酪氨酸激酶抑制剂抗白血病作用研究进展

绝大多数慢性髓系白血病和部分成人急性淋巴细胞白血病存在Ｐｈ染色体,即９号、２２号染色体易位,ｔ（９;２２）ｑ３４;ｑ１１）。该易位产生ＢＣＲ－ＡＢＬ嵌合基因,并表达ＢＣ－ＡＢＬ蛋白。本文综述近年来酪氨酸激酶抑制治疗进展。     

多表位BCR—ABL融合基因的合成,克隆及表达研究

慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）的免疫治疗是清除白血病微小残留病并最终根治ＣＭＬ的方向之一，包含ＢＣＲ－ＡＢＬ融合区的多肽具有良好的免疫原性，在体内、外可诱发ＢＣＲ－ＡＢＬ特异的Ｔ细胞克隆。以ＢＣＲ－ＡＢＬ融合肽瘤苗激发特异性Ｔ细胞应答ＣＭＬ免疫治疗有希望成为根治ＣＭＬ残留白血病的有效手段。本实验通过基因工程技术，设计一个２８０ｂｐ的融合抗原基因片段，包含ＨＬＡ－Ａ２，ＨＬＡ－Ａ３，ＨＬＡ－ＤＲ１１等３     

p15^INK4B基因甲基化在急性普细胞白血病和慢性粒细胞白血病中的研究

为探索ｐ１５＾ＩＮＫ４Ｂ基因在ＣｐＧ岛高甲基化对白血病发病机制的重要作用,应用敏感的甲基化特异的ＭＳＰ－ＰＣＲ的测定方法,测定了ｐ１５＾ＩＮＫ４Ｂ基因在急性粒细胞白血病（ＡＭＬ）和慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）中甲基化的表达变化,研究结果表明,ｐ１５＾ＩＮＫ４Ｂ基因操纵区在ＡＭＬ和ＣＭＬ中的甲基化发生率分别为８３．９％（２６／３１）和０％（０／２８）。结论提示：甲基化是ｐ１５＾ＩＮＫ４Ｂ基因在ＡＭＬ中主要的失活方式之一,并可在病程进展中出现甲基化,使病情加重,在ＣＭＬ中无基化的发生,说明ｐ１５＾ＩＮＫ４Ｂ基因的功能在ＣＭＬ中可能是完整的。     

BCR—ABL融合蛋白多样性及其与白血病表型的关系

本文报告ＢＣＲ－ＡＢＬ融合蛋白的变化及其与白血病表型的关系。首先报告各种ＢＣＲ－ＡＢＬ融合基因的结构及其转录本。可分为三种类型，即Ｍ－ｂｃｒ，ｍｂｃｒ和μ－ｂｃｒ，以及它们见于那些白血病。其次报告ＢＣＲ断点位置的变化，ＡＢＬ的特殊断点，ＢＣＲ－ＡＢＬ信息ＲＮＡ的拼接。ＢＣＲ－ＡＢＬ融合蛋白的结构和白血病的关系。引外ＢＣＲ／ＡＢＬ细胞还带有染色体的其它异常，Ｐｈ染以体的变种等。最后论述了ＢＣＲ／ＡＢ     

GATA—2与免疫球蛋白重链胚系基因Cμ在白血病细胞中的表 …

应用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）对不同类型白血病患者骨髓（ＢＭ）或外周血（ＰＢ）细胞ＧＡＴＡ－２和ＩｇＨ胚系基因ＣμｍＲＮＡ的表达进行检测，探讨ＧＡＴＡ－２与ＩｇＨ胚系基因Ｃμ在白血病细胞中的表达与共表达及意义。在正常人ＢＭ和ＰＢ细胞中未检测到ＧＡＴＡ－２和ＩｇＨ胚系基因Ｃμ。在急性髓性白血病（ＡＭＬ）和急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）以及慢怀粒细胞白血病慢性期（ＣＭＬ－ＣＰ）ＧＡＴＡ－２检出     

连接蛋白CRKL在正常血细胞和表达BCR／ABL细胞中的研究进展

ＣＲＫＬ是由２２号染色体ｑ１１的ｃｒｋｌ基因编码的含ＳＨ２、ＳＨ３结构域的３９ｋＤａ的连接蛋白。ＣＲＫＬ羧基端ＳＨ３结构域与Ｃ３Ｇ、ＳＯＳ、Ｐ１３－Ｋ、ＨＰＫｌ、ｃ－ＡＢＬ或ＢＣＲ／ＡＢＬ结合,ＣＲＫＬ氨基端ＳＨ２结构域与酷氨酸磷酸化的蛋白如ＣＢＬ、ＨＥＦ１、ＣＡＳ、ＳＴＡＴ５或ｐａｘｉｌｌｉｎ结合,在正常造血细胞和白血病中ＢＣＲ／ＡＢＬ的主要底物,与ＢＣＲ／ＡＢＬ和ｃ－ＡＢＬ形成连接复活复合物。     

用PCR技术评价微量残留白血病细胞体外净化的效果

应用系列稀释法ＰＣＲ技术检测含５％携带ＰＣＲγ基因重排的ＣＣＲＦ－ＣＥＭ株细胞的模拟缓解期白血病骨髓的微量残留白血病细胞，敏感性为１０＾－＾５－１０＾－＾６水平。经ＶＰＬ加ＡＤＭ，Ｖｐ１６，ＶＣＲ联合体外净化１小时，结果显示有３个对数级的杀伤作用。用体外克隆形成培养法观察该联合方案对急性期白血病患者白病祖细胞集落，（ＣＦＵ－Ｌ）及正常骨髓造血干细胞集落（ＣＦＵ－ＧＭ）的抑制作用，ＣＦＵ－ＧＭ存活率     

连接蛋白CRKL及其相关蛋白与造血调控信号传导

ＣＲＫＬ为具有ＳＨ２及ＳＨ３结构的连接蛋白,可与细胞内不同蛋白结合参与造血调控所涉及的广泛的信号传忸。在ＢＣＲ／ＡＢＬ的细胞,ＣＲＫＬ持崦显著地酪氨酸磷酸化,对ＢＣＲ／ＡＢＬ的恶性转化有重要作用。本文就ＣＲＫＬ来源。结构及功能,ＣＲＫＬ所识别并结合的蛋白以及ＣＲＫＬ在慢性同蛋白血病中的作用进行了综述。     

30例急性白血病自体骨髓移植后造血功能重建的影响因素

对３０例急性白血病（ＡＬ）自体骨髓移植（ＡＢＭＴ）后造血功能恢复进行了单因素和多因素分析。移植后ＷＢＣ＞１．０×１０￣９／Ｌ、ＡＮＣ＞０．５×１０￣９／Ｌ、ＢＰＣ＞２０×１０￣９／Ｌ和胸骨髓增生活跃的中位时间分别为３０，３７，６１和５０天。白血病类型（急性髓细胞白血病）和骨髓细胞－１９６℃冻存是造血功能尤其是血小板延期恢复的主要因素（Ｐ＜０．０５），而年龄、性别、缓解（ＣＲ）至ＡＢＭＴ间期、停化疗至采髓及移植的间期、预处理方案及回输的骨髓细胞量等对造血功能的恢复无明显影响（Ｐ＞０．１）。血小板的延期恢复造成输血及血小板量明显增加和住院时间明显延长（Ｐ＜０．０１）。移植后９０天ＢＰＣ＜２０×１０￣９／Ｌ者早期复发的可能性较大（Ｐ＝０．０６）。     

维拉帕米减敏巨噬细胞机制研究

目的：探讨维拉帕米对严重烧伤小鼠早期腹腔巨噬细胞（ＭХ）内毒素（ＬＰＳ）后信号转导途径的影响。方法：ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠随机分成烫伤组和假烫组，将收集到的腹腔ＭХ加入不同浓度维拉帕米（１０、１００和１０００ｎｍｏｌ／Ｌ）培养。用细胞免疫组化、逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和酶联免疫方法，观察维拉帕米对小鼠ＭХ表达磷酸化酪氨酸（Ｔｙｒ－Ｐ）、ＣＤ１４ｍＲＮＡ的产生肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）、白介     

激活骨髓自体移植治疗白血病

为降低自体骨髓移植（ＡＢＭＴ）后的复发。采用重组白细胞介素２（ｒＩＬ－２）激活骨髓（ＡＢＭ）自体移植治疗白血病１１例。１０例预处理用ＭＡＣＣ（马法兰、阿糖胞苷、环磷酰胺和环已亚硝脲）方案、１例用全身照射＋环磷酰胺方案；移植后当天开始用ｒＩＬ－２（２～４）×１０￣５Ｕ／ｄ×（１５～３０天），０～＋５天开始用Ｇ－ＣＳＦ３００μｇ／Ｌ×（５～１５天）。结果：所有患者造血都得到重建，时间缩短；移植前５例未缓解患者移植后均获完全缓解（ＣＲ），２例在移植后１０个月与１３２天复发，其它９例持续ＣＲ至１９９６年３月，ＣＲ期为５６天～３０个月。２例出现皮肤移植物抗宿主病样表现；移植中感染发生率为３６．４％。结论：ＡＢＭ自体移植治疗白血病有效，并可能诱导移植物抗白血病效应，降低ＡＢＭＴ的复发率，联合应用Ｇ－ＣＳＦ和ＩＬ－２能加速移植后造血重建。     

慢性粒细胞白血病发病机理研究的进展

慢粒白血病（ＣＭＬ）最大的特点是存在特异性的Ｐｈ染色体即ｔ（９；２２）。该易位产生ｂｃｒ－ａｂｌ融合基因，其表达为一个具有高酪氨酸激酶活性的ＢＣＲ／ＡＢＬ融合蛋白，后者被认为是ＣＭＬ发病的分子基础。本文就ＡＢＬ及ＢＣＲ蛋白的正常结构和生物学活性以及ＣＭＬ细胞中ＡＢＬ蛋白ＰＴＫ的激活及其所介导的致癌信号的传导进行综述，以助进一步了解ＣＭＬ的发病机理。     

可变串联重复区多聚酶链反应法评估异基因骨髓移植后的嵌合状态

为更好地评价异基因骨髓移植（ａｌｏ－ＢＭＴ）后的嵌合状态，采用可变串联重复区（ＶＮＴＲ）Ｄ１Ｓ８０位点多聚酶链反应（ＰＣＲ）法对１０例白血病患者ａｌｏ－ＢＭＴ后的嵌合状态进行检测。结果９例为完全嵌合（ＣＣ），１例为混合嵌合（ＭＣ），其中２例经核型分析结果证明为ＣＣ，６例经小卫星ＤＮＡ探针Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交分析也证明为ＣＣ。说明ＶＮＴＲ位点ＰＣＲ法检测ａｌｏ－ＢＭＴ后的嵌合状态具有方法简便、快速、灵敏度高的优点，且不需放射性同位素操作，不受血型、性别、ＨＬＡ配型及骨髓增生低下等影响。     

BCR-ABL嵌合蛋白质信号转导研究进展

p210(BCR-ABL)和p190(BCR-ABL)分别是慢性粒细胞白血病(CML)及部分急性淋巴细胞白血病(ALL)的特征性BCR-ABL嵌合基因的表达产物,与正常C-ABL蛋白质比较,它们具有极强的蛋白质酪氨酸激酶(protein tyrosine kinase,PTK)活性,通过自身磷酸化和使其它胞浆蛋白质磷酸化而干扰控制造血干细胞或造血祖细胞发育的信号转导过程,是相关白血病病理发生的主要原因和标志。本文综述BCR-ABL嵌合蛋白质信号转导的近期研究进展。     

血小板生成素及其受体在急性白血病中的改变

目的 探讨血小板生成素（Ｔｐｏ）受体Ｃ－ｍｐｌ在急性白血病中的表达主其意义以及重组人Ｔｐｏ对急性白血病细胞增殖的影响。方法 采用半定量逆转录,聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法检测４３例急性白血病患骨髓单个核细胞Ｃ－ｍｐｌ基因的表达,用ＭＴＴ法研究重组人Ｔｐｏ单独或联合某些造血生长因子对急性白血病细胞增殖的影响。结果 ３５例急性髓系白血病（ＡＭＬ）患中有２２例表达Ｃ－ｍｐｌ,各ＦＡＢ亚型无均有表     

激活骨髓自体移植联用IL-2和G-CSF对造血与免疫功能重建影响的观察

激活骨髓自体移植联用ＩＬ－２和Ｇ－ＣＳＦ对造血与免疫功能重建影响的观察刘启发周淑芸伍柏松冯茹孙竞刘晓力近年研究认为激活骨髓（ＡＢＭ）移植联合应用重组白细胞介素２（ｒｈＩＬ－２）能产生移植物抗白血病反应（ＧＶＬ），并对体内外微量残留病（ＭＲＤ）均有净化...     

灵芝多糖对人脐血LAK细胞增殖活性的影响

本研究表明，灵芝多糖（ＧＬＰ）能直接刺激人脐血单个核细胞（ＣＢＭＣ）增殖，并能协同ＰＨＡ刺激ＣＢＭＣ增殖在ｒＩＬ－２诱导人脐血ＬＡＫ细胞（简称ＣＢ－ＬＡＫ）早期加入ＧＬＰ，能明显增强ＣＢ－ＬＡＫ细胞增殖活性，最佳浓度１０μ／ｍｌ；ＧＰＬ本身不能诱导ＣＢＭＣＩＬ－２Ｒ的表达，但能协同ｒＩＬ－２提高ＣＢ－ＬＡＫ细胞表达ＩＬ－２Ｒ的表达。     

RT—PCR检测白血病融合基因的临床意义

本文综述应用逆转录－多聚酶链反应检测白血病融合基因ＡＭＬ１－ＥＴＯ、ＰＭＬ－ＲＡＲα和ＢＣＲ－ＡＢＬ的临床意义。     

T淋巴细胞识别自体慢性粒细胞白血病肿瘤细胞抗原的研究

目的：验证慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）患者体内是否存在细胞毒Ｔ淋巴细胞前体细胞，并鉴定其表型和功能特征。方法：用混合淋巴瘤细胞培养技术，用自体瘤细胞和细胞因子刺激扩增ＣＭＬ患者骨髓和外周血单个核细胞（ＭＮＣ）。结果：ＣＭＬ缓解期和慢性期均存在对自体和异体ＣＭＬ细胞杀伤活性的Ｔ淋巴细胞，这些细胞对自体和异体正常ＭＮＣ没有杀伤活性，对正常ＣＦＵ－ＧＭ无抑制作用。而ＬＡＫ细胞对自体ＣＭＬ细胞无杀伤活性（＜１０％），只对异体ＣＭＬ细胞有杀伤活性。上述Ｔ细胞包括ＣＤ３＋ＣＤ５６＋非主要组织相容性抗原（ＭＨＣ）限制性Ｔ细胞，和ＣＤ３＋ＣＤ６－ＭＨＣ限制性Ｔ细胞。用自体ＣＭＬ细胞刺激可增加Ｔ细胞激活抗原ＣＤ２５和ＨＬＡ－ＤＲ的表达。上述Ｔ细胞对自体ＣＭＬ细胞呈较弱的增殖反应，对异体ＣＭＬ细胞几乎无增殖反应，对载有ＢＣＲ－ＡＢＬ肽的自体缓解期ＥＢ病毒转染Ｂ细胞也无增殖反应。结论：ＣＭＬ细胞可能有共同的肿瘤抗原，后者可以被Ｔ细胞识别，但尚无证据表明是ｐ２１０的融合区序列。     

环孢霉素A逆转复发难治性白血病多药耐药的临床研究

目的：探讨环孢霉素Ａ（ＣｓＡ）逆转复发难治性急性白血病的临床意义及推广价值。方法：采用免疫组织化学ＡＢＣ法，ｐ１７０单抗ＪＳＢ－１检测复发难治性白血病的ｐ１７０表达，并对阳性患者随机分组，用ＣｓＡ加联合化疗进行逆转多药耐药研究，同时采用高效液相色谱法检测ＣｓＡ血药浓度，探讨ＣｓＡ血药浓度和逆转疗效间的关系。结果：ｐ１７０在复发难治性白血病中有高表达；ＣｓＡ有较好逆转复发难治性白血病多药耐药的作用（Ｐ＜０．０５）；ＣｓＡ血药浓度和逆转疗效呈正相关。结论：ＣｓＡ可能成为安全有效的逆转药物，在治疗复发难治性ＡＬ中有较大临床意义及推广价值。