例下降、S期比例增加(P<0.05);胞核p65蛋白水平增高,COX-2 mRNA水平上调;这种效应在不同细胞株之间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论镉可引起PP2A-B55δ高表达的人肝L02细胞增殖功能抑制并导致细胞周期S期阻滞,这种效应与NF-κB信号通路的活化有关。     

5-HTR1A、5-HTR2A基因多态性与SSRIs抗抑郁疗效的关系

目的:探讨5-羟色胺1A(5-HTR1A)rs6295位点、5-羟色胺2A(5-HTR2A)rs6311位点基因多态性与选择性5-羟色胺再摄取抑制剂(SSRIs)抗抑郁疗效的关系。方法:选择2018年5月至2020年10月烟台市心理康复医院收治的150例抑郁症患者,均采用SSRIs抗抑郁治疗8周。根据治疗8周后汉密尔顿...     

包头地区汉族人群COX-2基因多态性与幽门螺杆菌感染的关系

目的探讨包头地区汉族人群COX-2基因单核苷酸多态性(SNP)rs689466、rs5275、rs4648308与幽门螺杆菌感染的关系。方法在281例研究样本中,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测幽门螺杆菌的感染情况,采用Taq Man法对3个SNP进行基因分型;采用Haploview软件构建单体型,并用非条件性Logistic回归计算比值比(OR)及其95%可信区间(CI),以评估各等位基因、基因型及单体型与幽门螺杆菌感染的关系。结果在研究样本中,3个SNP的基因型频率分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律(P0.05);281例包头汉族样本中,幽门螺杆菌的感染率为43.1%。COX-2SNP rs689466、rs5275、rs4648308的等位基因、基因型以及单体型频率在幽门螺杆菌感染阳性和阴性人群中的分布差异无统计学意义(P0.05),所检测的3个SNP与幽门螺杆菌感染没有关联。结论包头地区汉族人群中,COX-2基因多态性rs689466、rs5275、rs4648308在幽门螺杆菌感染的发生中不起主要作用。     

肿瘤坏死因子-α基因多态性与安徽地区汉族人群Graves病的相关陛研究

摘要：目的探讨肿瘤坏死因子-α（TNF-α）基因-863、-857、-238三个位点多态性与安徽地区汉族人Graves病（CO）发病易感性的关系。方法采用聚合酶链反应-序列特异性引物（PCR—SSP）方法，检测和比较254例GD患者和212例正常对照者的TNF-α-863、-857、-238位点基因型和等位基因的频率。结果TNF-α-863位点A等位基因GD组频率（16．73％）高于正常对照组（11．79％），P〈O．05，OR=1．503；AA＋CA基因型频率GD组（32．68％）明显高于正常对照组（23．58％），P〈0．05，OR=I．573。TNF-α．-857、-238两位点基因型及等位基因频率在两组间比较差异无显著性。将GD组按性别分层后比较，-863、-857、-238三个位点的基因型及等位基因频率在不同性别间差异均无显著性。结论TNF-α-863位点基因多态性与安徽地区汉族人GD发病有相关性，而-857、-238位点基因多态性与安徽地区汉族人GD发病无明显相关性。     

α-adducin基因Gly460Trp、CYP11B2基因-344T/C多态性与河南汉族原发性高血压的相关性研究

目的 探讨α-adducin基因Gly460Trp、CYP11B2基因-344T/C多态性与河南汉族原发性高血压的相关性.方法 采用PCR-RFLP技术和病例对照分析的方法,检测河南汉族145例原发性高血压患者及120例血压正常者α-adducin、CYP11B2基因单核苷酸多态性与河南汉族原发性高血压的相关性.结果 α-adducin基因基因型频率在高血压组为TG:0.524、TT:0.331、GG:0.145,正常对照组为TG:0.450、TT:0.350、GG:0.200;等位基因频率在高血压组为T:0.593、G:0.407,正常对照组为T:0.575、G:0.425.CYP11B2基因基因型频率在高血压组为TC:0.441、TT:0.455、CC:0.104,正常对照组为TC:0.533、TT:0.400、CC:0.067;等位基因频率在高血压组为T:0.676、C:0.324,在正常对照组为T:0.667、C:0.333.经统计α-adducin和CYP11B2基因基因型频率和等位基因频率在原发性高血压组和正常对照组间差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 α-adducin基因Gly460Trp和CYP11B2基因-344T/C多态性与河南汉族群体原发性高血压的发生无明显相关.     

广东汉族人群谷胱甘肽硫转移酶A1基因多态性

目的探讨广东健康汉族人群谷胱甘肽硫转移酶A1（hGSTA1）基因多态性的分布。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法（PCR-RFLP）检测217名广东健康汉族人hGSTA1基因型。结果GSTA1基因野生型纯合子（GSTA1＊A／＊A）分布频率为76．0％（165／217），突变型纯合子（GSTA1＊B／＊B）为2．8％（6／217），突变型杂合子（GSTA1＊A／＊B）为21．2％（46／217）；GSTA1基因多态性的性别分布差异无统计学意义（P〉0．05）。结论广东健康汉族人群GSTA1基因多态性分布与日本人相似，但与美国白人、美国黑人存在差异。     

TRAF1/C5和TNF-α基因多态性与结核病易感性分析

目的 分析肿瘤坏死因子受体相关蛋白1(tumor necrosis factor receptor-associated factor 1,TRAF1)/补体5(complement component 5,C5) rs10818488和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α) rs1800629基因多态性、环境因素及其交互作用对结核病(tuberculosis, TB)易感性的影响。方法 选取TB多发家庭中TB确诊患者作为TB病例组,当地社区同期体检的健康志愿者作为健康对照(healthy controls, HC)组,与TB组有血缘关系且共同居住者组成家庭密切接触(healthy household contacts, HHC)组。采用logistic回归分析模型分析基因型和环境因素与TB的关联,叉生分析结合logistic回归分析模型分析基因与环境交互作用。结果 年龄>45岁(χ²=7.90,OR=2.28, 95%CI:1.28～4.04,P=0.005)、吸烟(χ²=15.27,O...     

PPP1R3基因Asp905Tyr多态性与安徽省汉族人群2型糖尿病相关性研究

目的 研究1型蛋白磷酸酶的骨骼肌特异糖原靶向调节亚单位基因(PPP1R3)Asp905Tyr多态性与安徽省汉族人群2型糖尿病相关性。方法 选取安徽省合肥地区汉族2型糖尿病患者262例,健康成人104名,运用聚合酶链反应限制性片段长度多态性技术(PCR-RFLP)进行基因型测定。以体重指数(BMI)25kl/m~2为分割点,将病例组和对照组进行分层分析。结果 PPP1R3基因Asp905Tyr多态性与安徽省汉族人群2型糖尿病没有明显的相关性;以BMI<25kg/m~2基因型Tyr/Tyr组为参照组,BMI≥25kg/m~2携有Asp 905等位基因个体的糖尿病发病风险明显增加(OR=3.69,95％CI:1.38～8.89,P=0.006)。结论 PPP1R3基因Asp 905Tyr多态性可能不是安徽省汉族人群2型糖尿病主要的致病因素。肥胖与Asp905等位基因间的交互作用可增加糖尿病的发病风险。     

山东地区汉族健康人群N-乙酰基转移酶基因多态性分布

[目的]探讨山东地区健康汉族人群N-乙酰基转移酶2(NAT2)基因多态性分布规律。[方法]采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP),检测200名山东地区汉族健康人群NAT2基因多态性,并与其他地区人群进行比较。[结果]NAT2等位基因频率分别为:NAT2*4(56.0%)、NAT2*5B(12.0%)、NAT2*6A(16.5%)、NAT2*7B(15.5%),与浙江健康汉族人群NAT2等位基因频率分布比较差异无统计学意义(χ2=7.54,P﹥0.05);NAT2各基因型频率分别为:NAT2*4/*4(36.0%),NAT2*4/*7B(15.0%),NAT2*4/*6A(14.0%),NAT2*4/*5B(11.0%),NAT2*6A/*7B(6.0%),NAT2*6A/*6A(5.0%),NAT2*5B/*7B(4.0%),NAT2*5B/*5B(3.0%),NAT2*5B/*6A(3.0%),NAT2*7B/*7B(3.0%),符合Hardy-Weinberg平衡定律(χ2=13.35,0.10﹤P﹤0.25);基因型分类:快乙酰化基因型(36%)、中间乙酰化基因型(40%)、慢乙酰化基因型(24%);表型:快型乙酰化(76%)、慢型乙酰化表型(24%)。[结论]山东地区汉族健康人群中频率最高的等位基因是NAT2*4,频率最低的等位基因是NAT2*5B,与中国浙江地区相近,与其他地区不同。最常见基因型为NAT2*4/*4,其次是NAT2*4/*7B,NAT2*4/*6A,NAT2*4/*5B,其他少见。表型以快型乙酰化为主。     

蛋白磷酸酶2A诱导肠上皮细胞凋亡机制研究进展

蛋白磷酸酶2A是细胞内重要的丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶,通过可逆性磷酸化使已磷酸化的蛋白质脱磷酸,参与细胞内众多信号通路和生理生化过程的调节.其生理活性的改变与肠上皮细胞损伤后凋亡、再生的发生密切相关,可能是肠上皮细胞凋亡与再生达到平衡的一个调节因子.

Abstract：

Protein phosphatase 2A(PP2A)is a major Ser/Thr phosphatase involved in sevelral cellular signal transduction pathways.The reversible phosphorylation of proteins is accomplished by opposing activities of kinases and phosphatases.PP2A controls the specific dephosphorylation of thousands of phosphoprotein substrates and thus regulates physiological and biochemical processes of organism.The changes of the physiological activities of PP2A closely relate to apoptosis and regeneration of injured intestinal epithelial cell,and PP2A may be a regulatory factor in balancing the apoptosis and regeneration of intestinal epithehal cell.     

解偶联蛋白2基因多态性与糖尿病合并脑血栓的关系

目的探讨解偶联蛋白2（UCP-2）基因8号外显子3’-末端45bp插入／缺失多态与糖尿病合并脑血栓的关系。方法178例糖尿病患者（伴有脑血栓组49例，不伴脑血栓组129例），检测所有患者的基因组DNA，用聚合酶链反应（PCR）方法对UCP-2基因进行扩增，记录各组UCP-2等位基因及基因型频率并进行比较。结果UCP-2基因8号外显子3’-末端45bp插入/缺失多态在伴有脑血栓组和不伴脑血栓组中基因型分布差异无统计学意义（x^2=1．17，P〉0．05），两组的等位基因频率差异亦无统计学意义（x^2=0．24，P〉0．05）。结论UCP-2基因8号外显子3’-末端45bp插入／缺失多态与中国人糖尿病并发脑血栓无相关性。