口服耐受对自身免疫性葡萄膜视网膜炎影响的实验研究

目的 观察口服牛视网膜S抗原对人S抗原多肽-35诱发的实验性自身免疫性葡萄膜视网膜炎(EAU)的影响.设计实验性对照研究.研究对象20只雌性纯种Lewis大鼠.方法 用人S抗原多肽-35诱发EAU,提纯牛视网膜S抗原诱导口服耐受,分高剂量组(2 mg/次)和低剂量组(0.2 mg/次),同时设实验对照组(胎牛血清蛋白).主要指标EAU发病情况和脾组织白介素-4(IL-4)和γ-干扰素(IFN-γ)的表达水平.结果 口服高剂量组的Lewis大鼠的EAU发病情况较实验对照组有显著减轻(P＜0.05),而且口服高剂量组Lewis大鼠脾组织IL-4的表达水平则高于实验对照组(F=4.214,P=0.017).结论 口服高剂量牛视网膜S抗原诱导的免疫耐受町以成功抑制人S抗原多肽-35诱发的实验性自身免疫性葡萄膜视网膜炎.(眼科,2008,17:250-253)     

骨髓间充质干细胞移植对实验性自身免疫性葡萄膜炎的抑制作用

目的 观察骨髓间充质干细胞对实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)的抑制作用,探讨其对活体内免疫机制的调节机制.方法 将18只Lewis大鼠采用随机数字表随机分为模型对照组、骨髓间充质干细胞干预组和正常对照组,每组6只.将浓度为1 mg/ml的人视网膜可溶性抗原第35号抗原决定簇多肽片段(HS-AgP35)溶液与完全福氏佐剂等体积混合,取0.2 ml分别注射至Lewis大鼠双侧后足垫内进行免疫.7 d后相同抗原剂量行第二次免疫制作模型组.造模当日将1 ml细胞数为2×106/ml骨髓间充质干细胞悬液经尾静脉注射干预组大鼠体内,观察时间为2周.正常对照组不做任何处理.比较3组大鼠的眼部表现、组织病理学分级和血清内干扰素γ(IFN-γ)水平.结果 正常对照组大鼠的眼前节及眼底检查未见异常.模型对照组大鼠的眼部表现分级为1级1只、2级1只、3级3只、4级1只;干预组大鼠的眼部表现分级为0级2只、0.5级3只、1级1只.与模型对照组相比,干预组大鼠眼部表现分级显著降低(P=0.015).正常对照组大鼠视网膜各层细胞排列整齐,细胞形态正常.模型对照组大鼠组织病理学分级为3级4只、4级2只;干预组大鼠组织病理学分级为0级1只、0.5级4只、1级1只.两组大鼠组织病理学分级比较,差异有统计学意义(P＜0.01).干预组大鼠外周血中IFN-γ水平下降,与模型对照组相比,差异有统计学意义(t=9.057 4,P=0.01).结论 骨髓间充质干细胞对EAU有明显抑制作用.其机制可能是通过降低大鼠血清内炎性因子INF-γ水平.     

龙胆泻肝汤对葡萄膜炎大鼠关键炎症细胞因子表达的影响

目的 探讨龙胆泻肝汤对实验性自身免疫性葡萄膜炎(experimental autoimmune uveitis,EAU)大鼠关键炎症细胞因子表达的影响.方法 Lewis大鼠随机分为对照组(6只)、EAU组(18只)和LXT组(18只).光感受器间维生素A结合蛋白(interphotoreceptor retinoid-binding protein,IRBP)免疫EAU组和LXT组大鼠,对照组大鼠注射等量不含IRBP的乳化液.使用实时荧光定量PCR及ELISA方法检测血液、淋巴结和脾脏中IFN-γ、IL-17、TNF-α和IL-10细胞因子在EAU大鼠体内治疗前后的变化情况.结果 LXT组大鼠全血中IFN-γ mRNA表达在第8天虽然高于对照组(P=0.000),但已显著低于EAU组(P=0.000);LXT组IL-17 mRNA在第12天达峰值,显著低于EAU组(P=0.000),且均显著高于对照组(P=0.000);TNF-α mRNA仅在第12天显著高于对照组(P=0.000),但低于EAU组(p=0.000);IL-10 mRNA表达在第16天高于EAU组(P =0.042).LXT组大鼠淋巴结和脾脏中IFN-y、IL-17和TNF-α mRNA表达在第12天显著低于EAU组(均为P =0.000);LXT组淋巴结中IL-10 mRNA表达在第8天开始显著高于对照组(P=0.001),且在整个炎症期均维持在较高水平;LXT组脾脏IL-10 mRNA表达在第12天达峰值,且高于对照组和EAU组(均为P=0.000).LXT组大鼠血清中IFN-y、IL-17和TNF-α蛋白表达水平在第12天和第16天均低于EAU组(均为P＜0.05);EAU组和LXT组血清中IL-10蛋白表达在第12天均高于对照组(均为P ＜0.05),第16天达峰值,但LXT组IL-10蛋白含量更高.结论 龙胆泻肝汤通过抑制IFN-γ、IL-17和TNF-oα相关炎症因子的表达发挥其抗炎作用,促进IL-10的表达,加速自身免疫炎症的恢复.龙胆泻肝汤可通过多种途径在EAU的治疗中发挥免疫调节作用.     

龙胆泻肝汤抑制Notch信号通路活化对实验性自身免疫性葡萄膜炎大鼠Th1、Th2细胞分化的影响

目的　探讨龙胆泻肝汤（LXD）对Notch信号通路活化的抑制作用及其对实验性自身免疫性葡萄膜炎（EAU）大鼠Th1、Th2细胞分化的影响。方法　将30只Lewis大鼠随机分为正常对照组、EAU模型组和LXD干预组,其中EAU模型组、LXD干预组大鼠均诱导EAU,LXD干预组大鼠造模后使用LXD每天灌胃处理,EAU模型组和正常对照组大鼠给予等量生理盐水灌胃。干预后12 d分离三组大鼠的脾脏、淋巴结和眼组织,Q-PCR检测Rbpj基因的表达,ELISA检测Rbpj、γ干扰素（IFN-γ）和白细胞介素-4（IL-4）蛋白的表达,流式细胞仪检测各组织中Th1、Th2细胞的表达水平,分析Th1/Th2细胞比例的变化。结果　干预后12 d,Q-PCR检测发现,与正常对照组大鼠相比, Rbpj mRNA在EAU模型组大鼠脾脏、淋巴结和眼组织中均呈显著上调表达(均为P<0.001);与EAU模型组相比,LXD干预组大鼠脾脏、淋巴结和眼组织中Rbpj mRNA相对表达水平均显著降低(均为P<0.01)。ELISA检测结果发现,EAU模型组大鼠脾脏、淋巴结和眼组织中Rbpj和IFN-γ蛋白表达水平均明显高于正常对照组,IL-4蛋白表达水平均明显低于正常对照组（均为P＜0.05);相比于EAU模型组,LXD干预组大鼠脾脏、淋巴结以及眼组织中Rbpj IFN-γ蛋白表达水平均显著降低,IL-4蛋白表达水平均显著升高（均为P＜0.05)。流式细胞仪检测发现,与正常对照组相比,EAU模型组大鼠脾脏、淋巴结和眼组织中Th1细胞水平均明显升高,Th2细胞水平均明显降低,Th1/Th2细胞比例失衡（均为P＜0.05）;与EAU模型组相比,LXD干预组大鼠各组织中Th1细胞水平均明显下降,Th2细胞水平均明显升高,两者细胞比例逐渐恢复均衡（均为P<0.01)。结论　LXD可通过下调EAU大鼠Notch信号通路转录因子Rbpj的表达水平抑制Notch信号通路的活化,显著促进EAU大鼠中Th1/Th2细胞比例恢复平衡并改善免疫微环境,从而达到治疗葡萄膜炎的目的。     

IL-17、IFN-γ在大鼠自体免疫性葡萄膜炎视网膜的表达及其意义

目的研究IL-17、IFN-γ在大鼠实验性自体免疫性葡萄膜炎(experimental autoimmune uveoretinitis,EAU)的表达情况及其意义。方法光感受器间维生素A类结合蛋白R16肽段与完全福氏佐剂充分乳化后,于Lewis大鼠皮下注射建立EAU模型后定期临床观察。分别于免疫后第6、12、20天摘除眼球,HE染色,进行病理学观察并评分,应用免疫组织化学方法检测EAU各时间点视网膜炎性因子IFN-γ及IL-17的表达情况。结果临床观察显示:对照组大鼠眼部未见明显炎性表现,实验组大鼠免疫后第6天EAU症状开始出现,第12天达到高峰,第20天逐步消退。组织病理学观察结果显示,对照组大鼠视网膜组织结构正常,组织病理学评分为0分;实验组大鼠免疫后第6天视网膜开始出现炎性细胞浸润,免疫后第12天视网膜炎性细胞浸润进一步加重,免疫后第20天浸润减轻,免疫后第6、12、20天组织病理学评分分别为0.50±0.32、3.42±0.49、2.42±0.49。对照组大鼠免疫后第6天、12天、20天视网膜IFN-γ表达平均积分光密度(average integral optical density,AIOD)值分别为8.44±1.31、8.39±1.27、8.55±1.13,实验组大鼠相同时间点视网膜IFN-γ表达AIOD值分别为24.83±4.88、65.17±6.43、47.17±5.08,与相同时间点对照组比较差异均有统计学意义(均为P<0.01);实验组大鼠视网膜表达IFN-γAIOD值与组织学评分经统计学分析二者显著正相关(r=0.978,P<0.01)。对照组大鼠免疫后第6天、12天、20天视网膜IL-17表达AIOD值分别为10.32±1.34、11.21±1.64、10.86±1.45,实验组各时间点大鼠视网膜IL-17表达AIOD值分别为19.67±2.73、94.50±5.43、53.33±3.93,与相同时间点对照组比较差异均有统计学意义(均为P<0.01);实验组大鼠视网膜表达IL-17AIOD值与组织学评分经统计学分析二者显著正相关(r=0.975,P<0.01)。结论 IFN-γ、IL-17表达量的高低与EAU症状的轻重密切相关,Th1、Th17共同参与了EAU的发生发展。     

IL-17在实验性自身免疫性葡萄膜炎大鼠模型眼部的表达

目的研究IL-17阳性细胞在实验性自身免疫性葡萄膜炎（EAU）大鼠模型眼部的表达。方法用光感受器间维生素A类结合蛋白（IRBP）和氟氏完全佐剂等量混合注射于20只Lewis大鼠的右后足底部为实验组,于建模后第7、10、11、12、13、14、21、28天用裂隙灯显微镜进行眼前节检查,并根据de Smet的标准对炎症进行分级。用0.3 mL肝素（5 000 U/mL）注射至左心室以抗凝血,然后取眼球制作冰冻切片。免疫组织化学染色观察IL-17多克隆抗体在眼组织中的表达,5只正常Lewis大鼠作为对照。结果用IRBP免疫Lewis鼠后第10天,裂隙灯显微镜下可见眼前节炎症表现,免疫后第7、14、21、28天各组大鼠眼部炎症平均得分为0.4、3.2、1.6和0.2。实验组大鼠眼组织切片的苏木精-伊红染色可见炎性细胞浸润和光感受器细胞破坏。免疫组织化学染色发现,实验组虹膜、睫状体和视网膜部位可见IL-17蛋白表达,而正常组未见IL-17蛋白表达。第7、14、21、28天各组大鼠眼部组织切片染色的平均得分分别为0.6、4、2、0.4。EAU大鼠眼部炎症表现的严重程度与IL-17的表达量呈正相关（r=0.968,P〈0.01）。结论IL-17蛋白在Lewis大鼠EAU模型中呈高表达,表明IL-17阳性表达细胞在EAU的发病过程中起一定作用。     

经鼻黏膜诱导免疫耐受治疗实验性自身免疫性葡萄膜炎

目的探讨经鼻腔滴注牛视网膜S抗原诱导免疫耐受对Lewis大鼠自身免疫性葡萄膜视网膜炎(EAU)的影响。方法利用盐析和离子交换层析方法纯化牛视网膜S抗原,然后用其诱导Lewis大鼠鼻黏膜耐受,再用视网膜S抗原诱发EAU,观察EAU的发病情况、眼部临床表现、组织学改变、皮肤迟发型超敏反应、由视网膜S抗原和刀豆蛋白A刺激的淋巴细胞增殖反应,同时观察环磷酰胺对免疫耐受的影响。结果用牛视网膜S抗原鼻腔滴注诱导免疫耐受后再诱导EAU,耐受组8只大鼠仅有2只发病(25%),对照组6只(100%)全部发病,耐受组大鼠发病比例明显低于对照组(P=0·0097)。耐受组大鼠的发病开始时间平均为16·5d,对照组为10·3d,两者之间差异有统计学意义(F=26·32,P=0·000;q=9·723,P<0·01);耐受组大鼠EAU病变的临床评分为0·89,对照组为3·94,差异有统计学意义(F=12·48,P=0·000;q=7·904,P<0·01);耐受组大鼠的组织学分级为1·21,对照组为4·12,差异有统计学意义(F=11·80,P=0·000;q=7·510,P<0·01)。耐受组大鼠的EAU表现为虹膜血管轻度扩张,前房和玻璃体内少量炎性渗出,视网膜轻度肿胀,视网膜感光细胞损害均较轻。耐受组大鼠的皮肤迟发型超敏反应和由视网膜S抗原刺激的淋巴细胞增殖反应也明显轻于对照组;腹腔注射环磷酰胺可轻度增强S抗原诱导的免疫耐受作用,仅用环磷酰胺对EAU的炎性反应无明显影响。结论视网膜S抗原诱导的黏膜耐受可有效地预防由视网膜S抗原诱发的EAU。     

龙胆泻肝汤抑制葡萄膜炎大鼠Notch信号通路活化的作用

目的　探讨龙胆泻肝汤（Longdan Xiegan Decoction，LXD）对实验性自身免疫性葡萄膜炎（experimental autoimmune uveitis，EAU）大鼠Notch信号通路活化的抑制作用及其对辅助性T细胞17（T helper 17，Th17）和调节性T细胞（regulatory T cell，Treg）表达水平的影响。方法　随机将雌性Lewis大鼠分为正常对照（NC）组、EAU模型组、LXD干预组。EAU模型组和LXD干预组大鼠诱导EAU，免疫后LXD干预组大鼠每天给予LXD灌胃处理，EAU模型组大鼠给予等量生理盐水灌胃。免疫后12 d观察大鼠眼部炎症表现，取三组大鼠眼球进行病理切片，观察病理学变化；实时荧光定量PCR（quantitative polymerase chain reaction，QT-PCR）和酶联免疫吸附实验（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）检测免疫后12 d三组大鼠脾脏、淋巴结及眼组织中Notch1、DLL4、白细胞介素10（interleukin 10,IL-10）和IL-17 mRNA及蛋白的表达；流式细胞仪检测三组大鼠各组织中Th17、Treg细胞的表达。结果　病理检查结果表明，LXD对EAU大鼠眼部组织结构有明显的保护作用。QT-PCR和ELISA检测结果发现，与NC组相比，LXD干预组大鼠脾脏、淋巴结和眼组织中Notch1、DLL4、IL-10、IL-17 mRNA和蛋白表达水平均升高，但除IL-10外，其他明显低于EAU模型组（均为P<0.05）；流式细胞仪检测结果发现，EAU模型组大鼠的各组织中Th17/Treg比例均高于NC组，经LXD干预后，Th17细胞表达水平下降，Treg表达水平升高，两者比例趋向平衡。结论　LXD可有效降低EAU大鼠脾脏、淋巴结、眼组织中Notch1、DLL4、IL-10和IL-17 mRNA和蛋白的表达水平，改善Th17/Treg细胞比例的平衡，从而有效减轻EAU大鼠的眼部炎症，保护眼部组织结构，调节全身及眼部的免疫状态。     

口服免疫耐受预防实验性自身免疫性葡萄膜视网膜炎中细胞因子网络的研究

目的 观察口服免疫耐受预防大鼠实验性自身免疫性葡萄膜视网膜炎(EAU)过程中血清以及脾细胞培养上清液中的Th1类细胞因子干扰素（IFN）-γ、白细胞介素（IL）-2和Th2类细胞因子IL-4、IL-10表达水平。方法 Lewis大鼠72只随机分为EAU组、口服视网膜S抗原10、100μg组和1、10 mg组、对照组，每组各12只大鼠。其中，EAU组用视网膜S抗原50μg和弗氏完全佐剂免疫诱导EAU模型，口服10、100 μg组和1、10 mg组，分别插管喂饲视网膜S抗原10、100 μg，1、10 mg和1 mg胰蛋白酶抑制剂的混合液1 ml，隔日1次，共7次，然后按上述方法诱导EAU；对照组插管喂饲磷酸盐缓冲液和1 mg胰蛋白酶抑制剂的混合液1 ml，隔日1次，共7次，然后诱导EAU。观察每组大鼠眼部EAU的临床表现。在EAU高峰期取大鼠眼球，进行病理分级。同时取大鼠血清，分离脾细胞，培养后取上清液，用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清以及脾细胞培养上清液中IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10细胞因子的水平。结果 100μg、1 mg组血清中Th1类细胞因子IFN-γ、IL-2浓度降低，Th2类细胞因子IL-4、IL-10的浓度增高，与EAU组和对照组比较，差异均有统计学意义（F=51.9, 68.8, 35.7,7.5,P＜0.01）；10 μg、10 mg组血清中Th1、Th2类细胞因子与EAU组和空白对照组比较，差异无统计学意义。与EAU组和空白对照组相比，100 μg、1 mg组大鼠脾细胞培养上清液中Th1类细胞因子IFN-γ和IL-2的浓度降低，Th2类细胞因子IL-4、IL-10的浓度增高，与EAU组和对照组比较，差异均有统计学意义（F=57.1,15.6,33.1,167.7, P＜0.01）；10 μg、10 mg组大鼠脾细胞培养上清液血清中Th1、Th2类细胞因子与EAU组和空白对照组比较，差异无统计学意义。结论 口服免疫耐受预防EAU过程中，Th1类细胞因子IFN-γ和IL-2的表达降低，而Th2类细胞因子IL-4、IL-10的表达增高。口服过高或过低剂量抗原不能预防EAU，细胞因子的表达水平也无明显改变。提示细胞因子在口服免疫耐受预防EAU的过程中起到重要作用。     

细胞因子信号传导抑制因子在实验性自身免疫性葡萄膜视网膜炎视网膜内的表达

目的 探讨细胞因子信号传导抑制因子(SOCS)在实验性自身免疫性葡萄膜视网膜炎(EAU)视网膜内的表达与意义.方法 随机对照实验设计方法.90只Lewis大鼠采用分层随机抽样进行分组,分别为未治疗组40只大鼠、治疗组40只大鼠及正常对照组10只大鼠.用光感受器间维生素A类结合蛋白(IRBP)诱导EAU动物模型,治疗组从免疫后1～28 d,给予环孢素(CsA)灌胃,每天20 mg/kg体重,而未治疗组给予等量生理盐水,正常对照组未给予免疫和治疗.分别于免疫后7、14、21、28 d按分层随机号抽取治疗组与未治疗组各10只大鼠进行相关枪测,观察大鼠眼部炎性变化,双眼取材,分别用实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白免疫印迹法检测大鼠视网膜内SOCS mRNA和蛋白的表达,酶联免疫吸附试验方法检测血清细胞因子白细胞介素4(IL-4)、IL-12、干扰素γ(IFN-γ)的水平.利用单因素方差分析对治疗组与未治疗组大鼠血清中细胞因子的浓度和视网膜内SOCS蛋白表达量进行对比分析,多重比较采用最小显著差异法;用Mann-Whitney两样本比较秩和检验进行治疗组与未治疗组大鼠炎性反应分值比较.结果 免疫后14 d,未治疗组可见明显的虹膜睫状体炎,房水闪辉阳性,虹膜后粘连,瞳孔不规则甚至前房积脓,炎性反应分值是1.5±0.5;而治疗组眼部炎性反应不明显,炎性反应分值是0.5±0.3.未治疗组的IL-12、IFN-γ及IL-4免疫后14 d达到最高峰(均P＜0.05),免疫后28 d IL-12、IFN-γ下降到正常水平(均P＞0.05),IL-4仍高于正常对照组(P＜0.05);治疗组中IL-12、IFN-γ的动态变化不明显(均P＞0.05),IL-4在整个病程中呈上升趋势(均P＜0.05).SOCS1、含SH2结构的细胞因子诱导蛋白(CIS)mRNA免疫后14 d表达最高,未治疗组分别是正常对照组的3.41倍和3.36倍,治疗组分别为1.44倍和1.73倍;SOCS3和SOCS5mRNA在整个病程中逐渐升高,免疫后28 d表达最高,未治疗组中分别为正常对照组的1.95倍和3.16倍,治疗组中分别为正常对照组的1.59倍和3.58倍.未治疗组SOCS1和CIS蛋白在免疫后7、14、21 d时显著高于正常对照组(均P＜0.05),治疗组二者免疫后14 d显著高于正常对照组(均P＜0.05);两组中SOCS3和SOCS5蛋白在免疫后均显著高于正常对照组(均P＜0.05).结论 EAU发生过程中视网膜SOCS1升高与Th1型反应增强有关;在发病的不同阶段中CIS与SOCS3升高和Th2细胞反应增强以对抗Th1细胞反应,与缓解葡萄膜炎的发病强度有关;SOCS5水平升高在眼局部炎性反应发生过程中可能起保护作用.     

Distribution,markers, and functions of retinal microglia

Retinal microglia originate from hemopoietic cells and invade the retina from the retinal margin and the optic disc, most likely via the blood vessels of the ciliary body and iris, and the retinal vasculature, respectively. The microglial precursors that appear in the retina prior to vascularization are major histocompatibility complex (MHC) class I- and II-positive and express the CD 45 marker, but lack specific macrophage markers. They differentiate into ramified parenchymal microglia in the adult retina. A second category of microglial precursors, which do express specific macrophage markers, migrate into the retina along with vascular precursors. They appear around blood vessels in the adult retina and are similar to macrophages or cells of the mononuclear phagocyte series (MPS). Microglia are distributed in the outer plexiform layer (OPL), outer nuclear layer (ONL), inner plexiform layer (IPL), ganglion cell layer (GCL), and nerve fiber layer (NFL) of the primate retina. The pattern of microglial distribution in the avascular retina of the quail indicates that blood vessels are not responsible for the final location of microglia in the retina. In the human retina, microglia express MHC class I, MHC class II, CD 45 , CD68, and S22 markers. In the rat and mouse retina, OX 41 , OX 42 , OX 3 , OX6, OX18, ED1, Mac-1, F 4 /80, 5 D 4 anti-keratan sulfate, and lectins are used to recognize microglia. Microglial cells play an important role in host defense against invading microorganisms, immunoregulation, and tissue repair. During neurodegeneration, activated microglial cells participate in the phagocytosis of debris and facilitate regenerative processes. In autoimmune disease, microglia have dual functions: initiating uveoretinitis, but also limiting subsequent inflammation. Retinal microglia may be associated with vitreoretinopathy, diabetic retinopathy, glaucoma, and age-related macular degeneration. The goal of this article was to review the present knowledge about retinal microglia and the function of retinal microglia in pathological conditions.     

Comparative antiproliferative and cytotoxic profile of bevacizumab (Avastin), pegaptanib (Macugen) and ranibizumab (Lucentis) on different ocular cells

Aim To compare the antiproliferative and cytotoxic properties of bevacizumab (Avastin), pegaptanib (Macugen) and ranibizumab (Lucentis) on human retinal pigment epithelium (ARPE19) cells, rat retinal ganglion cells (RGC5) and pig choroidal endothelial cells (CEC). Methods Monolayer cultures of ARPE19, RGC5 and CEC were used. Bevacizumab (0.1–0.3 mg/ml), pegaptanib (0.025–0.08 mg/ml) or ranibizumab (0.04–0.125 mg/ml) diluted in culture medium were added to the cells. Expression of VEGF-receptors (VEGFR1 and VEGFR2) and von Willebrand factor (a marker for endothelial cells) were analysed by immunohistochemistry. CEC cells were stimulated with VEGF. Cellular proliferative activity was monitored by BrdU-incorporation into cellular DNA. For cytotoxicity assays cells were grown to confluence and then cultured in a serum-depleted medium to ensure a static milieu. MTT-test was performed after one day. Results CEC and ARPE19 cells stained positively for VEGFR1 and VEGFR2. More than 95% of the CEC cells were positive for von Willebrand factor. Ranibizumab reduced CEC cell proliferation by 44.1%, bevacizumab by 38.2% and pegaptanib by 35.1% when the drugs were used at their established clinical doses. The differences, however, between the three drugs in respect to cell growth inhibition were not statistically significant. Only a mild antiproliferative effect of bevacizumab or pegaptanib on ARPE19 cells could be observed. Ranibizumab did not alter ARPE19 cell proliferation. No cytotoxicity on RGC5, CEC and ARPE19 cells could be seen. Conclusions Bevacizumab, pegaptanib and ranibizumab significantly suppress choroidal endothelial cell proliferation. However, when used at the currently established doses none of the drugs was superior over the others in respect to endothelial cell growth inhibition. The biocompatibility of all three drugs — including the off-label bevacizumab — seems to be excellent when used at the currently recommended intravitreal dose. This work is presented on behalf of the Tuebingen Bevacizumab Study Group.     

视网膜血管瘤增殖一年龄相关性黄斑变性的特殊类型

本文总结了年龄相关性黄斑变性的特殊类型—视网膜血管瘤增殖(RAP)的临床和造影表现及分期。RAP是起源于黄斑旁视网膜深层毛细血管的、以伴发多灶小片视网膜内出血及盘变前期即有视网膜-脉络膜血管吻合(RCA)形成为特征的新生血管性AMD。     

视网膜色素上皮挫伤的眼底自发荧光改变

目的 观察视网膜色素上皮挫伤时的眼底自发荧光(AF)形态改变,探讨AF检查对眼外伤造成的视网膜色素上皮挫伤的诊断意义.方法 对31例(36只眼)视网膜色素上皮挫伤的的患者,进行眼底自发荧光检查.采用海德堡激光眼底扫描系统获取自发荧光图像.与同病例的眼底检查及FFA做对比分析,得出其自发荧光特征.结果 所有病例在视网膜色素上皮挫伤区域的自发荧光普遍弥漫性增强,有色素上皮增生处大多表现为更强的自发荧光点,色素脱失处大多表现为低荧光,在总体增强区域表现为地图状的自发荧光.结论 眼球钝挫伤早期导致的视网膜色素上皮的损害会引起相应的自发荧光的改变,主要以自发荧光增强为主,反映该区域色素上皮高代谢状态或增殖活动为主,弱的AF较少,表明挫伤后短期局部的色素上皮萎缩.这些改变与一些以萎缩性病变为主的眼底病的AF有明显区别,因而AF应用于视网膜色素上皮挫伤的诊断有明显的意义.     

Intravitreal use of bevacizumab (Avastin) for choroidal neovascularization due to ARMD: a preliminary multifocal-ERG and OCT study

Purpose To evaluate by MFERG and OCT the macular function before and after intravitreal use of bevacizumab (Avastin) in eyes suffering from CNV due to ARMD. Methods Eighteen eyes with subfoveal CNV due to ARMD were studied before and after intravitreal use of bevacizumab with MFERG and OCT. The post treatment follow up was three months. Results Before treatment, OCT shows an increase of the retinal thickening of the fovea and the electrical response densities in the fovea and parafovea were decreased in all patients. Three months after treatment, OCT showed a real resolution of the subretinal fluid. The electrical responses in the fovea and parafovea remained the same or slightly improved in some cases. The intraocular pressure remained normal and no inflammation was observed. Conclusion The intravitreal use of bevacizumab may provide anatomical correlates that support the concept of disease amelioration but the functional improvement of the macula three months after treatment is not obvious. However the method is promising and needs further evaluation.     

糖尿病患者的视网膜电图分析

目的分析糖尿病(DR)患者视网膜电图(F-ERG)的振幅、峰潜时、OPS总和振幅及其与病程的相关性.方法将53例102眼糖尿病患者分为三组(NDR、BDR、PDR),并采用美国UATA-2000型视觉电生理仪对53DR例进行F-ERG检查,主要分析其a、b波峰潜时、振幅、OPS总和振幅.结果随着DR病情的加重,ERG及OPS无波的情况所占比例增大.a波峰潜时BDR组和正常组比较差异有极显著性(P<0.01),BDR组和DM无DR组比较差异有显著性(P[WTBZ〗<0.05);a波振幅正常对照组与其他各组比较差异均有极显著性(P<0.01).b波振幅正常对照组与BDR、PDR间以及DM无DR组与BDR、PDR组间均有极显著性差异(P<0.01).OPS总和振幅除了BDR与PDR间外,其他各组比较差异均有极显著性(P<0.01).结论OPS、ERG之a、b波振幅,尤其是b波振幅,可以作为早期诊断DR患者以及估计预后的敏感指标;良好的血糖控制,可以延缓DM的病情发展.     

30天连续配戴硬性透氧性角膜接触镜的安全性研究

目的为了评价Menicon Z硬性接触镜30 d连续配戴的安全性与有效性,进行了两个为期一年的临床比较试验.方法分别选用了可以7 d连续配戴的Hydrogel材料的Acuvue(1)及可以30 d连续配戴的Si H材料的Focus Night & Day(2)软性接触镜作为对照镜片.结果临床试验(Ⅰ)中,317人参加了Menicon Z组群,313人参加了Acuvue组群.Menicon Z组群有258人(占81.4%)完成了为期一年的试验,而Acuvue组群仅有210人(占67.1%).Acuvue组群中比较常见的副作用为浸润性角膜炎与细菌性结膜炎.相比之下,Menicon Z组群常见的不适症状是由异物飞入角膜造成角膜上皮擦伤所致的.各有50人参加了临床试验(Ⅱ)的Menicon Z组群与Night & Day组群.Menicon Z组群有35人(占70.0%)完成了为期一年的试验,Night & Day组群有33人(占66.0%).Menicon Z组群中常见的副作用表现为3～9点角膜染色,Night & Day组群为接触镜相关性充血、接触镜性角膜周边溃疡、乳头性结膜炎、角膜上方弓状损伤与细菌性角膜炎.结论Menicon Z 30 d连续配戴具有安全性.     

The Analysis of Electroretinography of Diabetes Mellitus

Purpose: In order to get deeper understanding of Diabetic Retinopathy (DR), we analyzed and evauated the results of the amplitude and latency of F-ERG a-wave, b-wave and the total amplitudes of oscillatory potentials(OPs).Methods: F-ERG of 105 eyes from 55 cases of DM were diagnosed by the medical department from July 1997 to July 1998. The 105 eyes were examined by ophthalmoscope and fluorescing in angiography and divided into there groups: 22 eyes with DM without DR(NDR), 56 eyes with background DR(BDR)and 27 eyes with proliferate DR(PDR). In addition, 30 eyes were regard as normal control group(NCG) . We used VATA-2000 type vision electrophysiological instrument and inter-national standard for clinical ERG to do measure meat and recording automatically by computer.Results: 1. The proportion of eyes number of invisible wave of a-wave, b-wave of F-ERG and Ops increased with the development of DR. 2. There were significant differences ( P< 0. 01) in the latency of a-wave between NCG and BDR and statistic     

近视及散光眼LASIK后非接触眼压计测量值的影响因素及其预测

目的 比较近视和(或)散光患者在LASIK手术前后非接触眼压计测量结果的差异及其影响因素,并得到预计眼压的计算公式.方法 对2005年12月至2006年11月在北京协和医院准分子激光手术中心行初次准分子激光原位角膜磨镶术(LASIK)矫正近视和(或)散光的患者进行回顾性研究,共93例(183只眼),采用非接触眼压计(NCT)测量术前和术后2周、1个月、3个月的眼压值,计算眼压变化值并分析其与各种变量之间的相关性,应用多元线性回归从相关变量得到术后预计的测量眼压值及眼压变化值.结果 患者术后3个月眼压较术前平均下降(5.74±2.03)mmHg,其变化与性别、年龄均不相关,但与术前屈光度有明显的关系.多元线性回归分析得到术后实际测量的眼压与术前眼压呈正性相关,而与手术切削量呈负相关(R2=0.442,P<0.001),术后预计测量眼压=5.175+0.411×术前眼压-0.0205×切削量,手术后眼压测量下降值0.589×术前眼压+0.0205×切削量-5.175.结论 通过术后实际测量眼压值与预测值比较,可以及时发现高眼压的患者,避免低估眼压以致漏诊青光眼而造成患者视功能损失.虽然可以通过预测公式来判断实际测量眼压值是否在正常范围.但更有效的方法是使用不受角膜变化影响的眼压计测定眼压.