乳腺癌组织Cox-2和ERβ mRNA表达及其相关性研究

目的：探讨乳腺癌组织中还氧化酶-2（Cox-2）与雌激素受体β（ER β）mRNA的表达及其相关性。方法：以β-actin基因为内参照,应用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）技术,检测35例乳腺癌患者的乳腺癌组织、相应癌旁组织和相应正常乳腺组织中Cox-2和ER β mRNA表达,应用Gene Tools软件对RT—PCR产物电泳带进行半定量分析。结果：35例样本中,癌组织Cox-2 mRNA表达（29例）明显增高,全距为0．03～0．99,与相应癌旁组织表达（全距0．01～0．52）和正常乳腺组织表达（很弱或无表达）差异有统计学意义,P〈0．05。Cox-2 mRNA表达与年龄、原发肿瘤大小和TNM分期无关,P〉0．05;而与淋巴结转移状况有关,P〈0．05。癌组织中ER β mRNA表达水平（全距0～0．74）低于相应癌旁组织（全距0～0．90）和相应正常乳腺组织（全距0～1．14）,P〈0．05。ER β mRNA表达与年龄无关,P〉0．05;而与原发肿瘤大小、TNM分期和淋巴结转移状况有关,P〈0．05。Cox-2 mRNA的表达与ER β mRNA表达无明显相关。结论：Cox-2和ER β的mRNA表达与乳腺癌生物学特性有关,Cox-2与ER β mRNA表达无明显相关。     

乳腺癌组织Cox-2和ER β mRNA表达及其相关性研究

目的：探讨乳腺癌组织中还氧化酶-2（Cox-2）与雌激素受体β（ER β）mRNA的表达及其相关性。方法：以β-actin基因为内参照，应用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）技术，检测35例乳腺癌患者的乳腺癌组织、相应癌旁组织和相应正常乳腺组织中Cox-2和ER β mRNA表达，应用Gene Tools软件对RT—PCR产物电泳带进行半定量分析。结果：35例样本中，癌组织Cox-2 mRNA表达（29例）明显增高，全距为0．03～0．99，与相应癌旁组织表达（全距0．01～0．52）和正常乳腺组织表达（很弱或无表达）差异有统计学意义，P〈0．05。Cox-2 mRNA表达与年龄、原发肿瘤大小和TNM分期无关，P〉0．05；而与淋巴结转移状况有关，P〈0．05。癌组织中ER β mRNA表达水平（全距0～0．74）低于相应癌旁组织（全距0～0．90）和相应正常乳腺组织（全距0～1．14），P〈0．05。ER β mRNA表达与年龄无关，P〉0．05；而与原发肿瘤大小、TNM分期和淋巴结转移状况有关，P〈0．05。Cox-2 mRNA的表达与ER β mRNA表达无明显相关。结论：Cox-2和ER β的mRNA表达与乳腺癌生物学特性有关，Cox-2与ER β mRNA表达无明显相关。     

抑癌基因ING1在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的探讨ING1基因在乳腺癌组织中的表达及其对乳腺癌发生发展的作用。方法采用逆转录一聚合酶链反应（RT—PER）方法检测51例乳腺癌组织、30例癌旁正常组织、12例乳腺良性肿瘤组织中ING1基因mRNA的表达情况。分析乳腺癌组织中ING1mRNA的表达与临床病理特征的关系。结果乳腺癌组织中ING1mRNA的表达水平（0．5458±0．2310）低于癌旁正常组织（0．6625±0．1699）。ING1mRNA表达水平在癌组织与癌旁正常组织、良性肿瘤三组间比较的差异有统计学意义（P〈0．05）;ING1mRNA在乳腺癌组织中的表达水平与病理类型及淋巴结转移有密切关系（P〈0．05）,与其他病理学特征无关（P〉0．05）。结论ING1mRNA表达水平低下可能与乳腺癌的发生发展及预后密切相关,有可能成为乳腺癌基因治疗的新靶点。     

PTEN基因甲基化及其表达异常与胃癌的关系

目的：探讨PTEN基因表达、启动子区甲基化与胃癌及其临床病理特征的关系。方法：采用甲基化特异性PCR法（MSP）和逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法，分析胃癌组织及相应癌旁正常组织中PTEN基因启动子区甲基化及其mRNA表达情况。结果：48．2％（27／56）的胃癌组织和3．6％（2／56）的癌旁胃组织PTEN基因启动子区发生甲基化．癌组织PTEN基因启动子区甲基化率显著增高（P〈0．05）：其中，2例甲基化癌旁胃组织均为胃癌组织中有甲基化的病例．发生淋巴结转移的29例胃癌组织中．19例PTEN基因启动子甲基化；发生淋巴结转移的PTEN基因启动子甲基化显著高于无淋巴结转移组（P〈0．05）。RT—PCR结果显示，所有甲基化的胃癌组织中PTEN mRNA均无表达，结论：胃癌中PTEN基因mRNA失表达与其启动子区甲基化有关，这可能是胃癌发生、发展以及转移的原因之一。     

Kiss-1基因在乳腺肿瘤组织中的表达及其临床意义

目的探讨Kiss-1 mRNA在乳腺肿瘤组织和正常腺体组织中的表达及其临床意义。方法采用逆转录聚合酶链式反应（RT．PCR）法检测70例乳腺癌、40例乳腺纤维腺瘤及肿瘤旁正常腺体中Kiss-1 mRNA的表达,采用配对t检验、成组t检验及方差分析比较各组间Kiss-1 mRNA的相对表达水平。结果Kiss-1 mRNA在乳腺癌组织及纤维腺瘤组织中的表达量分别为（0．952±0．576）、（0．587±0．496）,均高于正常腺体组织（t=7．917,P=0．00;t=2．656,P=0．011）,乳腺癌组织中的表达量高于纤维腺瘤组织（t=3．365,P=0．001）。有淋巴结转移的乳腺癌组织中Kiss-1 mRNA表达量为（0．662±0．530）,低于无淋巴结转移乳腺癌组织（1．124±0．537）（t=3．495,P=0．001）。结论Kiss-1 mRNA在乳腺肿瘤组织中相对高表达,可能成为潜在的乳腺肿瘤标志物;Kiss-1 mRNA低表达可能与乳腺癌淋巴结转移相关。     

微小RNA206和连接蛋白43在乳腺癌原发灶及腋窝转移淋巴结中的表达变化

目的探讨微小RNA-206（miR-206）和连接蛋白（Cx）43在乳腺癌原发灶（PTs）及腋窝转移淋巴结（MLNs）中的表达变化关系。方法收集8例经病理学证实为浸润性导管癌的乳腺癌患者,取手术切除的癌旁正常腺体组织、乳腺癌PTs、配对的正常腋窝淋巴结（NLNs）及MLNs,采用实时定量PCR和Western blotting等实验方法,检测正常腺体组织、乳腺癌PTs、配对的NLNs、MLNs中miR-206和Cx43的mRNA和蛋白表达。各组间均数比较行单因素方差分析和Post hoc检验（SNK／LSD）。结果与正常乳腺腺体组织比较,乳腺癌PTs和NLNs中miR-206的mRNA表达明显降低,配对的MLNs中miR-206的mRNA表达较PTs和NLNs进一步降低（P〈O．05）。PTs、NLNs和MLNs中Cx43mRNA表达较正常乳腺组织明显降低（P〈O．05）,而PTs与MLNs中Cx43mRNA的表达差异无统计学意义（P〉0．05）。PTs和NLNs中Cx43蛋白表达较正常乳腺组织明显降低（P〈O．05）;与PTs比较,NLNs中Cx43蛋白表达的差异无统计学意义（P〉O．05）,而MLNs中Cx43蛋白的表达明显增加（P〈O．05）。结论miR-206和Cx43基因的相互作用可能与乳腺癌腋窝淋巴结转移有关。     

人膀胱癌组织中环氧化酶2的表达

背景与目的：环氧化酶（cyclooxygenase,COX)是人体内合成前列腺素的限速酶。最近研究表明,环氧化酶2（COX－2）与肿瘤的生成有关。本研究通过检测COX－1和COX－2在人膀胱癌组织、正常膀胱粘膜以及膀胱炎症组织中的表达,探讨COX在膀胱癌发生发展中的作用。方法：应用逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）和免疫组化法（Envision二步法）,检测膀胱移行细胞癌和癌旁组织、正常膀胱粘膜以及膀胱炎症组织中COX－1和COX－2 mRNA和蛋白的表达,并分析癌组织中COX的表达强度与肿瘤对应的各项病理参数之间的关系。结果：RT－PCR检测15例新鲜膀胱癌组织COX－2 mRNA均阳性表达,5例肉眼所见的癌旁正常组织中仅1例阳性,两者差异有显著性;而COX－1 mRNA在所有新鲜癌组织标本中均有结构性表达。免疫组织化学研究结果与RT－PCR结果相似,COX－2蛋白主要集中在肿瘤细胞浆内,阳性表达率为50％,正常膀胱粘膜（n=4)和膀胱慢性炎症组织（n=5)中没有表达;反之,COX－1蛋白主要表达在正常或炎症组织的平滑肌细胞上,肿瘤组织中为阴性表达。在40例膀胱移行细胞癌石蜡切片标本中,COX－2蛋白的表达强度与肿瘤的分级和分期有关,恶性度较高的Ⅲ级癌的表达水平高于I级和Ⅱ级癌,浸润性癌（T2－4）也高于浅表性癌（Ta-1)。结论：COX－2 mRNA和蛋白在人膀胱癌组织中表达增高,并与肿瘤的恶性率相关,说明COX－2可能在膀胱癌的发生发展中起着重要作用。     

乳腺癌组织中CD105 mRNA的表达及其临床病理意义

目的　探讨CD10 5mRNA在乳腺癌中的表达以及与乳腺癌临床病理特征的关系。方法以β actin基因为参照 ,应用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术 ,检测 4 0例乳腺癌患者的肿瘤中心处癌组织、肿瘤边缘癌组织及癌旁正常腺体组织中CD10 5的表达。应用条带密度分析软件TotalLabv2 .0 1,定量分析RT PCR产物电泳带密度。结果　肿瘤中心处癌组织中CD10 5mRNA的表达水平为 0 .4 4± 0 .10 ,明显高于正常腺体组织 (P <0 .0 5 ) ;肿瘤边缘处癌组织中CD10 5mRNA的表达水平为 0 .6 0± 0 .11,明显高于中心处癌组织 (P <0 .0 5 )。CD10 5mRNA高表达与淋巴转移有关 (t=2 .71,P <0 .0 5 ) ,而与患者年龄、癌肿的大小、临床病理分期和病理类型无关 (P >0 .0 5 )。结论　乳腺癌组织中CD10 5mRNA的表达水平明显高于正常腺体组织 ,且肿瘤边缘处癌组织表达最高 ,其表达与乳腺癌的发生、发展及淋巴转移有关。     

浸润性乳腺癌组织MTS1和COX-2基因表达的临床意义

目的探讨多肿瘤抑制基因1（MTS1）和环氧合酶-2（COX-2）基因在浸润性乳腺癌组织中的表达及其临床意义。方法应用流式细胞术（FCM）定量分析66例原发性浸润性乳腺癌患者癌组织、相应癌旁组织中MTS1和COXO2的表达。结果浸润性乳腺癌组织中MTS1和COXO2蛋白表达的相对荧光强度（RFI）中位数分别为0．84和10．54,而相应癌旁组织分别为1．61和4．00,癌组织MTS1和COXO2蛋白表达与相应癌旁组织比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。MTS1和COX-2在不同年龄、病理类型、肿瘤大小和临床分期间的表达差异均无统计学意义（P〉0．05）。有淋巴结转移的患者MTS1和COX-2表达中位数分别为1．12和5．94,无淋巴结转移患者分别为0．79和13．05,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论MTS1和COXO2在乳腺癌的发生、发展中起重要作用,并与淋巴结转移状况有关,可作为预测乳腺癌预后的指标。     

人乳腺癌中p21WAF1组蛋白H3、H4乙酰化水平的表达变化

[目的]探讨人乳腺癌中p21WAF1组蛋白H3、H4乙酰化水平的变化及其意义。[方法]应用HE染色鉴定乳腺癌的病理形态变化,RT—PCR检测p21WAF1mRNA的表达,染色质免疫沉淀法检测p21WAF1组蛋白H3、H4乙酰化的状态。[结果]HE染色可见,与癌旁组织及正常乳腺组织相比,乳腺癌组织结构及细胞形态有明显的异型性。RT—PCR检测结果显示,乳腺癌组织中p21WAF1mRNA的表达水平明显低于癌旁组织及正常乳腺组织（P〈0．05）;p21WAF1mRNA在组蛋白H3、H4乙酰化水平降低乳腺癌中的表达明显低于组蛋白H3、H4乙酰化水平非降低乳腺癌中的表达（P〈0．05）;p21WAF1mRNA表达降低与人乳腺癌的临床分期、分化程度和淋巴结转移有关。染色质免疫沉淀法显示,乳腺癌组织中p21WAF1组蛋白H3、H4的乙酰化水平明显低于癌旁组织及正常乳腺组织;p21WAF1乙酰化水平降低与人乳腺癌的分化程度和淋巴结转移有关。[结论]p21WAF1组蛋白H3、H4乙酰化的表达变化与乳腺癌的发生发展密切相关。     

乳腺癌组织中拓扑异构酶Ⅱa和环氧合酶-2的表达及其临床意义

目的探讨拓扑异构酶Ⅱa【（TopoⅡa）和环氧合酶-2（COX-2）在乳腺癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用免疫组织化学法检测50例乳腺癌组织中TopoⅡa和COX-2的表达。结果TopoⅡa在乳腺癌及其周围正常乳腺组织中表达率分别为64％（32／50）和22％（11／50）;COX-2在乳腺癌及其周围正常乳腺组织中表达率分别为68％（34／50）和14％（7／50）,差异均有统计学意义（P〈0．05）。TopⅡa的表达仅与乳腺癌组织学分级有关（P〈0．05）,而与患者年龄、肿瘤大小、淋巴结转移和临床分期无关（P〉0．05）;COX-2表达与肿瘤大小、组织学分级、淋巴结转移和临床分期有关（P〈0．05）,而与患者年龄无关（P〉0．05）。结论TopoⅡa和COX-2的检测可作为评价乳腺癌分化程度和侵袭、转移的指标。     

MDR1和Anxa2在乳腺癌组织中的表达与侵袭转移的关系研究

探讨乳腺癌组织中多药耐药基因（MDR1）和膜联蛋白（Anxa2）表达的相关性及其与乳腺癌转移的关系。方法：应用荧光定量PCR的方法检测20例配对的乳腺导管内癌、100例乳腺浸润性导管癌、70例癌旁正常组织中MDR1和Anxa2 mRNA的相对表达情况。结果：MDR1 mRNA在乳腺导管内癌中的表达水平明显高于癌旁正常组织（P=0.005）,乳腺浸润性导管癌组织中mRNA的表达明显高于癌旁正常组织（P=0.017）和导管内癌（P=0.019 6）。Anxa2 mRNA在乳腺导管内癌中表达与癌旁正常组织相比无显著性差异（P=0.188 9）,但是在乳腺浸润性导管癌组织中的表达明显高于导管内癌（P=0.000 8）和癌旁正常组织（P<0.000 1）;MDR1和Anxa2 mRNA的表达升高均与患者出现淋巴结转移有关（P<0.01）;2种基因在乳腺浸润性导管癌中的表达呈正相关（P<0.000 1）。结论：在肿瘤进展过程中,MDR1和Anxa2 mRNA表达上调与乳腺癌的淋巴结转移有关,二者之间表达具有正相关提示肿瘤细胞的多药耐药的获得和肿瘤侵袭转移之间有着密切联系。     

乳腺癌组织中BRMS1mRNA表达及意义

[目的]探讨BRMS1mRNA在乳腺癌中的表达及其与乳腺癌临床病理特征的关系。[方法]采用Trizol提取组织总RNA，将mRNA转录成cDNA，用实时荧光定量聚合酶链反应（RFQ-PCR）技术检测乳腺组织BRMS1mRNA表达，以BRMS1mRNA和GAPDHmRNA含量的比值表示BRMS1表达水平。[结果]乳腺癌组织中BRMS1mRNA的表达水平明显低于癌旁组织（P〈0．01），也明显低于正常乳腺组织（P〈0．01），BRMR1mRNA低表达与临床病理分期和淋巴结转移有关（P〈0．05，P〈0．01），而与患者年龄、癌肿大小、病理类型无关（P〉0．05）。[结论]乳腺癌组织中BRMS1mRNA的低表达与乳腺癌的发展与转移有关，可能成为判断乳腺癌转移的一个标志物。     

COX-2、p53、PCNA和nm23异常表达与胃癌生物学行为的关系

背景及目的：分子生物学研究表明COX－2,p53,PCNA和nm23基因蛋白异常表达与胃癌发生发展密切相关,有关它们异常表达与胃癌生物学行为的关系尚不清楚,本文旨在了解它们与胃癌临床病理生物学行为的关系。方法：用免疫组化（SP）方法检测胃癌手术切除71例标本中上述基因表达,结果：（1）胃癌COX－2过表达率为70．4％（50／71例）,且过表达与肿瘤大小,大体类型,组织学类型,淋巴结转移（LN）及临床 理分期密切相关（P＜0．05或0．01）,（2）71例胃癌标本的p53和PCNA过表达率分别为74．6％,和78．9％,其中LN（＋）胃癌p53和PCNA过表达（86.7%,88.8%)分别高于LN（－）病例（53.8%和61．5％）（P＜0．05）,（3）LN（－）病例的nm23低表达率（88．5％）显著低于LN（＋）病例的62．2％（P＜0．05）,且I＋II期病例的mm23低表达91．3％明显高于Ⅲ＋Ⅳ期病例62．5％（P＜0．05）。（4）COX－2和p53,PCNA和nm23基因2个以上表达病例与表达异常或因素表达异常者相比,在组织学类型,癌浸润深度,淋巴结转移及临床分期差异显著（P＜0．05或P＜0．01）,结论：胃癌COX－2与p53,PCNA和nm23异常表达与胃癌淋巴结转移和疾病进展等生物学行为密切相关。     

乳腺癌中bag-1的表达及与腋窝淋巴结转移的关系

目的探讨乳腺癌组织中bag-1的表达及其与肿瘤细胞增殖和腋窝淋巴结转移的关系。方法收集100例乳腺癌,其中有腋窝淋巴结转移的58例。采用免疫组化SABC法检测bag-1的表达情况。结果bag-1在乳腺癌组织中阳性表达率为85.0%;在I、II、III期的乳腺癌中bag-1阳性表达率分别为87.5%,82.4%,88.2%,三者无明显差异(P>0.05);有腋窝淋巴结转移的乳腺癌中bag-1阳性表达率为89.6%,无腋窝淋巴结转移的乳腺癌中bag-1阳性表达率为78.6%,无明显差异(P>0.05)。结论乳腺癌中bag-1高表达,其表达与肿瘤细胞增殖和腋窝淋巴结转移无关。     

胃癌组织COX-2、VEGF-C表达与淋巴结转移及预后关系的研究

目的:探讨环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)、血管内皮生长因子C(VEGF-C)在胃癌组织中的表达及其与淋巴管生成、淋巴结转移及预后的关系.方法:采用免疫组织化学SABC法检测 51例胃癌及相应的癌旁组织COX-2、VEGF-C及受体VEGFR-3表达,计数肿瘤内淋巴管密度(LVD),并结合临床病理特征和随访资料进行分析.结果:胃癌组织COX-2、VEGF-C表达阳性率分别为62.8%(32/51),60.7%(31/51).COX-2表达与VEGF-C(r=O.74,P＜0.05)、临床分期(r=0.34,P＜0.05)、淋巴管密度(r=0.69,P＜0.01)和淋巴结转移(r=0.57,P＜0.01)呈正相关,与病理分化呈负相关(r=-0.58,P＜0.01).VEGF-C表达与淋巴管密度(r=0.45,P＜0.01)、淋巴结转移呈正相关(r=0.46,P＜0.05).随访5年,胃癌组织COX-2表达与生存率呈负相关,COX-2表达阴性组5年生存率(36.8%)显著高于COX-2表达阳性组(15.6%)(P＜0.05).结论:在胃癌组织中,COX-2、VEGF-C高表达,COX-2与VEGF-C、淋巴管密度、淋巴结转移呈正相关.推测COX-2通过诱导VEGF-C表达参与淋巴结转移.胃癌组织COX-2检测可能对推测预后具有重要意义.     

卵巢癌组织中组织因子途径抑制物2的表达及其临床意义

目的探讨TFPI-2mRNA在卵巢癌组织中的表达以及与卵巢癌临床病理特征的关系。方法以β-actin基因为参照,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测40例卵巢癌患者的肿瘤中心处癌组织、肿瘤边缘癌组织及癌旁正常卵巢组织中TFPI-2的表达。应用条带密度分析软件TotalLabv2.01,定量分析RT-PCR产物电泳带密度。结果正常腺体组织中TFPI-2mRNA的表达水平为0.44±0.10,明显高于肿瘤中心处癌组织(P<0.05);中心处癌组织中TFPI-2mRNA的表达水平为0.60±0.11,明显高于肿瘤边缘处癌组织(P<0.05)。TFPI-2mRNA表达与淋巴转移有关(t=2.71,P<0.05),而与患者年龄、癌肿的大小、临床病理分期和病理类型无关(P>0.05)。结论正常卵巢组织中TFPI-2mRNA的表达水平明显高于卵巢癌组织,且肿瘤边缘处癌组织表达最低,其表达下降与卵巢癌的发生、发展及淋巴转移有关。