谷氨酰胺对脓毒症幼年大鼠心肌ERK2mRNA以及p38MAPK表达的影响

目的观察脓毒症心肌细胞外信号调节激酶（extracellular signal regulated kinase-2，ERK2）和丝分裂原蛋白激酶（mitogen activated protein kinase，p38MAPK）是否参与这一病理过程，以及谷氨酰胺（Glutamine，Gln）对其表达的影响，探讨Gin对脓毒症大鼠心肌的保护途径。方法选健康18日龄Wistar大鼠88只．按腹腔注射药物不同生理盐水作对照组（0h），内毒素（LPS）、Gln组，各组于加LPS后2、4、6、24及72h分别取8只，断头无菌分离心脏，似多聚甲醛固定12-16h，制成石蜡切片，用原位杂交方法测定ERK2 mRNA表达，用免疫组化方法测定p38MAPK表达。结果LPS组各时点ERK：mRNA以及p38MAPK表达均较对照组增强．最高点分别在6h和6-24h，差异有显著性，P〈0．01；Gln组各时点ERK2 mRNA以及p38MAPK表达趋势与LPS组一致，但明显低于LPS组，P〈0．01。结论ERK2 mRNA以及p38MAPK表达在脓毒症时均明显增强：谷氨酰胺可以使其表达下调。     

谷氨酰胺、地塞米松对脓毒症幼年大鼠小肠肿瘤坏死因子α与基质金属蛋白酶3 的影响

 目的观察在脓毒症时幼年大鼠小肠肿瘤坏死因子琢（TNF-琢）、基质金属蛋白酶3（MMP-3）的动态变化,探讨谷氨酰胺
（Gln）、地塞米松（Dex）在这一病理过程中的作用。方法选健康18 日龄Wistar 大鼠128只,在设定时间点随机取8 只,按腹腔
注射药物不同分为生理盐水对照（0 h）、内毒素（LPS）、Dex 和Gln 治疗4 组,后3 组加LPS 后于2、4、6、24 及72 h 分别取8 只大
鼠断头,分离远段回肠,石蜡包埋,固定,制成切片,用免疫组化方法测定TNF-琢和MMP-3 蛋白质表达。结果（1）LPS 组TNF-
琢蛋白质表达逐渐增高,24 h达高峰,各时点表达明显高于对照组（ P< 0.01）;Dex 组增高趋势明显比LPS 组减弱,但各时点
TNF-琢表达仍明显高于对照组（ P< 0.01）;Gln 组6 h TNF-琢表达显著高于LPS 组（ P< 0.05）;（2）LPS 组MMP-3 蛋白质表达与
对照组比较明显升高,24 h达高峰,以后逐渐降低（ P< 0.01）;Gln 组各时点MMP-3 表达均明显低于对照组（ P< 0.01）;Dex 组
MMP-3 蛋白质表达低于LPS 组,但高于Gln 组,各时点与对照组比较差异有统计学意义（ P< 0.01）。结论在抑制炎性介质方
面地塞米松作用强于谷氨酰胺;地塞米松和谷氨酰胺都能减轻内毒素诱导的MMP-3 的合成,但谷氨酰胺强于地塞米松。     

地塞米松对内毒素血症幼年大鼠心肌肌动蛋白及其mRNA表达的影响

目的：通过观察地塞米松（Dex）对内毒素血症幼年大鼠心肌肌动蛋白（α-SA）及其mRNA表达的影响,探讨Dex对内毒素血症大鼠心肌收缩功能的保护途径.方法：选健康18 d Wistar大鼠121只,按腹腔注射药物不同分成：生理盐水对照组,内毒素（LPS）组、Dex组,各组于加LPS后2,4,6,24及72 h分别将大鼠断头分离心脏,RT-PCR方法测定α-SA mRNA表达水平,用免疫组化方法测定α-SA.结果：LPS和Dex组各时点α-SA及其mRNA表达均较对照组明显减弱（P＜0.01）;Dex组最低点与LPS组一致在6～24 h,但明显高于LPS组（P＜0.01）.结论：α-SA及其mRNA表达在内毒素血症时明显受到抑制,心肌收缩功能受损;Dex可减轻LPS对d-SA及其mRNA表达的抑制作用.     

内毒素血症时老年大鼠肝脏氧自由基代谢及热休克蛋白70的表达

目的探讨内毒素血症时老年大鼠肝脏功能、自由基代谢的变化以及热休克蛋白70（HSP70）的表达。方法39只SD大鼠分成四组：老年对照组（n=7）、青年对照组（n=12）、老年内毒素组（n=8）、青年内毒素组（n=12）。采用尾静脉注射LPS（3mg／kg体重）制造内毒素模型,4h后取血及肝脏。检测肝功能（ALT、AST、DBIL、IBIL）,血清及肝匀浆MDA,SOD水平,免疫组化测定肝脏HSP70表达。结果老年内毒素组较其对照组及青年内毒素组血清ALT及AST明显升高（P〈0．05）,血浆及肝匀浆MDA也均明显升高,SOD则明显下降（P〈0．05）。肝脏HSP70表达老年对照组较青年对照组、老年内毒素组较青年内毒素组均明显增强（P〈0．05）。结论内毒素血症时,老年大鼠存在更加严重的氧化／抗氧化比例失调,是老年组肝脏损伤明显的重要原因。老年内毒素组肝细胞的HSP70表达明显增强可能与其肝细胞内蛋白变性严重、存在更加强烈的氧化应激有关。     

谷氨酰胺对人外周血单个核细胞细胞因子表达的影响

目的 探讨谷氨酰胺(Gln)对内毒素(LPS)刺激下健康人外周血单个核细胞(PBMC)细胞因子表达的影响.方法 取健康志愿者新鲜外周血,利用密度梯度离心法提取单个核细胞,观察内毒素刺激单个核细胞表达肿瘤坏死因子(TNF-α)和白细胞介素(IL)系列(IL-1β、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10),酶联免疫吸附法(ELISA)检测上清中细胞因子的表达,SuperArray基因芯片技术检测细胞中细胞因子mRNA的表达,同时分别使用1、8、10和15 mmol/L Gln预处理单个核细胞0.5 h和2 h后观察细胞因子在蛋白以及基因水平的表达.结果 LPS刺激PBMC后观察部分细胞因子表达明显增强;1 mmol/L Gln组细胞因子表达无变化,8 mmol/L Gln预处理后TNF-α、IL-1β、IL-8和IL-10表达下降(P＜0.05),15 mmol/L Gln组炎症介质表达均有显著下降(P＜0.01).但与未受LPS刺激组相比炎症介质表达仍有增高(P＜0.05).Gln预处理2 h组细胞因子表达的抑制较0.5 h明显增强(P＜0.05),并且存在时间和剂量的依赖性.结论 Gln能够下调LPS刺激下PBMC细胞因子的过表达.     

HSP70在大鼠内毒素血症肺损伤中的作用

目的探讨热休克蛋白70（HSP70）在内毒素血症大鼠肺损伤中的作用及可能机制。方法大鼠尾静脉注射脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）复制内毒素血症模型。雌性Wistar大鼠24只，随机分为4组：对照组（C组）；内毒素血症组（E组）；Gln提前干预组（G1组）；Gln延迟干预组（G2组）。所有的动物于注射LPS之后6h放血处死，测定肺组织HSP70的表达、超氧化物歧化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）的含量，并用光镜观察大鼠肺组织的病理变化。结果E组同C组相比，肺组织HSP70表达明显增多（P〈0．01），SOD活性明显降低（P〈0．01），MDA含量增高（P〈0．05）。与E组相比，G1，G2组肺组织HSP70表达增多（P〈0．05），SOD活性增高（P〈0．05），MDA含量明显降低（P〈0．05）。G1与G2在肺组织HSP70表达。SOD活性，MDA含量等方面比较均无显著性差异（P〉0．05）。结论增加HSP70的表达对内毒素血症大鼠肺损伤可能起保护作用，作用机制可能与增加肺组织HSP70，提高机体应激时抗氧化能力有关，尚不能认为Gln提前干预与Gln延迟干预之间有差异。需要作进一步研究。     

TLR4及其信号通路在阻塞性黄疸肝脏损伤中作用的研究

目的 探讨TLR4及其信号通路在阻塞性黄疸中引起肝脏损伤的作用机制。方法 将60只SD大鼠（雌雄各半）随机分为阻塞性黄疸+多粘菌素B组（OJ+PMB组,n=15）、阻塞性黄疸组（OJ组,n=15）、假手术组（SO组,n=15）、空白对照组（CG组,n=15）。结扎胆总管建立阻塞性黄疸大鼠模型,并于术后7、14、21d采集标本,检测血清内毒素（LPS）、谷丙转氨酶（ALT）和总胆红素（TBI）含量,常规HE染色观察肝脏病变,ELISA法检测肝脏组织中TLR4蛋白表达和NF-kB P65活性,RT-PCR检测TLR4mRNA的表达情况 。结果 在同一时间点,OJ+PMB组、OJ组与SO组、CG组比较,血清内毒素、ALT、TBI和肝组织TLR4、NF-kB P65均明显升高（p＜0.01)。ALT与TLR4的变化呈明显正相关（r=0.875, p＜0.01）,并且肝组织病理损伤也随肝组织中TLR4升高而逐渐加重。LPS与TLR4的变化呈正相关（r=0.848, p＜0.01), TLR4与NF-kB p65的变化呈正相关（r=0.877, p＜0.01),它们之间都存在明显的依存关系。21d时,OJ+PMB组与OJ组比较各血清学指标下降,差别有统计学意义（p＜0.01),病理损伤减轻。结论 TLR4的表达可加重阻塞性黄疸肝脏的损伤,并可经LPS―TLR4―NF-kB信号转导通路发挥其作用;PMB有拮抗内毒素,减轻肝脏损伤作用。     

槐定碱对内毒素肺损伤小鼠p38MAPK的影响

目的探讨内毒素（细菌脂多糖,LPS）肺损伤小鼠肺组织p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）表达的变化以及槐定碱对其影响。方法 60只BALB/c小鼠,除正常对照组、槐定碱对照组外,内毒素肺损伤模型组（LPS模型组）、槐定碱治疗高（12mg.kg-1）、中（6mg.kg-1）、低（3mg.kg-1）剂量组的BALB/c小鼠均尾静脉注射LPS制备急性肺损伤模型,注射后30min再分别腹腔注射生理盐水或槐定碱12、6、3mg.kg-1,各组均处理后6h取材,肉眼及光镜观察肺组织的病理变化,免疫组化SP法检测肺组织中总p38、磷酸化p38的表达,硝酸还原酶法检测血清NO含量。结果 LPS模型组肺脏病理改变明显加重,肺组织总P38和磷酸化p38的表达均增多和增强（P〈0.01）;血清NO显著升高（P〈0.01）;槐定碱三个剂量治疗组病理损伤均不同程度改善,总P38表达与LPS组比较差异无统计学意义,但磷酸化p38表达均显著小于模型组（P〈0.01）,血清NO含量显著低于LPS模型组（P〈0.01）。结论 p38MAPK参与了内毒素肺损伤的发病过程,槐定碱的抗内毒素肺损伤机制可能与下调p38MAPK的表达,抑制NO的释放有关。     

谷氨酰胺对内毒素血症幼年大鼠肾脏细胞凋亡超微结构的影响

目的通过观察谷胺酰氨对内毒素血症时幼年大鼠肾脏细胞凋亡超微结构的影响，探讨谷氨酰胺对内毒素血症大鼠肾脏损伤的保护机制。方法健康18日龄Wistar大鼠54只，随机分为3组：正常对照组（N）：腹腔注射生理盐水0．1mL；内毒素组（L）：腹腔注射内毒素4mg／kg；谷氨酰胺干预组（G）：腹腔注射内毒素同时腹腔注射N（2）-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺2g／kg，于注射后6、24和72h处死大鼠取出肾脏，利用透射电镜观察肾脏细胞超微结构的改变。结果注射LPS6h、24h肾小球基底膜厚薄不均，局部有增厚和足突融合，近端小管上皮细胞内线粒体嵴溶解，远端小管微绒毛减少；注射LPS72h近端小管出现核染色质的浓缩、着边及核破碎的凋亡改变，应用谷氨酰胺后肾脏结构改变明显减轻，凋亡改变消失。结论细胞凋亡参与内毒素血症幼年大鼠肾损伤过程，谷氨酰胺可减轻肾脏细胞凋亡，保护肾脏功能。     

P38MAPK与HO-1在急性肺损伤中的探讨 1

目的 探讨丝裂原活化蛋白激酶P38（p38MAPK）与血红素加氧酶-1（HO-1）在急性肺损伤中的相互关系。方法 健康雄性wistar大鼠40只,随机分为五组(n=8)。对照组（NS组）、内毒素组（LPS组）、血晶素组（Hemin组）、锌原卟啉IX组（ZnPPIX组）、SB203580组（SB组）。于6 h后用Western Blot和免疫组化法法分别检测肺组织丝裂原活化蛋白激酶P38（P38MAPK）和血红素加氧酶-1（HO-1）蛋白表达,检测肺泡灌洗液（BALF）中中性粒细胞比、肺组织湿/干、蛋白含量和动脉血气,并进行病理学观察。结果 与NS组比较,LPS组、Hemin 组、SB组、ZnPPIX组P38MAPK含量蛋白表达明显增高（P<0.05）,HO-1强阳性表达（P<0.01或P<0.05）,肺组织湿/干比重明显增加（P<0.05）,中性粒细胞比、蛋白含量显著增加（P<0.05或P<0.01）,PaO2、PaCO2和HCO3?较NS组显著下降(P<0.05);与LPS组比较,Hemin 组、SB组P38MAPK蛋白表达显著降低（P<0.05）,HO-1的表达明显升高（P<0.05）,肺组织湿/干重、中性粒细胞比、蛋白含量明显减少（P<0.05）,而ZnPPIX组恰好相反;Hemin 组、SB组之间无显著差异（P>0.05）。ZnPPIX组肺组织损伤最重,LPS组次之,Hemin组和SB组最轻。结论 P38MAPK与HO-1在急性肺损伤中各自独立,相互抑制的。     

内毒素预处理对内毒素血症鼠的作用及机制

目的观察内毒素(LPS)预处理对内毒素血症鼠的作用并探讨其机制。方法将雄性Wistar大鼠72只随机分为生理盐水组(N组,n=24)、LPS对照组(L组,n=24)、LPS预处理组(P组,n=24),P组首先腹腔注射LPS,24 h后再经腹腔注射LPS,N组和L组在上述两时点均给予等容量生理盐水,72 h后L组和P组分别静脉注射LPS,N组给予等容量NS。各组分别取6只大鼠用于持续观察血流动力学改变,并于造模后2、4、6 h时分别另取6只大鼠采血测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和一氧化氮(NO)含量,并于造模后6 h取动物心、肺、肝、肾、小肠等脏器组织,观察其形态学变化。结果 LPS预处理可明显逆转大鼠内毒素血症时的血流动力学如平均动脉压、心率和呼吸频率的改变:P组与L组比较差异有统计学意义,而与N组差异无统计学意义。L组大鼠血浆中TNF-α、NO的含量较N组、P组明显升高(P<0.05),但N组与P组间差异无统计学意义。HE染色发现LPS预处理可减轻大鼠内毒素血症时心、肺、肝、肾、小肠的病理变化。结论 LPS预处理可能通过减少TNF-α和NO的释放,对鼠LPS血症起到保护作用。     

血必净对内毒素血症大鼠心肌细胞Toll样受体4表达的影响

目的 研究血必净注射液对内毒素血症大鼠心肌细胞Toll样受体4(TLR4)表达的影响,为临床脓毒症休克的治疗提供理论依据.方法 成年Wistar雄性大鼠80只,随机分为模型组、治疗A组、治疗B组和正常组,每组20只.前3组大鼠腹腔注射内毒素(本研究采用大肠杆菌脂多糖)15 mg/kg,正常组腹腔注射等容量0.9%氯化钠溶液.腹腔注射完毕后即刻,模型组皮下注射0.9 %氯化钠溶液10 mL/kg,治疗A组皮下注射血必净5 mL/kg及0.9%氯化钠溶液5 mL/kg,治疗B组皮下注射血必净10 mL/kg.各组大鼠均在皮下注射后即刻、30 min、2 h、6 h分别随机抽取5只留取相应标本并处死.采用免疫组织化学法检测心肌TLR4表达的变化.结果 皮下注射后2及6 h,模型组的心肌TLR4表达较正常组显著升高(P值均<0.05),治疗A组和治疗B组的心肌TLR4表达也较正常组显著升高,但较模型组显著下降(P值均<0.05);治疗B组皮下注射后6 h的心肌TLR4表达显著低于治疗A组(P<0.05).结论 血必净注射液能有效抑制内毒素所致的心肌细胞炎症信号TLR4表达的激活,减轻心肌的炎性反应.     

内毒素预处理对内毒素血症大鼠肺损伤的影响

目的探讨内毒素预处理对内毒素血症大鼠肺损伤的保护作用。方法将雄性Wistar大鼠72只随机分成对照组、内毒素组和预处理组,每组24只。每组又按时间分为2 h组、4 h组、6 h组、12 h组4个亚组,每组6只。预处理组首次经腹腔注射脂多糖（LPS）0.25 mg/kg,24 h后再经腹腔注射LPS 0.5 mg/kg,其余两组给予等量生理盐水。第二次腹腔注射72 h后,内毒素组和预处理组经尾静脉一次注射LPS 10 mg/kg,对照组给予等量生理盐水。内毒素组和预处理组在第二次注射LPS后2、4、6、12 h,对照组在注射最后一次生理盐水后2、4、6、12 h,各取6只处死取肺组织免疫组化法检测肺组织白细胞间粘附分子1（ICAM-1）的表达,酶联免疫吸附法检测血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）,比色法检测肺组织丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）。结果内毒素血症4 h时内毒素组肺组织ICAM-1、MDA和血清TNF-α水平均显著高于对照组[75.07±0.53比11.98±0.56,（3.93±0.42）μmol/g比（1.24±0.27）μmol/g,（478.62±45.58）pg/mL比（26.67±2.38）pg/mL,P〈0.05],肺组织SOD水平显著低于对照组[（6.26±0.31）U/mg比（15.23±0.62）U/mg,P〈0.05]。经内毒素预处理后,预处理组肺组织ICAM-1、MDA和血清TNF-α水平较内毒素组显著降低[42.40±0.44,（2.89±0.49）μmol/g,（376.76±43.67）pg/mL],肺组织SOD水平显著上升至（8.79±0.35）U/mg,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论内毒素预处理可减轻内毒素血症时的肺损伤,其机制可能与减少炎症反应和氧自由基生成有关。     

内毒素休克大鼠肾组织TLR2 mRNA和TLR4 mRNA的表达

目的 探讨内毒素休克大鼠肾组织Toll样受体2（TLR2） mRNA和TLR4 mRNA的表达变化,以及血管活性肠肽（VIP）和甲基泼尼松龙（MP）的作用及可能机制。方法 采用大肠杆菌脂多糖（LPS）（E coli O55:B5）10 mg/kg静脉注射,建立大鼠内毒素休克模型(LPS组,n=16);LPS+VIP组(n=16)建模后注射VIP（5 nmol/kg）,LPS+VIP+MP组（n=16）注射VIP（5 nmol/kg）和MP（3 mg/kg）;另设生理盐水对照组（n=8）。透射电子显微镜观察LPS注射6 h和24 h大鼠肾组织病理学变化;RT-PCR测定肾组织TLR2 mRNA和TLR4 mRNA的表达。结果 建模后6 h,电子显微镜下见LPS组肾小球毛细血管内皮细胞肿胀,线粒体空泡变性;建模后24 h,可见LPS组肾小管细胞线粒体肿胀、空泡变性,细胞核轻度固缩;LPS+VIP组及LPS+VIP+MP组肾组织病变轻于同期LPS组。LPS注射6 h,LPS组、LPS+VIP组及LPS+VIP+MP组肾组织TLR2 mRNA和TLR4 mRNA表达均高于对照组（P<0.01）;LPS注射24 h,LPS组TLR2 mRNA和TLR4 mRNA表达高于其他组（P<0.01）。结论 内毒素休克大鼠肾组织TLR2 mRNA和TLR4 mRNA表达增强;VIP和MP干预可减轻肾脏损伤,可能与其下调TLR2 mRNA和TLR4 mRNA的表达有关。     

谷氨酰胺防治梗阻性黄疸肠道细菌移位

目的　观察谷氨酰胺(GLN)对梗阻性黄疸(OJ)大鼠肠道细菌移位的影响。方法　将实验大鼠90只,随机分成对照组、OJ组及GLN组,每组各30只,OJ模型采用结扎胆总管诱发,GLN组制作OJ后每天灌入GLN,动物处理8 d后观察3组肠黏膜组织学和DNA含量,肠系膜淋巴结吖啶橙标记菌试验。结果　OJ后8 d,肠黏膜出现明显损伤,DNA含量下降,肠系膜淋巴结吖啶橙标记菌移位率明显升高,应用GLN能明显减轻肠黏膜损伤,增加DNA含量,减少肠系膜淋巴结吖啶橙标记菌移位率。结论　GLN有利于维持OJ黏膜屏障功能,减少肠道细菌移位的发生。     

谷氨酰胺防治梗阻性黄疸肠道细菌移位

目的 观察谷氨酰胺（GLN）对梗阻性黄疸（OJ）大鼠肠道细菌移位的影响。方法 将实验大鼠90只,随机分成对照组,OJ组及GLN组,每组各30只,OJ模型采用结扎胆总管诱发,GLN组制作OJ后每天灌入GLN,动物处理8d后观察3组肠黏膜组织学和DNA含量,肠系膜淋巴结吖啶橙标记菌试验。结果 OJ后8d,肠黏膜出现明显损伤,DNA含量上降,肠系膜淋巴结吖啶橙标记菌移位率明显升高,应用GLN能明显减轻肠黏膜损伤,增加DNA含量,减少肠系膜淋巴结吖啶橙标记菌移位率。结论 GLN有利于维持OJ黏膜屏障功能,减少肠道细菌移位的发生。     

青藤碱对细菌内毒素刺激的小鼠及巨噬细胞嘌呤受体A2A、P2X_7表达的影响

【目的】探讨青藤碱(sinomenine,SIN)对细菌内毒素(LPS)刺激的小鼠内毒素血症模型及巨噬细胞RAW264.7细胞炎症模型嘌呤受体A2A、P2X7表达的影响。【方法】选用BALB/c小鼠设空白对照组,模型组,青藤碱组(剂量分别为40、80、160 mg/kg),青藤碱组给予腹腔注射青藤碱30 min后,模型组和青藤碱组给予腹腔注射LPS(剂量为15 mg/kg)建立内毒素血症小鼠模型,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测小鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平;逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝脏、脾脏嘌呤受体A2A、P2X7的表达。RAW264.7细胞设空白组、LPS组、青藤碱组,青藤碱组给予青藤碱(300μmol/L)干预2 h后,LPS组和青藤碱组均给予LPS(剂量为100 ng/m L),继续培养8 h后,采用ELISA法检测上清TNF-α分泌量,RT-PCR法检测细胞P2X7、A2A m RNA表达。【结果】在LPS刺激下,小鼠血清TNF-α和IL-6水平显著上升,肝脏、脾脏组织中嘌呤受体A2A、P2X7的表达显著升高,青藤碱能下调TNF-α和IL-6水平,并抑制A2A、P2X7的表达(均P0.05);体外LPS刺激下,RAW264.7细胞分泌TNF-α增加,A2A、P2X7的表达增加,青藤碱可抑制TNF-α的分泌,并下调P2X7的表达(均P0.05),但对A2A的表达有促进作用。【结论】青藤碱对LPS刺激的小鼠肝脏、脾脏及体外巨噬细胞中嘌呤受体P2X7的表达增加均表现抑制作用,而对不同组织细胞中A2A表达的影响不同,相关机制有待深入。     

内毒素休克大鼠肾组织TLR2 mRNA和TLR4 mRNA的表达

目的 探讨内毒素休克大鼠肾组织Toll样受体2(TLR2) mRNA和TLR4 mRNA的表达变化,以及血管活性肠肽(VIP)和甲基泼尼松龙(MP)的作用及可能机制.方法 采用大肠杆菌脂多糖(LPS)(E coli O55:B5)10 mg/kg静脉注射,建立大鼠内毒素休克模型(LPS组,n=16);LPS+VIP组(n=16)建模后注射VIP(5 nmol/kg),LPS+VIP+MP组(n=16)注射VIP(5 nmol/kg)和MP(3 mg/kg);另设生理盐水对照组(n=8).透射电子显微镜观察LPS注射6 h和24 h大鼠肾组织病理学变化;RT-PCR测定肾组织TLR2 mRNA和TLR4 mRNA的表达.结果 建模后6 h,电子显微镜下见LPS组肾小球毛细血管内皮细胞肿胀,线粒体空泡变性;建模后24 h,可见LPS组肾小管细胞线粒体肿胀、空泡变性,细胞核轻度固缩;LPS+VIP组及LPS+VIP+MP组肾组织病变轻于同期LPS组.LPS注射6 h,LPS组、LPS+VIP组及LPS+VIP+MP组肾组织TLR2 mRNA和TLR4 mRNA表达均高于对照组(P<0.01);LPS注射24 h,LPS组TLR2 mRNA和TLR4 mRNA表达高于其他组(P<0.01).结论 内毒素休克大鼠肾组织TLR2 mRNA和TLR4 mRNA表达增强;VIP和MP干预可减轻肾脏损伤,可能与其下调TLR2 mRNA和TLR4 mRNA的表达有关.     

糖皮质激素对内毒素致急性肺损伤大鼠肺组织Fractalkine表达的影响

目的动态观察内毒素（LPS）所致急性肺损伤（acute lung injury,ALI）大鼠肺组织内趋化因子Fractalkine（FKN）的表达变化,及糖皮质激素对其的影响。方法将42只大鼠随机分为空白对照组、模型组（LPS）及地塞米松干预组（DEX）,其中LPS组和DEX组再分为1h、2h、4h3个时相组,每组6只,LPS组和DEX组大鼠经尾静脉注射LPS（4mg／kg）建立ALI大鼠模型。采用ELISA、RT—PCR等方法,观察ALI大鼠模型肺组织病理学改变、肺湿干重比值（W／D）及血清TNF-a变化,并检测肺组织FKNmRNA的表达,同时观察地塞米松对上述指标的影响．结果模型组1h、2h与4h3个时相组肺损伤病理改变、肺W／D、血浆TNF—α均明显增高,地塞米松能减轻ALl大鼠肺组织炎症反应、肺W／D值及血清TNF—α水平（P均〈0．05）。正常大鼠肺组织FKNmRNA有表达,模型组3个时相亚组肺组织FKNmRNA表达较正常组明显增加（P〈0．05）,在2h时点达峰值,地塞米松能下调ALI大鼠肺组织FKNmRNA表达（P〈0．05）。FKNmRNA的表达量与血清TNF—α水平呈正相关（r=0．674,P〈0．05）．结论早期应用地塞米松可降低TNF-α水平,下调肺组织FKN mRNA的表达,这可能是糖皮质激素对内毒素致急性肺损伤实验大鼠保护作用机制之一。