EBER原位杂交检测中手工与BenchMark ULTRA自动化染色差异

正与EBV感染相关的疾病有鼻咽癌、NK/T细胞淋巴瘤、EBV相关性胃癌、淋巴上皮瘤样癌、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤等。原位杂交是检测组织EBV感染的金标准,与PCR和免疫组化相比,原位杂交具有高度灵敏性和特异性,组织定位明确。目前最常用的EBER原位杂交试剂分别有适用于手工和全自动免疫组化染色仪两种类型的试剂盒。本实验使用北京中杉金桥公司的手工检测试剂盒和罗氏EBER全自动检测试剂盒同时对淋巴瘤、EBV相关性胃癌、     

六胺银滴染法在真菌检测中的应用

正六胺银染色是特殊染色中常用的真菌检测方法之一,其敏感性高且能够清晰的显示真菌的形态,是组织病理学检测真菌的重要手段[1]。以往六胺银染色多采用高身5片立式染缸浸染法,但该方法浪费试剂,并且受染色缸清洁度的影响,易出现银镜反应和银沉淀污染[1-2]。本科室采用了一种滴染法,效果稳定,且可节省试剂,现介绍如下。1 材料与方法1.1 材料收集中国科学技术大学附属第一医院(安徽省立医院)     

微波技术在PTAH特殊染色中的应用

Mallory 磷钨酸苏木精染色法(PTAH)是用来显示横纹肌、纤维素及神经胶质细胞的常用方法.但该方法存在着试剂配制及染色时间较长的缺点,给工作带来不便.为了解决这些问题,本文在试剂配制及染色过程中使用了微波加热的方法,大大缩短了试剂配制和染色的时间,且效果较好,现介绍如下.     

改良六胺银染色法在真菌染色中的应用

近年来,随着广谱抗生素的滥用、免疫抑制剂和抗肿瘤药物的广泛使用,加之外科介入性治疗的不断发展与成熟,使得系统性真菌感染在原有的基础上日益增多。尤以肺部真菌感染位居首位,超半数的真菌感染会侵犯支气管、肺部,然而其症状和影像学表现均缺乏特异性,因此在病理上准确诊断出真菌感染显得极其重要[1-4]。随着诊断试剂盒不断的更新,虽然染色方法越来越简便,效果也越来越好,但同时也导致越来越多的技术员并不能很好的理解六胺银特殊染色方法的原理和过程。上海交通大学附属胸科医院病理科至今仍然使用手工配制试剂进行染色,并且不断改良配方,取得了很好的效果,现介绍如下。     

病理免疫组化染色方法质量控制应注意的问题

免疫组化可以辅助病理诊断、指导治疗、评估预后，所以在做免疫组化过程中的质控问题处理尤其重要。随着免疫组化试剂新种类不断出现及方法的改进，特别是即用型试剂盒的出现，使抗体的标记更加简便、快捷，更加规范化。免疫组化标准化染色技术是一项实验性很强的技术，任何一个环节出现问题，都可以直接影响免疫组化结果。因此，本文就免疫组化标准化染色质量的应注意的问题报告如下。     

HE染色原理和试剂配制及染色过程中的若干问题的探讨

目的 探讨HE染色原理和试剂配制及染色过程中的若干问题的临床基础性意义,推广优良、简捷、经济的试剂配制方法,研究染色过程中的若干问题,完美HE染色,明确病理诊断,利于临床治疗.方法 采用本科室自己配制试剂所染HE切片30张和30张(对照组)某试剂公司配制试剂所染HE切片进行显微镜下对比,分析两者的优缺点及染色过程中的若干问题.结果 本科室自家配制试剂所染HE切片明显优于对照组,尤其体现在细胞核着色上,注重染色过程中的若干问题的切片比未注重染色过程中的若干问题的切片质量高.结论 HE染色原理和试剂配制及染色过程中的若干问题的探讨,从基础理论出发,不断实践,为更完美、清晰地呈现显微镜下正常或异常的组织细胞结构,明确病理诊断,从而更好更快地指导临床治疗而努力.     

介绍一种免疫组化试剂盒的筛选方法

免疫组织化学在病理诊断和相关科研中日益得到了广泛的应用,它不仅能辅助诊断,确定肿瘤组织的起源,而且在评估预后,指导治疗方面具有重要作用.做一张优良的免疫组化片子,除了操作者的经验外,高质量的试剂是成功的保障.免疫组化试剂盒的质量是影响免疫组化结果最重要的原因之一.免疫组化试剂盒的试剂较多,质量难以做到绝对稳定,如果仅仅因为其中一种试剂不合格或过期(不正确的组织表达)而将整个试剂盒丢弃,就会造成很大浪费.如何在试剂盒的几种试剂中挑选出有用的成分,减少经济损失就显得格外重要.现本文介绍一种在实践中总结出来的简单实用的即用型套装试剂盒筛选方法.     

PAS染色试剂的保存方法

PAS染色试剂容易变质,需要经常重新配制,既浪费试剂,又增加工作量。笔者介绍一种冷冻保存的方法,试剂可以长期保存。　　PAS染色试剂配制后分装在带瓶盖的塑料滴瓶中,如配制2 0 0ml试剂,则分装为2 0瓶,置冰箱的冷冻室里保存。临用取出1瓶融化混均,使用后置4℃保存。　　通过对比染色发现,冷冻保存1年的PAS染色试剂的染色结果与新鲜配制的染色结果一致。　　PAS染色试剂配制过程中,0 5 %高碘酸水溶液要求新鲜配制〔1〕;Schiff试剂不容易配制,且容易变质。通过我们的实践证明,这两种试剂在冷冻状态下可以长期保存,在4℃下可以保存3个月…     

全自动染色机染色过程中伊红染液的应用体会

HE染色是病理学技术中最常用的染色方法之一.随着病理学技术的快速发展,全自动染色机以其稳定、高效、良好的染色效果逐渐代替了手工染色,但是,在具体使用过程中,经常出现伊红不易上色现象,致使胞质着色不良,影响染色效果.本文现结合作者实验中的工作体会,介绍全自动染色机代替手工染色后伊红染液改进的使用方法.     

不同修复方法对免疫组化染色结果的影响

目前,免疫组化染色技术已成为病理学诊断中不可少的重要手段,而进行抗原修复使抗原决定簇暴露则是免疫组化染色成功的关键。本研究中,观察了高压加热法、微波加热法、胰酶消化和胃酶消化4种抗原修复方法对免疫组化染色结果的影响。1材料和方法1.1材料收集乳腺癌、淋巴瘤和大肠癌组织标本各12例,均由唐山市协和医院病理科提供。选用鼠抗人单克隆抗体(mAb)ER、PR、c-erbB-2、CK7、EMA、CEA、CK(pan)、MDR-1、P53、Ki67、GCDFP-15、LCA、CD3、CD20、CD45RO、CD79α及PV9000试剂盒,均购自北京中山生物技术有限公司。1.2方法按…     

HP亚甲蓝染色改良法分析

幽门螺杆菌(helicobacter pylori,HP)是主要存在于胃黏膜上皮和胃腺体黏膜之间的一种细菌,是短杆状、两端微弯的革兰阴性杆菌.HP与慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌等关系密切.随着免疫组化和分子病理技术的迅猛发展,部分病理学检查中常用的特殊染色方法和项目渐渐被取代或作用被弱化,但显示HP的特殊染色方法仍然被广...     

膀胱副神经节瘤的临床病理学特征

收集我院1990-2003年间外科手术切除膀胱副神经节瘤6例及1例会诊病例。HE染色，光镜观察。3例膀胱副神经节瘤行网状纤维染色。1例行Peris普鲁土蓝染色。2例行PAS染色。5例行Fontana银浸法染色。7例均行免疫组织化学染色。所用广谱细胞角蛋白（CK）、上皮膜抗原（EMA）、波形蛋白、神经元特异性烯醇化酶（NSE）、嗜铬粒素A（CgA）、S-100、突触素（Syn）抗体及LSAR试剂拿均购自Dako公司，染色前切片经微波处理，抗原修复，染色步骤按试剂盒说明书进行。用已知阳性切片进行阳性对照。     

网状纤维染色中氨银溶液配制的再认识

传统组织病理学技术理论中,用于病理切片组织网状纤维染色的氨银溶液有多种配制方法,本文基于相关化学原理对其进行比较优选. 1 传统氨银溶液配制方法的比较分析 1.1 James法、Lillie法和Lillie-Fullmer法的异同 Lillie法和Lillie-Fullmer法氨银溶液几乎是一样的,James法氨银溶液虽配制工艺不同,但试剂成分也是相同的,3种方法都只用硝酸银水溶液与氨水直接反应制得氨银溶液,而且都认为溶液略有混浊为好.3种方法的试剂用量较大.     

自制组织微阵列在自动免疫组化染色中应用

自动免疫组化染色机能够自动完成免疫组化染色的所有步骤,具有节省试剂、染色速度快、工作效率高等优点,能有效地保证染色的准确性、可重复性以及整体染色的一致性.使用自动免疫组化染色机要求每次染色流程必须包含阳性对照和阴性对照,其目的是为了确定试剂和仪器功能的可靠性.但一般的阳、阴性对照片因组织较大,给待染色组织裱在载玻片的下端提供了较小的区域,不利于使用小剂量模式滴加试剂(如LabVision Autostainer采用的微量滴加技术,最小试剂量低至80 μl),也不利于检测滴加的试剂对组织的覆盖效果.     

皮肤中弹性纤维三种染色方法的比较

弹性纤维广泛分布于纤维结缔组织 ,尤其集中分布于椎弓间黄韧带、声带、肺泡壁、动脉壁及弹性软骨等处 ,赋予所在的组织以良好的弹性。弹性纤维可被多种试剂着色 ,如地衣红、醛复红、苯胺黑、Ｓｃｈｉｆｆ试剂等染成不同的颜色。下面我们就分别用Ｇｏｍｏｒｉ醛复红染色法、Ｓｃｈｍｏｒｌ染色法 (Ｗｅｉｇｅｒｔ间苯二酚 品红染色法 )及地衣红染色法 3种染色法 ,对ＳＤ大鼠皮肤中的弹性纤维染色效果做一简单比较。1　材料和方法1 1　试剂　碱性品红、石碳酸、间苯二酚、三化铁、盐酸、聚乙醛、地衣红。1 2　实验方法1 2 1　Ｇｍｏｒｉ醛…     

TUNEL法与EnVision法多重染色技术的应用

我们在酒精性肝病及慢性病毒性肝炎的病理研究中 ,采用ＴＵＮＥＬ法原位检测凋亡细胞 ,选用简便而敏感的ＥｎＶｉ ｓｉｏｎ法免疫组化染色 ,分别显示肝星状细胞、枯否细胞及肝相关淋巴细胞 (Ｐｉｔ细胞 )以改良Ｍａｓｓｏｎ三色染色法做对比染色以显示肝纤维化程度。其结果背景清晰、反差鲜明 ,取得了较好的效果。1　材料和方法1.1　标本　尸检肝组织 2例 ,病毒性肝硬化尸检肝组织 3例 ,组织取材于日本医科大学多摩永山医院。1.2 　试剂　ＴＵＮＥＬ检测试剂盒 (ＡＰ)ＢｏｅｈｒｉｎｇｅｒＭａｎｎｈｅｉｍ公司产品 (现为罗曼公司 ) ;免疫组…     

PAS—M／PASM—M显示肾小球基膜,红细胞和细胞核的复合染色方法

多年来为了进一步提高肾小球的组化染色效果,我们进行了反复实验,根据染色机理和目的,重新组合PAS-M和PASM-M的二种染色方法,能够较好的显示肾小球毛细血管基膜、红细胞和细胞核的分布及病变程度,对于肾组织的疾病诊断和研究预后效果,具有一定的实用意义.1 材料和方法1.1 PAS—M法的试剂配制和染色方法 (1)试剂配制 ①Periodic acid (过碘酸)氧化液,过碘酸0.5g,蒸馏水98ml.②Martius yellow(马休黄)对比染色液:马休黄 0.5g,无水酒精 98ml,磷钨酸0.2g.③Schiff’s染色液:碱性复红2g,1M盐酸40ml,重亚硫酸钠4g,重蒸馏水400ml.先将蒸馏水煮沸,小火焰后加入碱性复红,再煮沸1分钟,冷却到50℃时加入盐酸,待35℃时加入重亚硫酸钠.将试剂盛棕色瓶中,冷却后入冰箱内备用.(2)染色方法 ①组织切片脱蜡至水.②过碘     

组织芯片技术在特殊染色阳性对照中的应用

组织芯片亦称组织微阵列（tissue microarray,TMA）是将数十个,数丰个组织标本整齐地排列在同一张载玻片上的微缩组织切片。组织芯片具有高通量、节约组织原材料和检测试剂、实验条件一致性和实验结果可比性好、实验误差小等优点,在病理学研究中有广阔的应用前景。我们利用组织芯片技术制作特殊染色阳性对照的组织芯片,将阳性对照的组织芯片与待检测的组织裱在同一张玻璃切片上,进行特殊染色,取得了比较理想的结果。     

Infinity高清恒染系统在常规HE自动化染色中的应用及染色持续能力的对比观察

目前我国常规病理诊断中使用最多的HE染色方法为传统的手工染色。手工HE染色过程繁琐、工作效率低、随意性强,不同的人操作会出现明显的波动,HE染色效果不稳定。试剂的配置和染色过程也费时、费力,要占用技术员大量的时间和精力,也不利于常规病理的质量控制,尤其在工作量大的综合性医院中,此缺点尤为突出。本科室自2004年引进Leica Auto stainer XL自动染色机应用于常规HE染色,切片的处理效率明显提高,染色效果稳定,染色质量也有了显著改善。今年5月本科室在常规HE自动染色机上改用Leica公司生产的ST Infinity高清恒染系统,在使用过程中对自动染色机试剂缸的分布、染色程序和染色时间进行改进和优化,进一步提高了染色效率及染色质量。     

介绍一种冰冻切片快速染色法

介绍一种冰冻切片快速染色法毕学杰，薛春梅冰冻切片在保证制片质量的前提下，所用时间越短，对临床越有利。我们配制了一种快速冰冻染色液，使染色时间在５ｍｉｎ内即可完成，染色效果和原来慢速染色法相同，现介绍如下。１材料和方法１．１染液配制所用试剂有１０％福尔...