白三烯受体拮抗剂对呼吸道合胞病毒肺炎血清Th1/Th2细胞因子水平影响的研究

目的探讨白三烯受体拮抗剂对呼吸道合胞病毒肺炎患儿血清中Th1／Th2细胞因子、半胱氨酰白三烯水平的影响，研究降低呼吸道合胞病毒肺炎发展为哮喘的有效干预途径。方法将37例呼吸道合胞病毒肺炎患儿分为白三烯受体拮抗剂干预组：顺尔宁，4mg qd，疗程12周，糖皮质激素吸入干预组：出院后给予糖皮质激素吸入，200μg qd／bid，疗程12周。两组患儿入院后24h内及疗程结束用酶联免疫法检测CysLTs、IFN-γ、IL-4。另选10例健康同龄儿童血清标本作对照。结果呼吸道合胞病毒肺炎患儿血清中Th1／Th2细胞因子表达存在失衡，血清CysLTs水平明显高于健康对照组（t=7．85，P〈0．05）；顺尔宁干预组和糖皮质激素吸入干预组均能纠正Th1／Th2细胞因子失衡，差异无统计学意义（P〉0．05）。糖皮质激素吸入干预组血清CysLTs水平治疗前后无明显变化，差异无统计学意义（P〉0．05），顺尔宁干预组血清Cys仉水平治疗后明显下降，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论呼吸道合胞病毒肺炎患儿存在Th1／Th2细胞因子失衡、血清CysLTs水平较健康同龄儿童明显升高，与哮喘有相似之处。白三烯受体拮抗剂早期干预能纠正Th1／Th2细胞因子失衡，降低血清CysLTs水平。     

新生儿巨细胞病毒肺炎Th1/Th2细胞因子测定及意义

目的探讨新生儿巨细胞病毒肺炎血清细胞因子IL4、IFN-7、TNF—α水平及意义。方法选取25例确诊为新生儿巨细胞病毒肺炎．并将其分为丙种球蛋白治疗组和更昔洛韦治疗组，应用ELISA法检测治疗前和疗程结束后血清细胞因子IL-4、IFN-γ、TNF-α的浓度，另选取本院产科同期出生的足月正常新生儿15例为正常对照组，用相同的方法检测其血清中细胞因子IL-4、IFN-γ、TNF-α的浓度。结果相对于健康新生儿．CMV—IgM阳性患儿血清IFN-γ及TNF—α水平升高．差异有统计学意义（t值分别为2．65及3．16．P〈0．05）；而IL-4水平降低，差异有统计学意义（t=2．49．P〈0．05）。丙种球蛋白治疗组（IVIG）和更昔洛韦治疗组治疗前IFN-γ、IL-4、TNF—α水平比较，差异无显著性（t值分别为1．85、1．71及1．76．P〈0．05）；IVIG治疗组中．治疗前后比较．IFN-γ及TNF—α水平降低，差异有统计学意义（t值分别为3．98及5．16，P〈0．01）；而IL-4水平升高，差异有统计学意义（t=2．55，P〈0．05）。更昔洛韦治疗组中．治疗前后比较，IFN-γ及TNF—α水平变化不明显．差异无统计学意义（t值分别为1．75及1．16．P〉0．05）；而IL-4水平无明显降低．差异无统计学意义（t=1．89，P〉0．05）。结论巨细胞病毒肺炎新生儿Th1／Th2存在平衡失调，代表Thl细胞功能水平的细胞因子IFN-γ水平明显增高，呈现低水平的Th1相对优势，表明感染后．免疫平衡遭到破坏．细胞因子分泌失衡，造成机体的免疫炎症损伤，IVIG治疗可以纠正这-平衡失调，提示在新生儿巨细胞病毒肺炎除单-抗病原治疗外，应重视免疫调节治疗。     

自身免疫性溶血性贫血患者外周血Th1／Th2、Th3／Tr1细胞的检测及意义

目的探讨自身免疫性溶血性贫血（AIHA）患者外周血Th1／Th2、Th3／Tr1细胞状态,分析它们在AIHA发病机制中的作用。方法收集AIHA患者及健康者外周抗凝静脉血,分离纯化淋巴细胞。运用FITC-CD3单抗,Cy5-CD4单抗,PE—CRTH2单抗,以CD3／CD4设门作三色流式细胞术检测Th1／Th2细胞,ELISA法检测血清中Th3细胞相关的细胞因子TGF-β1的含量和Tr1细胞的相关因子IL-10的含量。结果与正常对照相比．AIHA患者外周血CD3^＋CD4^＋CRTH2-T细胞（Th1）百分率、CD3^＋CD4^＋CRTH2^＋T细胞（Th2）百分率均下降（P〈0．05）,而CD4^＋CRTH2^-T／CD4^＋CRTH2^＋T比例（Th1／Th2）均明显升高（P〈0．01）,Th3／Tr1细胞分泌的相关细胞因子TGF-β1和IL-10的含量均降低（P〈0．05）。结论AIHA患者外周血存在细胞免疫功能失调,T细胞亚群极化状态发生改变,呈Th1型细胞优势,Th3／Tr1细胞因子含量下降,可能与AIHA的免疫学发病机制有关。     

过敏小鼠模型Th1/Th2漂移和纠正

目的：研究炒紫苏子醇提物对过敏小鼠模型Th1／Th2漂移和纠正作用。方法：设正常对照组、过敏模型组、炒紫苏子醇提取物0．32、0．64和1．28g／kg各剂量组小鼠共5组。利用流式细胞仪技术测定Th1型细胞因子IL-2、IFN-γTNF-α和Th2型细胞因子IL4、IL-5水平。结果：过敏模型小鼠IFN-γ／IL4为0．87，而正常小鼠IFN-γ／IL4为3．93，说明过敏小鼠Th1／Th2异常偏向Th2漂移。0．32、0．64和1．28g／kg各剂量组能明显提高IFN-γ水平（P〉0．05、P〈0．05和P〈0．01），降低IL-4水平（P〉0．05、P〉0．05和P〈0．05），其相应的IFN-γ／IL-4分别为1．92、2．85和3．14。结论：炒紫苏子醇提物能够纠正过敏小鼠Th1／Th2异常偏向Th2漂移，恢复正常，其作用呈剂量依赖关系。     

非霍奇金淋巴瘤患者T细胞亚群、NK细胞检测的临床意义

目的：研究非霍奇金淋巴瘤（NHL）患者外周血T淋巴细胞亚群、NK细胞检测结果的变化与该病的关系及与慢性淋巴腺炎患者细胞免疫功能的不同变化。方法：采用流式细胞仪（FCM）检测非霍奇金淋巴瘤（NHL）患者、慢性淋巴腺炎及正常人外周血T淋巴细胞亚群比例、NK细胞的变化。结果：非雹奇金淋巴瘤患者与正常人比较总的T淋巴细胞、辅助性T淋巴细胞及CD4^＋／CD8^＋比值明显下降（P〈0．05），细胞毒性T淋巴细胞明显升高（P〈0．05），NK细胞则无明显变化（P〉0．05）。非霍奇金淋巴瘤患者与慢性淋巴腺炎患者比较，细胞毒性T淋巴细胞、NK细胞明显升高（P〈0.05），而总的T淋巴细胞、辅助性T淋巴细胞无明显改变（P〉0．05），CD4^＋／CD8^＋比值略有下降但无明显统计学意义。结论：非霍奇金淋巴瘤患者细胞免疫功能明显受到抑制，T细胞亚群及NK细胞的检测对NHL的诊断、治疗、预后判断有一定的临床价值。     

不同Th1/Th2细胞免疫应答支气管肺泡灌洗液中细胞学的变化

目的 探讨不同Th细胞优势应答下支气管肺泡灌洗液（BALF）中的细胞学变化，了解Th1/Th2细胞免疫应答的细胞和分子机制。方法 用鸡卵清蛋白（OVA）致敏Wistar大鼠（每组10只），制作致敏大鼠哮喘模型；用“冻干BCG”皮内注射制作BCG免疫大鼠模型。收集BALF并做HE染色，进行细胞分类计数。采用流式细胞术，测定BALF中，CD2^ ,CD28^ 及γδTCR^ T细胞占总淋巴细胞的百分率及平均荧光密度（MIF）。用原位杂交法，检测肺组织中IL－4mRNA的IFN－γmRNA的表达。用ELISA法检测血清IL－4和IFN－γ的浓度。结果 哮喘组BALF中淋巴细胞，嗜酸性粒细胞（EOS），浆细胞和中性粒细胞的总数，均显著多于正常组（P＜0．01）；BCG免疫组BALF中，淋巴细胞和巨噬细胞的总数也显著高于正常组（P＜0．001）。哮喘组BALF中，CD2^ T 细胞的明显增加。但哮喘组CD2^ T细胞的F1显著高于正常组及BCG组（P＜0．05）；BCG组BALF中，CD^2 T细胞的百分率与正常组相比产无显著差异（P＞0．05），其CD2^ T细胞的MFI显著高于正常组(P＜0．05）。哮喘组和BCG组BALF中，CD28^ 细胞占淋巴细胞的百分率显著多于正常组（P＜0．01）；BCG组CD28^ 细胞的MFI高于哮喘组（P＜0．01）。两组的CD28^ 细胞的MF1均显著多于正常组（P＜0．05）。哮喘组和BCG组BALF中，γδTCR^ 细胞占淋巴细胞的百分率显著高于正常组（P＜0．01）。结论 支气管哮喘患者Th2细胞的优势应答，与BALF中的B细胞，EOS，浆细胞和中性粒细胞等APC数的增加及T细胞上CD2的高表达有关；而BCG免疫组中的Th1细胞的优势应答与BALF中巨噬细胞，T细胞增加及T细胞上CD28的高表达有关。γδT细胞可能存在Th1/Th2细胞免疫模式，既参与哮喘免疫也参与BCG免疫过程，可能是调节Th0细胞分化的重要始动细胞。     

青少年吸毒者免疫细胞、细胞因子和生长激素的改变

目的：通过测定青少年吸食海洛因者外周血中T细胞亚群、Th1／1112细胞因子和血清中的生长激素，从分子水平探讨吸食海洛因对青少年免疫功能和生长发育的影响。方法：用微量全血直接免疫荧光染色，用流式细胞术检测外周血中T细胞亚群；流式细胞（Cytometric bead array，CBA）技术测定Th1／Th2细胞因子；化学发光法测定生长激素。结果：青少年吸食海洛因组（n=20）CD3^＋、CD3^＋＋CIM^＋、CD3^＋＋CIM^＋／CD3^＋＋CD8^＋、Th1细胞因子（IL-2，TNF-α和IFN-γ）和Th2细胞因子（IL-4，IL-10）低于健康组（n=23）（P〈0．01或0．05）；且Th1细胞因子下降程度大于Th2细胞因子（P〈0．05）；血清生长激素显著高于健康组（P〈0．01）。结论：海洛因降低青少年机体免疫功能，对细胞免疫的损伤大于体液免疫；海洛因能升高青少年血清生长激素，机制需进一步探讨。     

类风湿关节炎患者Th17细胞与调节性T细胞失衡的研究

目的观察类风湿性关节炎（RA）患者外周血Th17细胞与CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋调节性T细胞（Treg）平衡状态与疾病的关系,分析Th17／Treg细胞免疫失衡在RA发病机制中的作用。方法采用流式细胞仪四色荧光抗体标记法分别对47例RA患者和39名健康志愿者（HVs）进行CD3、CD8、IL-17与CD4、CD25、F0xP3标记,测定Th17与调节性T细胞的比例变化及相关细胞因子IL-6、IL-23和IL-17水平。结果RA组患者外周血中,CD3^＋CD8^＋IL-17^＋T细胞占CD3^＋T淋巴细胞的百分比为（1．12±0．38）％,明显高于对照组（0．68±0．29）％（t=1．83,P〈0．05）;CD4’CD25’FoxP3^＋细胞占CD4^＋T淋巴细胞的百分比为（2．74±0．71）％,明显低于对照组（4．69±1．23）％（t=-2．94,P〈0．05）。相关细胞因子测定结果：IL-6水平在RA组为（13．5±3．7）ng／L,正常人为（4．6±0．9）ng／L（t=6．24,P〈0．01）;IL-23水平在RA组为（71±19）ng／L,正常人为（25±6）ng／L（t=14．37,P〈0．01）;IL-17水平在RA组为（122±33）ng／L,正常人为（37±9）ng／L（t=19．01,P〈0．01）;RA患者血清IL-6、IL-23和IL-17水平均明显升高。结论RA患者外周血Th17与CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋调节性T细胞数量的异常可能是RA发病的重要因素,IL-6和IL-23的升高是引起这些改变的可能原因。     

儿童B细胞性非霍奇金淋巴瘤2001方案临床报告

目的分析2001方案短程化疗对儿童B细胞性非霍奇金淋巴瘤（B—NHL）及间变大细胞型淋巴瘤（ALCL）的疗效。方法根据国外发达国家报道及本研究组前期CCCG-97方案结果,对CCCG-97方案的适应证、分组标准、治疗强度及治疗时间进行修正,制定B—NHL2001方案。根据分期和血清乳酸脱氢酶（LDH）水平将患儿分为低危组（R1组）、中危组（R2组）和高危组（R3组）,分别接受3、5和6个疗程的短程化疗。对2001年1月至2007年6月上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心血液／肿瘤科明确诊断为B—NHL（伯基特型、弥漫大B细胞性和未能进一步行病理形态分型）和ALCL的连续首诊病例进行分析。随访至2007年12月,采用Kaplan—Meier法计算生存率。结果研究期间纳入48例患儿,有3例（Ⅰ期1例,Ⅲ期2例）在1个疗程化疗好转后家长决定终止治疗未进入统计。有效数据45例,男35例,女10例。年龄10个月至15．5岁,平均7．1岁,中位年龄6．3岁;Ⅰ期2例,Ⅱ期17例,Ⅲ期18例,Ⅳ期8例;R1组2例,R2组14例,R3组29例。原发部位：腹腔23例,鼻咽部7例,外周淋巴结7例,皮下组织1例,纵隔1例,腮腺2例,股骨、髋骨各1例,右胸壁1例,广泛胸腹腔病变难以确定原发病灶1例。病理分型：伯基特型14例,弥漫大B细胞性13例,ALCL3例,B细胞性（非淋巴母细胞性,未能进一步行病理形态分型）15例。2个疗程化疗后获得完全缓解（CR）41例;因有残留病灶而在3个疗程化疗后行2次手术,病理活检证实无肿瘤细胞确定为CR2例。CR率为95．6％（43／45例）。2例（Ⅲ、Ⅳ期各1例）未获CR,其中1例3个疗程化疗后仍有残留病灶行2次手术,病理活检证实仍为肿瘤组织。随访至2007年12月,40／43例（88．9％）持续CR中,均已完成治疗。随访6～77个月,平均26．9个月,中位随访时间为19个月。复发3例（Ⅲ期2例,Ⅳ期1例）,其中1例为盆腔原发部位复发、1例骨髓复发、1例转移性脑膜复发,复发时间分别为诊断后5、6和8个月。估计5年无病生存率（EFS）为88．3％。结论B—NHL2001方案估计5年EFS为88．3％,提示该方案有合理性,值得进一步扩大病例验证。     

不明原因习惯性流产患者主动免疫治疗前后Th1/Th2型细胞因子水平的变化

为探讨主动免疫治疗对不明原因习惯性流产 (UHA )患者Th1/Th2型细胞因子水平的影响。采用酶联免疫吸附法检测15例正常非妊娠妇女、 35例UHA患者淋巴细胞主动免疫治疗前后经滋养细胞抗原刺激的外周血单个核细胞 (PBMC )培养上清液中IL 2、IFN γ、IL 4、IL 10的水平。结果发现 :(1)在最佳诱导时间下 ,UHA组治疗前PBMC产生IL 2、IFN γ的水平明显高于正常对照组 (P <0 0 5 ) ,IL 4、IL 10水平明显低于正常对照组 (P <0 0 5 )。UHA组治疗后PBMC产生IL 2、IFN γ的水平较治疗前明显降低 (P <0 0 5 ) ,IL 4、IL 10水平较治疗前明显升高 (P <0 0 5 )。UHA组治疗后PBMC产生各细胞因子的水平与正常对照组比较 ,差异均无显著性 (P >0 0 5 ) ;(2 )UHA组 35例患者主动免疫治疗后半年内 2 8例妊娠 ,其中 9例又出现自然流产。 9例自然流产者治疗后IL 2、IFN γ水平未明显下降 ,IL 10水平未明显上升。 19例妊娠成功者治疗后IL 2、IFN γ水平较治疗前明显下降 (P <0 0 5 ) ,IL 4、IL 10水平明显上升 (P <0 0 5 )。以上结果表明UHA患者对滋养细胞抗原产生以Th1型反应为主的免疫应答 ,产生大量Th1型细胞因子 ,主动免疫治疗有助于上调Th2型细胞因子及下调Th1型细胞因子 ,利于UHA患者妊娠成功。     

Stability of Th1 and Th2 populations

Using an in vitro model for the development of IFN-y-producIng(Th1) and IL-4-produclng (Th1) cells from CD4 T lymphocytesexpressing a transgenlc TCR, we show that IL-12 and IL-4 arethe most potent stimuli for the differentiation of naive T cellsto effector populations. When combinations of cytokines arepresent during T cell priming, the effect of IL-4 Is dominant.Furthermore, differentiated Th1 cells can be converted intoIL-4 producers by exposure to IL-4, but the Th2 phenotype Isnot reversible. The stability of Th2 populations may limit theability to regulate Th2-domlnant responses In pathologic situations.     

The Th1/Th2 paradigm

The Th1/Th2 paradigm provides a useful model for understanding the pathogenesis of several diseases, as well as for developing novel immunotherapeutic strategies. Here, Sergio Romagnani examines Th1/Th2 polarization in the context of associated pathophysiological conditions.     

Development of Neonatal Th1/Th2 Function

Newborn animals generally mount poor T cell-mediated immune responses in vivo. As a result, neonates fall prey to infectious agents and diseases which have little impact on immunocompetent adult animals. For some time, it was believed that this phenomenon was due to an intrinsic inability of newborns to mount developmentally mature Th1 responses. Recent studies in mice have challenged that view; under certain conditions, adult-level Th1 function has been achieved in newborns. More often, however, neonates develop Th2-dominant responses. A major challenge in the field of developmental immunology is to understand why the ‘default’ response for neonates is Th2 function. Cell intrinsic as well as environmental influences may contribute to Th2 skewing in neonates.     

Distribution of Th1, Th2, and Th0 and the Th1/Th2 cell ratios in human peripheral and endometrial T cells

PROBLEM: To examine whether normal pregnancy involves type 2 T-helper (Th2) immune condition or not. METHOD OF STUDY: We measured the percentage of Th0, Th1, and Th2 and the Th1/Th2 cell ratios of human peripheral blood and endometrial T cells using flow cytometry, which can analyze both the surface marker CD3, and intracellular cytokines, interleukin 4 (IL-4) and interferon gamma (IFNgamma). RESULTS: No significant differences were found in the percentages of Th1, Th2, and Th0 and the Th1/Th2 cell ratios in the peripheral blood T cells of nonpregnant women and women in early pregnancy. On the other hand, the percentage of Th1 cells was highest during the proliferative phase of the endometrium, followed by the secretory phase and early pregnancy decidua. The percentage of Th2 cells was highest in early pregnancy decidua and lowest during the proliferative phase of the endometrium. The Th1/Th2 ratio was 147.48+/-96.68 during the proliferative phase of the endometrium, 37.74+/-21.33 during the secretory phase, and 1.31+/-0.48 in the early pregnancy decidua. CONCLUSIONS: These data indicate that Th1 cells predominate in the nonpregnant endometrium, especially during the proliferative phase, while Th2 cells predominate in early pregnancy decidua.     

The paradigm of Th1 and Th2 cytokines

In the past few years, considerable evidence has accumulated to suggest the existence of functionally polarized responses by the CD4⁺ T helper (Th)—and the CD8⁺ T cytotoxic (Tc)—cell subsets that depend on the cytokines they produce. The Th1 and Th2 cellular immune response provide a useful model for explaining not only the different types of protection, but also the pathogenic mechanisms of several immunopathological disorders. The factors responsible for the polarization of specific immune response into a predominant Th1 or Th2 profile have been extensively investigated in mice and humans. Evidence has accumulated from animal models to suggest that Th1type lymphokines are involved in the genesis of organ-specific autoimmune diseases, such as experimental autoimmune uveitis, experimental allergic encephalomyelitis, or insulin-dependent diabetes mellitus. Accordingly, data so far available in human diseases favor a prevalent Th1 lymphokine profile in target organs of patients with organ-specific autoimmunity. By contrast, Th2-cell predominance was found in the skin of patients with chronic graft-versus host disease, progressive systemic sclerosis, systemic lupus erythematosus, and allergic diseases. The Th1/Th2 concept suggests that modulation of relative contribution of Th1 or Th2-type cytokines regulate the balance between protection and immunopathology, as well as the development and/or the severity of some immunologie disorders. In this review, we have discussed the paradigm of Th1 and Th2 cytokines in relation to autoimmunity and allergy.     

Development of neonatal Th1/Th2 function

Newborn animals generally mount poor T cell-mediated immune responses in vivo. As a result, neonates fall prey to infectious agents and diseases which have little impact on immunocompetent adult animals. For some time, it was believed that this phenomenon was due to an intrinsic inability of newborns to mount developmentally mature Th1 responses. Recent studies in mice have challenged that view; under certain conditions, adult-level Th1 function has been achieved in newborns. More often, however, neonates develop Th2-dominant responses. A major challenge in the field of developmental immunology is to understand why the 'default' response for neonates is Th2 function. Cell intrinsic as well as environmental influences may contribute to Th2 skewing in neonates.     

Th细胞及其分化调节

幼稚CD4^＋T细胞可分化为Th1和Th2细胞，Th1主要产生IL-2、IFN-γ、TNF，增强吞噬细胞介导的抗感染机制，促进细胞免疫，也在器官特异性自身免疫疾病中起作用；Th2细胞主要产生IL-4、IL-5、IL-10、IL-13，促进B细胞增殖、分化和产生抗体，增强B细胞介导的体液免疫应答，在变态反应和机体抗寄生虫免疫中发挥作用。Th细胞分化主要由局部环境中的细胞因子及细胞内关键转录因子调控。转录因子STAT1、STAT4、IRF1和T—bet促使Th1细胞分化；转录因子STAT6、IRF4和GATA-3促使Th2细胞分化。