HLD ATP 7B基因8、12、14、16、18号外显子突变的DNA分析(Ⅱ)

目的 对肝豆状核变性(又称Wilson病,WD)基因的突变位点外显子8、12、14、16、18进行DNA测序分析并建立直接基因诊断方法.方法 对102例WD病人和82例对照正常人提取基因组DNA,PCR扩增ATP7B第8、12、14、16、18号外显子,8号外显子及12号外显子扩增产物分别行Msp Ⅰ及Tail内切酶酶切分析;后对所有病人及对照组DNA外显子扩增产物行直接测序,进而与临床表型做相关分析.结果 102例WD病人,8号外显子35例存在Msp Ⅰ酶切反应异常,测序示Arg778Leu纯合或杂合突变,占34.31%,其中12例伴Leu770Leu多态性;12号外显子13例存在Tail酶切反应异常,测序示Thr935Met杂合错义突变,占12.75%,1例存在Arg919Gly杂合错义突变,Arg952Lys在患者及对照组中均检出;余外显子14、16、18对照组与患者均未发现突变.结论 ATP7B基因外显子8、12为WD突变热点,其中8号外显子以Arg778Leu、12号外显子以Thr935Met为主要突变形式,PCR-Msp Ⅰ酶切、PCR-Tail酶切反应可作为WD病人初步筛选方法.     

婴儿运动里程碑和神经反射发育的追踪研究

目的对肝豆状核变性(又称Wilson病,WD)基因的突变热点外显子8进行MspⅠ酶切、DNA测序,进而对实验中的方法进行研究.方法追踪测察婴儿运动里程碑和神经反射发育规律.结果婴儿运动里程碑、原始反射和姿势反映检查项目Cronbach内部一致系数分别为0 .95、0 .56和0 .94;运动里程碑和姿势反应评分有显著意义的相关;除足抓握反射外,其他6种原始反射在6个月龄已基本消失.结论运动里程碑、原始反射和姿势反应的消长规律可用于评价儿童发育状况,早期发现发育异常.     

7个纤维蛋白原γ链Arg275位点突变导致的遗传性异常纤维蛋白原血症家系的基因型与临床特征分析

目的探讨7个纤维蛋白原(Fg)γ链275位点突变导致的遗传性异常纤维蛋白原血症家系的基因型与临床特征的关系。方法根据先证者常规凝血功能实验、Fg活性(Fg:C)及Fg抗原(Fg:Ag)等指标诊断遗传性异常纤维蛋白原血症;PCR法扩增Fg基因的全部外显子及侧翼序列,扩增产物经纯化后直接测序,明确突变位点进一步分析基因型与临床特征的关系。结果 7个家系15例患者存在Fgγ链275位点突变。其中4个家系为Arg275Cys突变,其余为Arg275His突变。15例患者有7例无症状,8例有出血相关症状:包括牙龈出血、损伤后出血难止、月经量过多等。同一突变类型(Arg275Cys或Arg275His)的家系成员间,其临床表现从无症状到重型不等。结论γ链Arg275是本地区的突变热点,其临床表型以无症状或出血表现为主,未见血栓表现。纤维蛋白原基因突变的类型与临床表型无绝对相关性。     

耐环丙沙星鲍氏不动杆菌的gyrA基因及parC基因突变分析

目的 研究本地区临床分离鲍氏不动杆菌环丙沙星耐药表型与DNA旋转酶A亚单位gyrA基因及拓扑异构酶Ⅳ parC基因突变的关系。方法收集28株耐药株及2株敏感株，通过PCR扩增其gyrA基因及parC基因，并对扩增产物进行限制性片段长度多态性分析（PCR-RFLP）及DNA序列分析。结果敏感株的gyrA基因产物经HinfⅠ酶切后可产生两个片段，耐药株则产生1个片段；而parC基因产物经Hinf Ⅰ酶切后，敏感株及耐药株均产生两个片段；DNA测序显示，5株耐药株gyrA基因存在Ser83→Leu及Ala88→Thr突变，其中Ser83→Leu的突变是导致Hinf Ⅰ酶切位点消失的原因，而1株敏感株无突变；1株敏感株与1株耐药株的pcrC基因存在Ser108→Ile突变，另外14株耐药株存在多位点同义突变。结论与parC基因相比，gyrA基因突变是鲍氏不动杆菌对环丙沙星耐药的主要分子基础，环丙沙星的高水平耐药可能需要多种不同的突变。     

先天性甲状腺功能减低症患儿DUOX2基因突变检测

目的检测20例先天性甲状腺功能减低症(CH)患儿二元氧化酶2(DUOX2)基因突变。方法抽取20例CH患儿外周血并提取DNA,用wafergen验证技术检测先证者甲状腺过氧化物酶(TPO)基因、二元氧化酶2(DUOX2)基因和二元氧化酶成熟因子2(DUOXA2)基因。PCR扩增先证者DUOX2基因突变所在的外显子区域,以DNA测序技术检测DUOX2基因突变,并对发现突变的部分CH患儿父母进行对照分析。结果 7例CH患儿存在6种DUOX2基因突变,分别为c.1588AT[p.Lys530X]、c.2033AG[p.His678Arg]、c.4027CT[p.Leu1343Phe]、c.2048GT[p.Arg683Leu]、c.3200CT[p.Ser1067Leu]、c.1708CT[p.Gln570X],其中c.1708CT[p.Gln570X]为1种新突变。结论中国人群CH患儿存在较高频率的DUOX2基因突变。     

RDPCR检测DNA损伤定位于核苷酸水平的研究

目的简化RDPCR建立程序,并在核酸序列水平精确定位DNA损伤。方法培养TK6细胞,抽提基因组DNA,制备k-ras基因外显子2的单链探针。扩增k-ras基因外显子2(以下称短片段)。酶切短片段和基因组DNA构建损伤模型,前者经依赖随机化末端连接物PCR(RDPCR)扩增,每一步产物作凝胶电泳,终产物与单链探针杂交显色,并进行测序;后者以短片段建立的实验条件进行RDPCR扩增,产物与单链探针杂交显色,并进行测序。结果凝胶电泳可见酶切短片段在RDPCR中每一步骤的目的产物条带;酶切短片段和酶切基因组DNA的RDPCR产物均在相应位置出现杂交条带,测序证实损伤均位于HinfI在k-ras外显子2上的酶切位点。结论短片段建立RDPCR的实验条件简单易行;并首次利用RDPCR检测DNA损伤精确定位于核酸序列水平的碱基位置。     

成纤维细胞生长因子受体2基因突变与crouzon综合征

采用多聚酶链式反应结合DNA直接测序的方法,对5例crouzon综合征患者FGFR 2基因第7外显子(ⅢA或ⅢU)和第9外显子(ⅢC或ⅢB)进行了检测。结果发现2例为第9外显子突变(Gly 338 Arg;Ala 344 Gly),1例为第7外显子突变(Gln 289Pro)。     

AIS大家系的AR突变效应分析

目的：分析雄性激素不敏感综合征（AIS）大家系的AR突变效应。方法：从AIS患者外周血中将基因组DNA提取出来,以特异的引物聚合酶联反应（PCR）扩张雄激素受体（AR）基因,单链构象多态性分析（SSCP）扩增产物,将突变的外显子筛选出来,然后对其直接进行PCR产物测序。结果：所选取的8例人员中,有2例AIS患者缺失AR基因2号外显子,其余6例存在外显子电泳条带,经过基因测序,发现其符合正常AR基因。结论：本研究方法简便实用,在临床诊断和研究AIS中具有极为有益的应用。     

X连锁显性遗传性肾炎一家系相关基因排除定位分析

目的 研究我国X连锁显性遗传性肾炎一家系(又名Alport综合征，Alport’s syndrome，AS)编码Ⅳ型胶原α5链的COIAA5基因突变特点。方法 提取35例现存家系成员基因组DNA，根据COIAA5基因中与外显子相邻的内舍子序列设计引物．分别作DNA聚合酶链式反应(PCR)，将该基因所有51个外显子扩增。以琼脂搪凝胶电泳鉴定产物，作单链构象多态性(SSCP)分析检测PCR产物，对迁移率异常者进行DNA直接测序。结果 PCR-SSCP分析发现17个外显子PCR产物单链DNA迁移率异常。通过DNA直接测序发现9个外显子可疑突变，但反向测序均未能证实。结论 该家系COIAA5基因外显子未发生突变。其突变可能发生在该基因内含子或其它致病基因。     

MDR3基因外显子6和9突变与妊娠期肝内胆汁淤积症的关系

目的:探索妊娠期肝内胆汁淤积症(intrahepatic cholestasis of pregancy,ICP)患者MDR3基因外显子6和9突变与ICP发病的关系。方法:从云南省临沧地区各少数民族自治县29例ICP患者及32例正常孕妇及患者家属组的外周血中提取DNA,聚合酶链反应(PCR)扩增MDR3基因外显子6和9,PCR产物进行DNA测序分析。结果:所有ICP患者及对照组PCR均扩增出目的片段,且外显子6存在多态性位点C158T,外显子9存在突变位点G581A,但两组的基因频率无明显差异。结论:云南省临沧少数民族地区ICP的发生可能与MDR3外显子6和9的突变无关。     

对医院护理管理队伍建设的几点思考

文章分析了当前医院护理管理队伍存在的主要问题：知识结构不合理；专业思想不纯正；接受继续教育不足：工作效能低下。提出了建设高素质护理管理人才队伍的思路：严格标准，搞好选才；加强思想教育和引导；加大培养力度；建立科学考评和激励机制；完善人才合理流动措施；合理编制，突出效率。     

医学科技成果信息资源网络开放利用的原则探析

医学科技成果信息资源网络开放利用，为资源的开放共享创造了良好条件，它使医学科技信息得到了高效传播和最大利用。网络开放利用医学科技成果信息资源，利用的主体和核心是其信息内容。信息内容是网络用户从中提取知识和所需资料的主要来源，同时也是信息破坏者发动攻击的主要目标之一，因而，信息内容的安全是信息安全的基本问题，主要包括信息内容的规范性、完整性与真实性、知识产权保护与利用的合理性等。要做好这些工作，应该遵循相应的原则和要求。     

政府公共财政支出分配公平性研究进展

政府公共财政支出是社会再分配的一种形式，其目的是促进社会公平。因此，政府的公共财政支出应该具有较强的目标针对性，应该向社会贫困人群倾斜，使其从中受益。本文通过查阅国内外政府公共财政支出分配公平性的相关文献资料。阐述了相关研究的进展情况，井着重探讨了政府公共财政支出分配公平性的内涵、研究范围、测算方法和研究意义。以及实际研究中存在的问题，最后提出我国政府公共财政支出分配公平性的研究方向和需要进一步完善的地方。     

长春新碱过量引起严重毒副反应1例的护理体会

报道1例霍奇金淋巴瘤患者因误用长春新碱（VCR）10mg一次性静脉推注后治疗护理情况。其出现间断性神志恍惚、眼睑闭合不全、言语不清、口腔黏膜糜烂、全身疼痛、麻痹性肠梗阻、尿潴留、手足麻木等症状,经积极解救,禁食,持续胃肠减压、胃管内注入麻油、开塞露、生理盐水灌肠,合理应用肠外营养,注重疼痛、心理护理,做好口腔、肛周护理,预防感染加重,患者病情得到控制好转出院。     

上海市某医院骨科平均住院日影响因素分析

对上海市某医院2003年-2007年骨科出院病人的住院日描述性分析．2003年-2007年骨科的床位利用指数与平均住院日相关性分析．2003年-2007年骨科床位与医护比例分析．2007年骨科前10大病种平均住院目影响因素分别进行单因素相关性分析和多因素逐步回归分析（STATA软件）。通过对骨科10大病种住院日影响因素分析,术前等待天数、手术类型、是否输血分别对10个、9个和8个病种的住院目有影响。输血因素和手术类型是医院不可控、由病人的病情决定的,术前等待天数是管理因素,是最值得医院重视的影响因素。