甲基强的松龙对大鼠脊髓损伤组织中肾上腺髓质素表达的影响

目的:观察甲基强的松龙(MP)对大鼠脊髓损伤(SCI)组织中肾上腺髓质素(AM)表达的干预作用.方法:SD大鼠108只随机分为假手术组、MP干预组(MP组)和脊髓损伤组(SCI组),每组36只.假手术组只切除椎板不损伤脊髓,MP组和SCI组采用Allen WD法制作大鼠急性脊髓损伤模型,并于术后1 h经尾静脉分别给予50mg/kg MP和等量生理盐水.于术后2 h、8 h、1 d、2 d、3 d、6 d取骨髓组织(每个时点6只大鼠),HE染色观察脊髓损伤情况,免疫组化染色观察AM的表达,并于术后1 d、3 d、6 d行运动功能评定.结果:HE染色,假手术组各时间点无明显异常,MP组病理变化轻于SCI组.免疫组化染色,假手术组中AM低表达,SCI组AM表达增高并于术后8 h达峰值,以后逐渐降低(P＜0.01),MP组AM的表达在术后8 h、1 d、2 d、3 d均高于SCI组,差异有统计学意义(P＜0.05).运动功能评分:假手术组1 d、3 d、6 d均高于MP、SCI组,MP组在术后3 d、6 d高于SCI组,P均＜0.01.结论:急性脊髓损伤后AM表达代偿性增高并存在动态变化,MP干预可上调AM的表达从而减轻脊髓的继发性损伤.     

明矾对大鼠脑组织中单胺氧化酶、乙酰胆碱酯酶和乙酰胆碱的影响

目的 探讨明矾对大鼠脑组织中单胺氧化酶（MAO）活力、乙酰胆碱酯酶（AChE）活力及乙酰胆碱（ACh）含量的影响。方法 32只Wistar大鼠,随机分为对照组、低、中、高剂量组4组,低、中、高组大鼠饲料中分别加入明矾1457、2914、4371mg/kg,染毒30d,测定大鼠脑组织中MAO活力、AChE活力及ACh含量。结果 随着饲喂明矾量的增加,各剂量组大鼠脑系数逐渐升高,中、高剂量组脑系数高于对照组（P＜0.01）;高剂量组MAO活力高于对照组（P＜0.05）,低、中剂量组与对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）;各剂量组大鼠脑组织中AChE活力呈上升趋势,中、高剂量组高于对照组（P＜0.01）;中、高剂量组ACh含量低于对照组（P＜0.01）。结论 明矾的摄入在一定程度上影响大鼠脑组织中MAO、AChE活力及ACh含量,损伤大鼠脑神经系统。     

调心,补肾中药对大鼠脑基底核损伤所致乙酰胆碱酯酶变化的影响

用单极１．０ｍＡ的直流电刺激大鼠前脑基底核的方法制作类痴呆动物模型，手术后第４天喂以生地，熟地，菖蒲，远志等为主的补肾，调心方剂及喜得镇等药１７天。在第２１天取材，恒冷箱切片，进行乙酰胆碱酯酶（ＡｃｈＥ）组织化学反应。观察基底核苍白球大神经原的反应变化。实验结果为模型组的大细胞神经原核团面积显著变小，ＡｃｈＥ阳性反应的细胞及突起等数量显著减少，ＡｃｈＥ反应显著降低。调心及补肾组的核团面积都比模型…     

氯胺酮对新生大鼠海马乙酰胆碱酯酶和乙酰胆碱转移酶的影响

目的探讨氯胺酮对新生大鼠学习记忆和海马乙酰胆碱酯酶(AchE)、乙酰胆碱转移酶(ChAT)的影响。方法 80只7 d龄大鼠随机分为C、K1、K2、K3组,每组20只。C组给予生理盐水2 ml;K1组单次腹腔注射氯胺酮80 mg/kg,K2、K3组分别按同等剂量注射2、3 d。末次给药后1 d各组处死10只、余大鼠至21 d龄行Morris水迷宫实验。迷宫实验后检测海马AchE和ChAT水平。结果水迷宫结果:C组与K1组比较、K2组与K3组比较差异均无统计学意义;K2、K3组较C、K1组潜伏期延长且穿越平台次数减少(P<0.05)。酶测定:8 d龄,各组间差异有统计学意义(P<0.05)。27 d龄,C组与K1组比较、K2组与K3组比较差异均无统计学意义,K2、K3组较C、K1组差异有统计学意义(P<0.05)。结论氯胺酮引起新生大鼠空间辨别记忆能力下降,可能与海马胆碱能系统有关;单次给药能引起短期内海马胆碱能系统变化,而重复给药则会导致较长时间的影响。     

亚胺环已酮与甲基强的松龙治疗大鼠脊髓损伤的初步 …

目的 为脊髓损伤的临床药物治疗提供新的理论依据。方法 将４８只大鼠用Ａｌｌｅｎ法制成脊髓损伤模型，分别予以亚胺环已酮、甲基强的松龙、二药联合应用及不予治疗。观察运行不同时期神经功能评分，斜板试验及体表诱发电位。结果 从伤后３周后，治疗组各种指标与对照组有显著差异，而各治疗组间无差异。结论 早期应用亚胺环已酮与甲基强的松龙治疗脊髓损伤均有效，但二者合用不能提高疗效。     

甲基强的松龙对实验性脊髓损伤大鼠水通道蛋白-4的影响

[目的]观察甲基强的松龙对大鼠脊髓损伤后AQP-4表达的影响。[方法]取SD大鼠150只，分为正常组（50只）、模型组（50只）、甲基强的松龙组（50只），于1、3、7、14、21天分别对大鼠后肢功能进行BBB评分，应用免疫组织化学技术检测脊髓组织AQP-4的表达，用图象分析仪进行定量分析。[结果]脊髓损伤后第1天，在模型组和甲基组受损脊髓灰质、白质中AQP-4的表达明显增加；第3天时均达到高峰，但甲基组与模型组AQP-4表达有显著性差异（P〈0．05）。在第7、14、21天，甲基强的松龙组与模型组相比，AQP-4表达有非常显著性差异（P〈0．01）。[结论]甲基强的松龙使脊髓损伤后AQP-4表达减少，抑制脊髓水肿来消除脊髓继发性损伤，保存残存正常脊髓组织并促进神经组织重建。     

甲基强的松龙对大鼠急性脊髓损伤后c-fos基因表达的影响

探讨甲基强的松龙对脊髓损伤后ｃ－ｆｏｓ基因表达的影响。方法采用Ａｌｌｅｎ’ｓ法制成大鼠脊髓损伤模型,动物随机分三组：假手术组、手术组、术后给药组。分３个时间点（术后１小时、２小时,４小时）进行ｃ－ｆｏｓ免疫细胞化学法染色。结论脊髓损伤后脊髓ｃ－ｆｏｓ基因表达显著增多,甲基强的松龙能抑制损伤后ｃ－ｆｏｓａ基因表达。     

肠缺血后大鼠回肠乙酰胆碱酯酶阳性神经元的变化

目的 观察缺血回肠肌间神经丛乙酰胆碱酯酶（AchE)活性的变化。方法 建立大白鼠肠系膜上动脉阻断模型,用AchE对大白鼠回肠肌间神经丛进行酶组织化学观察。结果 肠缺血后,大鼠回肠肌间神经丛内AchE阳性神经元明显减少,AchE活性减弱。结论 肠肌间神经丛AchE阳性神经抑对肠缺血耐受性较差。     

甲基强的松龙对大鼠脊髓损伤后微管相关蛋白-2表达的影响

目的研究甲基强的松龙对大鼠脊髓损伤后微管相关蛋白-2（MAP-2）表达的影响。方法健康成年wistar大鼠66只,随机取6只作为正常对照组,60只制作成脊髓打击伤动物模型。模型大鼠随机分为甲基强的松龙组和治疗对照组,每组30只,分别于伤后1、3、7、14和28d取材,应用免疫组织化学方法观察MAP-2的表达,用改良的Tarlov评分观察大鼠脊髓损伤后运动功能的恢复情况。结果大鼠脊髓损伤后7和14d,甲基强的松龙组MAP-2的表达强于治疗对照组;大鼠脊髓损伤后7、14和28d,甲基强的松龙组Tarlov评分大于治疗对照组。结论甲基强的松龙能促进大鼠损伤脊髓表达MAP-2,并能促进大鼠脊髓损伤后运动功能的恢复。     

破坏RBC膜对乙酰胆碱酯酶测定的影响

乙酰胆碱酯酶(AchE),是化学传导介质乙酰胆碱的水解酶。昔日主要用于诊断有机磷中毒,现今成为诊断多种疾病的重要指标。目前测定AchE活性的方法较多,     

外源性雄激素对幼年大鼠骨骼肌肌纤维及其运动终板形态的影响

目的：观察雄激素对骨骼肌肌纤维及其运动终板形态的影响。材料与方法：给５ ｄ 龄的Ｗｉｓｔａｒ 雄性大鼠持续５ 周肌内注射丙酸睾丸酮（每天４０ｍｇ／ｋｇ）,用肌球蛋白ＡＴＰ酶染色法（ｐＨ１０－４ 孵育液预处理） 和乙酰胆碱酯酶染色法分别对大鼠趾长伸肌的肌纤维和运动终板染色。结果：雄激素对幼年雄性大鼠趾长伸肌的肌纤维类型形态以及运动终板的结构均没有显著影响（Ｐ＞０－０５）。结论：从形态上可能说明雄激素对肢体骨骼肌的收缩速度没有显著影响。     

大剂量甲基强的松龙对大鼠急性脊髓损伤后胶质纤维酸性蛋白的影响

目的：探讨大剂量甲基强的松龙（ＭＰＳ）治疗大鼠急性脊髓损伤（ＡＳＣＩ）后,胶质纤维酸性蛋白（ＧＦＡＰ）的变化。方法：４４只成年雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠,随机分成对照、损伤和治疗３组。采用Ａｌｅｎ打击法损伤脊髓。损伤组与治疗组于损伤后１５ｍｉｎ内尾静脉内推注ＭＰＳ３０ｍｇ／ｋｇ,以后２３ｈ内静滴ＭＰＳ５．４ｍｇ／ｋｇ·ｈ－１。各组动物分别于损伤后１、４、８ｄ处死,行ＧＦＡＰ单克隆抗体免疫细胞化学染色。结果：对照组大鼠应用ＭＰＳ后４ｄ,ＧＦＡＰ减少到８０％,８ｄ后减少到６３％。ＡＳＣＩ后,各组ＧＦＡＰ增加,治疗组与损伤组ＧＦＡＰ之比损伤后第１ｄ为８７．２％,第４ｄ为８８．６％,第８ｄ为９５．７％。结论：大剂量ＭＰＳ抑制未损伤大鼠ＧＦＡＰ的合成。对ＡＳＣＩ后,ＧＦＡＰ含量的增加也有一定的抑制作用。     

三七总皂甙对脊髓损伤大鼠一氧化氮含量的影响

目的　探讨脊髓继发性损伤的病理生理机制及三七总皂甙 (panaxnotoginsengsaponins ,PNS)防治该病的作用机理。方法　以Wistar大鼠 6 5只为研究对象 ,分为空白组、假手术组、溶媒对照组、三七总皂甙 (PNS)组 ,各实验组按 2、6、12、2 4小时相点观察 ,Allen s脊髓损伤模型 10 0g·cm致伤脊髓。各组在相应时相点取脊髓组织 ,采取组织化学方法观察脊髓一氧化氮合酶 (NOS)阳性神经元的表达变化。结果　脊髓NOS阳性神经元表达 :溶媒对照组 >PNS组 >假手术组 >空白组。结论　NO参与了脊髓继发性损伤的病理生理机制 ,PNS通过抑制NOS活性而起保护作用。     

补阳还五汤对大鼠脊髓损伤修复与运动功能康复的作用研究

目的探讨中医补阳还五汤对大鼠脊髓损伤后脊髓组织星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein，GFAP）和巢蛋白（Nestin）表达的影响及其促进脊髓损伤修复的作用机制。方法大鼠随机分为假手术组（Sham 组）、模型组（Model组）、补阳还五汤低剂量组（L-BYHWD组）、补阳还五汤中剂量组（M-BYHWD组）和补阳还五汤高剂量组（H-BYHWD组）。Model组、补阳还五汤低、中、高4组大鼠行脊髓左侧半横断损伤；模型组不行药物干预，补阳还五汤低、中、高3组分别使用不同剂量补阳还五汤连续灌胃。用免疫组织化学法检测不同组大鼠经补阳还五汤治疗后不同时间段损伤区脊髓组织内GFAP和Nestin表达情况，BBB评分评估大鼠后肢运动功能。结果补阳还五汤干预后大鼠BBB评分明显高于同时期Model组大鼠（P<0.05）。脊髓损伤后大鼠脊髓组织GFAP表达出现明显上调，补阳还五汤干预后GFAP表达出现下调。M-BYHWD组和H-BYHWD组大鼠脊髓组织GFAP表达明显低于同时期Model组（P<0.05）；H-BYHWD组大鼠GFAP表达在术后3～7d明显低于同时期M-BYHWD组（P<0.05），而术后14～28d二者无显著差异（P>0.05）。补阳还五汤干预的脊髓组织Nestin表达水平均高于同时期Model组（P<0.05）；中、高剂量组Nestin表达水平明显高于同时期低剂量组和Model组（P<0.05），而中、高剂量组之间Nestin表达水平无显著差异（P>0.05）。结论补阳还五汤能促进大鼠脊髓损伤的修复和运动功能的康复，其作用机制可能与抑制GFAP表达减少瘢痕形成、上调Nestin表达促进神经修复有关。     

大剂量甲基强的松龙冲击治疗急性脊髓损伤的疗效观察

目的:评估大剂量甲基强的松龙(MP)冲击对于治疗急性脊髓损伤(ASCI)患者神经功能恢复的影响,同时观察并发症。方法:本组ASCI患者共98例,年龄18～60岁,平均38.6岁。其中男性57例,女性41例。致伤原因为车祸或高空坠落,入院时受伤均不超过8小时。随机分为MP治疗组和对照组,其中MP治疗组62例,参照NASCISⅡ推荐方案,在持续心电监护下15分钟内经静脉快速滴注MP30mg/kg(冲击治疗),45分钟后继续给予MP5.4mg/kg/h,持续23小时。对照组36例未使用MP治疗,仅予地塞米松静滴。2组均予20%甘露醇脱水及洛赛克预防应急性溃疡治疗,随访6个月。采用美国ASIA分级标准评估2组患者治疗前后感觉及运动功能恢复情况。此外对2组并发症的发生率行统计学分析。结果:入院时确诊为不全性ASCI患者,伤后6周及随访6个月时,治疗组的感觉及运动功能改善情况显著优于对照组(P<0.01);入院时确诊为完全性ASCI患者,伤后6周及随访6个月时,治疗组的感觉及运动功能改善情况与对照组相比无统计学差异(P>0.05)。2组消化道溃疡、感染等并发症的发生率无统计学差异(P>0.05)。结论:对于ASCI合并不全瘫患者,采用大剂量MP冲击治疗可以有效预防脊髓的继发性损伤、改善脊髓神经功能,同时消化道溃疡等并发症的发生率未增加。     

骨髓间充质干细胞移植联合孕酮应用对脊髓损伤的修复作用

目的 探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植联合孕酮应用对大鼠脊髓损伤修复的协同作用及其可能的分子机制.方法 将60只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、孕酮组、BMSCs组、BMSCs+孕酮组,除假手术组外其余各组均为采用改良的Allen法建立的脊髓损伤(SCI)模型鼠.按上述分组分别在脊髓损伤后立即将BMSCs移植到损伤部位,和(或)在脊髓损伤后第1～5天腹腔注射孕酮(8 mg/kg).脊髓损伤术后第0、3、7、14、21、28天用BBB评分法评价后肢运动功能的恢复情况;RT-PCR和Western blot检测脊髓损伤后第0天和第28天局部组织脑源性神经营养因子(BDNF)、髓磷脂碱性蛋白(MBP)和生长相关蛋白GAP-43的mRNA和蛋白表达水平.结果 孕酮或BMSCs移植单独应用均可以有效促进大鼠后肢功能的恢复,二者联合运用效果更好.Real-time PCR和Western blot结果显示脊髓损伤后第0天各脊髓损伤组局部组织BDNF、MBP和GAP-43的表达水平均较假手术组明显降低;第28天孕酮组、BMSCs组和BMSCs+孕酮组上述指标较模型组明显升高,孕酮+BMSCs组的表达水平最高.结论 单纯孕酮或BMSCs移植均能促进SCI大鼠后肢运动功能的恢复,其机制之一可能是上调损伤局部BDNF、MBP和GAP-43的表达水平,促进髓鞘和神经元再生,两者联合应用具有协同作用.     

大剂量甲基强的松龙治疗脊髓损伤鼠的实验研究

目的 探讨大剂量泼尼松（MP）治疗脊髓损伤的可行性。方法 SD成年雌性大鼠78只，随机分成13组：即假损伤组；脊髓挫伤组（SCI组）及大剂量甲基强的松龙治疗组（MP组），再分为：1d组、3d组、7d组、14d组、21d组、28d组；用改良的Allen装置造成T12脊髓节段挫裂伤。在手术前及术后进行BBB（Basso，Beattie and Bresnahan）评分。术后立即采用大剂量冲击疗法，腹腔注射MP30mg／kg，伤后1h开始，按5．4mg／（k·h）计算23h总量，分4次腹腔注射，在不同时间点处死大鼠。取损伤节段上、下长约0．5cm脊髓连续冰冻切片，间隔取片后分别以抗神经丝蛋白、突触素抗体行免疫组化ABC染色。在光学显微镜下观察各组NF、SYP在SD大鼠脊髓的表达分布情况。结果 MP明显改善损伤脊髓的病理形态。7，14，21，28d时MP组NF染色轴突数目均明显高于SCI组。而灰度值均明显低于SCI组。MP治疗组较SCI组相同时间点神经学功能均有明显提高。结论 大剂量MP在脊髓损伤中后期明显促进其损伤后的再生，具有中远期疗效。     

甲泼尼龙对低温体外循环后肺血管内皮功能的影响

目的研究甲泼尼龙5mg/kg是否能有效抑制体外循环(CPB)诱发的炎症反应,并对肺血管内皮功能产生保护效应。方法健康家犬15只,随机分为3组,A组:不进行CPB,作为非体外对照组;B组:麻醉后注射生理盐水10mL,常规全麻和CPB,主动脉阻断90min;C组:麻醉后静脉给予甲泼尼龙5mg/kg,其余处理同B组。B、C组分别在手术前及主动脉开放前、开放后30min和90min4个时间点采动脉血,放免法测定血浆白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)和白介素-10(IL-10)水平;手术结束时,A、B、C3组均取右肺动脉段,固定于张力传感器,测定血管环内皮依赖性和非内皮依赖性扩张能力的变化。结果CPB前各细胞因子水平无统计学差异,CPB使IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8和IL-10产生增多,血浆水平明显升高(P<0.01);C组IL-1β、TNF-α、IL-6和IL-8升高幅度较小,与B组相比有明显差异,而IL-10水平明显高于B组。3组肺血管环对去甲肾上腺素的反应相似,ACh产生的最大舒张反应在CPB后的肺动脉环明显降低,只有A组的50%(P<0.001);体外前注射甲泼尼龙5mg/kg使ACh产生的最大舒张反应从31%升高到48%(P<0.01);各组动脉环对硝酸甘油产生的舒张反应相似,其Rmax和EC50在3组间无统计学差异。结论术前注射甲泼尼龙5mg/kg能有效抑制CPB诱发的炎症反应、保护血管内皮功能,改善肺动脉的内皮依赖性舒张功能。     

甲泼尼龙对大鼠急性脊髓损伤后内质网应激相关蛋白CHOP表达的影响

目的探讨大剂量甲泼尼龙(methylprednisolone,MP)对急性脊髓损伤(acute spinal cord injury,ASCI)大鼠脊髓组织中内质网应激相关蛋白C/EBP家族的同源蛋白(C/EBP homology protein,CHOP)的影响。方法 48只SD大鼠采用Allen法制作ASCI模型,按随机数字表法分为MP治疗组(MP组,n=24)与生理盐水组(NS组,n=24),MP组在损伤后早期从尾静脉注射大剂量MP,对照组同样方法注射等量NS,分别于伤后3h,1、3和7d(3h组、1d组、3d组和7d组,每组6只)用改良Tarlov评分法评价其神经功能,再在各时间点处死动物,取受损节段脊髓HE染色及免疫组织化学观察其形态变化以及CHOP分布特点,同时用TUNEL方法检测细胞凋亡。其量的评定借助于IPP(Image-Pro Plus 6.0)软件,结果分别用累积光密度(integrated optical density,IOD)及平均光密度(mean density)表示。结果 MP组与NS组Tarlov评分分别为(3.583 3±0.583 6)分和(3.041 7±0.690 3)分,MP组较NS组各个时间点后肢运动功能明显改善(P<0.01)。CHOP在各组大鼠脊髓组织中均呈阳性表达,MP组CHOP表达明显低于NS组(P<0.05);MP组内,CHOP表达1d组和3h组、3d组的差异有统计学意义(P<0.05),且3h组<1d组>3d组。MP组内各时间点的细胞凋亡差异有统计学意义(P<0.05),并且3h组<1d组<3d组>7d组;NS组和MP组之间3h、1d、3d之间的细胞凋亡差异有统计学意义(P<0.05)。结论大鼠ASCI后CHOP显著升高,早期应用大剂量MP对CHOP的表达具有明显的抑制作用。