沉默Caveolin-1基因对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨沉默 Caveolin-1（Cav-1）基因对人膀胱癌细胞株5637增殖和凋亡的影响。方法通过siRNA转染人膀胱癌细胞株5637（沉默组）,以转染 FAM-siRNA为阴性对照组,未转染细胞为正常对照组。Re-al-time PCR法检测Cav-1基因沉默的效率,CCK-8法检测各组细胞的增殖情况,流式细胞术检测各种细胞的凋亡情况。结果 siRNA转染可显著降低人膀胱癌细胞株5637中 Cav-1 mRNA 的表达水平。沉默组细胞的增强能力明显减低,而细胞凋亡率明显升高（均P＜ 0.05）。结论沉默Cav-1基因可抑制人膀胱癌细胞株5637的细胞增殖并促进细胞凋亡。     

DLL4基因在非浸润性膀胱癌中的表达及预后分析研究

【目的】探讨DLL4基因在非浸润性膀胱癌中的表达及其与预后的差异。【方法】选择本院2011年5月至2012年10月收治的40例非浸润性膀胱癌部分切除术患者,其中男21例,女19例。以上研究对象均经病理组织学检查证实为膀胱移行细胞癌（BTCC）,采用实时荧光定量聚合酶链式反应（RT‐PCR）测定标本中DLL4‐mRNA的表达量,免疫组化检测DLL4蛋白表达情况;对患者术后进行2年随访,分析高表达与肿瘤转移及复发的关系。【结果】DLL4‐mRNA及蛋白在BTCC中呈高表达,癌旁组织中呈低表达,且表达呈现一致性,差异有显著性（ P＜0．05）;同时膀胱癌组织中表达强度存在差异,其中低阳性表达27例,高阳性表达13例;2年随访率为100％,其中高阳性表达患者复发或转移8例,低阳性表达患者复发或转移6例。【结论】DLL4在BTCC的高阳性表达与BTCC复发或转移存在联系;抑制或阻断DLL4信号通路可能抑制BTCC的发生发展。该基因具有一定的临床应用前景。     

RASSF1A和WIF-1基因甲基化程度与直肠癌患者新辅助放化疗疗效的关系

【目的】探讨血清Ras相关区域家族1A基因(RASSF1A)和Wnt抑制因子-1(WIF-1)基因甲基化程度与直肠癌患者新辅助放化疗(nCRT)疗效的关系。【方法】选取本院收治的109例直肠癌患者为研究对象,均给予nCRT治疗。分析患者治疗效果,根据肿瘤消退程度分级(TRG)标准分为观察组(nCRT敏感,n=73)和对照组(nCRT不敏感,n=36)。收集两组患者年龄、性别、肿瘤距离肛门位置、分化类型、临床分期、淋巴结转移及合并疾病等临床资料,对比两组血清RASSF1A和WIF-1基因甲基化阳性表达率,分析RASSF1A和WIF-1基因甲基化程度与直肠癌患者nCRT疗效的相关性。【结果】两组年龄、性别、肿瘤距离肛门位置、分化类型、临床分期、淋巴结转移、合并疾病构成比及血压、血脂水平相比较,差异无统计学意义(P>0.05)。观察组血清RASSF1A基因阳性率为16.44%(12/73)、WIF-1基因甲基化阳性率为13.70%(10/73),均低于对照组的41.67%(15/36)和33.33%(12/36),且差异均有统计学意义(P<0.05)。经Spearman检验,血清RASSF1A和WIF-1基因甲基化程度与疗效呈负相关(P<0.01)。【结论】RASSF1A和WIF-1基因甲基化程度与直肠癌患者nCRT疗效关系密切,RASSF1A和WIF-1基因甲基化阳性率越高,患者nCRT疗效越低。     

凋亡抑制基因Survivin与膀胱癌

Survivin属于凋亡抑制蛋白家族之一，在人类肿瘤中都有不同程度的表达，其中以膀胱移行细胞癌为著，有抑制细胞凋亡和参与细胞周期的调节作用，对膀胱肿瘤的发生发展起重要作用。他们的高表达也许能为临床诊断和将来靶向治疗提供潜在价值，本文就其生物学特点及在膀胱癌中的研究现状作一概述。     

慢病毒介导的Clusterin基因沉默抑制膀胱癌EJ细胞增殖及转移

目的探讨慢病毒介导的Clusterin（CLU）基因沉默的RNA干扰效果及其对膀胱癌EJ细胞增殖和转移的影响。方法构建靶向CLU基因的慢病毒干扰载体,用Westernblot检测其对膀胱尿路上皮癌细胞株EJ的干扰效果,用MTT、细胞划痕实验、Transwell侵袭实验等方法分别检测CLU沉默后膀胱癌EJ细胞在增殖、侵袭和转移等方面的细胞生物学改变。结果靶向CLU基因的慢病毒干扰载体感染膀胱癌EJ细胞后,CLU基因在蛋白水平的表达明显下降。EJ细胞的增殖、侵袭和转移能力均受到抑制。结论 CLU慢病毒干扰载体可有效沉默膀胱癌EJ细胞内源性CLU基因,抑制膀胱癌EJ细胞的增殖、侵袭和转移。     

膀胱癌B超漏诊1例

1病历摘要 男，74岁。因反复血尿伴右腰部隐痛半个月，血尿加重1d入院。其间曾在外院检查诊断为泌尿系结石。查体：BP140／85mmHg，心肺未见异常，腹平软，肝、脾肋下未及，腹部无压痛，双肾区无明显叩击痛，脊柱四肢无异常。实验室检查：，血WBC8．2×109／L，N0．68，Hb96g／L；肝、肾功能正常；尿常规：低倍镜下满布红细胞。B超检查：见右肾窦及膀胱内多发大小不等强回声团，后伴声影，其中最大两个强回声团位于膀胱三角区近尿道口处，大小分别约2．8cm×1．9cm、2．5cm×1．1cm，B超提示双肾多发小结石、膀胱多发结石。     

miR-143在膀胱癌组织中的表达及意义

【目的】探讨miR-143在膀胱癌组织中的作用及机制,为膀胱癌的临床诊治提供参考。【方法】选用体外培养的T24细胞株作为研究对象,按照处理方式分为si-COX-2转染组、miRNA-143转染组、阴性对照组、空白对照组。Transwell趋化实验和3 H-thymidine 法检测 T24细胞增殖和迁移能力,免疫印迹法检测COX-2蛋白表达变化。【结果】miR-143和si-COX-2转染T24细胞48～72 h后,细胞增殖能力较正常T24细胞相比下降36％～49％（ P ＜0．01）,迁移能力下降81％。免疫印迹结果表明,si-COX-2或miR-143转染的T24细胞内源性COX-2表达水平显著减少至正常T24细胞表达水平的0．39和0．31倍（ P＜0．01）。【结论】miR-143可能通过COX-2通路发挥对膀胱癌 T24细胞的增殖和侵袭的抑制作用并抑制COX-2的表达。提示miR-143可作为膀胱癌的治疗候选药物。     

肺癌患者血浆RASSF1A和BLU基因甲基化检测及临床意义

【目的】探讨肺癌患者外周血血浆中抑癌基因Ras相关结构域家族1A（RASSF1A）和BLU基因启动子的甲基化状态及其临床意义。【方法】利用巢式甲基化特畀性PCR（nMSP）法检测肺癌患者外周血血浆与正常人血浆中抑癌基因RASSF1A和BLU基因启动子的甲基化状态。【结果】58例肺癌患者血浆样品中分别发现22例（37．93％）RASSF1A基因启动子的异常甲基化和17例（29．31％）BLU基因启动予的异常甲基化,20例正常对照血浆中都未检测到RASSF1A和BLU基因启动子的异常甲基化,差异有显著性（P〈0．01）;但血浆中两基因甲基化检出率与患者性别、肺癌组织学分型及临床分期无明显相关性（P〉0．05）。【结论】利用nMSP法检测外周血血浆中RASSF1A和BLU基因启动子的甲基化,可为肺癌的筛查、早期诊断提供有用的信息。     

膀胱畸胎瘤1例

1病例报告女,63岁。以下腹部隐痛、尿急、尿痛伴排尿不畅反复发作5 a,加重0.5 a入院。曾在外院多次治疗(用药不详)效果不佳。X线检查示膀胱充盈良好,膀胱前壁见一3.0 cm×3.0 cm×2.0 cm大小,外周呈蛋壳样类圆形致密钙化阴影。B超检查于膀胱前壁探及3.0 cm×3.0 cm×2.0 cm低回声实性占位病变,表面光滑,向膀胱壁凸出,肿物基底宽,提示膀胱壁占位性病变伴钙化。尿常规检查白细胞(++),培养无细菌生长。妇检无特殊。行手术探查,术中见肿物位于膀胱前壁,大小约3.0 cm,界线清楚,深达肌层。予完整切除后送病理检查。肉眼观见肿物呈灰白色,大小3.2 …     

二烯丙基三硫对人卵巢癌细胞增殖抑制作用的研究

【目的】探讨二烯丙基三硫（DATS）抑制人卵巢癌CoCl增殖的作用。【方法】台盼蓝染色细胞计数法测定DATs对体外培养人卵巢癌CoCl细胞增殖的影响;软琼脂克隆形成法测定DATs对体外培养CoCl细胞的非锚定依赖性生长作用;PI染色流式细胞术（FCM）分析DATS对CoCl细胞周期的影响。【结果】细胞计数法结果显示DATs抑制体外培养人卵巢癌CoCl增殖和生长,呈剂量依赖性;软琼脂克隆形成法结果显示：DATS呈剂量依赖性抑制细胞集落形成;PI染色FCM结果显示不同浓度的DATS作用于CoCl细胞后,使细胞周期阻滞于G1期。【结论】DATS具有抑制卵巢癌CoCl生长的作用。     

腺病毒载体介导的单纯疱疹病毒-胸苷激酶基因杀伤人膀胱癌细胞的实验研究

目的探讨HSV-tk/GCV系统基因治疗膀胱癌细胞的方法及结果。方法与结果采用了带有CMV启动子驱动HSV-tk基因的重组腺病毒载体,体外转染HTB9细胞后对GCV敏感性增强。当MOI=100时,HTB9细胞的IC50为2.5mg/L,病毒浓度降低,GCV对细胞的杀伤效率亦降低。将不同比例的tk 细胞和tk-细胞混合后加入10mg/L GCV,发现HSV-tk/GCV系统有很强的“旁观者效应”。结论HSV-tk/GCV系统是一种有效、安全地治疗膀胱癌的新方法。     

STCl过表达对宫颈癌CaSki细胞生物学行为的影响

【目的】研究转染STCl基因对人宫颈癌CaSki细胞生物学行为的影响。【方法】通过MTT、集落形成、划痕实验、Tranwell实验、裸鼠成瘤等方法检测STCl基因转染对宫颈癌CaSki细胞增殖、迁移、侵袭、体内成瘤能力的影响。【结果1MTT和集落形成实验表明,与空载体组相比,CaSki／STCl细胞生长受到抑制,细胞存活率和集落形成率较低（P〈0．05）。划痕实验显示CaSki／STCl较CaSki／NC组细胞迁移率降低（35±3．2％ VS 64±4．5％,P〈0．05）。TranweⅡ实验显示CaSki／NC的85±5,而CaSki／STCl组穿膜细胞数较少为54±4（P〈0．05）。裸鼠成瘤实验显示,CaSki／STCl组和CaSki／NC组的肿瘤平均质量依次为（O．285士0．057）g、（0．523±0．154）g,差异具有统计学意义（P,0．01）。【结论】sTCl过表达抑制宫颈癌细胞增殖、转移及侵袭,STCl基因可用于宫颈癌的基因治疗。     

CD 40、PCNA在人膀胱移行细胞癌中的表达及意义

[目的]探讨CD40、PCNA在人膀胱移行细胞癌(BTCC)中的表达及临床应用价值. [方法]采用免疫组化技术检测56例BTCC组织、20例正常膀胱组织中的CD40和PCNA的表达,分析CD40、PCNA表达水平与肿瘤病理分级、临床分期相关性,以及两指标间的相关性.[结果]①CD40、PCNA 在BTCC中的表达为66.1%、64.3%,明显高于正常膀胱黏膜.②CD40在高分化、表浅性BTCC中的表达为91.7%、83.3%,明显高于中低分化、浸润性BTCC.而PCNA在高分化、表浅性BTCC中的表达为33.3%、52.8%,明显低于中低分化、浸润性BTCC.③CD40、PCNA 在BTCC 中表达呈负相关.[结论]CD40在BTCC发生过程中可能起重要的作用,可作为诊断、评估恶性程度的指标.     

PTEN基因在膀胱移行细胞癌中的表达及意义

[目的]研究第10号染色体丢失的张力蛋白同源的酪氨酸磷酸酶基因(phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten,PTEN)在膀胱移行上皮细胞癌(BTCC)组织中的表达水平及其与BTCC生物学行为的关系及临床意义.[方法]以免疫组化SP法检测10例正常膀胱黏膜及69例BTCC组织中的PTEN基因的表达水平.[结果]在10例正常膀胱组织中PTEN基因均表达阳性或强阳性.在69例BTCC组织中PTEN高表达组为46例(66.7%),其中阳性15例,强阳性31例.随着肿瘤分期、分级的增加PTEN表达显著减少(P＜0.01).[结论]PTEN可能成为估计BTCC恶性程度及肿瘤侵袭性的一项有用的指标.     

膀胱移行细胞癌中PTEN和p53基因的表达及临床意义

【目的】研究第10号染色体丢失的张力蛋白同源的磷酸酶基因(PTEN)及p53在膀胱移行上皮细胞癌(BTCC)组织中的表达水平及其与BTCC生物学行为的关系及临床意义。【方法】以免疫组化SP法检测10例正常膀胱黏膜及69例BTCC组织中的PTEN及p53基因的表达水平。【结果】在10例正常膀胱组织中PTEN基因均表达阳性或强阳性,p53基因有1例弱阳性表达,其余9例表达阴性。在69例BTCC组织中PTEN高表达组为46例(66.7%),其中阳性15例,强阳性31例,p53阳性高表达组为39例(56.5%),其中阳性22例,强阳性17例。随着肿瘤分期、分级的增加PTEN表达显著减少(P<0.01);而p53的表达显著增强(P<0.01);PTEN的表达随肿瘤分期、分级而减少与p53的表达增强呈显著负相关(P<0.01)。【结论】PTEN与p53可能成为估计BTCC恶性程度及肿瘤侵袭性的一项有用的指标,p53基因与PTEN基因的表达可能起互相调节作用。     

原发性卵巢小细胞癌（高钙血症型）一例临床病理分析并文献复习

【目的】探讨原发性卵巢小细胞癌（高钙血症型）（OSCCHT）的临床病理特征,并对其诊断和鉴别诊断进行讨论。【方法】报告1例卵巢OSCCHT并结合文献对其临床病理特征进行分析。【结果】原发性卵巢小细胞癌是卵巢的一种起源不明确的少见的高度恶性小细胞肿瘤,其病理组织学分型包括高钙血症型和肺型,0SCCHT2／3患者伴血钙升高,肿瘤摘除后血钙恢复正常,组织学特点主要由大小较一致的小细胞组成,可见散在分布的滤泡样结构,40％肿瘤内出现大细胞。【结论】本病预后差,联合治疗（特别是放疗）可能延长生存时间。     

端粒酶活性与膀胱癌T24细胞生长

目的 :研究端粒酶逆转录酶基因 (h TERT)反义寡核苷酸 (ASODN)对膀胱癌 T2 4细胞生长的影响。方法 :用脂质体介导技术 ,将 h TERT基因 ASODN转染入膀胱癌 T2 4细胞中应用端粒酶 PCR- EL ISA法检测端粒酶活性变化 ,MTT法测定细胞生长变化 ,并用流式细胞术观察其对 T2 4细胞周期的影响。结果 :h TERT基因 ASODN能显著地抑膀胱癌 T2 4细胞端粒酶活性 ,癌细胞生长增殖受限 ,同时抑制具有序列特异性和剂量依赖性 ,并出现细胞凋亡现象 ,其凋亡率 (15 .8% )明显高于 SODN转染组 (0 )和空白对照组 (1.9% ,P<0 .0 5 )。结论 :h TERT基因 ASODN能特异性抑制膀胱癌 T2 4细胞端粒酶活性和生长 ,促进其细胞凋亡。