耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的耐药表型及同源性分析

目的了解医院耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌分离株的耐药表型、携带blaKPC基因的型别及菌株同源性,为控制耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌传播及临床治疗提供科学依据。方法收集35株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌临床分离株,用K-B纸片法进行药敏试验;应用PCR方法检测blaKPC基因,并通过测序进行分型;采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术对菌株进行分子分型,建立医院PFGE指纹图谱库,运用BioNumeries7.0生物分析软件对菌株之间的亲缘关系及同源性进行分析。结果 35株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌对18种临床常用抗菌药物呈广泛耐药,耐药机制主要是携带blaKPC-2类耐药基因,携带率达82.86%;PFGE分子分型共分为10个谱型,优势型别为KPN01.002型(11株);各菌株间相似性系数达93.00%以上。结论产KPC-2型碳青霉烯酶为医院耐碳青霉烯类肺炎克雷伯细菌的主要耐药机制;不同病区菌株呈高度同源性分布;且可能存在院内的同源暴发,应加强细菌耐药性监测和医院感染的监控。     

Carba NP碳青霉烯酶检测方法在医院感染监测中的应用

目的 研究Carba NP法检测3株产酶菌株同源性及耐药机制,探讨Carba NP碳青霉烯酶检测方法在医院感染监测中的应用价值,为临床治疗提供参考依据。方法 于2012年7月-2013年1月采用Carba NP法对检出3株产碳青霉烯酶克雷伯菌属细菌进行鉴定、药物敏感性、菌株特征及药物敏感谱;PCR扩增和测序碳青霉烯酶的基因型;PFGE电泳探讨3株菌的亲缘关系。结果 菌株1为肺炎克雷伯菌,产碳青霉烯酶酶KPC-2;菌株2为肺炎克雷伯菌,产碳青霉烯酶IMP-4,菌株3为产酸克雷伯菌,同时产KPC-2和IMP-4;PFGE结果表明该3株菌不是近源的克隆株,提示KPC-2和IMP-4基因元件在该病房的跨种属传播。结论 Carba NP能早期迅速准确的检出菌株是否产碳青霉烯酶,为产碳青霉烯酶菌株的医院感染提供早期线索,在医院感染监测、控制中有重要应用价值,结合PCR及测序,PFGE的结果能在医院获得性感染控制方面发挥积极的作用。     

患者及相关环境分离CRKP的耐药谱与同源性

目的了解某医疗机构耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)感染患者临床分离株与环境分离株的同源性。方法收集该院1例患者分离的CRKP与该患者周围环境中检出的4例肺炎克雷伯菌,测定5株菌对临床上常用抗菌药物的敏感性,利用改良Hodge试验和CIM(Carbapenem Inactivation Method)试验检测5株菌产碳青霉烯酶情况,采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)对其进行同源性分析。结果药敏试验结果显示,5株肺炎克雷伯菌(1株来自患者,4株来自于患者所在的病房环境,分离自护工手、溶液瓶口、升降扶手、床栏杆)除对头霉素类、氨基糖苷类抗生素的药敏结果不一致外,对其他各类抗菌药物均表现为耐药。改良Hodge试验和CIM试验证实5株菌均产碳青霉烯酶;PFGE结果显示,病房溶液瓶口、床栏杆、病床升降扶手同患者标本分离的CRKP电泳图谱一致,为同一菌株,而护工手同患者标本分离的CRKP电泳图谱有2条条带的差异,其菌株间有相近的关系。结论患者及其周围环境检出同一种CRKP,应严格执行医院感染控制制度,隔离感染患者,加强环境的清洁与消毒,避免医院感染暴发。     

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌同源性分析及blaKPC-2基因的检测

目的对耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌进行同源性分析及blaKPC-2基因检测。方法采用最低抑菌浓度琼脂稀释法检测30株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌对17种抗菌药物的敏感性,以WHONET 5.4软件分析细菌耐药表型,以脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌株的基因型,以聚合酶链反应检测blaKPC-2基因、并进行基因测序。结果 30株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的耐药表型模式有6种,其中泛耐药及仅对妥布霉素敏感的菌株共22株,占73.3%;PFGE图谱分析有5种类型,其中Ⅰ型菌株流行为主,占80.0%;从7号试验菌株检测出blaKPC-2基因,其他试验菌株均未检测出blaKPC-2基因。结论 30株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌存在高度同源性的菌株流行,并有一株细菌检测出blaKPC-2基因,临床科室及医院感染部门应采取措施控制这些菌株在医院内的传播。     

重症监护病房耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌同源性分析

目的了解重症监护病房(ICU)分离的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的药敏结果及同源性。方法对2014年4—5月某院ICU患者和环境分离的11株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌进行药敏试验,以及采用随机扩增多态性DNA(RAPD)扩增法进行同源性分析。结果 11株肺炎克雷伯菌8株分离自患者,3株分离自环境,标本分布以痰为主(6株,占54.55%)。药敏试验结果显示:10株(90.91%)对环丙沙星耐药;11株对复方磺胺甲口恶唑均敏感,对亚胺培南均为中介,对其余抗菌药物耐药率均为100%。11株肺炎克雷伯菌均有3个条带,可以分为2型:Ⅰ型10株(1~5号、7~11号菌株),Ⅱ型1株(6号菌株)。结论医院ICU肺炎克雷伯菌耐药严重,ICU患者和环境分离的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌为同一克隆株。加强ICU环境清洁、消毒及监测,有利于减少和及时预警多重耐药菌,降低医院感染。     

耐碳青酶烯类肺炎克雷伯菌同源性分析

目的 对耐碳青酶烯类肺炎克雷伯菌进行同源性分析,为临床治疗和医院感染控制提供帮助.方法 使用WHONET5.4软件对40株耐碳青酶烯类肺炎克雷伯菌进行表型耐药模式分析,质粒图谱和PFGE进行基因型分析.结果 对临床常用的18种抗菌药物耐药表型分析,耐药模式有8种,其中以全耐药及仅对妥布霉素敏感的2个耐药谱(72.5%)流行为主;质粒分型图谱分析有5种类型菌株,以Ⅰ、Ⅱ型菌株流行为主,占82.5%;PFGE图谱分析有5种类型菌株,其中Ⅰ型菌株流行为主,共34株(85.0%).结论 3种方法均测出实验菌株存在高度的同源性的菌株流行,应引起临床科室及医院感染部门的高度重视,避免发生严重暴发流行.     

耐碳青霉烯酶肠杆菌科耐药基因及同源性分析

目的了解临床分离的60株耐碳青霉烯酶肠杆菌(CRE)对常用抗菌药物的耐药性及耐药机制,以期帮助临床医师制定合理抗菌药物给药方案,最大限度阻止耐药菌的产生与传播。方法收集2011年1月-2013年6月衢州市人民医院住院患者临床分离的CRE 60株;检测CRE对抗菌药物的敏感性;通过改良Hodge试验和EDTA协同试验对碳青霉烯酶进行表型分析,应用PCR法进一步确定碳青霉烯酶的基因型;采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)对21株肺炎克雷伯菌进行分子分型。结果 60株CRE对多数β-内酰胺类和喹诺酮类抗菌药物耐药,部分菌株对氨基糖苷类抗菌药物敏感,磺胺甲噁唑/甲氧苄啶的敏感率最高为56.7%;37株细菌携带KPC-2基因,11株细菌携带IMP-4基因,3株细菌携带NDM-1基因,未检出VIM、OXA-48型碳青霉烯酶基因;肺炎克雷伯菌PFGE分型结果提示,A型菌株引起医院克隆菌株的流行播散。结论 KPC-2及IMP-4基因是医院CRE最主要的获得性碳青霉烯酶基因,肺炎克雷伯菌存在院内流行株,应重视CRE的感染,并做好对其的耐药监测。     

2017年—2020年4634株肺炎克雷伯菌的临床分布及耐药性分析

目的调查肺炎克雷伯菌临床分离株的分布及对常用抗菌药物的耐药性,为控制医院内感染及合理使用抗菌药物提供依据。方法收集2017年1月—2020年6月温州医科大学附属第一医院从各种标本分离的4 634株肺炎克雷伯菌。常规方法进行细菌分离培养,用VITEK全自动微生物分析仪对肺炎克雷伯菌进行菌种鉴定和药敏试验。结果肺炎克雷伯菌引起的感染夏秋季明显高于春冬季,主要分离自痰液、血液及尿液,肺炎克雷伯菌医院感染高发科室为中心重症监护病房(ICU),占15.90%。在18种临床常用抗菌药物中,肺炎克雷伯菌对氨苄西林的耐药率最高(87.99%),对阿米卡星的耐药率最低(7.47%),肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗菌药物的耐药率呈逐年缓慢下降的趋势。碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)和碳青霉烯敏感肺炎克雷伯菌(CSKP)对常用抗菌药物的耐药率差异有统计学意义(P<0.001)。结论肺炎克雷伯菌的临床分离率高,耐药情况严重,应加强细菌耐药监测,合理使用抗菌药物。     

临床分离肠杆菌科细菌金属β 内酰胺酶检测

目的研究某院2007-2011年临床分离的肠杆菌科细菌产金属β 内酰胺酶主要基因型及流行情况。方法常规分离菌株,采用纸片扩散法和琼脂稀释法进行药物敏感性试验,改良Hodge试验和Etest MBL确认纸条法表型筛查金属β 内酰胺酶,聚合酶链反应（PCR）扩增金属β 内酰胺酶基因型,接合试验分析质粒携带基因的转移,脉冲场凝胶电泳（PFGE）分析产金属酶细菌的同源性。结果3 297株肠杆菌科细菌中,对碳青霉烯类抗生素耐药的菌株共41株,其中14株碳青霉烯酶表型阳性,3株肺炎克雷伯菌产IMP 8型金属酶,属于同一克隆,并可通过质粒传递。 结论 该院发现3株产IMP 8型金属酶的肺炎克雷伯菌,且具有较高的同源性。     

骨科患者感染肺炎克雷伯菌特点及其耐药性分析

目的分析医院骨科患者感染肺炎克雷伯菌的分布及其耐药情况,以指导临床合理使用抗菌药物。方法通过细菌分离培养和药敏试验方法,对某医院骨科患者送检病原学标本进行检测和分析。结果共检出肺炎克雷伯菌229株,检出率有逐年增加趋势;主要分离自痰液和创面分泌物。产β-内酰胺酶菌株占37.99%。各年龄段检出产酶菌株差异有统计学意义(χ~2=15.732,P 0.05)。药敏结果显示,肺炎克雷伯菌对所试验的抗菌药物尚有一定敏感性,未检测出对碳青霉烯类耐药的菌株。结论骨科住院患者感染肺炎克雷伯菌产酶菌株的耐药性高,需要根据药物敏感试验合理选用抗生素,减少耐药率的发生。     

医院感染肺炎克雷伯菌连续6年耐药性监测研究

目的 观察和监测医院感染肺炎克雷伯菌对抗菌药物的耐药变化及产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）菌株的发生率。方法 连续检测1999-2004年医院感染肺炎克雷伯菌的耐药状况,药敏试验采用K-B纸片法,结果判定依据美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）标准。结果 肺炎克雷伯菌对亚胺培南全部敏感,头孢他啶、头孢吡肟、头孢哌酮/舒巴坦对肺炎克雷伯菌亦有很好的抗菌活性,对其他抗菌药物耐药率有逐年升高趋势,ESBLs总阳性率为20.2%。结论 及时总结医院感染肺炎克雷伯菌的耐药菌变迁规律,具有十分重要的临床意义。     

碳青霉烯类抗生素敏感性下降肺炎克雷伯菌耐药机制及分子流行病学研究

目的:研究临床分离对碳青霉烯类抗生素敏感性下降肺炎克雷伯菌的耐药机制及同源性分析。方法:收集对碳青霉烯类抗生素敏感性下降肺炎克雷伯菌25株。E test法测定10种抗菌药物的MIC值;脉冲场凝胶电泳分析菌株同源性;PCR及克隆测序分析耐药基因型。结果:25株菌株对β-内酰胺类抗生素呈多重耐药,但对多黏菌素E和替加环素敏感。PFGE分型除一株外均为同一克隆(暗示医院内感染)。25株菌株均产KPC-2碳青霉烯酶基因,并同时携带CTX-M、SHV、DHA等多种耐药基因。结论:携带KPC-2基因的肺炎克雷伯菌同时携带多种耐药基因。此类菌株对碳青霉烯类抗生素敏感性下降并对除多黏菌素E和替加环素外抗生素多重耐药。     

MRSA分子流行病学研究 FREE

目的 采用脉冲场凝胶电泳（PFGE）分型及多重聚合酶链反应（PCR）SCCmec分型技术对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）进行基因分型,以了解医院感染MRSA的流行情况。方法 收集天津市南开医院2007年1月-2008年12月住院患者送检标本分离的MRSA 40株,进行耐药谱分析、PFGE分型和SCCmec分型。结果40株菌耐药谱高度相似,可被分为A-E 5个PFGE型,其中A型21株,B型8株,C型4株,D型6株,E型1株;SCCmec分型：Ⅰ型1株,Ⅲ型33株,Ⅳ型1株,V型5株。通过对医院内菌株发生的时间和空间分析,明确了感染的发生和传播情况,即在2007年1月-2008年12月存在MRSA散发感染。结论 PFGE可有效鉴定菌株间的亲缘关系,SCCmec分型对是否为医院感染菌株有提示作用,两种分型方法相结合可更好地鉴定流行菌株的特征,为医院感染的监控提供依据。     

住院患者医院感染病原菌对药物敏感性的调查及护理干预

目的 探讨特定的护理干预对住院患者医院感染发生率的影响,并观察病原菌及药敏率.方法 选取医院住院治疗的患者,共406例,依患者来院的顺序分为观察组与对照组,观察组共203例,应用特定的护理干预措施,对照组共203例,应用普通的护理干预,观察两组患者医院感染的发生率、医院感染患者病原菌及药敏率.结果 观察组医院感染的发生率为3.9％,明显低于对照组的8.9％,患者共26例出现医院感染,以铜绿假单胞菌(11株)、肺炎克雷伯菌(8株)、金黄色葡萄球菌(9株)和溶血葡萄球菌(8株)为主.结论 特定的护理干预能减少住院患者医院感染的发生率,临床中可以推广应用,对感染的患者,治疗前及时进行药敏试验有重要价值.     

2006-2009年重症监护病房医院感染大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌的耐药性分析

目的探讨医院重症监护病房(ICU)医院感染大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌现状及耐药特点,为预防和控制ICU的医院感染提供依据。方法收集ICU 2006年1月-2009年12月医院感染大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌菌株,使用K-B法进行药敏试验。结果 2006-2009年ICU共检出大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌409株,其中大肠埃希菌233株,产ESBLs大肠埃希菌61株,占26.2%,肺炎克雷伯菌176株,产ESBLs肺炎克雷伯菌38株,占21.6%;大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类美罗培南与亚胺培南的耐药率在所测14种抗菌药物中最低。结论经验性使用碳青霉烯类抗菌药物治疗ICU的医院感染是可行的。     

骨科患者术后院内感染病原菌及耐药性分析

摘要:目的　探讨研究骨科患者手术后院内感染致病菌的分离情况、菌株的药敏试验结果,为指导临床治疗提供基础资料。方法　对某院收治的120例骨科患者手术后院内感染的标本进行细菌学培养,并对分离出的菌株进行药物敏感试验。结果　120例骨科患者手术后出现院内感染者中,共培养出细菌104株,真菌4株,病原菌总体分离率为90.00%。其中革兰阴性菌为70株,占64.81%,以铜绿假单胞菌和肺炎克雷伯菌为主;革兰阳性菌为34株,以金黄色葡萄球菌和粪肠球菌为主。药敏试验结果显示,大多数革兰阴性菌对β-内酰胺类抗生素、四环素和复方新诺明耐药,对氨基糖苷类和喹诺酮类等抗生素敏感;而绝大多数革兰阳性菌则对β-内酰胺类和碳氢霉稀类抗生素耐药,对万古霉素等敏感。多重耐药菌株则较少出现。结论　骨科患者手术后出现院内感染病原菌以革兰阴性菌为主要病原体,并且分离出的菌株抗生素敏感性各有不同,在具体临床救治过程中应根据实际情况酌情选择抗生素进行合理治疗。     

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的耐药机制与分子流行病学特征

目的了解耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)的碳青霉烯酶基因携带情况及分子流行病学特点,为医院感染控制和临床治疗提供实验室依据。方法收集山东省泰安市中心医院2014年1—11月临床分离的CRKP 13株,采用Walk Away 96 PLUS型全自动细菌分析仪进行细菌鉴定和药敏试验;改良Hodge试验及EDTA协同试验进行碳青霉烯酶表型的确认;采用多聚酶链反应(PCR)方法扩增相关碳青霉烯类耐药基因(bla KPC、bla IMP、bla VIM、bla GIM及bla NDM-1)并测序;采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)和多位点序列分型(MLST)调查菌株的克隆相关性并进行流行病学比较。结果 13株CRKP主要来源于痰(7株,53.85%)及尿(4株,30.77%),对复方磺胺甲口恶唑、四环素的耐药率较低(均40%),对其他抗菌药物(除阿米卡星)的耐药率均70%,对碳青霉烯类药物的耐药率均为100%;13株细菌改良Hodge试验均为阳性,5株细菌EDTA协同试验阳性;经PCR测序确认,碳青霉烯酶基因中,bla KPC基因最常见(13/13),其次为bla NDM-1基因(5/13),未发现其基因bla IMP、bla VIM和bla GIM;PFGE聚类结果显示,13株肺炎克雷伯菌被分为5型,主要为C型(9/13),且均属于ST11,其他分别为ST37、ST626、ST628和ST668型。结论碳青霉烯酶基因bla KPC与bla NDM-1是引起该院肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素耐药的主要原因,ST11是主要的克隆类型,医院需尽快强化医院感染预防控制措施。     

肠杆菌科细菌耐药性及其耐碳青霉烯类菌株分布特点

目的了解2015年度西京医院肠杆菌科细菌耐药性,以及耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的分布特点,为临床合理应用抗菌药物提供依据。方法对2015年1—12月西京医院住院及门诊患者临床感染标本进行病原菌培养、分离和鉴定,采用K-B纸片扩散法进行药敏试验,采用改良Hodge方法进行碳青霉烯酶确证试验,统计肠杆菌科细菌耐药情况。结果 2015年共检出病原菌4 166株,肠杆菌科细菌1 554株,分离率为37.30%,其中大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、奇异变形杆菌及产气肠杆菌位列肠杆菌科细菌的前5位。787株大肠埃希菌中产ESBLs菌株581株,产酶率为73.82%;367株肺炎克雷伯菌中产ESBLs菌株182株,产酶率为49.59%。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对头孢唑林耐药率最高,分别为93.14%、78.48%。共检出耐碳青霉烯类抗生素肠杆菌科细菌81株,分离率为5.21%,其中肺炎克雷伯菌41株,阴沟肠杆菌27株,大肠埃希菌13株;主要来自神经外科(42株),消化内科(9株),神经内科(8株)。1.02%(8/787)的大肠埃希菌、3.27%(12/367)的肺炎克雷伯菌具有多重耐药性。结论医院感染病原菌中肠杆菌科细菌所占比例较高,肠杆菌科细菌产ESBLs菌株的检出率较高,耐碳青霉烯类抗生素肠杆菌科细菌分离率较去年有所上升,尤以肺炎克雷伯菌显著。