肿瘤坏死因子-α对糖尿病大鼠肾脏肥大的影响

目的:探讨肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)对糖尿病大鼠肾脏肥大的影响.方法:成功制备糖尿病肾病大鼠模型后,采用蛋白免疫印迹等技术观察TNF-α对糖尿病大鼠肾脏肥大的影响.结果:1)与NC组相比,DM组空腹血糖及24h尿白蛋白排泄量明显升高(n=8,P＜0.01);2)与NC组相比,DM组肾组织中TNF-α的蛋白表达明显升高(n=3,P＜0.01);3)与NC组相比,DM组肾指数明显升高(n=8,P＜0.01);与DM组相比,DM+TNFR:Fc组肾指数下降(n=8,P＜0.05).结论:糖尿病肾病时TNF-α水平增高,并促进糖尿病肾脏肥大的发生.     

氯沙坦对糖尿病大鼠肾脏AT2受体及细胞因子mRNA表达的影响

目的研究氯沙坦对糖尿病大鼠肾脏AT2受体及细胞因子mRNA表达影响.方法SD大鼠随机分成3组对照组、糖尿病组、氯沙坦治疗组(30 mg·kg-1·d-1,ig).实验第8周,应用RT-PCR技术检测大鼠肾皮质血管紧张素Ⅱ2型受体(AT2)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、血小板衍化生长因子-B(PDGF-B)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及Ⅳ型胶原的mRNA表达.同时用放免法检测大鼠肾皮质血管紧张素II(Ang II)含量.结果糖尿病大鼠尿蛋白排泄率(P＜0.01)、肾皮质Ang II水平(P＜0.05)较对照组明显升高;糖尿病组大鼠肾皮质TGF-β1、PDGF-B、TNF-α及Ⅳ型胶原的mRNA表达较对照组大鼠显著增加(P＜0.01);然而,糖尿病组大鼠肾皮质AT2mRNA表达却较对照组显著下降(P＜0.05),氯沙坦治疗能明显降低糖尿病大鼠肾皮质TGF-β1、PDGF-B、TNF-α及Ⅳ型胶原的mRNA表达(均P＜0.05).治疗组AT2的mRNA表达则明显高于对照组(P<0.05)与糖尿病组(P＜0.01).结论糖尿病大鼠肾皮质AT2受体mRNA表达的下调可能与肾组织TGF-β1、PDGF-B、TNF-α及血管紧张素Ⅱ表达的增加有关.氯沙坦激活AT2受体的表达的机制可能与下调肾脏系列细胞生长因子的表达有关.     

帕立骨化醇抑制血管紧张素活性减轻足细胞损伤

目的：观察维生素D受体激动药帕立骨化醇对尿毒症大鼠肾脏的保护作用。方法：雄性SD大鼠切除右肾并结扎左肾动脉前支诱导尿毒症模型。将20只尿毒症鼠随机分为尿毒症组（UC组）、UC＋帕立骨化醇治疗组（UA组）。另设正常SD大鼠为对照组（NC组）。第10周检测大鼠血清Ca、P、1,25（OH）2D3、成纤维细胞生长因子23（FGF23）、甲状旁腺素（PTH）、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）、血肌酐（Scr）、白蛋白（Alb）、24h尿蛋白（24hUP）。RT—PCR检测肾小球血管紧张素原（Ang）、血管紧张素转化酶（ACE）、nephrin、synaptopodin的表达。胞核WT-1阳性细胞计数测定每个肾小球足细胞数量。结果：UC组P、FGF23、PTH、AngⅡ、Scr、Alb、24hUP较NC组显著升高（P〈0．01）,Ca、1,25（OH）2D3、Alb降低（P〈0．05或0．01）。UC组Ang、ACE mRNA的表达较NC组显著增加（P〈0．01）;nephrin、synaptopodin mRNA的表达较NC组显著降低（P〈0．01）;肾小球足细胞数目减少。帕立骨化醇改善尿毒症鼠的矿物质代谢,下调AngⅡ水平,减少尿蛋白的排泄;抑制肾小球Ang、ACE mRNA的表达,恢复nephrin、synaptopodin的表达,并维持肾小球足细胞数量。结论：帕立骨化醇可抑制尿毒症鼠肾小球血管紧张素活性,减轻足细胞损伤和脱落。     

骨化三醇对单侧输尿管梗阻大鼠肾小管上皮细胞转分化影响的研究

目的观察幼年大鼠单侧输尿管梗阻(UUO)肾组织中α-肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏蛋白(E-Cad)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、骨形态发生蛋白-7(BMP-7)mRNA的表达,探讨骨化三醇对肾小管上皮细胞转分化(EMT)干预效应及机制。方法 54只雄性SD大鼠随机分为3组:假手术组(A组)、UUO模型组(B组)及UUO模型干预组(C组)各18只,灌胃满3、7、14d取肾。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)法检测各组α-SMA、E-Cad、TGF-β1、BMP-7mRNA表达水平。结果与A组相比,B组E-Cad、BMP-7mRNA表达明显下降(P<0.01),α-SMA、TGF-β1mRNA表达显著增高(P<0.01);C组与B组相比,E-Cad、BMP-7mRNA表达明显上调(P<0.01),α-SMA、TGF-β1mRNA表达明显下降(P<0.01)。结论骨化三醇对UUO模型大鼠肾小管上皮细胞转分化有抑制作用,这种抑制作用可能与下调TGF-β的表达及上调BMP-7的表达有关。     

辛伐他汀对糖尿病大鼠的肾脏保护作用及其抗炎机制探讨

目的:研究辛伐他汀对糖尿病大鼠的肾脏保护作用及其相关的抗炎机制.方法:将Wistar大鼠随机分为正常对照、糖尿病模型组和辛伐他汀治疗组,每组8只.腹腔注射链脲佐菌素65 mg·kg-1建立糖尿病大鼠模型1周后,灌胃辛伐他汀20 mg·kg-1·d-1,qd,连续灌胃7周.正常对照组和糖尿病模型组灌以等体积的生理氯化钠溶液.第8周时,监测各组鼠尾外周血血糖,检测大鼠血糖化血红蛋白(HbA1c)及12 h尿白蛋白(UALB)、视黄醇结合蛋白(URBP)和尿单核细胞趋化蛋白-1(UMCP-1)、尿细胞间黏附分子-1(UICAM-1)的排泄率,处死大鼠留取肾脏标本,计算肾脏肥大指数、电镜下病理学检查,并采用逆转录PCR(RT-PCR)法和实时定量PCR(real-time PCR)法对肾脏组织表达的MCP-1和ICAM-1mRNA进行半定量和相对定量检测.结果:第8周时,与正常对照组比较,糖尿病模型大鼠的血糖、HbA1c、UALB、URBP、UMCP-1、UICAM-1排泄率和肾脏肥大指数水平均显著升高(P＜0.05或P＜0.01),电镜下肾组织结构病变明显,肾组织MCP-1和ICAM-1 mRNA表达均明显上调(P＜0.01);与糖尿病模型组比较,辛伐他汀治疗组除血糖和HbA1c水平外,其他各项生化指标和肾脏肥大指数均明显降低(P＜0.05或P＜0.01),肾组织病理改变明显减轻,肾组织MCP-1和ICAM-1 mRNA表达均显著下降(P＜0.01).结论:辛伐他汀对糖尿病大鼠肾脏具有确切的保护作用,其机制可能通过降低MCP-1和ICAM-1的表达和排泄,减轻微炎症反应有关.     

激动黑皮质素4型受体对抗脓毒症诱导的肾脏损伤

目的:观察激动黑皮质素4型受体(MC4R)对抗脓毒症诱导的肾脏损伤作用,并探讨其机制.方法:雄性SD大鼠24只,随机分为:假手术组(Sham)、Sham+MC4R激动剂R027-3225组、盲肠结扎穿孔组(CLP)和CLP+R027-3225组,造模24 h后测定血清尿素氮(BUN)和肌酐(CRE)水平,HE染色观察肾脏形态学变化,免疫组化观察肾小管细胞NF-κB P65的表达,RT-PCR测定肾脏组织NF-κB mRNA表达情况.结果:与Sham组相比,CLP组血清BUN和CRE水平明显升高(P＜0.01),组织切片显示CLP组大鼠肾小体中血管球淤血、皱缩、肾小囊腔扩大,伴肾小管上皮细胞肿胀和坏死.肾脏组织NF-κB P65表达呈强阳性,NF-κB mRNA表达增高(P＜0.01).与CLP组相比,CLP+R027-3225组BUN和CRE水平下降(P＜0.01),肾小体、肾小管损伤减轻,肾脏组织NF-κB P65表达和NF-κB mRNA表达下降(P＜0.01).结论:脓毒症大鼠肾脏功能受损,激动MC4R可对抗脓毒症诱导的肾脏损伤,这可能与减少NF-κB的表达,降低炎症反应有关.     

阿托伐他汀对糖尿病大鼠大血管组织单核细胞趋化蛋白1表达的影响

目的 研究链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病(DM)大鼠大血管组织中单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的表达和阿托伐他汀对MCP-1表达的影响.方法 30只SD大鼠随机分成正常对照(NC)组和DM造模组,造模组给予STZ 60 mg/kg一次性腹腔注射,造模成功后再随机分为DM组和DM 阿托伐他汀治疗(AT)组,AT组大鼠给予阿托伐他汀(15 mg·kg-1·d-1)灌胃.于8周末,1%戊巴比妥麻醉下取胸主动脉,分别采用半定量RT-PCR及Western blot方法检测大血管组织中MCP-1 mRNA和蛋白的表达水平.结果 与DM组相比,AT组大鼠体重、血糖水平无明显差异(P＞0.05),而血浆胆固醇、甘油三酯明显降低(P＜0.05).与NC组相比,DM组大鼠大血管组织MCP-1 mRNA和蛋白的表达明显增加(P＜0.01);与DM组相比,AT组大鼠大血管组织MCP-1mRNA和蛋白的表达水平明显降低(P＜0.01).结论 糖尿病大鼠血管组织中MCP-1的表达明显升高,而阿托伐他汀可能通过减少炎症因子MCP-1的表达而对糖尿病大血管并发症产生治疗作用.     

葛根素对慢性低氧高二氧化碳性肺动脉高压大鼠肺血管低氧诱导因子1α的影响

目的：探讨葛根素降低大鼠慢性低氧(O_2)高二氧化碳(CO_2)性肺动脉高压的作用是否与抑制肺小动脉低氧诱导因子1α(HIF-1α)表达有关。方法：清洁级SD雄性大鼠30只随机分为正常对照组(NC)、低O_2高CO_24 wk组(HH)、低O_2高CO_2加葛根素组(HP)。免疫组织化学法检测肺细小动脉HIF-1α蛋白的表达,核酸原位杂交法检测肺细小动脉HIF-1αmRNA表达。结果：HH组平均肺动脉压,右室/(左室+室间隔)重量比高于NC组(P＜0.01),HP组低于HH组(P＜0.01)。HH组血浆一氧化氮含量低于NC组(P＜0.01),HP组高于HH组(P＜0.01)。HH组肺细小动脉HIF-1α蛋白表达及HIF-1αmRNA表达高于NC组(P＜0.01),HP组肺细小动脉HIF-1α蛋白表达及HIF-1αmRNA表达低于HH组(P＜0.05)。结论：葛根素减轻大鼠慢性低O_2高CO_2性肺动脉高压的作用可能与其抑制肺血管HIF-1α表达有关。     

全反式维甲酸对糖尿病大鼠肾脏组织BMP-7表达及细胞外基质代谢的影响

目的探讨全反式维甲酸（atRA）对糖尿病大鼠肾脏组织骨形成蛋白-7（BMP-7）、转化生长因子-β1（TGF-β1）表达和细胞外基质（E（M）Ⅳ、Ⅲ型胶原代谢的影响。方法随机选择24只舍SD大鼠制作糖尿病模型,其中12只入糖尿病模型（DM）组,另12只入糖尿病模型＋atRA（DM＋atRA）组,此外再随机选择12只正常大鼠作为空白对照（NC）组。分别于第8、12周末各组处死6只大鼠,通过光镜、电镜观察各组大鼠肾脏病理结果;通过免疫组织化学方法观察BMP-7,TGF-β1,Ⅳ、Ⅲ型胶原表达,并进行半定量分析;通过实时荧光定量PCR方法对TGF-β1 mRNA、BMP-7mRNA,进行相对定量分析。结果DM＋atRA组大鼠肾组织BMP-7表达较同时期DM组增加（P〈0.01）,主要表达于大鼠肾小管上皮细胞,而TGF-β1表达较同时期DM组减少（P〈0．01）：且DM＋atRA组大鼠肾组织ECM重要成分Ⅳ、Ⅲ型胶原表达与DM组相比较显著减少（P〈0．01）。同时观察到BMP-7蛋白与Ⅳ型胶原蛋白表达呈负相关（r=-0．75,P〈0．01）,与Ⅲ型胶原蛋白表达呈负相关（r=-0．71,P〈0．01）,与TGF-β1蛋白表达呈负相关（r=-0．86,P〈O．01）。荧光定量PCR结果表明,DM＋atRA组BMP-7mRNA水平升高,TGF-β1 mRNA水平下降,且两者星显著负相关（r=-0．83,P〈0．01）。结论atRA能减轻糖尿病大鼠肾脏病理损伤,延缓肾脏纤维化,这一防治作用可能与其增加BMP-7表达,下调TGF-β1表达从而减少肾组织ECM沉积有关。     

小檗碱对早期糖尿病肾病大鼠肾组织病理变化与BMP-7蛋白及mRNA表达的影响

目的:研究小檗碱(BBR)对糖尿病肾病(DN)大鼠肾组织病理变化与骨形成蛋白-7(BMP-7)蛋白及mRNA表达的影响,探讨BBR对DN大鼠早期肾脏损伤的作用及其可能机制。方法:以链脲佐菌素(STZ)复制早期DN大鼠模型,动物分为正常对照组、模型组、3个BBR(50,100,200 mg.kg-1)治疗组及依那普利(1 mg.kg-1)治疗组,灌胃给药,qd,5周后检测各组大鼠尿量、左肾重、肾重/体重比值;生化指标检测空腹血糖(FBG)、尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、胰岛素(Ins)、24 h尿蛋白量(Upro)及24 h尿微量白蛋白(Um-Alb);光镜和电镜观察肾组织形态学和超微结构的改变;免疫组化技术和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肾组织BMP-7蛋白和mRNA表达。结果:与模型组比较,BBR各治疗组DN大鼠FBG,BUN,Scr,Upro及UmAlb水平降低,Ins升高;肾组织形态学异常和超微结构病变改善;BMP-7蛋白和mRNA表达增多。结论:BBR可显著升高早期DN大鼠肾组织BMP-7蛋白及mRNA的表达,改善早期DN大鼠肾功能病变,延缓DN发展。     

氯沙坦和帕立骨化醇联合治疗对尿毒症鼠肾脏的保护作用

目的：观察氯沙坦和维生素D类似物——帕立骨化醇联用对尿毒症鼠肾脏的保护作用。方法：尿毒症鼠分组如下：尿毒症组（uc）、氯沙坦组（UL）、帕立骨化醇组（UP）、氯沙坦＋帕立骨化醇组（ULP）。正常鼠为对照组（NC）。给药10周后检测大鼠血压（BP）,血清中的肌酐（Cr）、钙（ca）、磷（P）、甲状旁腺素（PTH）,24h尿蛋白、尿足细胞（UPC）。免疫组化染色计数肾组织浸润的巨噬细胞（ED-1）。蛋白印迹分析转化生长因子-β1（TGF-β1）、肝细胞生长因子（HGF）的表达。结果：UC、uP组BP较NC组显著升高,较UL、ULP组亦显著升高（P〈0．01）。与NC组相比,UC组Cr、P、PTH明显升高（P〈0．01）,Ca降低（P〈0．05）。与UC组相比,UL组cr明显降低,uP组Cr、P、唧也显著降低（P〈0．01）,且血钙水平明显升高（P〈0．05）。UC组24h尿蛋白、UPC排泄较NC组增加,但可被氯沙坦、帕立骨化醇所改善。UL、uP组肾组织ED．1阳性细胞浸润较UC组显著减少,ULP组较UL、uP组明显减少。TGF-β1蛋白在UC组表达明显增加,UL、UP组明显减少,ULP组减少更为显著。UL、uP和ULP组HGF的表达明显增加（P〈0．01）。结论：氯沙坦和帕立骨化醇均有肾保护作用,两者联用较单用肾保护作用更加明显。     

依托咪酯对糖尿病大鼠肾脏缺血再灌注后心肌的影响

目的观察糖尿病大鼠肾缺血再灌注对远隔器官心肌组织的损伤作用,探讨依托咪酯对心肌组织的保护作用。方法健康成年雄性wistar大鼠36只,体质量300～350g,用链脲佐菌素(STZ)诱发大鼠糖尿病。糖尿病大鼠随机分为A组假手术组(n=12),B组肾缺血再灌注组(n=12),C组肾缺血再灌注+依托咪酯组(n=12),实验结束,24h后处死大鼠,光镜观察心肌组织的形态学改变,采用免疫组织化学法对TNF-α和NF-κB进行定性、半定量检测。结果与A组相比,B组大鼠心肌组织TNF-α和NF-κB表达上调(P<0.05),C组大鼠心肌组织TNF-α和NF-κB表达差异无统计学意义(P>0.05),与B组相比较,C组大鼠心肌组织TNF-α和NF-κB表达下调(P<0.05)。结论糖尿病大鼠肾缺血再灌注继发心肌组织损伤,依托咪酯能够明显减轻这种损伤,其保护作用可能与TNF-α表达抑制,TNF-α/NF-κB正反馈信号阻断有关。     

肾康注射液对单侧输尿管梗阻大鼠模型肾间质转化生长因子-β1和骨形成蛋白-7表达的影响

目的研究肾康注射液对单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠模型肾间质转化生长因子-β1（TGF-β1）和骨形成蛋白-7（BMP-7）表达的影响。方法将SD雌性大鼠54只随机分为正常对照组、UUO模型组、肾康治疗组，肾康治疗组用肾康注射液灌胃，分别在手术后第5，10，15天处死大鼠，在光镜下观察肾组织病理改变，应用免疫组织化学方法检测肾小管间质中TGF-β1，和BMP-7表达。结果与正常对照组相比，UUO模型组大鼠肾脏TGF-β1表达明显升高，BMP-7表达明显减少，但在予肾康注射液治疗后能显著下调UUO模型大鼠TGF-β1表达，上调BMP-7表达。结论肾康注射液可减轻肾小管间质纤维化，延缓慢性肾功能衰竭进展。     

尿毒清联合川芎嗪注射液治疗慢性肾功能不全的临床观察

目的：通过观察尿毒清联合川芎嗪对慢性肾功能不全患者的疗效,进一步探讨其作用机制。方法：将95例慢性肾功能不全患者随机分为实验组（50例）和对照组（45例）,实验组给予尿毒清联合川芎嗪治疗;对照组给予包醛氧淀粉。观察两组患者治疗前后的临床疗效和血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、肾小球滤过率（GFR）、血红蛋白（Hb）、红细胞（RBC）等指标。结果：实验组治疗后的总有效率、GFR、Hb和RBC显著高于对照组,BUN、Scr显著低于对照组。结论：尿毒清联合川芎嗪对早、中期慢性肾功能不全患者具有延缓肾衰竭进展、稳定肾功能、改善贫血状态的作用。     

促红细胞生成素对顺铂急性肾损伤的保护作用

目的：探讨促红细胞生成索（Erythopoietin,Epo）对顺铂（CDDP）急性肾损伤的保护作用及机制。方法：建立大鼠CDDP急性肾损伤动物模型,将SD大鼠随机分为生理盐水（NS）组、CDDP组及Epo治疗（CDDP＋Epo治疗）,观察各组血清尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）和肾组织匀浆超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）及肿瘤坏死因子-α（TNF—α）的变化。结果：Epo治疗组血清BUN、Scr及MDA、TNF-α较CDDP组显著下降（P〈0．05）,SOD显著升高（P〈0．05）。结论：Epo可提高SOD,降低TNF—α对CDDP急性肾损伤具有保护作用。     

阿奇霉素对单侧输尿管梗阻大鼠NF-κBp65和MCP-1及ColⅢ表达的影响

目的研究阿奇霉素对单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠肾间质核因子-κB（NF-κB）、单核细胞趋化因子-1（MCP-1）、胶原Ⅲ（ColⅢ）表达的影响,探讨其对肾间质纤维化的作用机制。方法采用单侧输尿管结扎肾间质纤维化模型,将60只SD大鼠随机分为3组：假手术组（正常对照组）,单侧输尿管结扎组（模型组）,阿奇霉素组（治疗组）,分别于术后第3、7、14天处死3组大鼠。用HE和MASSON染色法观察肾脏病理改变,用免疫组化方法检测NF-κBp65、MCP-1、ColⅢ表达情况。结果模型组NF-κBp65、mCP-1、ColⅢ在肾间质表达明显增强,与正常对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;治疗组各因子的表达下调,与相应时间点模型组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论阿奇霉素可降低NF-κBp65、MCP-1、ColⅢ的表达,缓解肾间质纤维化。     

盐酸二甲双胍对非酒精性脂肪肝大鼠脂肪组织相关基因表达的影响

目的:从基因表达水平上分析盐酸二甲双胍对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠模型的干预效果及其作用机制。方法:以高脂饲料饲喂雄性Wistar大鼠诱发NAFLD,并分别进行盐酸二甲双胍干预与蒸馏水灌胃对照,每组8只,为期4周。通过逆转录和定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)方法检测脂肪组织中脂联素、瘦素、肿瘤坏死因子(TNF)-α、抵抗素和解偶联蛋白2的mRNA相对水平并进行t检验。结果:与对照组比较,药物干预组脂联素mRNA相对水平略有上升(P>0.05),瘦素mRNA和TNF-αmRNA相对水平显著下降(P<0.05)。2组样品中均未检测到抵抗素和解偶联蛋白2的mRNA。结论:盐酸二甲双胍可能主要是通过促进脂联素基因表达和抑制TNF-α基因表达来调节肝脏脂肪代谢、改善肝细胞脂肪变性和炎症反应,从而发挥其对NAFLD的干预作用。     

肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白对佐剂性关节炎大鼠滑膜中TNF-α、TGF-β1 和 VEGF 表达的影响

目的探讨肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白对佐剂性关节炎大鼠滑膜中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、转化生长因子-β1（TGF—β1）血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法将成年雄性Wistar大鼠随机分为5组,Ⅱ-Ⅴ组建立佐剂性关节炎大鼠（AA）模型,于造模后第12天开始Ⅲ组给予甲氨喋呤灌胃治疗,Ⅳ-V组给予益赛普皮下注射治疗。第28天取膝关节滑膜,常规HE染色,计算滑膜病理积分,免疫组织化学染色检测TNF-α、TGF-β1和VEGF在膝关节滑膜的表达。结果正常对照组大鼠滑膜组织均有少量TNF-α、TGF-β1和VEGF的表达,Ⅱ～Ⅴ组较Ⅰ组均明显增高（P〈0．05）。Ⅳ、Ⅴ组滑膜组织TNF—α表达较Ⅱ组明显减低（P〈0．05）,而Ⅲ组与Ⅱ组无统计学意义（P〉0．05）。Ⅲ～Ⅴ组滑膜组织TGF—β1、VEGF的表达均明显低于Ⅱ组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论可溶性重组人肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白可明显降低AA大鼠滑膜组织TNF-α、TGF—β1和VEGF表达,对AA大鼠的关节炎症有明显的治疗作用,可能抑制局部组织血管新生。