改良双缩脲法测定血清总蛋白

目的研究建立改良双缩脲试剂二点速率法测定血清总蛋白的方法,以消除标本溶血、黄疸、脂浊、含葡聚糖的干扰。方法进行方法参数选择试验、方法学评价试验和方法间比较试验。结果改良试剂反应液吸收峰530～560nm,最大峰值540nm。在反应进行的初期,吸光度变化率与蛋白质浓度成正比,可用速率法测定,线性范围142g/L。高、低值血清的批内、批间、日间和总CV均<5%。回收率为98.6%～100%,平均99.3%。检测限0.4g/L。血红蛋白9.5g/L以下、胆红素370μmol/L以下、三酰甘油200.0mmol/L以下、葡聚糖30g/L以下无显著性干扰。改良法与Doumas法测定外观正常标本结果高度相关,回归方程:y=2.7147+0.9658x,r=0.9633,P=0.000。配对t检验:t=0.907,P=0.370。测定高脂、黄疸、含葡聚糖标本两种方法间有非常显著性差异。结论采用改良法单试剂二点速率法测定血清总蛋白,能有效消除溶血、黄疸、高脂和葡聚糖的干扰。     

改良双缩脲双试剂二点终点法测定血清总蛋白的研究与应用

目的研究建立改良双缩脲双试剂二点终点法测定血清总蛋白的方法，以消除标本溶血、黄疸、脂浊、含葡聚糖的干扰。方法采用改良试剂，测定方法的精密度、回收率、检测限、线性范围、干扰试验，以确定所建立方法的基本性能；与Doumas法比较以确定方法的可靠性与消除干扰的效果。结果样品与试剂比例为5：220μl，线性范围达140g／L。回归方程：Y=484．0＋48．06X，r=0．9993。批内CV（20次）0．24％，日间CV（20d）1．07％。回收率95．6％～103％，平均99．5％。检测限2．36g／L。血红蛋白（Hb）2．1g／L以下，胆红素（Bil）148μmol／L以下，三酰甘油（TG）aS．2mmol／L以下，葡聚糖30g／L以下干扰不显著。改良法与Doumas法测定外观正常标本结果高度相关，回归方程：Y=-2．4354＋1．0374X，r=0．9882。结果间差异无统计学意义，t=0．156，P=0．877。测定溶血、高脂、黄疸、含葡聚糖标本二种方法间差异有统计学意义。结论采用改良双缩脲双试剂二点终点法测定血清总蛋白，能有效消除溶血、黄疸、高脂和葡聚糖的干扰，提高结果准确性。     

防止右旋糖酐对血清总蛋白定量的干扰

目前国内多采用Doumas双缩脲试刊测定血清总蛋白。此法受右旋糖酐的干扰,使反应液混浊,影响了准确性。我们参考Hadjivassiliou(ClinCh em34(11):2388,1988)对该试剂进行改良,调整Na     

用甘油消除右旋糖酐对总蛋白测定的干扰

国际上通用双缩脲法测定血清总蛋白,但患者输过右旋糖酐后的血清与双缩脲试剂产生混浊,可能是右旋糖酐与Cu~(2+)结合形成沉淀,干扰双缩脲反应,我们在双缩脲试剂中添加15ml/L甘油,有效地消除了这一干扰,恢复了血清总蛋白测定的准确性。     

血清总蛋白测定右旋糖酐引起干扰的消除方法(来稿综合)

双缩脲反应测定血清总蛋白是一种操作简便、结果准确的常规方法,各级医院均在应用。当病人输入右旋糖酐后,采用常规双缩脲方法测定该标本时,会产生混浊,影响结果的准确性。为了消除右旋糖酐对总蛋白测定的干扰,将双缩脲试剂中的酒石酸钾钠含     

直接胆红素检测方法可靠性的评估

目的了解直接胆红素(DBil)不同测定方法间的差异,各方法和改良Doumas重氮法的偏倚.探索解决差异的可能性.方法 (1) 建立DBil的改良Doumas重氮法.(2) 选择现有1份重氮法试剂盒;1份氧化法的试剂盒;1份氧化酶法的试剂盒.各试剂盒都各自使用配套的标准.按照各试剂盒和方法的程序,进行DBil测定.(3) 选择41例血清标本,进行各方法间的比较.(4) 选择改良Doumas重氮法检测结果在5～30 μmol/L左右的血清,进行日间重复性测定.由此确定各方法的功能灵敏度.结果 4种方法可定量报告DBil的最小限值分别为改良Doumas方法为5 μmol/L,重氮法为10 μmol/L,氧化法和氧化酶法<5 μmol/L.将≤100 μmol/L DBil结果对比分析,各方法和改良Doumas方法比较氧化酶法(斜率0.968,截矩0.17 μmol/L,r=0.986),氧化法(斜率0.814,截矩0.733 mmol/L,r=0.947),重氮法(斜率0.803,截矩3.08 μmol/L,r=0.892).结论在≤100 μmol/L内的实验结果,氧化酶法较为满意,灵敏度也可接受,最低定量报告<5 μmol/L,在本实验条件下,比较符合临床要求.     

双试剂双缩脲法测定血清总蛋白的探讨

目的将双缩脲单试剂改为双试剂法,观察高脂、高胆红素、溶血标本对血清总蛋白测定的干扰.方法用二种不同试剂对高脂,高胆红素,溶血及外观正常标本用原法及本法同在全自动生化分析仪上测定血清总蛋白.结果脂血标本对原法干扰十分明显.本法可完全消除脂血的干扰;总胆红素每增加50μ mol/L,原法总蛋白增加0.4g/L,本法不受影响;溶血标本中血红蛋白对原法结果明显影响,1g/L血红蛋白对原法总蛋白增加2.85g/L,对本法总蛋白增加0.93g/L;外观正常标本二种方法无显著差异.结论双试剂法在保持原法的反应原理的基础上,消除了脂血、黄疸的干扰,明显减少溶血的影响,有利于自动生化仪的分析.     

直接胆红素检测方法可靠性的评估

目的　了解直接胆红素 (DBil)不同测定方法间的差异 ,各方法和改良Doumas重氮法的偏倚。探索解决差异的可能性。方法　 (1)建立DBil的改良Doumas重氮法。 (2 )选择现有 1份重氮法试剂盒 ;1份氧化法的试剂盒 ;1份氧化酶法的试剂盒。各试剂盒都各自使用配套的标准。按照各试剂盒和方法的程序 ,进行DBil测定。 (3)选择 4 1例血清标本 ,进行各方法间的比较。 (4 )选择改良Doumas重氮法检测结果在 5～ 30 μmol/L左右的血清 ,进行日间重复性测定。由此确定各方法的功能灵敏度。结果　 4种方法可定量报告DBil的最小限值分别为 :改良Doumas方法为 5 μmol/L,重氮法为 10 μmol/L,氧化法和氧化酶法 <5 μmol/L。将≤ 10 0 μmol/LDBil结果对比分析 ,各方法和改良Doumas方法比较 :氧化酶法 (斜率 0 .96 8,截矩 0 .17μmol/L,r =0 .986 ) ,氧化法 (斜率 0 .814 ,截矩 0 .733mmol/L ,r =0 .94 7) ,重氮法 (斜率 0 .80 3,截矩 3.0 8μmol/L,r =0 .892 )。结论　在≤ 10 0 μmol/L内的实验结果 ,氧化酶法较为满意 ,灵敏度也可接受 ,最低定量报告 <5 μmol/L,在本实验条件下 ,比较符合临床要求。     

M蛋白对氧化酶法测定血清胆红素的干扰及排除

目的 探讨血清中M蛋白对氧化酶法测定胆红素产生干扰的可能原因.方法 通过比较反应曲线,观察反应过程,分析试剂成分及反应环境,以及用其他方法测定,探讨干扰产生的原因.结果 氧化酶法测定富含M蛋白血清胆红素出现异常反应曲线,样本与试剂混合产生白色混浊,将患者血清稀释后不能完全消除干扰,应用其他测定方法验证了干扰的存在.结论 某些血清中高浓度的M蛋白能干扰胆红素氧化酶法的测定,应引起日常检验工作者的重视.     

酶法尿素检测试剂的改进及性能评价

目的建立一种改良酶法尿素测定试剂,并评估其性能。方法采用酶法测定尿素反应前后吸光度(A)值的变化率并对试剂进行改良,评估其性能。同时与现有酶法试剂及进口和光试剂进行比较。结果现有试剂空白A值为1.8,空白A值变化率为-0.001 8;改良试剂空白A值为1.8,空白A值变化率为-0.001 9;和光试剂空白A值为1.6,空白A值变化率为-0.000 4。现有试剂检测限为0.035 mmol/L、改良试剂为0.014 mmol/L、和光试剂为0.075 mmol/L。分析敏感性现有试剂为-0.04,改良试剂为-0.13,和光试剂为-0.05。改良试剂对高、低值血清的批内精密度分别为0.45%和0.85%,批间精密度分别为0.38%和0.71%,线性浓度范围为0~38 mmol/L;改良试剂与和光试剂方法学比对的回归方程为Y=0.93X+0.41(r=0.999),估计偏倚低于允许误差;342μmol/L结合胆红素、342μmol/L非结合胆红素、0.03 g/L维生素C、5 g/L血红蛋白、1 450 FTU乳糜对改良试剂高、低值样本检测结果均无干扰。结论改良酶法尿素试剂具有更加优越的检测限和分析敏感性,并且自身性能良好,符合相关临床应用要求。     

Prevention of interference by dextran with biuret-type assay of serum proteins

In assay of serum proteins by use of the biuret reaction, dextran can cause turbidity by formation of an insoluble complex of dextran with copper and tartrate (or EDTA) in strongly alkaline solution. Whether or not the turbidity occurs depends on the tartrate concentration: turbidity is maximal at about 10 g/L, absent at 20 g/L or more, and only slight and delayed at 4 g/L. Two biuret reagents, containing respectively 5.6 and 22.5 g of tartrate per liter, obviate the interference, but the former is suitable only when a short (5 min) incubation is used. Both reagents show linear calibration curves and yield virtually identical results.     

糖化血清蛋白测定的自动分析

目的建立双试剂测定糖化血清蛋白的自动分析方法.方法根据测定条件的优化实验采用双试剂酶法直接测定.结果该法180 s达反应终点,线性达1 306μmol/L(y=0.983 5X+0.124,r=0.999 7);批内CV＜1.45%,日间CV＜3.56%,总CV＜4.19%;平均回收率100.3%;加入TG＜7.6mmol/L,BIL＜456 μmol/L,Hb＜200g/L,UA＜1 240 μmol/L,GLU＜75.2 mmol/L时无显著干扰.结论该法适合全自动分析.     

Metabolic syndrome is associated with changes in D-mannose metabolism

Serum mannose concentration increases in diabetic patients and correlates closely with blood glucose. In patients with glomerulonephritis, serum mannose and mannose/glucose ratio positively correlate with dyslipidemia and the extent of urinary protein excretion. We investigated whether changes in serum mannose mark subjects with features of metabolic syndrome, including obesity, hypertension, glucose intolerance, and dyslipidemia. The study comprised 20 patients with mean age of 68 (SD 11) years, body mass index 27.2 (SD 5.1) kg/m2, blood glucose 6.2 (SD 1.6) mmol/L, serum total cholesterol 6.3 (SD 1.2) mmol/L, triglyceride 2.0 (SD 0.08) mmol/L, uric acid 320 (SD 109) micromol/L, mannose 60.0 (SD 17) micromol/L, and mannose/glucose ratio 9.7 (SD 1.8) micromol/mmol. Serum mannose correlated with blood glucose (r=0.758, p=0.012), triglyceride (r=0.478, p=0.023), and HDL-cholesterol (r = approximately 0.427, p=0.022). Mannose/glucose ratio correlated with BMI (r=0.581, p=0.033), mannose (r=0.491, p=0.035), and uric acid (r=0.608, p=0.027). The rate of VLDL lipoprotein turnover may be instrumental in the regulation of serum mannose concentration. We conclude that an altered mannose metabolism is a novel consideration among the metabolic abnormalities in the metabolic syndrome.     

48例冠心病患者血脂测定临床分析

目的调查冠心病(CHD)患者血脂代谢状况,探讨血脂变化在触发CHD发生发展中的作用及临床意义。方法用日立7020全自动生化分析仪检测48例CHD患者和50例健康对照者血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和脂蛋白(a)[Lp(a)]水平。TC、TG测定采用氧化酶法,HDL-C、LDL-C测定采用直接法,Lp(a)测定采用胶乳增强免疫比浊法。结果 CHD患者TC(5.28±1.07)mmol/L、TG(1.83±0.60)mmol/L、LDL-C(3.41±1.29)mmol/L、Lp(a)(269±170)mg/L,明显比对照组[(4.25±0.93)mmol/L、(1.30±0.43)mmol/L、(2.51±0.87)mmol/L、(138±96)mg/L]高,差异有统计学意义(P0.001);而CHD患者HDL-C[(1.15±0.34)mmol/L]却比对照组[(1.32±0.43)mmol/L]低,差异也有统计学意义(P0.05)。结论 CHD患者存在不同程度的血脂代谢紊乱,TC、TG、LDL-C升高和HDL-C降低将触发CHD的发生和发展。     

New chromogen for assay of glucose in serum.

We describe a colorimetric assay for glucose determination in human serum, with use of the chromogen 2-amino-4-hydroxybenzenesulfonic acid (AHBS), glucose oxidase, and peroxidase. With this assay, glucose concentrations less than or equal to 27.8 mmol/L can be measured in serum, with a sample/reagent volume ratio as low as 0.0025. The chromogen itself is easily soluble in water and does not require other components for the color change, making the reagent composition less complex. A single working reagent is used, and the reaction is completed within 10 min at 37 degrees C. The absorbance of the yellow reaction product is measured at 415 nm, and a blank sample measurement is not needed. The average analytical recovery of glucose in different human sera was 97.6%, with no significant interference of reducing compounds in serum. The results of the recommended procedure correlated well with those of the phenol/4-aminoantipyrine method of Trinder.     

溶血和黄疸血清对甘油三酯检测结果干扰的探讨

目的 探讨溶血和黄疸血清对甘油三酯检测结果的干扰.方法 用全自动生化分析仪常规检测程序和改进检测程序分别对溶血标本（血红蛋白含量1g/L）和黄疸标本（总胆红素含量260umol/L）的血清进行测试.结果 常规检测程序溶血标本测得甘油三酯平均值比标准高出0.27mmol/L,黄疸标本测得甘油三酯平均值比标准高出0.28mmol/L,改进检测程序测得甘油三酯平均值不升高.结论 溶血和黄疸血清使甘油三酯检测结果升高,通过改进的检测程序,可以有效地消除血清对甘油三酯检验结果的影响.     

双剂型双缩脲法测定血清总蛋白

目的为克服乳浊、黄疸、溶血对血清总蛋白测定的影响，将双缩脲法改为双剂型方法。方法第一试剂为不含硫酸铜的双缩脲空白试剂，第二试剂系将原双缩脲试剂中的硫酸铜增加一倍，二者等量混合即成原法试剂。选取乳浊、黄疸、溶血及外观正常标本用新法与原法同时在日立7060自动生化分析仪上测定总蛋白含量。结果血清总胆红素每增加100μmol／L，原法总蛋白增加0．7g／L，新法不受干扰；乳浊血清对原法结果影响十分明显，新法完全可排除乳浊干扰；标本溶血时，血红蛋白中的血红素与珠蛋白均对总蛋白测定结果造成明显影响，每1g／L血红蛋白可使原法总蛋白结果增加2．2g／L，可使新法增加0．8g／L；外观基本正常标本二法结果无显著差别。结论双剂型双缩脲法在不改变原法反应原理，保留原法优点的基础上，能克服黄疸、乳浊的干扰，明显减少溶血的干扰，而且适合于自动分析。     

65岁以上老年人血清25-羟维生素D水平与代谢综合征的相关性分析

目的分析65岁以上患者血清25-羟维生素D水平同代谢综合征（MS）之间的关系。 方法选取2016年6月至2017年6月期间的164例65岁以上体检人员进行研究,根据MS诊断标准分为MS组（64例）和非MS组（100例）,对比两组患者的骨生化指标;根据血清25-羟维生素D水平是否<51 nmol/L分为缺乏组（148例）和非缺乏组（16例）,对两组患者糖尿病病程、高血压病程、高脂血症病程、空腹血糖、收缩压、舒张压、体质量指数（BMI）、甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）以及高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）进行比较;对所有患者25-羟维生素D水平与上述代谢指标的相关性进行Pearson相关分析。 结果MS组患者25-羟维生素D平均水平显著低于非MS组患者[（31 ± 7）mmol/L vs.（35 ± 9）mmol/L,t= 2.741,P= 0.007],而骨特异性碱性磷酸酶、血清钙和血清磷水平间的比较差异均无统计学意义（P均>0.05）。缺乏组患者高血压病程长于非缺乏组[（13.0 ± 3.7）年vs.（8.5 ± 2.2）年,t= 8.654,P<0.001],且空腹血糖[（5.7 ± 0.8）mmol/L vs.（5.2 ± 0.6）mmol/L,t= 6.764,P= 0.011]和甘油三酯水平[（1.6 ± 0.6）mmol/L vs.（1.0 ± 0.4）mmol/L,t= 1.608,P<0.001]均高于非缺乏组,而高脂血症病程[（1.58 ± 0.24）年vs.（1.97 ± 0.37）年,t= 2.452,P<0.001]短于非缺乏组。两组患者糖尿病病程、收缩压、舒张压、BMI、总胆固醇、LDL-C及HDL-C比较,差异均无统计学意义（P均>0.05）。相关性分析显示,25-羟维生素D水平与高血压病程（r=-0.102,P= 0.031）、空腹血糖（r=-0.125,P= 0.028）、甘油三酯（r= -0.139,P= 0.038）呈负相关,与HDL-C呈正相关（r= 0.175,P= 0.024）。 结论25-羟维生素D水平与个体BMI水平无关,与糖代谢、甘油三酯代谢有关。补充外源性维生素D可能改善MS患者的糖脂代谢。     

血清三酰甘油水平与小而密低密度脂蛋白胆固醇的关系

目的探讨健康人群和血脂代谢异常者小而密低密度脂蛋白胆固醇（sdLDL-C）水平分布及血清三酰甘油（TG）水平对sdLDL-C水平的影响。方法将693例血脂代谢异常者分为A组（542例,TG〈1.70 mmol/L）和B组（151例,TG≥1.70 mmol/L）,同时选取健康对照者181名。采用肝素-镁沉淀法检测血清sdLDL-C水平,同时检测空腹血糖、血脂[包括总胆固醇（TC）、TG、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）]及载脂蛋白A1（apo A1）、载脂蛋白B（apo B）。分析各组各指标间的差异及血清TG水平对sdLDL-C的影响。结果 B组TC、aopB水平高于健康对照组和A组（P〈0.05）,HDL-C水平明显低于健康对照组和A组（P〈0.05）。健康对照组sdLDL-C水平呈偏态分布,以第95百分位数（0.62 mmol/L）作为正常参考阈值。血脂异常组sdLDL-C水平为0.46（0.34～0.64）mmol/L,明显高于健康对照组[0.22（0.16～0.38）mmol/L]（P〈0.001）。多元逐步回归分析表明,对sdLDL-C水平有显著影响的因素为TG和LDL-C。17.6%的A组患者血清sdLDL-C水平高于正常参考阈值（P〈0.05）。受试者工作特征（ROC）曲线分析表明,TG识别sdLDL-C水平升高的Cut-off值为1.36 mmol/L。结论血清sdLDL-C水平受TG的影响最大,判断sdLDL-C水平是否升高的TG的界值应适当调低。     

尿素酰基裂解酶酶偶联法测定血清总钙

目的 介绍尿素酰基裂解酶酶偶联测定血清总钙的方法。方法 双试剂两点法；缓冲液为三乙醇胺（TEA，pH8.0,200mmol/L）；试剂I：含NaHCO326.0mmol/L,NADPH 0.4mmol/L,α－酮戊二酸8.0mmol/L，尿素酰基裂解酶115U／L，GLDH43．0kU/L；试剂Ⅱ：含NaCO3 26.0mmol/L,ATP6.2mmol/L。结果 方法线性范围为0．5－5．0mmol/L，批内和批间平均变异系数分别为2．13％和2．69％。平均回收率为102．7％ 。本法（Y）与邻甲酚酞络合酮法（OCPC法，X1）比较：r＝0．981，Y1＝1．02X1－0．021，与偶氮胂Ⅲ法（X2）比较：r＝0．978，Y＝0．99X2＋0．03。血清胆红素高达300μmol/L，血红蛋白4g/L，镁2.5mmol/L，NH4^ 2.0mmol/L,Trig 8.0mmol/L对本法无明显干扰。结论 本法具有简便、准确、快速，适用于自动分析等特点。